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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology

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Purification de plasmide

Vue d'ensemble

La purification de plasmide est une technique utilisée pour isoler et purifier l'ADN plasmidique de l'ADN génomique, des protéines, des ribosomes, et du mur de la cellule bactérienne. Un plasmide est un ADN double brin petit et circulaire, qui est utilisé comme porteur de molécules spécifiques d'ADN. Lorsqu'il est introduit dans un organisme hôte via transformation, le plasmide sera répliqué, créant de nombreuses copies du fragment d'ADN à l'étude.

Dans cette vidéo, une procédure généralisée pas à pas est décrite pour montrer comment réaliser une purification de plasmide. La purification de plasmide implique trois étapes de base: la croissance de la culture bactérienne, la récolte et la lyse des bactéries, et la purification de l'ADN plasmidique. La vidéo contient une explication sur où le plasmide peut être trouvé dans chaque étape du protocole et pour analyser quantitativement et qualitativement l'ADN plasmidique avec un spectrophotomètre et/ou une électrophorèse sur gel. Il y a différents types de méthodes de purification de plasmide disponibles, qui sont dédicacées au rendement désiré, au nombre de copies de plasmide et au volume de culture bactérienne.

Procédure

Les plasmides sont des molécules d'ADN circulaires et extra-chromosomiques. En biologie moléculaire, ils agissent comme porteurs, ou vecteurs, pour un fragment d'ADN spécifique. Des bactéries sont utilisées pour répliquer les plasmides, de sorte que votre ADN d'intérêt soit produit en masse. Le procédé par lequel les chercheurs obtiennent les plasmides depuis les bactéries est appelé la purification de plasmide, qui sera expliquée dans cette vidéo.

De façon évidente, la purification de

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Overview

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Principal Components of the Plasmid Purification Procedure

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Plasmid Purification Procedure: Step by Step

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Applications

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Summary

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