Pour commencer, incubez les cultures ancestrales et évoluées de Sulfolobus acidocaldarius aux températures finales. Une fois l’incubation terminée, mesurez leurs densités optiques à 600 nanomètres. Ensuite, ajoutez 1,5 millilitre de BBM plus dans six séries de sept tubes pour chaque culture.
Ajoutez ensuite 15 microlitres de chaque culture dans les six ensembles de tubes. Réglez trois thermomélangeurs à 75 degrés Celsius et trois thermomélangeurs à 65 degrés Celsius. Placez les tubes dans le thermomélangeur correspondant à la température et répliquez ID.Après un transfert d’incubation de 48 heures, 200 microlitres de chaque culture dans une plaque de 96 puits.
Mesurez la densité optique à l’aide d’un spectrophotomètre. Enfin, tracez et analysez les données à l’aide d’un logiciel statistique. Les lignées à partir de la condition constante de 75 degrés Celsius ont augmenté dans OD600 à partir d’une plage initiale à la fin de l’expérience.
En revanche, les lignées du traitement constant à 65 degrés Celsius ont affiché une baisse. Les populations ayant reçu le traitement de baisse de température ont augmenté de la densité optique initiale à six transferts, puis ont montré un déclin constant.