AEVD a été soutenue par la Heart Foundation néerlandaise (DHF-2007B103). Les auteurs tiennent à remercier toutes les mères et les enfants dans les Amsterdam enfants nés et leur développement étude (ABCD), et toute l&#39;équipe de développement et de maintenance du système VU-AMS à la Division de l&#39;Instrumentation - le ministère de la psychophysiologie (VU University, Amsterdam, Pays-Bas).

1. Préparation: Démarrage <ol><li> Vous devez: <ul><li> un dispositif d&#39;enregistrement ambulatoire de VU-AMS5fs (y compris un câble d&#39;interface infrarouge qui se connecte soit au port série RS232 d&#39;un PC ou à un port USB). </li><li> 7 électrodes (nous avons utilisé ConMed 1690-003). </li><li> 2 inculpé piles AA. </li><li> une carte vide mémoire CompactFlash (le VU-AMS5fs a été testé avec la carte de 1GB CF 80x de Transcend (TS1GCF80), mais d&#39;autres cartes CF devrait fonctionner aussi). </li><li> un ordinateur portable ou un PC avec lecteur de carte flash et le logiciel de gestion d&#39;analyse de données (DAMS) Suite est installé. </li><li> un chronomètre. </li><li> lecteur de musique avec des histoires et des casques pour enfants et une petite auto-matelas gonflable air sont disponibles en option. </li></ul></li><li> Vérifiez les paramètres de date et d&#39;heure sur l&#39;ordinateur portable / PC, puisque ceux-ci seront enregistrées sous forme de métadonnées sur vos fichiers. Insérez la carte mémoire vide et des batteries pleines dans le dispositif VU-AMS (placement réussi est signalé par un triple bip). Lorsque l&#39;appareil est en veille, le voyant vert clignote deux fois toutes les dix secondes. Cela indique qu&#39;il est prêt, mais pas l&#39;enregistrement. Maintenant, connectez l&#39;appareil à l&#39;ordinateur portable en utilisant le câble fourni et le démarrage du programme de DAMS. Initier la communication avec l&#39;appareil (sélectionner «dispositif» de l&#39;onglet et choisissez le mode de connexion approprié, câble infrarouge ou Bluetooth). </li><li> Avez participant décoller sa / son usure supérieure du corps. Dans les endroits où les électrodes seront placés, nettoyer la peau avec l&#39;alcool lingettes, et placer les sept électrodes sur la poitrine et le dos (figure 1). Ensuite, fixez les fils suivant le schéma de couleurs, et de les connecter à l&#39;appareil. </li><li> Vérifiez le type de batterie et indication de la tension de la batterie (ce qui devrait être d&#39;environ 3,4 V pour V alcalines et environ 2,4 pour les batteries rechargeables NiMH). Remplissez le champ d&#39;identification. Les fréquences d&#39;échantillonnage typiques sont illustrés dans la figure (Figure 2). </li><li> Mesurez la distance bntre les deux électrodes sur la poitrine en millimètres et remplir ce formulaire dans le champ &#39;ICG V-distance ». Ensuite, cliquez sur «Paramètres d&#39;envoi» pour envoyer les paramètres / ID actuels de l&#39;appareil. </li><li> Maintenant, l&#39;option «ligne» du programme devrait être utilisé pour afficher l&#39;ECG, Az (c&#39;est la respiration) et dZ / dt (c&#39;est le ICG). Le signal Az reflète l&#39;impédance de base au niveau du thorax, qui, après filtrage approprié peut être utilisé pour extraire le signal de respiration avec une grande fidélité 7. Le signal dZ / dt est la Az différenciées au cours du temps et reflète des changements rapides dans Az liés à l&#39;éjection de sang du ventricule vers l&#39;aorte. <ol><li> Un clair QRST complexe devrait être détectable dans l&#39;ECG. L&#39;onde R devrait être à la hausse et il devrait être le pic avec la plus grande amplitude (en valeur absolue) dans les deux sens. </li><li> L&#39;Az devrait être dans -0,5 et 0,5 Ω plupart du temps et dZ / dt compris entre -1 et 1 Ω / sec. </li><li> Z 0 devrait Always rester dans une plage de 8 à 20 Ω. Cette variante tient compte du fait que le signal d&#39;impédance du thorax dépend de la distance entre les électrodes de mesure qui est une fonction de la taille de l&#39;enfant, et la &#39;humectation&#39; de la colonne thoracique délimitée par les électrodes de mesure, les différences de composition corporelle (par exemple, IMC) peut affecter l&#39;amplitude du signal dZ / dt (masse grasse contenant moins d&#39;eau que le muscle). Les différences individuelles dans absolue Z 0 amplitude sont également reflétées dans le signal Az mais cela n&#39;affecte pas la détermination des intervalles de temps systoliques, qui sont d&#39;amplitude indépendante. </li><li> Le signal Az devrait refléter la respiration profonde du sujet clairement (Enseigner à l&#39;enfant de prendre une profonde respiration lente et expirez lentement). </li><li> Dans l&#39;ICG la forme d&#39;onde vers le haut typique reflétant la phase d&#39;éjection cardiaque doit être nettement détectable. Léger mouvement du sujet ne doit pas fausser le signal dZ / dt. Si ces critères ne sont pas remplis, re-nettoyer la peau et re-fixer les électrodes jusqu&#39;à ce que les signaux satisfaisants sont obtenus. </li></ol></li><li> Lors de bons signaux sont atteints, commencer l&#39;enregistrement des données en appuyant sur le bouton «start». Vous entendrez un bip reconnaissant le début de l&#39;enregistrement et le voyant vert clignote une fois toutes les trois secondes. L&#39;enregistrement a commencé. Fermez le programme VU-DAMS. Vous pouvez maintenant débrancher l&#39;appareil du câble d&#39;interface. </li></ol> 2. La période d&#39;inscription <ol><li> Une fois que l&#39;enregistrement a commencé, demandez à l&#39;enfant de se coucher pour la première condition expérimentale. Lorsque l&#39;enfant a été en position couchée (sans tête-up tilt) pendant deux minutes, vous sous peu (&lt;2 s), appuyez sur le petit bouton noir sur le dessus de l&#39;appareil. En appuyant sur ce bouton marque un événement spécial, et plus tard vous aider à identifier le début de cette condition dans vos données. </li><li> Après quatre minutes, appuyez à nouveau sur le bouton de l&#39;événement. Cela marque la fin de la couchéétat. Maintenant, demandez à l&#39;enfant s&#39;asseoir et répéter la procédure pour cette seconde condition. Appuyez sur le bouton, attendre quatre minutes, et appuyez de nouveau sur le bouton. Les enfants sont priés de se reposer tranquillement pendant ces conditions. </li><li> Pour arrêter la mesure, appuyez et maintenez le bouton enfoncé pendant au moins 3 sec. La lumière clignote toutes les 10 secondes pour indiquer qu&#39;il a arrêté et est en &#39;stand en «mode. Une fois l&#39;appareil arrêté, vous pouvez débrancher la fiche de câble du connecteur et les fils des électrodes. </li><li> Retirez les piles et Flash sous forme de carte, le dispositif VU-AMS et placez la carte flash dans l&#39;unité de lecture. Déplacez les fichiers acquis dans un répertoire désigné (généralement le nom du répertoire sera identique à l&#39;identifiant objet utilisé dans le domaine de l&#39;identification). </li></ol> 3. Traitement des données <ol><li> Lors de l&#39;ouverture des données avec le programme VU-DAMS, les données seront automatiquement converties du format de données brutes (extension. 5FS) &lt;/ Em&gt; pour un nouveau format (extension. Amsdata). Il s&#39;agit du fichier de données VU-DAMS sera utilise dans les étapes suivantes. </li><li> Premier extrait de la série chronologique de l&#39;intervalle de battement Inter à partir du signal ECG. Sélectionnez le Detect onglet R sommets. Un algorithme automatisé permet de détecter tous les pics de R dans le signal ECG et sélectionner (si présent) périodes de très faible qualité de l&#39;ECG pour l&#39;enlèvement. Dans le coin supérieur gauche de la main le nombre de Bleu (correct), jaune (moyen suspect) ou rouge (très suspect) est indiqué. En appuyant sur &#39;.&#39; (DOT) le curseur est déplacé à l&#39;autre suspect R-pic et l&#39;utilisateur peut supprimer ou ajouter des marqueurs pour le R-ondes à la main. Il est recommandé qu&#39;au moins tous les battements très suspectes sont inspectées visuellement. </li><li> L&#39;objectif principal est d&#39;obtenir une valeur moyenne de la fréquence cardiaque, la période de preejection (PEP) et les mesures d&#39;arythmie sinusale respiratoire (RSA, HF, RMSSD) dans les conditions expérimentales utilisées. Par conséquent procéder en indiquant quelles périodes dans les données brutes correspondent àces conditions. Ce processus est appelé «l&#39;étiquetage des données». Sélectionnez l&#39;onglet Données de l&#39;étiquette. Deux panneaux montrent le signal de la fréquence cardiaque et le signal de mouvement, respectivement, de même que le temps réel de l&#39;enregistrement. </li><li> Placez le curseur de la souris dans la barre du haut, où il est dit «cliquer et faire glisser pour ajouter des étiquettes&quot; autour de l&#39;heure de départ de votre premier état et faites glisser la souris sur l&#39;heure de fin de cette condition. Ces temps sont obtenus soit à partir d&#39;un compte rendu écrit des heures de début et (que vous avez noté lors de la collecte des données) arrêter ou vous pouvez utiliser marqueurs de début et d&#39;arrêt obtenue à partir de la touche au début et à la fin de chaque état, qui sont à la verticale lignes qui traversent les graphiques de RH et de mouvement. </li><li> Chaque étiquette peut être donné un (unique) identifiant pour signaler une condition particulière. Dans notre cas, nous n&#39;avons qu&#39;une seule catégorie pour nos étiquettes: état expérimental. Cette catégorie comprend deux valeurs: couchée et assise. </li><li> VU-DAMS a besoin d&#39;être mis au courant de l&#39;expérimentationconception tal par un fichier de configuration de l&#39;étiquette dite (label.cfg). Il s&#39;agit d&#39;un fichier ASCII qui peut être ouvert avec la plupart des éditeurs de texte et, par exemple, ressemble à ceci: # Exp_condition 10 couché 11 assis </li><li> En plaçant le fichier label.cfg dans le répertoire des fichiers. Amsdata, il sera chargé automatiquement par le programme VU-DAMS. Une fois que l&#39;étiquette a été faite, un écran contextuel apparaît avec les catégories / valeurs figurant dans le fichier label.cfg. Sélectionnez «couché» pour la première étiquette et «assis» pour la deuxième étiquette. </li><li> Après marquage, sélectionnez l&#39;onglet «scoring Impédance» pour marquer le PEP dans le cardiogramme impédance. Pour chacune des conditions d&#39;un ensemble moyenne dZ / dt forme d&#39;onde est affichée, le temps à verrouillage à l&#39;ECG R-pic. Un ensemble en moyenne ECG est présenté sous la courbe dZ / dt. Placez les quatre curseurs verticaux dans les positions correctes: ECG onde Q apparition (début de l&#39;activité électrique), ICG point B (début de la phase d&#39;éjection), ICG dZ / dt-min (vitesse maximale d&#39;éjection), et GIC X points (fermeture de la valve aortique - fin de la phase d&#39;éjection). </li><li> Ensuite, sélectionnez l&#39;onglet «Scoring respiration» pour marquer le pic-vallée RSA en utilisant les voies respiratoires et les signaux ECG. Automated notation souffle à souffle de l&#39;intervalle respiratoire et l&#39;intervalle le plus court Interbeat pendant l&#39;inspiration et l&#39;intervalle Interbeat plus longue lors de l&#39;expiration peut maintenant être inspecté. Typiquement, l&#39;algorithme de détection automatique ne doit pas classer plus de 15% des respirations que déviant - inspecter sinon le signal de respiration et d&#39;ajuster les paramètres de l&#39;algorithme de détection en fonction des besoins. Directives pour l&#39;inspection visuelle des signaux ECG, GIC et de la respiration et Pep interactive et la notation RSA peuvent être trouvés sur le site VU-AMS, <a href="http://www.vu-ams.nl" target="_blank">www.vu-ams.nl</a> . </li></ol><ol start="10"><li> Enfin, sélectionnez l&#39;onglet Informations Label. Un tableau des résultats apparaît après calcul. Chaque ligne représente l&#39;avvaleur verture d&#39;une série de paramètres physiologiques (fréquence cardiaque, la PPE, RSA, RR) pour chaque période marquée. La première colonne contient l&#39;identifiant objet (Label_ID). La dernière colonne indique les valeurs de toutes les catégories utilisées pendant l&#39;étiquetage (ici une seule catégorie &#39;état expérimental »avec deux valeurs,« assis »et« couché »). Puissances spectrales de la série des temps d&#39;intervalle Interbeat ne sont donnés qu&#39;à des étiquettes avec une longueur minimale de 4 min (sinon le code manquant est affiché). La feuille de calcul dans cet affichage peut être exporté au format ASCII ou Excel pour d&#39;autres analyses statistiques. </li></ol>

<ol>
	<li>de Geus, E. J., Willemsen, G. H., Klaver, C. H., van Doornen, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambulatory+measurement+of+respiratory+sinus+arrhythmia+and+respiration+rate.">Ambulatory measurement of respiratory sinus arrhythmia and respiration rate.</a> Biol. Psychol. 41, 205-227 (1995).</li><li>Goedhart, A. D., van der, S. S., Houtveen, J. H., Willemsen, G., de Geus, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+time+and+frequency+domain+measures+of+RSA+in+ambulatory+recordings.">Comparison of time and frequency domain measures of RSA in ambulatory recordings.</a> Psychophysiology. 44, 203-215 (2007).</li><li>Goedhart, A. D., Kupper, N., Willemsen, G., Boomsma, D. I., de Geus, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+stability+of+ambulatory+stroke+volume+and+cardiac+output+measured+by+impedance+cardiography.">Temporal stability of ambulatory stroke volume and cardiac output measured by impedance cardiography.</a> Biol. Psychol. 72, 110-117 (2006).</li><li>Riese, H., Groot, P. F. C., van den Berg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+ensemble+averaging+of+ambulatory+impedance+cardiograms.">Large-scale ensemble averaging of ambulatory impedance cardiograms.</a> Behavior Research Methods Instruments &amp; Computers. 35, 467-477 (2003).</li><li>Willemsen, G. H., de Geus, E. J., Klaver, C. H., van Doornen, L. J., Carroll, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambulatory+monitoring+of+the+impedance+cardiogram.">Ambulatory monitoring of the impedance cardiogram.</a> Psychophysiology. 33, 184-193 (1996).</li><li>van Dijk, A. E., van Eijsden, M., Stronks, K., Gemke, R. J., Vrijkotte, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prenatal+stress+and+balance+of+the+child's+cardiac+autonomic+nervous+system+at+age+5-6+years.">Prenatal stress and balance of the child's cardiac autonomic nervous system at age 5-6 years.</a> PLoS ONE. 7, e30413 (2012).</li><li>Houtveen, J. H., de Groot, P. F., de Geus, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+variation+in+posture+and+respiration+on+RSA+and+pre-ejection+period.">Effects of variation in posture and respiration on RSA and pre-ejection period.</a> Psychophysiology. 42, 713-719 (2005).</li><li>Goedhart, A. D., Willemsen, G., Houtveen, J. H., Boomsma, D. I., De Geus, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+low+frequency+heart+rate+variability+and+preejection+period:+two+sides+of+a+different+coin.">Comparing low frequency heart rate variability and preejection period: two sides of a different coin.</a> Psychophysiology. 45, 1086-1090 (2008).</li><li>van Dijk, A. E., van Eijsden, M., Stronks, K., Gemke, R. J., Vrijkotte, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardio-metabolic+risk+in+5-year-old+children+prenatally+exposed+to+maternal+psychosocial+stress:+the+ABCD+study.">Cardio-metabolic risk in 5-year-old children prenatally exposed to maternal psychosocial stress: the ABCD study.</a> BMC Public Health. 10, 251 (2010).</li><li>van Lien, R., Goedhart, A., Kupper, N., Boomsma, D., Willemsen, G., de Geus, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underestimation+of+cardiac+vagal+control+in+regular+exercisers+by+24-hour+heart+rate+variability+recordings.">Underestimation of cardiac vagal control in regular exercisers by 24-hour heart rate variability recordings.</a> Int. J. Psychophysiol. 81, 169-176 (2011).</li></ol>

<p class="jove_content"&gt; Nous n&#39;avons rien à révéler.</p

Nous avons utilisé un dispositif d&#39;enregistrement ambulatoire pour mesurer le contrôle autonome cardiaque en 3097 enfants, âgés de 5 et 7 ans. Sept électrodes suffisent à mesurer l&#39;ECG et ICG à partir de laquelle le rythme cardiaque, la variabilité de la fréquence cardiaque et les intervalles de temps systoliques ont été extraites. la variabilité de la fréquence cardiaque dans la bande de fréquence respiratoire (RSA) est un indicateur valable de l&#39;activité parasympathique cardiaque. L&#39;intervalle systolique du temps, PEP, en réfléchissant la contractilité cardiaque, est un indicateur valide de l&#39;activité sympathique cardiaque. Les valeurs moyennes obtenues pour les RH, la PPE et RSA, les effets des changements de posture et les différences entre les garçons et les filles sont en ligne avec ce qui était attendu de la littérature. Comme la surveillance ambulatoire supprimé la nécessité d&#39;une évaluation dans un laboratoire nos enregistrements peuvent être effectués à divers endroits (par exemple, école, centre sportif, musée des sciences), sans différence de qualité d&#39;enregistrement du signal. Cependant, il est deimportance cruciale pour normaliser l&#39;intérieur ou entre des comparaisons en cause pour la posture et la charge physique, les effets de postcharge et précharge peuvent co-déterminer le PEP sans aucun changement dans cardiaque lecteur sympathique 7. Nous concluons que l&#39;enregistrement ambulatoire de l&#39;ECG et ICG dans les grands échantillons d&#39;enfants est très faisable et nous proposons la conception de l&#39;étude normalisée actuelle comme un modèle utile pour les évaluations futures de contrôle autonome cardiaque chez les enfants.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>VU-AMS5fs ambulatory recording device &amp; infrared interface cable</td>
			<td>VU University Amsterdam</td>
			<td>n/a</td>
			<td><a href="http://www.vu-ams.nl" target="_blank">http://www.vu-ams.nl</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Electrodes</td>
			<td>ConMed</td>
			<td>1690-003</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>AA-batteries</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>CompactFlash memory card</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Laptop/pc with flash card reader</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>VU-DAMS software suite</td>
			<td>VU University Amsterdam</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>free download, <a href="http://www.vu-ams.nl" target="_blank">http://www.vu-ams.nl</a></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Stopwatch</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Music player &amp; headphones</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>optional</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Self-inflatable air mattress</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>optional</td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

measuring cardiac autonomic nervous system (ans) activity in children

Le système nerveux autonome (ANS) contrôle les fonctions principalement automatiques corporelles qui sont engagées dans l&#39;homéostasie, comme un pouls cardiaque, la digestion, la fréquence respiratoire, salivation, la transpiration et la fonction rénale. Le SNA dispose de deux branches principales: Le système sympathique nerveux, la préparation de la corps humain pour l&#39;action dans les moments de danger et le stress, et le système nerveux parasympathique, qui réglemente le état de repos de le corps. Activité du SNA peut être mesurée invasive, par exemple par des techniques de radiotraçage ou l&#39;enregistrement de microélectrodes à partir de nerfs superficielles, ou elle peut être mesurée non-invasive par utilisant des changements dans la réponse de un organe comme un proxy pour changements dans l&#39;activité ANS, pour instance de les glandes sudoripares ou le cœur. Mesures envahissantes ont la plus haute validité, mais sont très mal faisable dans échantillons à grande échelle où des mesures non-envahissantes sont la approche préféré. Effets Autonomic sur le cœur peuvent être quantifiés manière fiable par le enregistrementde la électrocardiogramme (ECG) en combinaison avec d&#39;le cardiogramme impédance (groupe de contact intersessions), ce qui reflète les des changements dans impédance de protection du thorax en réponse à des la respiration et des la éjection de sang à partir de le ventricule dans l&#39;aorte. À partir de la signaux ECG la respiration et la, respiratoire arythmie sinusale peut être extraite en tant que une mesure de la le contrôle parasympathique cardiaque. À partir de la l&#39;ECG et de les signaux d&#39;éjection d&#39;ventriculaires gauches, la période de preejection peut être extraite en tant que une mesure de la le contrôle sympathique cardiaque. ECG et l&#39;enregistrement ICG se fait principalement dans paramètres de laboratoire. Toutefois, ayant la rapport des sujets à un laboratoire réduit grandement validité écologique, n&#39;est pas toujours faisable dans les études épidémiologiques de grandes échelle, et peut être intimidant pour les jeunes enfants. Une dispositif ambulatoire pour ECG et ICG résout simultanément ces trois problèmes. Ici, nous présentons une conception de l&#39;étude pour une évaluation minimalement invasive et rapide de contrôle autonomic cardiaque chez les enfants, en utilisant un amb validédispositif ulatory 1-5, le système de surveillance ambulatoire de VU University (VU-AMS, Amsterdam, Pays-Bas, <a href="http://www.vu-ams.nl" target="_blank">www.vu-ams.nl</a> ).

Dans les leur étude sur le développement, une étude prospective, la cohorte de naissance longitudinal néerlandaise Amsterdam enfants nés et, le protocole de mesure a été lancé en 3097 les enfants de 6. L&#39;approbation a été obtenue auprès du Comité académique Medical Center éthique médicale, le comité d&#39;éthique VU University Medical Medical Center et le comité d&#39;inscription d&#39;Amsterdam. Toutes les mères participantes ont donné un consentement éclairé écrit pour eux-mêmes et leurs enfants. Comme les moniteurs sont légers et discrets, les enfants tolérés ces mesures très bien. Nous n&#39;avons pas de données sur le taux de refus, mais l&#39;expérience nous a appris que seuls quelques enfants ont résisté à la mise en place des électrodes et ainsi obstrué une évaluation plus poussée. Sur les 3.097 inscriptions, 0,7% ont été perdus en raison soit de panne d&#39;équipement ou d&#39;égarer des dossiers. Sur les 3.074 inscriptions gauche, 98,7% étaient des enfants qui ont terminé l&#39;ensemble du protocole (n = 3,056). Dans each des périodes marquées (nous avions initialement étiquetés quatre périodes de temps, mais plus tard, a résumé ces contre deux), nous avons rencontré des signaux ICG floues, ce qui signifie PEP n&#39;a pas pu être déterminée. Cela a conduit à une perte de 1,5% dans la première des quatre périodes marquées, de 2,4% au deuxième, 2,8% au troisième et 4,1% au quatrième période. Des données complètes sur PEP dans toutes les périodes étaient disponibles dans 2.797 cas (91,5%, donc une perte de 8,5% en raison de signaux de GIC floues). Des données complètes sur la fréquence cardiaque (HR), la période de pré-éjection (PEP) et arythmie sinusale respiratoire (RSA), ainsi que le sexe et l&#39;âge, est disponible à partir de 2.761 enfants; dans cette dernière étape, la perte de données de 1,3% a eu lieu, en raison de des raisons inconnues. Dans l&#39;ensemble, 89,2% des inscriptions ouvertes a conduit à des données soumises à part entière. L&#39;âge moyen des enfants était de 5,7 ans (SD 0,5; intervalle interquartile 5.0:6.5), et leur IMC était de 15,5 kg / m 2 (SD 1,5; intervalle interquartile 13.9:17.2). Les valeurs moyennes du résultat majeur des variables RH, PEP, et RSA are donnée dans le tableau 1 et graphique montre la figure 3, séparément pour les garçons et les filles. HR (à la fois couchée et assise) et PEP (seulement s&#39;asseoir) étaient plus élevés chez les filles que chez les garçons (les postures). RSA était plus faible chez les filles que chez les garçons (les postures). Les valeurs les plus élevées en matière de RH dans les filles sont susceptibles d&#39;être causés par le contrôle cardiaque inférieure vagal (parasympathique). Leur contrôle cardiaque sympathique n&#39;était pas différent, voire inférieur à celui des garçons (assis). Dans les deux sexes, HR était plus élevé en position assise par rapport à couché, alors que RSA a été plus faible en position assise. Cela s&#39;explique par le contrôle vagal inférieur en position assise. PEP a été plus courte couché puis assis. Cet effet a également été comme prévu, et il reflète le résultat de processus opposés: l&#39;activité sympathique inférieur (allonge PEP) en position couchée avec une augmentation de précharge (raccourcit PEP) 7. <table border="1" class="jove_content_small" fo:keep-together.withen page = &quot;always&quot;&gt; <tbody><tr><td rowspan="3"></td><td colspan="6"> Garçons </td><td colspan="5"> Filles </td></tr><tr><td colspan="3"> Couché </td><td colspan="3"> Assis </td><td colspan="2"> Couché </td><td colspan="3"> Assis </td></tr><tr><td> Signifier </td><td colspan="2"> SD </td><td> Signifier </td><td> SD </td><td></td><td> Signifier </td><td> SD </td><td> Signifier </td><td> SD </td><td></td></tr><tr><td> La fréquence cardiaque (bpm) </td><td> 83,9 </td><td> 9.5 </td><td> * </td><td> 89,1 </td><td> 10 </td><td> * † </td><td> 86,9 </td><td> 10.1 </td><td> 92,4 </td><td> 10.4 </td><td> † </td></tr><tr><td> Période de pré-éjection (ms) </td><td>76,9 </td><td> 11.8 </td><td></td><td> 78,5 </td><td> 12.2 </td><td> * † </td><td> 77,7 </td><td> 10.3 </td><td> 81 </td><td> 11.7 </td><td> † </td></tr><tr><td> Sinusale respiratoire arythmie (ms) </td><td> 127,0 </td><td> 60,4 </td><td> * </td><td> 115,7 </td><td> 55,8 </td><td> * † </td><td> 121,7 </td><td> 56,8 </td><td> 108,7 </td><td> 51,9 </td><td> † </td></tr></tbody></table> Tableau 1. Mesures cardiaques système nerveux autonome chez les garçons et les filles, par la posture sur la différence de posture. P &lt;0,05 pour un test t sur ​​la différence de sexe. † p &lt;0,05 pour les échantillons test t apparié. <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/50073/50073fig1.jpg" /> Figure 1. Les sept électrodes doivent être placées sur la poitrine et le dos du participant. La première électrode ECG (V) est un lieud légèrement inférieur à la droite de la clavicule 4 cm à droite du sternum. La seconde électrode ECG (V +) est placé à la pointe du coeur au cours de la neuvième côte sur le bord latéral gauche de la poitrine, sensiblement au niveau de la xiphodius Processus. La troisième électrode ECG (GND) est une électrode de terre et est placé sur le côté droit, entre les deux rampes inférieures à la droite de l&#39;abdomen. La première électrode de mesure de l&#39;ICG (V 1) est placé à l&#39;extrémité supérieure du sternum, entre les pointes des clavicules. La seconde électrode de mesure de l&#39;ICG est placé au complexe xiphoïde du sternum, où les nervures se rencontrent. Les deux électrodes de courant sont placés sur le dos: I-sur la colonne vertébrale au cours de la vertèbre cervicale C4, au moins 3 cm (1 po) au-dessus du GIC mesure électrode V et I + entre vertèbres thoraciques T8 et T9 sur la colonne vertébrale , au moins 3 cm (1 &quot;) en dessous de la mesure de l&#39;électrode V 2 ICG. L&#39;emplacement de l&#39;électrode ICG prend en compte que la plus grande partie du ventricule gauche driven variation de l&#39;impédance du thorax est capturée par la colonne entre la fourchette sternale et l&#39;xiphoideus Processus. <img alt="Figure 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50073/50073fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50073/50073fig2.jpg" /> Figure 2. Les réglages typiques utilisés pour un enregistrement affiché par le logiciel DAMS après la connexion au dispositif VU-AMS5fs. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50073/50073fig2large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour agrandir la figure</a> . <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/50073/50073fig3.jpg" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50073/50073fig3highres.jpg"/> Figure 3. Mesures du système nerveux autonome cardiaque chez les garçons et les filles, par la posture. * Indique p &lt;0,05 pour un test t sur ​​la différence de sexe. # Indiquep &lt;0,05 pour les échantillons test t apparié à la différence de posture.

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Measuring Cardiac Autonomic Nervous System ANS Activity in Children

Mesure de l&#39;activité du système nerveux autonome généralement confins du chercheur et participant au laboratoire, ce qui peut créer un environnement intimidant pour les enfants. Le système de surveillance ambulatoire de VU University (VU-AMS) appareil peut enregistrer contrôle autonome cardiaque dans n&#39;importe quel contexte. Le VU-AMS s&#39;est avéré très prêtent à tester chez les enfants.

Système de mesure (ANS) Activité Nervous Autonomic Cardiac in Children

The autonomic nervous system (ANS) controls mainly automatic bodily functions that are engaged in homeostasis, like heart rate, digestion, respiratory ...

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Measuring Cardiac Autonomic Nervous System (ANS) Activity in Children

20.7K vues.  Academic Medical Center - University of Amsterdam. Mesure de l'activité du système nerveux autonome généralement confins du chercheur et participant au laboratoire, ce qui peut créer un environnement intimidant pour les enfants. Le système de surveillance ambulatoire de VU University (VU-AMS) appareil peut enregistrer contrôle autonome cardiaque dans n'importe quel contexte. Le VU-AMS s'est avéré très prêtent à tester chez les enfants.

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Quantitative Autonomic Testing

Disorders associated with dysfunction of autonomic nervous system are quite common yet frequently unrecognized. Quantitative autonomic testing can be invaluable tool for evaluation of these disorders, both in clinic and research. There are number of autonomic tests, however, only few were validated clinically or are quantitative. Here, fully quantitative and clinically validated protocol for testing of autonomic functions is presented. As a bare minimum the clinical autonomic laboratory should have a tilt table, ECG monitor, continuous noninvasive blood pressure monitor, respiratory monitor and a mean for evaluation of sudomotor domain. The software for recording and evaluation of autonomic tests is critical for correct evaluation of data. The presented protocol evaluates 3 major autonomic domains: cardiovagal, adrenergic and sudomotor. The tests include deep breathing, Valsalva maneuver, head-up tilt, and quantitative sudomotor axon test (QSART). The severity and distribution of dysautonomia is quantitated using Composite Autonomic Severity Scores (CASS). Detailed protocol is provided highlighting essential aspects of testing with emphasis on proper data acquisition, obtaining the relevant parameters and unbiased evaluation of autonomic signals. The normative data and CASS algorithm for interpretation of results are provided as well.

Standardized, comprehensive and fully quantitative testing of autonomic functions is described. The autonomic tests consist of evaluation of all three major autonomic domains including cardiovagal, adrenergic and sudomotor. The severity and distribution of dysautonomia is quantitated using Composite Autonomic Severity Scores.

Des tests quantitatifs Autonomic

Disorders associated with dysfunction of autonomic nervous system are quite common yet frequently unrecognized. Quantitative autonomic testing can be ...

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Measuring Cardiac Autonomic Nervous System (ANS) Activity in Toddlers - Resting and Developmental Challenges

The autonomic nervous system (ANS) consists of two branches, the parasympathetic and sympathetic nervous systems, and controls the function of internal organs (e.g., heart rate, respiration, digestion) and responds to everyday and adverse experiences 1. ANS measures in children have been found to be related to behavior problems, emotion regulation, and health 2-7. Therefore, understanding the factors that affect ANS development during early childhood is important. Both branches of the ANS affect young children&#8217;s cardiovascular responses to stimuli and have been measured noninvasively, via external monitoring equipment, using valid and reliable measures of physiological change 8-11. However, there are few studies of very young children with simultaneous measures of the parasympathetic and sympathetic nervous systems, which limits understanding of the integrated functioning of the two systems. In addition, the majority of existing studies of young children report on infants&#8217; resting ANS measures or their reactivity to commonly used mother-child interaction paradigms, and less is known about ANS reactivity to other challenging conditions. We present a study design and standardized protocol for a non-invasive and rapid assessment of cardiac autonomic control in 18 month old children. We describe methods for continuous monitoring of the parasympathetic and sympathetic branches of the ANS under resting and challenge conditions during a home or laboratory visit and provide descriptive findings from our sample of 140 ethnically diverse toddlers using validated equipment and scoring software. Results revealed that this protocol can produce a range of&#160;physiological responses to both resting and developmentally challenging conditions, as indicated by changes in heart rate and indices of parasympathetic and sympathetic activity. Individuals demonstrated&#160;variability in resting levels, responses to challenges, and challenge reactivity, which provides additional evidence that this protocol is useful for the examination of ANS individual differences for toddlers.

Measuring Cardiac Autonomic Nervous System ANS Activity in Toddlers - Resting and Developmental Challenges

We describe the methods for continuous monitoring of the autonomic nervous system under resting and challenge conditions with 18 month old children. Results revealed that this protocol can produce meaningful physiological responses in both branches of the autonomic nervous system and elicit significant individual variability in patterns of responses.

Mesure du système nerveux cardiaque Autonomic (ANS) Activité in Toddlers - Repos et développement Défis

The autonomic nervous system (ANS) consists of two branches, the parasympathetic and sympathetic nervous systems, and controls the function of internal ...

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal model to investigate bladder remodeling in pBOO are female rodents undergoing partial obstruction at the proximal urethra. Variability in the degree of obstruction and animal mortality are major concerns with proximal obstruction. Furthermore, dissecting around the proximal urethra and bladder neck jeopardizes bladder innervation.
We developed a nerve-sparing mid-urethral obstruction (NeMO) model for pBOO avoiding the disadvantages of the traditional model. We approached the urethra just inferior to the pubic symphysis, which obviated the need for laparotomy as well as for dissection in this area; also, the striated urethral sphincter remained untouched. We performed NeMO in female Sprague-Dawley rats (12 obstructions, 6 sham animals) as well as in female C57/bl6 mice (20 obstructions, 18 sham animals). After two weeks, we evaluated bladder function, bladder mass, and body mass.
We had no mortalities among obstructed- or sham-operated female rats; as described for the traditional proximal pBOO-method, we tied the suture around the proximal urethra and a temporarily placed 0.9 mm metal rod. NeMO induced an 85% increase in bladder mass after two weeks, average residual urine volume was 0.4 mL in partially obstructed rats while only 0.03 mL in sham animals. In mice, we tested 3 sizes of cannulas that we placed along the urethra when tying the suture. We found that using a 27-gauge cannula resulted in over 50% animal mortality; placing the 25-gauge cannula did not yield the desired response in increasing bladder mass; utilizing a 26-gauge cannula yielded favorable results with minimal animal mortality (1/8) yet a significant 2-fold increase in bladder mass.

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

Traditional modeling of partial bladder outlet obstruction in rodents is fraught with animal mortality. A denervation injury from dissection around the proximal urethra and bladder neck is also of major concern. We developed and evaluated a safe and reliable mid-urethral obstruction model, avoiding the shortcomings of the traditional model.

Préservation des nerfs Obstruction à mi-urétrale (NEMO) chez les femelles petits rongeurs

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System

The regrowth capacity of damaged neurons governs neuroregeneration and functional recovery after nervous system trauma. Over the past few decades, various intrinsic and extrinsic inhibitory factors involved in the restriction of axon regeneration have been identified. However, simply removing these inhibitory cues is insufficient for successful regeneration, indicating the existence of additional regulatory machinery. Drosophila melanogaster, the fruit fly, shares evolutionarily conserved genes and signaling pathways with vertebrates, including humans. Combining the powerful genetic toolbox of flies with two-photon laser axotomy/dendriotomy, we describe here the Drosophila sensory neuron &#8211; dendritic arborization (da) neuron injury model as a platform for systematically screening for novel regeneration regulators. Briefly, this paradigm includes a) the preparation of larvae, b) lesion induction to dendrite(s) or axon(s) using a two-photon laser, c) live confocal imaging post-injury and d) data analysis. Our model enables highly reproducible injury of single labeled neurons, axons, and dendrites of well-defined neuronal subtypes, in both the peripheral and central nervous system.

A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System

Here, we present a protocol using the Drosophila sensory neuron - dendritic arborization (da) neuron injury model, which combines in vivo live imaging, two-photon laser axotomy/dendriotomy, and the powerful fly genetic toolbox, as a platform for screening potential promoters and inhibitors of neuroregeneration.

Un modèle de blessure de Drosophila In Vivo pour étudier la neurogenèse dans le périphérique et le système nerveux Central

The regrowth capacity of damaged neurons governs neuroregeneration and functional recovery after nervous system trauma. Over the past few decades, various ...

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum of physiological, biochemical, morphological, and pharmacological parameters in centrally denervated hearts. Here, we describe a setup for the modulation of the intracardiac autonomic nervous system and the assessment of its influence on basic electrophysiology, arrhythmogenesis, and cyclic adenosine monophosphate (cAMP) dynamics. The intracardiac autonomic nervous system is modulated by the mechanical dissection of atrial fat pads-in which murine ganglia are located mainly&#8212;or by the usage of global as well as targeted pharmacological interventions. An octapolar electrophysiological catheter is introduced into the right atrium and the right ventricle, and epicardial-placed multi-electrode arrays (MEA) for high-resolution mapping are used to determine cardiac electrophysiology and arrhythmogenesis. F&#246;rster resonance energy transfer (FRET) imaging is performed for the real-time monitoring of cAMP levels in different cardiac regions. Neuromorphology is studied by means of antibody-based staining of whole hearts using neuronal markers to guide the identification and modulation of specific targets of the intracardiac autonomic nervous system in the performed studies. The ex vivo Langendorff setup allows for a high number of reproducible experiments in a short time. Nevertheless, the partly open nature of the setup (e.g., during MEA measurements) makes constant temperature control difficult and should be kept to a minimum. This described method makes it possible to analyze and modulate the intracardiac autonomic nervous system in decentralized hearts.

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

Here, we present a protocol for the modulation of the intracardiac autonomic nervous system and the assessment of its influence on basic electrophysiology, arrhythmogenesis, and cAMP dynamics using an ex vivo Langendorff setup.

Impact des neurones intracardiaques sur l’électrophysiologie cardiaque et arythmogenèse dans un système de Langendorff Ex Vivo

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum ...

A Flow Cytometry-based Assay for Measuring Mitochondrial Membrane Potential in Cardiac Myocytes After Hypoxia/Reoxygenation

Timely and efficient reperfusion of the occluded coronary artery is the best strategy for decreasing myocardial infarct size in patients with a ST-segment elevated myocardial infarction. However, reperfusion per se can result in further cardiomyocyte death, a phenomenon known as reperfusion injury. The opening of the mitochondrial permeability transition pore (mPTP), with the decrease of the mitochondrial membrane potential (MMP), or mitochondrial depolarization, is universally recognized as the final step of reperfusion injury and is responsible for mitochondrial and cardiomyocyte death. JC-1 is a lipophilic cationic dye that accumulates in mitochondria depending on the value of MMP. The higher the MMP is, the more JC-1 accumulates in the mitochondria. The increasing amounts of JC-1 in mitochondria can be reflected by a fluorescence emission shift from green (~530 nm) to red (~590 nm). Therefore, the reduction of the red/green fluorescence intensity ratio can indicate the depolarization of mitochondria. Here, we take advantage of JC-1 to measure MMP, or the opening of mPTP in human cardiac myocytes after hypoxia/reoxygenation, detected by flow cytometry.

Here, we present a protocol that uses JC-1 dye to assess the mitochondrial membrane potential of cells after being exposed to hypoxia/reoxygenation with or without a protective agent.

Un test Flow Cytometry pour mesurer le potentiel de Membrane Mitochondrial dans les Myocytes cardiaques après l’hypoxie/réoxygénation

Timely and efficient reperfusion of the occluded coronary artery is the best strategy for decreasing myocardial infarct size in patients with a ST-segment ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Méthode invasive semi-minimale pour induire l’infarctus du myocarde chez les rats et l’évaluation de la fonction cardiaque par un système cardiaque de travail isolé

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...

How to Administer Near-Infrared Spectroscopy in Critically ill Neonates, Infants, and Children

Near infrared spectroscopy (NIRS) calculates regional tissue oxygenation (rSO2) using the different absorption spectra of oxygenated and deoxygenated hemoglobin molecules. A probe placed on the skin emits light that is absorbed, scattered, and reflected by the underlying tissue. Detectors in the probe sense the amount of reflected light: this reflects the organ-specific ratio of oxygen supply and consumption - independent of pulsatile flow. Modern devices enable the simultaneous monitoring at different body sites. A rise or dip in the rSO2 curve visualizes changes in oxygen supply or demand before vital signs indicate them. The evolution of rSO2 values in relation to the starting point is more important for interpretation than are absolute values.
A routine clinical application of NIRS is the surveillance of somatic and cerebral oxygenation during and after cardiac surgery. It is also administered in preterm infants at risk for necrotizing enterocolitis, newborns with hypoxic ischemic encephalopathy and a potential risk of impaired tissue oxygenation. In the future, NIRS could be increasingly used in multimodal neuromonitoring, or applied to monitor patients with other conditions (e.g., after resuscitation or traumatic brain injury).

This protocol is designed to assist clinicians to measure regional tissue oxygenation at different body sites in infants and children. It can be used in situations where tissue oxygenation is potentially compromised, particularly during cardiopulmonary bypass, when using non-pulsatile cardiac-assist devices, and in critically ill neonates, infants and children.

Comment administrer la spectroscopie proche infrarouge chez les nouveau-nés, les nourrissons et les enfants gravement malades

Near infrared spectroscopy (NIRS) calculates regional tissue oxygenation (rSO2) using the different absorption spectra of oxygenated and deoxygenated ...

In vitro Assessment of Cardiac Reprogramming by Measuring Cardiac Specific Calcium Flux with a GCaMP3 Reporter

Cardiac reprogramming has become a potentially promising therapy to repair a damaged heart. By introducing multiple transcription factors, including Mef2c, Gata4, Tbx5 (MGT), fibroblasts can be reprogrammed into induced cardiomyocytes (iCMs). These iCMs, when generated in situ in an infarcted heart, integrate electrically and mechanically with the surrounding myocardium, leading to a reduction in scar size and an improvement in heart function. Because of the relatively low reprogramming efficiency, purity, and quality of the iCMs, characterization of iCMs remains a challenge. The currently used methods in this field, including flow cytometry, immunocytochemistry, and qPCR, mainly focus on cardiac-specific gene and protein expression but not on the functional maturation of iCMs. Triggered by action potentials, the opening of voltage-gated calcium channels in cardiomyocytes leads to a rapid influx of calcium into the cell. Therefore, quantifying the rate of calcium influx is a promising method to evaluate cardiomyocyte function. Here, the protocol introduces a method to evaluate iCM function by calcium (Ca2+) flux. An &#945;MHC-Cre/Rosa26A-Flox-Stop-Flox-GCaMP3 mouse strain was established by crossing Tg(Myh6-cre)1Jmk/J (referred to as Myh6-Cre below) with Gt(ROSA)26Sortm38(CAG-GCaMP3)Hze/J (referred to as Rosa26A-Flox-Stop-Flox-GCaMP3 below) mice. Neonatal cardiac fibroblasts (NCFs) from P0-P2 neonatal mice were isolated and cultured in vitro, and a polycistronic construction of MGT was introduced to NCFs, which led to their reprogramming to iCMs. Because only successfully reprogrammed iCMs will express GCaMP3 reporter, the functional maturation of iCMs can be visually assessed by Ca2+ flux with fluorescence microscopy. Compared with un-reprogrammed NCFs, NCF-iCMs showed significant calcium transient flux and spontaneous contraction, similar to CMs. This protocol describes in detail the mouse strain establishment, isolation and selection of neonatal mice hearts, NCF isolation, production of retrovirus for cardiac reprogramming, iCM induction, the evaluation of iCM Ca2+ flux using our reporter line, and related statistical analysis and data presentation. It is expected that the methods described here will provide a valuable platform to assess the functional maturation of iCMs for cardiac reprogramming studies.

We describe here, the establishment and application of an Tg(Myh6-cre)1Jmk/J /Gt(ROSA)26Sortm38(CAG-GCaMP3)Hze/J (referred to as &#945;MHC-Cre/Rosa26A-Flox-Stop-Flox-GCaMP3 below) mouse reporter line for cardiac reprogramming assessment. Neonatal cardiac fibroblasts (NCFs) isolated from the mouse strain are converted into induced cardiomyocytes (iCMs), allowing for convenient and efficient evaluation of reprogramming efficiency and functional maturation of iCMs via calcium (Ca2+) flux.

Évaluation in vitro de la reprogrammation cardiaque en mesurant le flux de calcium spécifique cardiaque avec un rapporteur GCaMP3

Cardiac reprogramming has become a potentially promising therapy to repair a damaged heart. By introducing multiple transcription factors, including ...

A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position

The Ross operation for aortic valve disease has regained new interest due to its outstanding long-term results. Nonetheless, when employed as freestanding root replacement, the possible dilation of the pulmonary autograft and subsequent aortic regurgitation is described. Several animal models have been proposed. However, these are usually limited to ex-vivo models or in-vivo experiments with relatively expensive large animal models. In this study, we sought to establish a rodent model of pulmonary artery graft (PAG) implantation in a systemic position. A total of 39 adult Lewis rats were included. Immediately after euthanasia, the pulmonary root was harvested from a donor animal (n=17). Syngeneic recipient (n=17) and sham-operated (n=5) rats were sedated and ventilated. In the recipient group, the PAG was implanted with an end-to-end anastomosis in infra-renal abdominal aortic position. Sham-operated rats underwent only transection and re-anastomosis of the aorta. Animals were followed with serial ultrasound studies for two months and post-mortem histological analysis. The median PAG diameter in the native position was 3.20 mm (IQR=3.18-3.23). At follow-up, the median diameter of the PAG was 4.03 mm (IQR=3.74-4.13) at 1 week, 4.07 mm (IQR=3.80-4.28) at 1 month, and 4.27 mm (IQR=3.90-4.35) at 2 months (p&lt;0.01). Peak systolic velocity was 220.07 mm/s (IQR=210.43-246.41) at 1 week, 430.88 mm/s (IQR=375.28-495.56) at 1 month, and 373.68 mm/s (IQR=305.78-429.81) at 2 months (p=0.02) and did not differ from the sham-operated group at the end of the experiment (p=0.5). Histological analysis did not show any sign of endothelial thrombosis. This study showed that rodent models may allow for the evaluation of the long-term adaptation of the pulmonary root to a high-pressure system. A systemically placed syngeneic PAG implantation represents a simple and feasible platform for the development and evaluation of novel surgical techniques and drug therapies to further improve the outcomes of the Ross operation.

We demonstrate how to establish a murine model of pulmonary root implantation into the descending aorta to simulate the Ross procedure. This model enables the medium/long-term evaluation of pulmonary autograft remodeling in a systemic position, representing the basis of developing therapeutic strategies to promote its adaptation.

Un modèle de rongeur de l’opération de Ross: implantation d’une greffe d’artère pulmonaire syngénique dans une position systémique

The Ross operation for aortic valve disease has regained new interest due to its outstanding long-term results. Nonetheless, when employed as freestanding ...