1. Mettre en place: conception du cadre et de serrage pour tenir l&#39;animal <ol><li> Le cadre et le collier de tenir l&#39;animal a été spécialement conçu pour accueillir l&#39;horizon infini (IH) Spinal Cord Injury Impactor. </li><li> La base de la trame est une plate-forme en aluminium taillées dans les dimensions suivantes (30,2 cm x 20,3 cm x 1,3 cm) pour s&#39;insérer dans le support de guide de table qui est livré en standard avec l&#39;appareil IH (figure 1A). </li><li> Quatre plaques Flexaframe pied d&#39;appui (Fisher Scientific, Toronto, ON) sont attachés à la plate-forme et de huit tiges de support Flexaframe (Fisher Scientific, Toronto, ON, 30,5 cm) sont assemblés à l&#39;aide de huit connecteurs de soutien Flexaframe (figure 1B). </li><li> Deux autres connecteurs de soutien Flexaframe, attachés aux deux moyennes tiges, maison de la coutume fait est valable pour la pince (figure 1B). </li><li> L&#39;angle par lequel la moelle épinière de l&#39;animal est tourné par rapport à la verticale est établie par keeping une de la tige horizontale en place et faire varier la hauteur de l&#39;autre tige horizontale (figure 2). </li><li> La pince est de 35,6 mm de long, 25,4 mm de haut et avec une mâchoire de 7,6 mm conçu pour agripper solidement au-dessous de l&#39;apophyse transverse de C4 à C6 (figure 1C). Des détails supplémentaires sur la conception de serrage ont été décrites précédemment par Choo et al., 2009. </li></ol> 2. Chirurgie <ol><li> Homme rats Sprague-Dawley (Charles River Laboratories) pesant 300-350 g ont été anesthésiés par l&#39;isoflurane (4% pour l&#39;induction et 2% pour la maintenance) dans de l&#39;oxygène (1 L / min). </li><li> Une fois que les animaux sont sous le plan de l&#39;anesthésie, l&#39;animal est placé dans un cadre stéréotaxique (Kopf, Tujunga, CA). </li><li> Afin de minimiser les saignements lors de la procédure chirurgicale de 0,4 mL de lidocaïne (20 mg / ml; Bimeda - MTC Animal Health Inc, Cambridge, Ontario, Canada) avec de l&#39;épinéphrine est injectée par voie intramusculaire dans le site chirurgical dans le dorsala région du cou l. </li><li> Une incision 4-5 cm ligne médiane dorsale est faite en utilisant un scalpel stérile (# 15), à partir de la base du crâne et s&#39;étendant caudalement. </li><li> Stériles pince Adson sont utilisés pour disséquer sans ménagement par la musculature dorsale pour atteindre la colonne vertébrale, et un écarteur stérile Alm (Outils belle science, North Vancouver, BC) est insérée pour maintenir les muscles écartés. </li><li> En utilisant le scalpel n ° 15, les muscles recouvrant les lames de C4-C7 sont grattées, à partir de la ligne médiane et les balayant latéralement. </li><li> Une incision avec un scalpel stérile (# 15) est faite pour le muscle attaché aux apophyses transverses des deux côtés de la colonne vertébrale afin d&#39;adapter la pince au-dessous des apophyses transverses de C4 à C6. </li><li> Avec une amende stérile à embout Friedman-Pearson Rongeur (Outils belle science, North Vancouver, BC), la gauche C5 lamina est soigneusement enlevée pour visualiser la durée et la moelle épinière. </li><li> Une tige d&#39;un diamètre de 1,5 mm est glissé sous les braspour soutenir l&#39;animal jusqu&#39;à, augmentant ainsi la colonne vertébrale et légèrement faciliter l&#39;insertion de serrage. </li><li> Monter la mâchoire de la pince stérile sur les apophyses transverses latéraux de C4 à C6 et serrer les vis. </li><li> Retirer l&#39;écarteur Alm. </li></ol> 3. Spinal Cord Injury <ol><li> Après la pince est montée sur l&#39;animal, l&#39;animal est déplacé vers l&#39;élément de frappe IH. </li><li> La pince est inséré dans les supports métalliques sur les deux tiges du milieu de la trame qui ont été déposés sous un angle de 22,5 ° par rapport à l&#39;horizontale (figure 2). </li><li> La prise en ciseaux qui permet les réglages de hauteur stable, (VWR, Mississauga, ON) est soulevée jusqu&#39;à l&#39;animal repose à plat. </li><li> Faire en sorte que la pince est horizontal en plaçant un niveau petit cylindre au-dessus de la pince et en serrant les vis. Il est important que toutes les vis sont bien serrées et la mise en place est rigide, sans aucun mouvement. </li><li> Le reste de la procédure se déroule en vertu d&#39;un microscope (Leica MZ8). </li><li> Abaisser et visent la pointe de frappe (15 mm de diamètre, avec des bords arrondis) en utilisant le bouton de réglage vertical et les deux boutons de réglage horizontal sur l&#39;impacteur IH jusqu&#39;à ce que le centre de la pointe de frappe est en vol stationnaire au-dessus du sommet de l&#39;apophyse épineuse C6. </li><li> Une fois la pointe de frappe est centré, tournez le bouton de réglage axe des y un et deux cinquième tour (1,4 mm) pour déplacer la pointe latéralement vers le côté gauche et l&#39;axe des x bouton de réglage horizontale pour déplacer la pointe de frappe le centre de C5. </li><li> Abaissez la pointe jusqu&#39;à ce qu&#39;elle soit juste au-dessus de la dure-mère afin de vérifier que la pointe de frappe est le but de la moitié latérale de la substance grise. </li><li> Tournez le bouton de réglage vertical de deux tours à relever la pointe de 4 mm au-dessus de la dure-mère. </li><li> Assurez-vous que la zone d&#39;impact est à sec en utilisant un coton-tige ou un bâtonnet. </li><li> Régler la force désirée à 150 kdyn sur le programme et cliquez sur &quot;Expérience Démarrer&quot; pour déclencher la frappe. </li><li> Après la blessure, la plaie est fermée en layers avec 5-0 points de suture vicryl. La buprénorphine (0,03 mg / kg SC, Temgésic; Schering-Plough Corporation de Kenilworth, NJ) et Saline (10 ml) est administré par voie sous cutanée deux fois par jour avant et pendant deux jours après la chirurgie. Les animaux sont surveillés de près deux fois par jour pendant 2 semaines et une fois par semaine pendant 6 semaines après la lésion. </li></ol> 4. Les résultats représentatifs Twenty Nine mâles Sprague Dawley (Charles River Laboratories) pesant 300-350 g ont été blessés lors d&#39;une mise en vigueur de 150 kdyn. La pointe de frappe visait 1,4 mm latéral de la ligne médiane, à un angle de 22,5 ° au large de la verticale. La force moyenne réelle était 155,55 ± 0,73 kdyn. Le déplacement moyen était de 1512,72 ± 27,86 um et la vitesse était 120,24 ± 0,52 mm / s (Figure 3). Mesures issue du comportement La récupération fonctionnelle a été évaluée en utilisant le test horizontale échelle, l&#39;élevage de test cylindre, le toilettage de test,et modifié test de l&#39;escalier Montoya 1. Les animaux ont été formés avant la lésion et évalués aux semaines 2, 4 et 6 post-traumatiques. Il y avait des déficiences importantes subies membres antérieurs pendant toute la période expérimentale. Essai échelle horizontale. Avant la blessure, les animaux ne fait 4,75 ± 0,73% sur les erreurs de la patte antérieure ipsilatérale lors de la traversée à travers l&#39;échelle irrégulière interligne horizontal. Après la blessure, les animaux ont démontré des augmentations marquées dans le pourcentage d&#39;erreurs des membres antérieurs. Les erreurs ipsilatérales pour cent des membres antérieurs étaient 26,97 ± 2,92%, 26,23 ± 2,84% et 22,06 ± 2,05% à 2, 4 et 6 semaines post-traumatiques, respectivement (figure 4A). Surtout, la dépréciation du membre antérieur sur ce test a été maintenue pendant les 6 semaines. Élevage d&#39;essai Cylindre. Le pourcentage de membres antérieurs homolatérale (à gauche + à la fois) utilisation lors de l&#39;exploration a diminué de façon significative après la SCI.Avant la blessure, les animaux utilisés à des membres antérieurs du ipsilatéral 75,12 ± 2,25%. Après la blessure des animaux utilisés à des membres antérieurs du ipsilatéral 8,59 ± 1,80% à 2 semaines, 14,25 ± 2,65% à 4 semaines et 11,76 ± 2,66% à 6 semaines (figure 4B). Mis à jour le test de l&#39;escalier Montoya. Le nombre de pastilles récupérées avec la patte antérieure ipsilatérale diminué de façon spectaculaire après la blessure. Avant la blessure, les animaux recueillis 84,85 ± 2,88% des récompenses alimentaires. Toutefois, aux semaines 2, 4 et 6 post-traumatiques, les animaux récupérés seulement 30,91 ± 4,03%, 28,94 ± 4,38% et 25,86 ± 3,09% des pellets (figure 4C). Toilettage de test. Il y avait des baisses dramatiques dans les scores de toilettage après une blessure. Après SCI, les scores étaient ipsilatérales de toilettage 2 semaines: 2,00 ± 0,17, 4 semaines: 1,83 ± 0,17 et 6 semaines: 1,79 ± 0,11 (Figuré 4D). Résultats histologiques La matière blanche et économe matière grise. Un exemple d&#39;une lésion de la moelle épinière à une force de 150 kdyn, angle de 22,5 ° et visent latérale de 1,4 mm est présenté dans la Figure 5. La blessure a entraîné des dommages importants à la matière grise et blanche sur le côté ipsilatéral. Les deux cortico et des voies rubrospinal ont été blessés et 23 des 29 animaux ont subi des dommages du parenchyme contenues sur le côté ipsilatéral. L&#39;étendue longitudinale de l&#39;endommagement de la matière grise et blanche était de 2400 et 2400 rostralement caudale (figure 6). Lors de l&#39;ajout des sections afin de fournir une estimation brute de la «propagation cumulative&quot; d&#39;épargner matière grise et blanche (2000 um rostrale et caudale de l&#39;épicentre), du côté ipsilatéral eu seulement 51,8% de la substance blanche épargné et 39,7% de la matière grise rapport en restant sur ​​le côté controlatéral (figure 6). &lt;img alt = &quot;Figure 1&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/3313/3313fig1.jpg&quot; /&gt; Figure 1. Infini Horizon frappe des lésions médullaires. A. Impacteur Horizon Infini et global mis en place. B. Cadre mis en place. C. Close-up image de la pince pour la tenue de col de l&#39;utérus apophyses transverses. D. Spécification (unité: pouces) de la pince. La tolérance suggérée &lt;0,002 dans (Choo et al. 2009). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/3313/3313fig1large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> . <img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig2.jpg" /> Figure 2. A. Illustration cadre et correspondant mis en place pour atteindre la moelle épinière de rotation de 0 ° (neutre) ou B. 22,5 ° dans le but latérale de 1,4 mm. <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig3.jpg" /> Figure 3. Représentant vigueur et des graphiques de déplacement pour impacteur horizon infini. La flèche indique le temps que la pointe de frappe a atteint 20 kdyn et le moment où l&#39;enregistrement du déplacement est déclenchée. La force réelle est lu à partir du pic de la courbe force en fonction du temps et le déplacement correspondant est calculé. Les graphiques ci-dessous illustrent un type 150 contusion kdyn, A. Déplacement vs graphique en temps, la Force vs B. graphe temps. Ces graphiques montrent que la force réelle obtenue était de 152 kdyn, et le déplacement de frappe dans la moelle a été mesurée à 1287 um. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig3large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> . <img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig4.jpg" /> Figure 4. Évaluations comportementales pour la force de 150 kdyn, angulation de frappe de 22,5 ° et l&#39;objectif de 1,4 mm à gauche de la ligne médiane. A. Test de l&#39;échelle horizontale. B. Test élevage Cylindre. C. mise à jour test de l&#39;escalier Montoya. D. Toilettage de test. Le membre antérieur ipsilatéral entraîné importante et sustaiNed déficiences par rapport à la patte antérieure controlatérale. <img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig5.jpg" /> Figure 5. Des images représentatives de la moelle épinière lésée de rostrales 1600 um à 1600 um caudal. <img alt="Figure 6" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig6.jpg" /> Figure 6. Évaluations histologiques. A. Pour cent de blanc et de matière grise épargné. Matière autour de 2000 um de l&#39;épicentre du dommage a été en grande partie épargnée. B. cumulatif blanc et la matière grise au sein épargné 2000 um de l&#39;épicentre de dommages. Le côté ipsilatéral avaient significativement moins épargné matière grise et blanche par rapport au côté controlatéral. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig6large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> .

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	<li>Lee, J. H., Tigchelaar, S., Liu, J., Stammers, A. M., Streijger, F., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+neuroprotective+effects+of+simvastatin+and+minocycline+in+a+model+of+cervical+spinal+cord+injury.">Lack of neuroprotective effects of simvastatin and minocycline in a model of cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 225, 219-230 (2010).</li><li>Kwon, B. K., Hillyer, J., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research+in+spinal+cord+injury:+a+survey+of+opinion+from+the+SCI+community.">Translational research in spinal cord injury: a survey of opinion from the SCI community.</a> J. Neurotrauma. 27, 21-33 (2010).</li><li>Gensel, J. C., Tovar, C. A., Hamers, F. P., Deibert, R. J., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+histological+characterization+of+unilateral+cervical+spinal+cord+contusion+injury+in+rats.">Behavioral and histological characterization of unilateral cervical spinal cord contusion injury in rats.</a> J. Neurotrauma. 23, 36-54 (2006).</li><li>Kwon, B. K., Borisoff, J. F., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+targets+for+therapeutic+intervention+after+spinal+cord+injury.">Molecular targets for therapeutic intervention after spinal cord injury.</a> Mol. Interv. 2, 244-258 (2002).</li><li>Allen, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+of+experimental+lesions+of+spinal+cord+equivalent+to+crush+injury+of+fracture+dislocation.">Surgery of experimental lesions of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocation.</a> J. Am. Med. Assoc. 57, 878-880 (1911).</li><li>Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+histological+and+locomotor+outcomes+after+spinal+cord+contusion+using+the+NYU+weight-drop+device+versus+transection.">Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection.</a> Exp Neurol. 139, 244-256 (1996).</li><li>Gruner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monitored+contusion+model+of+spinal+cord+injury+in+the+rat.">A monitored contusion model of spinal cord injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 9, 123-128 (1992).</li><li>Choo, A. M., Liu, J., Liu, Z., Dvorak, M., Tetzlaff, W., Oxland, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+spinal+cord+contusion,+dislocation,+and+distraction:+characterization+of+vertebral+clamps,+injury+severities,+and+node+of+Ranvier+deformations.">Modeling spinal cord contusion, dislocation, and distraction: characterization of vertebral clamps, injury severities, and node of Ranvier deformations.</a> J. Neurosci. Methods. 181, 6-17 (2009).</li><li>Whishaw, I. Q., Piecharka, D. M., Drever, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+and+partial+lesions+of+the+pyramidal+tract+in+the+rat+affect+qualitative+measures+of+skilled+movements:+impairment+in+fixations+as+a+model+for+clumsy+behavior.">Complete and partial lesions of the pyramidal tract in the rat affect qualitative measures of skilled movements: impairment in fixations as a model for clumsy behavior.</a> Neural. Plast. 10, 77-92 (2003).</li><li>Jones, T. A., Schallert, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overgrowth+and+pruning+of+dendrites+in+adult+rats+recovering+from+neocortical+damage.">Overgrowth and pruning of dendrites in adult rats recovering from neocortical damage.</a> Brain Res. 581, 156-160 (1992).</li><li>Liu, Y., Kim, D., Himes, B. T., Chow, S. Y., Schallert, T., Murray, M., Tessler, A., Fischer, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplants+of+fibroblasts+genetically+modified+to+express+BDNF+promote+regeneration+of+adult+rat+rubrospinal+axons+and+recovery+of+forelimb+function.">Transplants of fibroblasts genetically modified to express BDNF promote regeneration of adult rat rubrospinal axons and recovery of forelimb function.</a> J. Neurosci. 19, 4370-4387 (1999).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat:+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects.">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behav. Brain Res. 119, 1-13 (2001).</li><li>McKenna, J. E., Prusky, G. T., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+motoneuron+topography+reflects+the+proximodistal+organization+of+muscles+and+movements+of+the+rat+forelimb:+a+retrograde+carbocyanine+dye+analysis.">Cervical motoneuron topography reflects the proximodistal organization of muscles and movements of the rat forelimb: a retrograde carbocyanine dye analysis.</a> J. Comp. Neurol. 419, 286-296 (2000).</li><li>Sandrow, H. R., Shumsky, J. S., Amin, A., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspiration+of+a+cervical+spinal+contusion+injury+in+preparation+for+delayed+peripheral+nerve+grafting+does+not+impair+forelimb+behavior+or+axon+regeneration.">Aspiration of a cervical spinal contusion injury in preparation for delayed peripheral nerve grafting does not impair forelimb behavior or axon regeneration.</a> Exp. Neurol. 210, 489-500 (2008).</li><li>Popovich, P. G., Lemeshow, S., Gensel, J. C., Tovar, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Independent+evaluation+of+the+effects+of+glibenclamide+on+reducing+progressive+hemorrhagic+necrosis+after+cervical+spinal+cord+injury.">Independent evaluation of the effects of glibenclamide on reducing progressive hemorrhagic necrosis after cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 233, 615-622 (2012).</li><li>Dunham, K. A., Siriphorn, A., Chompoopong, S., Floyd, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+graded+cervical+hemicontusion+spinal+cord+injury+model+in+adult+male+rats.">Characterization of a graded cervical hemicontusion spinal cord injury model in adult male rats.</a> J. Neurotrauma. 27, 2091-2106 (2010).</li><li>Lee, J. H., Roy, J., Sohn, H. M., Cheong, M., Liu, J., Stammers, A. T., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnesium+in+a+polyethylene+glycol+formulation+provides+neuroprotection+after+unilateral+cervical+spinal+cord+injury.">Magnesium in a polyethylene glycol formulation provides neuroprotection after unilateral cervical spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 35, 2041-2048 (2010).</li><li>Alstermark, B., Isa, T., Lundberg, A., Pettersson, L. G., Tantisira, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+low+pyramidal+lesions+on+forelimb+movements+in+the+cat.">The effect of low pyramidal lesions on forelimb movements in the cat.</a> Neurosci. Res. 7, 71-75 (1989).</li></ol>

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

Dans cet article, nous décrivons un modèle contusion cervicale unilatérale en utilisant l&#39;horizon infini (IH) frappe avec une force de 150 kdyn, un angle de 22,5 ° par rapport à la verticale, et un objectif latérale de 1,4 mm de la ligne médiane. Avec ces paramètres, nous étions en mesure de produire les déficits comportementaux subies dans le membre antérieur ipsilatéral avec une perturbation du parenchyme contenue en grande partie sur le côté ipsilatéral, où il est apparu que des dommages considér...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom de l&#39;équipement </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Impactor Infinite Horizon </td><td> Precision Systems et de l&#39;instrumentation </td><td> IH-0400 </td><td></td></tr><tr><td> Tôle d&#39;aluminium </td><td> Metalsupermarlets.com </td><td> APT6061/500 </td><td></td></tr><tr><td> Des plaques d&#39;appui de pied Flexaframe </td><td> Les pêcheurs scientifique </td><td> 1466625Q </td><td></td></tr><tr><td> Tiges de support Flexaframe </td><td> Les pêcheurs scientifique </td><td> 1466610GQ </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe Connecteurs de soutien </td><td> Les pêcheurs scientifique </td><td> 1466620Q </td><td></td></tr><tr><td> Fixer une </td><td> Custom made </td><td></td><td> Choo et al., 2009 </td></tr><tr><td> Détenteurs de métal </td><td> Custom made </td><td></td><td> Voir ci-dessus </td></tr><tr><td> Impactor pointe </td><td> Custom made </td><td></td><td> Diamètre: 1,15 mm </td></tr><tr><td> Cadre stéréotaxique </td><td> David Kopf Instruments </td><td> Modèle 900 </td><td></td></tr><tr><td> Niveau Cylindre </td><td> Yijia OUTILS </td><td> YJ-SL0620 </td><td></td></tr><tr><td> Microscope </td><td> Leica </td><td></td><td> Modèle #: MZ8 </td></tr><tr><td> Ciseaux Laboratoire prise </td><td> VWR </td><td> 12620-902 </td><td></td></tr></tbody></table>

a contusive model of unilateral cervical spinal cord injury using the infinite horizon impactor

Alors que la majorité des humains blessures de la moelle épinière se produisent dans la moelle épinière cervicale, la grande majorité des recherches en laboratoire emploie des modèles animaux de lésions de la moelle épinière (SCI) dans lequel la moelle épinière thoracique est blessé. En outre, parce que la plupart lésions de la moelle de l&#39;homme se produisent à la suite d&#39;émoussée, non-pénétrant un traumatisme (accident de véhicule automobile, par exemple, des blessures sportives) où la moelle épinière est violemment frappé par de l&#39;os déplacées ou des tissus mous, la majorité des chercheurs SCI sont d&#39;avis que les plupart des modèles de blessures cliniquement pertinents sont ceux dans lesquels la moelle épinière est rapidement contusionné. 1 Par conséquent, une étape importante dans l&#39;évaluation préclinique de nouveaux traitements sur le chemin de la traduction humaine est une évaluation de leur efficacité dans un modèle de contusion au sein de SCI la moelle épinière cervicale. Ici, nous décrivons les aspects techniques et les résultats qui en résultent anatomiques et comportementales d&#39;un modèle unilatéral contondante du cancer du col SCI qui emploie leInfini Horizon frappe des lésions médullaires. Des rats Sprague-Dawley ont subi une laminectomie unilatérale du côté gauche au niveau de C5. Afin d&#39;optimiser la reproductibilité des résultats biomécaniques, fonctionnels, et histologique du modèle des blessures, nous contus de la moelle épinière en utilisant une force d&#39;impact de 150 kdyn, une trajectoire d&#39;impact de 22,5 ° (animaux tourné à 22,5 °), et un point d&#39;impact hors de la ligne médiane de 1,4 mm. La récupération fonctionnelle a été évaluée à l&#39;aide du test du cylindre d&#39;élevage, de test échelle horizontale, le toilettage de test et test de l&#39;escalier modification de Montoya pour un maximum de 6 semaines, après quoi les moelles épinières ont été évalués histologiquement pour épargne matière grise et blanche. Le modèle présenté ici donne des blessures cohérents et reproductibles des forces biomécaniques de la moelle épinière, une caractéristique importante de tout modèle expérimental SCI. Cela entraîne des dommages histologiques discret à la moitié latérale de la moelle épinière qui est en grande partie contenue à til côté ipsilatéral de blessure. La blessure est bien tolérée par les animaux, mais ne se traduisent par des déficits fonctionnels de la patte antérieure qui sont importants et soutenus dans les semaines suivant la lésion. Le modèle de lésion cervicale unilatérale présenté ici peut être une ressource pour les chercheurs qui souhaitent évaluer les thérapies potentiellement prometteuses avant la traduction humaine.

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A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Une façon fiable et reproductible pour produire un col de l&#39;utérus blessures unilatérale moelle épinière aide de l&#39;impacteur Infinite Horizon est décrite. La méthode tire parti d&#39;un cadre personnalisé conçu et pince pour stabiliser la colonne vertébrale. La procédure normalisée et biomécanique des blessures paramètres entraînent des blessures suffisantes et durables.

Un modèle de contusion unilatérale des blessures moelle épinière cervicale aide de l&#39;impacteur Infinite Horizon

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

19.3K vues.  University of British Columbia. Une façon fiable et reproductible pour produire un col de l'utérus blessures unilatérale moelle épinière aide de l'impacteur Infinite Horizon est décrite. La méthode tire parti d'un cadre personnalisé conçu et pince pour stabiliser la colonne vertébrale. La procédure normalisée et biomécanique des blessures paramètres entraînent des blessures suffisantes et durables.

Vidéo: A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

Aiguë et chronique Test tactile sensorielle après un traumatisme médullaire chez le rat

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Recherche

Médecine

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Use of genetically modified mice enhances our understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders such as a spinal cord injury (SCI). Freehand manual control used to produce a laceration model of SCI creates inconsistent injuries often associated with a crush or contusion component and, therefore, a novel technique was developed. Our model of cervical laceration SCI has resolved inherent difficulties with the freehand method by incorporating 1) cervical vertebral stabilization by vertebral facet fixation, 2) enhanced spinal cord exposure, and 3) creation of a reproducible laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm in depth without associated contusion. Compared to the standard methods of creating a SCI laceration such as freehand use of a scalpel or scissors, our method has produced a consistent lesion. This method is useful for studies on axonal regeneration of corticospinal, rubrospinal, and dorsal ascending tracts.

A novel technique to create a reproducible in vivo model of cervical spinal cord laceration injury in the mouse is described. This technique is based on spine stabilization by fixation of the cervical facets and laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm.

Contrôlé blessures de lacération du col chez la souris

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is described to obtain a consistent model of severe SCI. Use of a stereotactic frame and computer controlled impactor allows for creation of reproducible injury. Hypothermia and urinary tract infection pose significant challenges in the post-operative period. Careful monitoring of animals with daily weight recording and bladder expression allows for early detection of post-operative complications. The functional results of this contusion model are equivalent to transection models. The contusion model can be utilized to evaluate the efficacy of both neuroprotective and neuroregenerative approaches.

A contusion model of severe spinal cord injury is described. Detailed pre-operative, operative and post-operative steps are described to obtain a consistent model.

Un modèle de contusion de graves lésions de la moelle épinière chez les rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

A Novel Vertebral Stabilization Method for Producing  Contusive Spinal Cord Injury

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing reliable cervical SCI is difficult due to lack of satisfactory methods of vertebral stabilization. The conventional method to stabilize the spine is to suspend the rostral and caudal cervical spine via clamps attached to cervical spinous processes. &#160;However, this method of stabilization fails to prevent tissue yielding during the contusion as the cervical spinal processes are too short to be effectively secured by the clamps (Figure 1). &#160;Here we introduce a new method to completely stabilize the cervical vertebra at the same level of the impact injury. &#160;This method effectively minimizes movement of the spinal column at the site of impact, which greatly improves the production of consistent SCIs. &#160;We provide visual description of the equipment (Figure 2-4), methods, and a step-by-step protocol for the stabilization of the cervical 5 vertebra (C5) of adult rats, to perform laminectomy (Figure 5) and produce a contusive SCI thereafter. &#160;Although we only demonstrate a cervical hemi-contusion using the NYU/MASCIS impactor device, this vertebral stabilization technique can be applied to other regions of the spinal cord, or be adapted to other SCI devices. &#160;Improving spinal cord exposure and fixation through vertebral stabilization may be valuable for producing consistent and reliable injuries to the spinal cord. &#160;This vertebral stabilization method can also be used for stereotactic injections of cells and tracers, and for imaging using two-photon microscopy in various neurobiological studies.

Vertebral stabilization is necessary for minimizing variability, and for producing consistent experimental spinal cord injuries.&#160; Using a customized stabilizing apparatus in conjunction with the NYU/MASCIS impactor device, we have demonstrated here the proper equipment and procedure for generating reproducible hemi-contusive cervical (C5) spinal cord injuries in adult rats.

Une nouvelle méthode de stabilisation vertébrale pour Produire contusion Traumatisme médullaire

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

Un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

Contrôlée corticale modèle d&#39;impact pour Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

Un système de radio-télémétrique de surveiller la fonction cardiovasculaire chez le rat avec la moelle épinière Transection et embryonnaires souches neurales greffes cellulaires

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. Clinically, more than 50% of SCI affect the cervical spine1. As a consequence of the primary injury, a cascade of secondary mechanisms including inflammation, apoptosis, and demyelination occur finally leading to tissue scarring and development of intramedullary cavities2,3. Both represent physical and chemical barriers to cell transplantation, integration, and regeneration. Therefore, shaping the inhibitory environment and bridging cavities to create a supportive milieu for cell transplantation and regeneration is a promising therapeutic target4. Here, a contusion/compression model of cervical SCI using an aneurysm clip is described. This model is more clinically relevant than other experimental models, since complete transection or ruptures of the cord are rare. Also in comparison to the weight drop model, which in particular damage the dorsum columns, circumferential compression of the spinal cord appears advantageous. Clip closing force and duration can be adjusted to achieve different injury severity. A ring spring facilitates precise calibration and constancy of clip force. Under physiological conditions, synthetic self-assembling peptides (SAP) self-assemble into nanofibers and thus, are appealing for application in SCI5. They can be injected directly into the lesion minimizing damage to the cord. SAPs are biocompatible structures erecting scaffolds to bridge intramedullary cavities and thus, equip the damaged cord for regenerative treatments. K2(QL)6K2 (QL6) is a novel SAP introduced by Dong et al.6 In comparison to other peptides, QL6 self-assembles into &#946;-sheets at neutral pH6.14 days after SCI, after the acute stage, SAPs are injected into the center of the lesion and neural precursor cells (NPC) are injected into adjacent dorsal columns. In order to support cell survival, transplantation is combined with continuous subdural administration of growth factors by osmotic micro pumps for 7 days.

Treating cervical spinal cord injury with both self-assembling peptides (SAP) and neural precursor cells (NPC), together with growth factors, is a promising approach to promote regeneration and recovery. A contusion/compression aneurysm clip rat model of cervical SCI and combined treatment involving SAP injection and NPC transplantation is established.

Utilisation synergique des cellules neurales précurseurs et peptides d&#39;auto-assemblage dans la partie expérimentale moelle épinière cervicale blessures

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can be used both to investigate the biological responses to injury and to test potential therapies. Contusion or compression injury delivered to the surgically exposed spinal cord are the most widely used models of the pathology. In this report the experimental contusion is performed by using the Infinite Horizon (IH) Impactor device, which allows the creation of a reproducible injury animal model through definition of specific injury parameters. Stem cell transplantation is commonly considered a potentially useful strategy for curing this debilitating condition. Numerous studies have evaluated the effects of transplanting a variety of stem cells. Here we demonstrate an adapted method for spinal cord injury followed by tail vein injection of cells in CD1 mice. In short, we provide procedures for: i) cell labeling with a vital tracer, ii) pre-operative care of mice, iii) execution of a contusive spinal cord injury, and iv) intravenous administration of post mortem neural precursors. This contusion model can be utilized to evaluate the efficacy and safety of stem cell transplantation in a regenerative medicine approach.

Spinal cord injury is a traumatic condition that causes severe morbidity and high mortality. In this work we describe in detail a contusion model of spinal cord injury in mice followed by a transplantation of neural stem cells.

Neural Transplantation de cellules souches dans la partie expérimentale Modèle contusion de la moelle épinière des blessures

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

Calibré Forceps modèle de compression de la moelle épinière des blessures

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...