1. Préparation du placenta <ol><li> Le placenta doit être acquis auprès de la salle d&#39;accouchement dès que possible après l&#39;accouchement pour minimiser la formation de caillots, la dessiccation et la détérioration générale du tissu. </li><li> Des précautions doivent être prises pour s&#39;assurer que le placenta n&#39;est pas exposée à fixateurs de formol ou d&#39;autres. </li><li> Standard BSL2 précautions à prendre pour les tissus humains doivent être maintenus et le personnel doit porter un masque, une blouse, des gants et des couvre-chaussures. </li><li> Placez le placenta dans un sac plastique ou un bol de grandes métal qui a des trous prédécoupés pour permettre le drainage du fluide. Ce bol doit être placé dans un grand bol en acier inoxydable pour éviter les déversements. </li><li> Lavez le placenta avec une solution saline chaude. </li><li> Pour la visualisation placentaire mieux, utiliser des ciseaux pour exciser Metzenbaum les membranes inter-twin amniotique étant sûr de ne pas blesser le placenta lui-même. Laisser un brassard ½ cm d&#39;inter-twin membrane en place. (Figure 1A). </li></ol> 2. Cathétérisme des vaisseaux placentaires <ol><li> Identifier les cordons des jumeaux respectifs. Les obstétriciens habituellement identifier chaque jumeau par le nombre de pinces placées sur chaque cordon. Soyez sûr de confirmer ce qui a fourni le cordon présentant jumeaux (jumeau A). </li><li> Un à la fois, garder une trace de ce qui est du cordon qui, chaque cordon transect juste en dessous des pinces (figure 1B). Doucement le lait caillot par les navires (figure 1C). Au bord de coupe de la moelle, il y aura une veine et au moins un, généralement deux, les artères. Les artères sont identifiés par leur diamètre relativement petit (par rapport à la veine) et entoure la coiffe musculaire (figure 1D). </li><li> Utilisez une norme radiale fils artérielle guide en ligne, 0,46 mm de diamètre et 80 cm de long (Arrow, Reading PA, Etats-Unis), avec une pointe souple pour accéder à un orifice artériel sur le bord coupé du cordon jumeau A (figure 1E). </li><li> Le fil-guide doit être placé un minimum de 3 cm dans la cuve. Douceur de tension compteur sur la partie non vasculaire de l&#39;arête de coupe de la moelle à l&#39;aide d&#39;une pince de Kelly facilite grandement l&#39;avancement du fil. Tourner mineure de la corde pour redresser les vaisseaux tortueux peut aider à l&#39;avancement du fil. Des précautions doivent être prises pour éviter des passages faux. </li><li> En utilisant la technique de Seldinger, fil de 20 cm de long 0,6 à 1,19 mm de diamètre cathéter intérieur en polyéthylène (Intramedic, Batavia IL, Etats-Unis) avec une extrémité distale carrément biseauté sur le fil dans l&#39;artère (figure 1F). Des précautions doivent être prises pour ne pas déloger le fil tout en faisant progresser le cathéter. Retirez le fil après un cathéter est assis au moins 3 cm dans la cuve. </li><li> Par ailleurs, certains groupes ont eu du succès, sans utilisation d&#39;un fil-guide et canulation directe des vaisseaux ombilicaux avec des cathéters artère ombilicale. Bien que cette technique fonctionne bien dans nos mains l&#39;utilisation d&#39;un fil-guide a diminué le temps qu&#39;il nous faut pour terminer la procédure. </li><li> Attacher une 18 G pointe de l&#39;aiguille émoussée (BD Biosciences, Franlik Lakes, NJ, Etats-Unis) à l&#39;extrémité proximale du tube. Assurer le placement correct du cathéter en injectant une petite quantité de solution saline dans le navire et l&#39;observation de compensation des artères distales. Balaye le doigt sur la douceur des navires tout en injectant une solution saline peut aider à faciliter le mouvement des caillots résiduels. </li><li> Soigneusement répétez les étapes 2.3 à 2.6 pour la veine d&#39;un twin avec une attention pour ne pas déloger le cathéter artériel. </li><li> Attachez un morceau de ruban adhésif ombilical 1 cm en aval de l&#39;arête de coupe autour de la moelle et les cathéters. Assurer un joint étanche afin d&#39;éviter le reflux. </li><li> Répétez l&#39;étape 2.3 à 2.9 pour le cordon du jumeau B (le non-présentation de jumeaux) telle qu&#39;il existe des cathéters dans une artère ombilicale et la veine de chaque jumeau sécurisé avec du ruban ombilical et les circulations ont été perfusé avec une solution saline (Figure 2). </li></ol> 3. L&#39;injection de colorant dans les vaisseaux placentaires <ol><li> Pathologie de teinture, les suspensions de baryum, de la gélatine ou autres colorants visqueuses de couleur peuvent être utilisés pour visualiser la vascularisation placentaire. Choisissez quatre couleurs contrastées avec laquelle d&#39;injecter les artères et les veines de jumeaux A et B. Les couleurs pour l&#39;artère et veine pour chaque jumeau devrait être facilement reconnaissable. Anastomoses superficielles devraient être détectables en mélangeant de teinture et la formation d&#39;un autre (mélangé) de couleur facilement détectable. </li><li> Utilisez une seringue à la main 3ml injecter dans l&#39;artère du jumeau A colorant avec à basse pression. Doucement balayage avec un ou deux doigts le long des vaisseaux dans le sens d&#39;écoulement de teinture pour assurer le remplissage de la totalité de l&#39;arbre vasculaire. Si une anastomose vasculaire superficielle est identifié, l&#39;occlusion manuelle du navire d&#39;alimentation peuvent être employées pour permettre au reste du lit supérieur résistance vasculaire à remplir (figure 3A). </li><li> Utilisez une seringue à la main 3ml injecter dans l&#39;artère du jumeau B (figure 3B). </li><li> Répétez les étapes 3.2 et 3.3 pour les injections veineuses. </li><li> Si les fuites de colorant à partir d&#39;un navire, la réparation blessés doit être effectuée avec une suture fine et un chauffeur de l&#39;aiguille. Prenez soin de ne pas suturer ligaturer les Vess touteel. </li><li> Utiliser un appareil photo numérique haute résolution prendre une image après chaque injection. Après toutes les injections soient terminée, retirez le spécimen de la pétanque, place contre un fond de couleur neutre et une nouvelle image (figure 4). Documenter le nombre et le type de connexions entre les circulations vu des jumeaux. </li></ol> 4. Les résultats représentatifs: Artère aux anastomoses des artères (AA) ont été montré pour être «protecteur», comme ils sont associés à un risque significatif diminué de STT et avec de meilleurs résultats pour les deux jumeaux 5. La figure 4 montre une injection jumeaux MC placenta. Un AA avait été identifié par prospectivement in utero échographie Doppler. Cette constatation a été confirmée par le mélange du jumeau A artérielle (jaune) et jumeau B artérielle (bleu) de colorant dans une structure de communication artérielle (vert, flèches). Une anastomose AV avec l&#39;artère du jumeau A (jaune) et la veine du jumeau B (orange) est également démontré (tête de flèche). Figure 5 et 6 représentent des photographies de deux autres spécimens placentaire nous avons injecté. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig1.jpg" alt="Figure 1"/> Figure 1. (A) La membrane amniotique est soigneusement enlevé de la surface foetale du placenta partagé MC avec des ciseaux Metzenbaum. (B) un bord propre du cordon ombilical du jumeau A est exposée par transection proximale avec des ciseaux Metzenbaum. (C) Clot est traite partir de la moelle par compression manuelle. (D) Les artères ombilicales (flèches) et la veine (flèche) du jumeau A sont identifiés. (E) Après le placement d&#39;une pince de Kelly sur la partie avasculaire de la surface de la coupe du cordon pour la traction, un fil-guide est placé dans l&#39;artère ombilicale du jumeau A et doucement avancés à travers le vaisseau tortueux. (F) d&#39;un petit cathéter est ensuite avancée sur le fil guide dans la lumière du vaisseau en utilisant la technique de Seldinger. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig2.jpg" alt="Figure 2"/> Cathéters Figure 2. Ont été placés dans une artère ombilicale et la veine ombilicale de chaque jumeau. Ces cathéters sont fixés en place avec des liens sur bande ombilical autour du cordon ensemble. Le positionnement correct de chaque cathéter a été confirmée et les caillots intraluminaux ont été déminés par l&#39;injection de solution saline normale réchauffé. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig3.jpg" alt="Figure 3"/> Figure 3. (A) la circulation artérielle du jumeau A est injecté avec un colorant jaune. Contraste passe bien à travers l&#39;équateur vasculaire dans la circulation artérielle du jumeau B. (B) La circulation artérielle du jumeau B est injecté avec un colorant bleu. Mélangeant du colorant jaune et bleu des résultats colorant dans la teinture verte au sein de l&#39;anastomose démontré AA (flèche). <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig4.jpg" alt="Figure 4"/> Figure 4. La veine du jumeau A (rouge) et la veine du jumeau B (en orange) ont été injectés. L&#39;anastomose AA (flèche) et une anastomose AV, avec un flux dirigé de A vers jumelles jumeau B, (tête de flèche) sont délimitées. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig5.jpg" alt="Figure 5"/> Figure 5. Exemple de jumeaux MC placenta qui ont subi un traitement au laser après l&#39;injection postnatale. Le jumeau l&#39;artère et la veine du donneur sont respectivement en jaune et vert. L&#39;artère et la veine bénéficiaires sont en bleu et orange, respectivement. Aucune connexion résiduelle entre les circulations ont été détectés. <img src="/files/ftp_upload/2837/2837fig6.jpg" alt="Figure 6"/> Figure 6. Exemple de jumeaux MC placenta après l&#39;injection. Le jumeau artère du côté gauche et veine sont en jaune et rouge respectivement. Le jumeau artère du côté droit et veine sont en bleu et orange, respectivement. Un AA (tête de flèche) et VV (flèche) sont visibles sur la surface placentaire.

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	<li>Rand, L., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complicated+monochorionic+twin+pregnancies:+updates+in+fetal+diagnosis+and+treatment.">Complicated monochorionic twin pregnancies: updates in fetal diagnosis and treatment.</a> Clin Perinatol. 36, 417-430 (2009).</li><li>Sebire, N., Talbert, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twin-to-twin+transfusion+syndrome+results+from+dynamic+asymmetrical+reduction+in+placental+anastomoses:+a+hypothesis.">Twin-to-twin transfusion syndrome results from dynamic asymmetrical reduction in placental anastomoses: a hypothesis.</a> in Placenta. , (2001).</li><li>Machin, G. A., Keith, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> An atlas of multiple pregnancy: biology and pathology. , (1999).</li><li>Machin, G. A., Feldstein, V. A., van Gemert, M. J., Keith, L. G., Hecher, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doppler+sonographic+demonstration+of+arterio-venous+anastomosis+in+monochorionic+twin+gestation.">Doppler sonographic demonstration of arterio-venous anastomosis in monochorionic twin gestation.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 16, 214-217 (2000).</li><li>Denbow, M. L., Cox, P., Taylor, M., Hammal, D. M., Fisk, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+angioarchitecture+in+monochorionic+twin+pregnancies:+Relationship+to+fetal+growth,+fetofetal+transfusion+syndrome,+and+pregnancy+outcome.">Placental angioarchitecture in monochorionic twin pregnancies: Relationship to fetal growth, fetofetal transfusion syndrome, and pregnancy outcome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 182, 417-426 (2000).</li><li>Taylor, M. J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doppler+detection+of+arterio-arterial+anastomoses+in+monochorionic+twins:+feasibility+and+clinical+application.">Doppler detection of arterio-arterial anastomoses in monochorionic twins: feasibility and clinical application.</a> Human Reproduction. 15, 1632-1636 (2000).</li><li>Berm&#250;dez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+types+and+twin-twin+transfusion+syndrome.">Placental types and twin-twin transfusion syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 187, 489-494 (2002).</li><li>Lewi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intertwin+anastomoses+in+monochorionic+placentas+after+fetoscopic+laser+coagulation+for+twin-to-twin+transfusion+syndrome:+is+there+more+than+meets+the+eye.">Intertwin anastomoses in monochorionic placentas after fetoscopic laser coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: is there more than meets the eye.</a> Am J Obstet Gynecol. 194, 790-795 (2006).</li><li>Wee, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+deep+arterio-venous+anastomoses+within+monochorionic+placentae+by+vascular+casting.">Characterisation of deep arterio-venous anastomoses within monochorionic placentae by vascular casting.</a> Placenta. 26, 19-24 (2005).</li><li>Paepe, M. E. D. e., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demonstration+of+placental+vascular+anatomy+in+monochorionic+twin+gestations.">Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations.</a> Pediatr Dev Pathol. 5, 37-44 (2002).</li></ol>

Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

Cartographie vasculaire du placenta jumeaux MC par injection de colorant est une procédure compliquée précieux pour évaluer, cas cliniquement traitées et pour améliorer encore notre compréhension du jumelage de MC. Coordination avec l&#39;équipe obstétricale pour assurer l&#39;acquisition rapide d&#39;un spécimen intact placentaire est cruciale. La dessiccation ou le stockage prolongé des tissus avant l&#39;injection peut provoquer des blessures navire et l&#39;extravasation du colorant. Fixation du placenta ...

<table border="1"><tbody><tr><th> Nom du réactif </th><th> Société </th><th> Numéro de catalogue </th><th> Commentaires (optionnel) </th></tr><tr><td> Bol en plastique perforé </td><td> QuickMedical fournitures et matériel médicaux </td><td> Polarware PA75 </td><td> Les perforations peuvent être faites avec une perceuse </td></tr><tr><td> Cuve en acier inoxydable </td><td> Narang Medical Limited </td><td> HH517 </td><td></td></tr><tr><td> Une solution saline normale </td><td> Fisher </td><td> 50983204 </td><td></td></tr><tr><td> 0,6 à 1.9 mm de diamètre des tuyaux en polyéthylène </td><td> Intramedic </td><td> 7436 </td><td></td></tr><tr><td> Fil artérielle guide en ligne (0,46 mm) </td><td> Arrow International </td><td> PW-18080 </td><td> Embout souple </td></tr><tr><td> 18 G aiguilles émoussées </td><td> BD Biosciences </td><td> 305180 </td><td></td></tr><tr><td> Ruban ombilical </td><td> Approvisionnement QC </td><td> 140895 </td><td></td></tr><tr><td> Ciseaux Metzenbaum </td><td> Cole-Parmer </td><td> EW-10921-04 </td><td></td></tr><tr><td> Kelly pince </td><td> Cole Parmer </td><td> EW-10918-20 </td><td></td></tr><tr><td> 3 ml seringue </td><td> Covidien </td><td> 1180300555 </td><td></td></tr><tr><td> Pathologie Dye </td><td> Produits Bradley </td><td> 7365-X </td><td></td></tr><tr><td> Appareil Photo Numérique </td><td> Panasonic </td><td> Lumix TZ50- </td><td></td></tr></tbody></table>

guide wire assisted catheterization and colored dye injection for vascular mapping of monochorionic twin placentas

Monochoriales (MC) grossesses gémellaires sont associées à une morbidité significativement plus élevés et les taux de mortalité que les jumeaux dichorioniques. Environ 50% des grossesses jumeaux MC développer des complications découlant de la commune placenta et associés connexions vasculaires 1. Sévère jumeau à jumeau syndrome (STT) est rapporté au compte pour environ 20% de ces 2,3 complications. Inter-twin connexions vasculaires surviennent dans presque tous les placentas MC et sont liés à l&#39;pronostic et le résultat de ces grossesses à haut risque jumeaux. Le nombre, la taille et le type de connexions ont été impliqués dans le développement de la STT et d&#39;autres conditions MC jumeaux. Trois types d&#39;inter-connexions vasculaires surviennent doubles: 1) l&#39;artère aux connexions veine (AVS) dans laquelle une artère transportant le sang désoxygéné branche d&#39;un cours jumelles long de la surface foetale du placenta et plonge dans un cotylédon placentaire. Le sang circule à travers un réseau capillaire en profondeur intraparenchymateuse dans une veine de drainage qui émerge à la surface fœtale du placenta et le sang oxygéné vers amène l&#39;autre jumeau. Il ya un écoulement unidirectionnel du jumeau fournissant l&#39;artère afférente vers la réception de la double veine efférente; 2) l&#39;artère à artère connexions (AA) dans lequel une branche de l&#39;artère chaque jumeau répond directement à la surface superficielle du placenta résultant dans un récipient avec bidirectionnelle pulsatile débit, et 3) veine à veine connexions (VVS), dans lequel une branche veineuse de chaque jumeau répond directement à la surface superficielle du placenta qui permet la circulation à basse pression bidirectionnel. In utero échographie obstétricale aux interrogatoires ciblés Doppler a été utilisé pour identifier la présence d&#39;AV et les connexions 4 piles AA. AA stade prénatal détecté qui ont été confirmés par des études post-natale d&#39;injection placentaire a été démontré que d&#39;être associé à une amélioration du pronostic pour les deux jumeaux 5. Par ailleurs, l&#39;ablation laser fetoscopic des inter-connexions vasculaires jumelles sur la surface fœtale du placenta partagé est maintenant le traitement de choix pour le début, STT sévère. Postnatale études d&#39;injection placentaire fournir une méthode utile pour confirmer l&#39;exactitude des résultats de l&#39;échographie prénatale Doppler et l&#39;efficacité de la thérapie au laser foetus 6. Utilisant des colorants de couleur séparément à la main injecté dans les circulations artérielles et veineuses de chaque jumeau, le met en évidence la technique et délimite AV, AA, et VVS. Cette démonstration définitive de l&#39;anatomie vasculaire placentaire MC peut ensuite être corrélés avec les résultats échographie Doppler et l&#39;issue néonatale afin d&#39;améliorer notre compréhension de la physiopathologie de la MC de jumelage et de ses séquelles. Ici nous démontrons notre technique d&#39;injection placentaire.

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Guide Wire Assisted Catheterization and Colored Dye Injection for Vascular Mapping of Monochorionic Twin Placentas

Cartographie vasculaire de monochoriales (MC) placentas jumelles après leur naissance constitue un moyen pour la démonstration détaillée des connexions vasculaires entre les circulations des jumeaux. Déséquilibre de ces connexions est pensé à jouer un rôle pivot dans le développement de complications du jumelage de MC dont le syndrome de transfusion jumeau à jumeau.

Cathétérisme Guide fil assistée et coloré pour la cartographie d&#39;injection de colorant vasculaires de monochoriales placentas jumelles

Monochorionic (MC) twin pregnancies are associated with significantly higher morbidity and mortality rates than dichorionic twins. Approximately 50% of MC ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

14.8K vues.  University of California, San Francisco. Cartographie vasculaire de monochoriales (MC) placentas jumelles après leur naissance constitue un moyen pour la démonstration détaillée des connexions vasculaires entre les circulations des jumeaux. Déséquilibre de ces connexions est pensé à jouer un rôle pivot dans le développement de complications du jumelage de MC dont le syndrome de transfusion jumeau à jumeau.

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Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between 100-400 &mu;m in diameter function primarily in directing blood flow to various organs according to the overall requirements of the body. The rat mesenteric artery has a diameter greater than 100 &mu;m. The myography technique, first described by Mulvay and Halpern1, was based on the method proposed by Bevan and Osher2. The technique provides information about small vessels under isometric conditions, where substantial shortening of the muscle preparation is prevented. Since force production and sensitivity of vessels to different agonists is dependent on the extent of stretch, according to active tension-length relation, it is essential to conduct contraction studies under isometric conditions to prevent compliance of the mounting wires. Stainless steel wires are preferred to tungsten wires because of oxidation of the latter, which affects recorded responses3.The technique allows for the comparison of agonist-induced contractions of mounted vessels to obtain evidence for normal function of vascular smooth muscle cell receptors.
We have shown in several studies that isolated mesenteric arteries that are contracted with phenylyephrine relax upon addition of cumulative concentrations of extracellular calcium (Ca2+e). The findings led us to conclude that perivascular sensory nerves, which express the G protein-coupled Ca2+-sensing receptor (CaR), mediate this vasorelaxation response. Using an automated wire myography method, we show here that mesenteric arteries from Wistar, Dahl salt-sensitive(DS) and Dahl salt-resistant (DR) rats respond differently to Ca2+e. Tissues from Wistar rats showed higher Ca2+-sensitivity compared to those from DR and DS. Reduced CaR expression in mesenteric arteries from DS rats correlates with reduced Ca2+e-induced relaxation of isolated, pre-contracted arteries. The data suggest that the CaR is required for relaxation of mesenteric arteries under increased adrenergic tone, as occurs in hypertension, and indicate an inherent defect in the CaR signaling pathway in Dahl animals, which is much more severe in DS.
The method is useful in determining vascular reactivity ex vivo in mesenteric resistance arteries and similar small blood vessels and comparisons between different agonists and/or antagonists can be easily and consistently assessed side-by-side6,7,8.

An automated myography method for force measurements in isolated mesenteric arteries is described. It employs a Mulvany-Halpern Auto Dual Wire Myograph 510A to determine responses to phenylephrine and extracellular calcium. The method allows consistent determination of isometric responses to agonists in small vessels of diameters of 60 - 300 &mu;m, independently.

Contraction artère mésentérique et des études de relaxation utilisant myographie fil automatisé

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between ...

Recherche

Médecine

Accurate and Simple Evaluation of Vascular Anastomoses in Monochorionic Placenta using Colored Dye

The presence of placental vascular anastomoses is a conditio sine qua non for the development of twin-to-twin transfusion syndrome (TTTS) and twin anemia polycythemia sequence (TAPS)1,2. Injection studies of twin placentas have shown that such anastomoses are almost invariably present in monochorionic twins and extremely rare in dichorionic twins1. Three types of anastomoses have been documented: from artery to artery, from vein to vein and from artery to vein. Arterio-venous (AV) anastomoses are unidirectional and are referred to as "deep" anastomoses since they proceed through a shared placental cotyledon, whereas arterio-arterial (AA) and veno-venous (VV) anastomoses are bi-directional and are referred to as "superficial" since they lie on the chorionic plate. Both TTTS and TAPS are caused by net imbalance of blood flow between the twins due to AV anastomoses. Blood from one twin (the donor) is pumped through an artery into the shared placental cotyledon and then drained through a vein into the circulation of the other twin (the recipient). Unless blood is pumped back from the recipient to the donor through oppositely directed deep AV anastomoses or through superficial anastomoses, an imbalance of blood volumes occurs, gradually leading to the development of TTTS or TAPS. The presence of an AA anastomosis has been shown to protect against the development of TTTS and TAPS by compensating for the circulatory imbalance caused by the uni-directional AV anastomoses1,2. 
Injection of monochorionic placentas soon after birth is a useful mean to understand the etiology of various (hematological) complications in monochorionic twins and is a required test to reach the diagnosis of TAPS2. In addition, injection of TTTS placentas treated with fetoscopic laser surgery allows identification of possible residual anastomoses3-5. This additional information is of paramount importance for all perinatologists involved in the management and care of monochorionic twins with TTTS or TAPS. Several placental injection techniques are currently being used. We provide a simple protocol to accurately evaluate the presence of (residual) vascular anastomoses using colored dye injection.

Twin-to-twin transfusion syndrome and twin anemia polycythemia sequence are two potentially devastating problems in perinatal medicine. Both disorders occur only in monochorionic twins and result from unbalanced blood flow through placental vascular anastomoses. We provide a simple protocol to accurately evaluate the presence of vascular anastomoses using colored dye injection of placental vessels after birth.

Évaluation précise et simple des anastomoses vasculaires dans le placenta monochoriales utilisant colorant

The presence of placental vascular anastomoses is a conditio sine qua non for the development of twin-to-twin transfusion syndrome (TTTS) and twin anemia ...

Accuracy in Dental Medicine, A New Way to Measure Trueness and Precision

Reference scanners are used in dental medicine to verify a lot of procedures. The main interest is to verify impression methods as they serve as a base for dental restorations. The current limitation of many reference scanners is the lack of accuracy scanning large objects like full dental arches, or the limited possibility to assess detailed tooth surfaces. A new reference scanner, based on focus variation scanning technique, was evaluated with regards to highest local and general accuracy. A specific scanning protocol was tested to scan original tooth surface from dental impressions. Also, different model materials were verified. The results showed a high scanning accuracy of the reference scanner with a mean deviation of 5.3 &#177; 1.1 &#181;m for trueness and 1.6 &#177; 0.6 &#181;m for precision in case of full arch scans. Current dental impression methods showed much higher deviations (trueness: 20.4 &#177; 2.2 &#181;m, precision: 12.5 &#177; 2.5 &#181;m) than the internal scanning accuracy of the reference scanner. Smaller objects like single tooth surface can be scanned with an even higher accuracy, enabling the system to assess erosive and abrasive tooth surface loss. The reference scanner can be used to measure differences for a lot of dental research fields. The different magnification levels combined with a high local and general accuracy can be used to assess changes of single teeth or restorations up to full arch changes.

Accuracy is a major demand in dental medicine. To verify accuracy, reference scanners are needed. This article presents a new reference scanner with an adjusted scanning method to acquire a broad variety of dental morphologies with high trueness and precision.

Précision en médecine dentaire, une nouvelle façon de mesurer la justesse et fidélité

Reference scanners are used in dental medicine to verify a lot of procedures. The main interest is to verify impression methods as they serve as a base ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to atherosclerotic plaque development or the rupturing of established plaques, interrupts normal blood flow leading to various morbidities such as myocardial infarction and stroke. In the clinic endovascular procedures such as angioplasty are commonly performed to reopen the lumen. However, these treatments inevitably damage the vessel wall as well as the vascular endothelium, triggering an excessive healing response and the development of a neointimal plaque that extends into the lumen causing vessel restenosis (re-narrowing). Restenosis remains a major cause of failure of endovascular treatments for atherosclerosis. Thus, preclinical animal models of restenosis are vitally important for investigating the pathophysiological mechanisms as well as translational approaches to vascular interventions. Among several murine experimental models, femoral artery wire injury is widely accepted as the most suitable for studies of post-angioplasty restenosis because it closely resembles the angioplasty procedure that injures both endothelium and vessel wall. However, many researchers have difficulty utilizing this model due to its high degree of technical difficulty. This is primarily because a metal wire needs to be inserted into the femoral artery, which is approximately three times thinner than the wire, to generate sufficient injury to induce prominent neointima. Here, we describe the essential surgical details to effectively overcome the major technical difficulties of this model. By following the presented procedures, performing the mouse femoral artery wire injury becomes easier. Once familiarized, the whole procedure can be completed within 20 min.

The mouse femoral artery wire injury model of restenosis is technically challenging. In this protocol we show the key technical details essential for successfully performing wire injury to induce consistent&#160;neointima for studies of restenosis.

Un modèle murin de la resténose artérielle: les aspects techniques de fémur fil blessures

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The &quot;Wire-Injury&quot; Model

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

Induction de l’athérosclérose accélérée chez les souris : le modèle « Wire-Injury »

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

Chirurgie Shunt, droite Cathétérisme cardiaque et vasculaire Morphometry dans un modèle de rat pour Flow-induite Hypertension artérielle pulmonaire

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Model Surgical Training: Skills Acquisition in Fetoscopic Laser Photocoagulation of Monochorionic Diamniotic Twin Placenta Using Realistic Simulators

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome (TTTS), but is technically challenging and can lead to significant complications. Acquiring and maintaining the necessary surgical skills require consistent practice, a critical caseload, and time. Training on realistic surgical simulators can potentially shorten this steep learning curve and enables several proceduralists to acquire procedure-specific skills simultaneously. Here we describe realistic simulators designed to allow the user familiarity with the equipment and specific steps required in the surgical treatment of TTTS, including fetoscopic handling, approaches to anterior and posterior placenta, recognition of anastomoses, and efficient coagulation of vessels. We describe the skills that are especially important in conducting placental laser coagulation that the surgeon can practice on the model and apply in a clinical case. These models can be adapted easily depending on the availability of materials and require standard fetoscopy equipment. Such training systems are complementary to traditional surgical apprenticeships and can be useful aids for fetal medicine units that provide this clinical service.

Practicing the specific skills required for fetoscopic laser coagulation of monochorionic placental anastomoses on realistic models can aid less experienced surgeons in overcoming the steep learning curve associated with this procedure that is now regarded as the standard of care for twin-twin transfusion syndrome.

Modèle de formation chirurgicale : Acquisition de compétences en Photocoagulation Laser Fetoscopic du Placenta de jumeaux monochorioniques Diamniotic à l’aide de simulateurs réalistes

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome ...

Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due to sodium retention and hyperlipidemia. To study the pathophysiology of this syndrome, rodent models have been developed based on the injection of toxic substances such as doxorubicin causing podocyte damage. In mice, only few strains are susceptible to this model. In wildtype 129S1/SvImJ mice, the administration of doxorubicin by rapid intravenous injection to the retrobulbar sinus induces experimental nephrotic syndrome that features all the symptoms of human disease including sodium retention and edema. After the onset of proteinuria, mice exhibit increased urinary serine protease activity that leads to the activation of the epithelial sodium channel (ENaC) and sodium retention. Pharmacological inhibition of urinary serine proteases by the treatment with sustained release aprotinin abrogates ENaC activation and prevents sodium retention. This model is ideal to study the pathophysiology of proteasuria, i.e., the excretion of active serine proteases that cause ENaC activation by the proteolysis of its &#947;-subunit. This can be regarded as the primary mechanism of ENaC activation and sodium retention in proteinuric kidney disease.

Here, we describe the induction of experimental nephrotic syndrome in 129S1/SvImJ mice by rapid retrobulbar injection of doxorubicin. We also treat nephrotic mice with sustained release pellets containing aprotinin to inhibit urinary serine protease activity and prevent sodium retention.

Induction de Syndrome néphrotique chez la souris par Injection rétrooculaire de la doxorubicine et la prévention de la rétention de Volume par LIBERATION PROLONGEE aprotinine

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due ...

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The accuracy of PVP mainly depends on the surgeons&#39; experience and multiple fluoroscopes during a traditional procedure. Puncture related complications were reported all over the world. To make the surgical procedure more precise and decrease the rate of puncture-related complications, our team applied a three-dimensional printing guide template to PVP to modify the traditional procedure. This protocol introduces how to model target vertebrae DICOM imaging data into three-dimensions in the software, how to simulate operation in this 3-D model, and how to use all of the surgical data to reconstruct a patient specific template for application. Using this template, surgeons can identify suitable puncture points accurately to improve the accuracy of the operation. The whole protocol includes: 1) diagnosis of the osteoporotic vertebral compression fracture; 2) acquisition of CT imaging of the target vertebra; 3) simulation of the operation in the software; 4) design and fabrication of the 3-D printing guide template; and 5) application of the template into an operation procedure.

Three-Dimensional Printing Guide Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty PVP

Herein, we present a three-dimensional printing guide template for percutaneous vertebraplasty. A patient with a T11 vertebral compression fracture was selected as a case study.

Guide d'impression tridimensionnel Template Assisted Percutaneous Vertebroplasty (PVP)

Percutaneous vertebroplasty (PVP) is considered an effective treatment for the back pain caused by osteoporotic vertebral compression fracture. The ...

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte retrieval with routine gynecological surgery. OP-IVM is suitable for patients undergoing benign gynecological surgery who have the need for fertility preservation (FP) or infertility treatments such as in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET). In the operating room, patients undergoing benign gynecological surgery are first anesthetized and receive ultrasound-guided immature follicle aspiration (IMFA) treatment. As the subsequent gynecological surgery is performed, the cumulus-oocyte complexes (COCs) are examined, and the immature COCs are transferred into the IVM medium and cultured for 28-32 hours in the IVF laboratory. After assessment, mature oocytes in the MII stage will be selected and cryopreserved in liquid nitrogen for FP or fertilized by intracytoplasmic sperm injection (ICSI) for IVF-ET. By combining IVM with gynecological surgery, immature oocytes that would have been discarded can be saved and used for assisted reproductive technology (ART). The procedure, significance and critical aspects of OP-IVM are described in this article.

In vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) combines IVM following oocyte retrieval with routine gynecological surgery and serves as an extension of conventional IVM applications for fertility preservation.

OP-IVM: Combiner la maturation in vitro après le prélèvement d’ovocytes avec la chirurgie gynécologique

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...