Ce travail a été soutenu par les National Institutes of de santé (subvention 08UDE017788-05). EBP reconnaît également le soutien de la Fondation Espagnole pour la Science et la Technologie (FECYT). Les auteurs remercient Shonda T. Gaylord et Pratyusha Mogalisetti pour la lecture critique du manuscrit.

<img alt="Figure 1" width="600px" fo:content-width="5.5in" src="/files/ftp_upload/50726/50726fig1.jpg" /> Figure 1. . Flux de travail pour appliquer une puce à anticorps de la microsphère de la fibre optique à la salive de profilage (1) Des microsphères sont codés en interne avec deux colorants fluorescents, (2) les microsphères codés sont extérieurement modifiées avec des anticorps monoclonaux spécifiques de la protéine, (3) les microsphères multiplexés sont mélangés, et (4) déposés au hasard dans des micropuits gravés à l&#39;extrémité proximale d&#39;un faisceau de fibres optiques (5); protéines salivaires sont capturés par les microsphères à travers immunologique en sandwich, et (6) quantifiés en utilisant la microscopie à fluorescence. Une. Microsphères encodage <ol><li> Peser europium de sodium (III) thenoyltrifluoroacetonate trihydrate (Eu-TTA, MW = 869,54 g / mol) dans un flacon en verre ambré et préparer une solution stock de 200 mM dans du tétrahydrofuranne (THF). Mélanger doucement par pipetage; vérifier visuellementle colorant est totalement dissous. </li><li> Peser coumarine 30 (C30, MW = 347,41 g / mol) dans un flacon en verre ambré et préparer une solution stock de 12 mM dans le THF. Mélanger délicatement la pipette, vérifier visuellement le colorant soit complètement dissous. </li><li> Préparer 700 pi de solution de travail pour chaque type de microsphères à l&#39;aide des solutions mères et de THF pour atteindre la concentration finale indiquée dans le tableau 1. </li><li> Assurer microsphères (10% p / v) sont bien en suspension au vortex, puis transférer 60 pi de suspension à un tube de 1,5 ml. </li><li> Ajouter 600 ul de PBS à suspension de microsphères et mélanger par pipetage 20x. Centrifuger le tube à 10 000 rpm pendant 3 min et retirez soigneusement le surnageant. Répétez ce processus une autre 2x pour laver les microsphères. </li><li> Laver le culot de microsphères 3x avec du THF en utilisant une procédure similaire à l&#39;étape 1.5. </li><li> Centrifuger la suspension de microsphères / THF à 10 000 tours par minute pendant 3 min, retirer le surnageant et remettre en suspension le culot dans 600 ulsolution de travail énumérés dans le tableau 1. Transférer le mélange dans un nouveau tube de 1,5 ml microtubes. </li><li> Scellez le tube à centrifuger avec du Parafilm et le placer sur un agitateur. Agiter à 3000 rpm et incuber pendant 24 heures, protéger de la lumière en couvrant la configuration à l&#39;aide d&#39;une boîte recouverte de papier d&#39;aluminium. </li><li> Centrifuger la suspension de microsphères à 10000 rpm pendant 3 minutes pour former une pastille. </li><li> Retirer le surnageant de solution de colorant, se laver les microsphères 6x avec 600 ul de methanol, puis avec 600 pi de PBS contenant 0,01% de Tween-20 à un autre 6x, telle que décrite dans l&#39;étape 1.5. </li><li> Stocker les microsphères codées dans 600 ul de PBS contenant 0,01% de Tween-20 à 4 ° C jusqu&#39;à son utilisation, l&#39;abri de la lumière. </li></ol><table border="1"><tbody><tr><td> nom du type de microsphères: </td><td> 1 </td><td> 2 </td><td> 3 </td><td> 4 </td><td> 5 </td><td> 6 </strong&gt; </td><td> 7 </td></tr><tr><td> Eu-TTA (mM) </td><td> 100 </td><td> 100 </td><td> 10 </td><td> 100 </td><td> 10 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> C30 (mM) </td><td></td><td> 1 </td><td> 1 </td><td> 6 </td><td> 6 </td><td> 1 </td><td> 6 </td></tr></tbody></table> Tableau 1. Les concentrations de Eu-TTA et C30 solutions de travail. 2. Préparation de microsphères de protéine de capture d&#39; <ol><li> Préparer du tampon MES [2 - (N-morpholino) éthanesulfonique (MES) 0,1 M, NaCl 0,9%, SDS 0,01%, pH 5,7] et de tampon PBS / SDS (Sodium phosphate 0,01 M, NaCl 0,154 M, SDS à 0,01%, pH 7.4) à l&#39;avance à la température ambiante. </li><li> Ajouter 200 pi codé suspension de microsphères (contenant ~ 2 mg de microsphères) dans un tube de 1,5 ml microtubes Safe-Lock. Il est important d&#39;utiliser ce type de tube à centrifuger pour éviter les fuites pendant l&#39;incubation à l&#39;étape 2.6. </li> &lt;li&gt; Lavez les microsphères avec 600 ul tampon MES 3x comme décrit dans l&#39;étape 1.5. Ajouter 700 ul MES au culot de microsphères et bien mélanger par pipetage. </li><li> Préparer 0,105 g / ml de 1-éthyl-3-[3-diméthylaminopropyl] carbodiimide (EDC, PM = 191,7 g / mol) et 0,163 g / ml de sulfo-N-hydroxysulfosuccinimide (sulfo-NHS, PM = 217,13 g / mol) solutions dans un tampon MES dans des tubes séparés. </li><li> Ajouter 150 ul de solution fraîchement préparée EDC goutte à goutte dans la suspension de microsphères. La SEE hydrolyse très rapidement, il est donc essentiel d&#39;utiliser une solution fraîchement préparée d&#39;assurer l&#39;efficacité de l&#39;immobilisation. Immédiatement après l&#39;addition de la CED, ajouter la solution sulfo-NHS 150 pi pour les microsphères, bien mélanger par pipetage et vérifiez la suspension est homogène. </li><li> Boucher le tube, le sceller avec du Parafilm, et le placer sur un agitateur. Agiter à 1500 tours par minute pendant 4 heures, protéger de la lumière en utilisant une boîte recouverte de papier d&#39;aluminium. </li><li> Centrifuger le suspens de microsphèresion à 10000 rpm pendant 3 minutes pour former un culot et éliminer le surnageant. Laver les microsphères avec 500 ul de PBS / SDS 3x tampons comme décrit dans l&#39;étape 1.5. </li><li> Ajouter tampon PBS / SDS 200 pi au culot, bien mélanger les microsphères et transférer la solution dans 300 pi de tampon PBS / SDS contenant 60 anticorps de capture de pg. Il est important de suspendre le culot de microsphères, puis d&#39;ajouter la suspension de microsphères dans la solution d&#39;anticorps. </li><li> Incuber le mélange d&#39;anticorps microsphères par agitation à 1500 tours par minute pendant 4 heures sur un agitateur, protéger de la lumière en utilisant une boîte recouverte de papier d&#39;aluminium. </li><li> Centrifuger la suspension de microsphères à 10000 rpm pendant 3 minutes pour former un culot et éliminer le surnageant. Laver les microsphères avec 500 ul StartingBlock (TBS) de blocage 3x tampons, comme décrit dans l&#39;étape 1.5. </li><li> Mélanger microsphères avec 1 ml de TBS tampon de blocage et incuber microsphères à 1500 tours par minute pendant 1 heure sur un agitateur, protéger de la lumière en utilisant une boîte anserouge avec une feuille d&#39;aluminium. </li><li> Centrifuger la suspension de microsphères à 7000 rpm pendant 3 minutes pour former un culot et éliminer le surnageant. Laver le culot avec de 3x 500 ul de tampon TBS blocage, tel que décrit dans l&#39;étape 1.5. </li><li> Centrifuger la solution à base de microsphères à 7000 rpm pendant 3 minutes pour former un culot et éliminer le surnageant. Ajouter 500 ul SCT tampon de blocage et mélanger par pipetage. </li><li> Entreposez la suspension de microsphères modifiées à 4 ° C jusqu&#39;à leur utilisation, protéger de la lumière. </li><li> Répétez cette procédure pour faire d&#39;autres types de microsphères en utilisant des anticorps correspondants. </li></ol> 3. Fibre optique Assemblée puces à ADN <ol><li> Mélanger 50 pi de chaque type de microsphères d&#39;interception de protéines dans un nouveau tube autoclave. Centrifuger les microsphères d&#39;actions en commun à 7000 rpm pendant 3 minutes, et retirer le surnageant de sorte que le volume restant est d&#39;environ 100 pi. </li><li> Coupées à la main fibre optique faisceaux à environ 5 cm de longueur etpolir de manière séquentielle aux deux extrémités sur une machine de polissage à l&#39;aide de 30, 15, 9, 6, 3, 1, 0,5 et 0,05 um de taille de diamant rodage films. Soniquer le faisceau poli dans de l&#39;eau déminéralisée pendant 2 min pour éliminer les particules. </li><li> Mettez une petite barre d&#39;agitation magnétique dans un tube de 0,5 ml à centrifuger, ajouter 400 ul de PBS sans protéines tampon et remuer sur une plaque d&#39;agitation magnétique pendant 30 min pour éliminer les bulles d&#39;air. </li><li> Graver une extrémité du faisceau de fibres polies dans une solution de HCl 0,025 N pour 150 sec 10,16. Immerger immédiatement et soniquer la fin gravé dans de l&#39;eau déminéralisée pendant 1 min. Sécher les faisceaux de fibres à l&#39;air comprimé. </li><li> Monter le faisceau de fibres sur un support de fibre et de bloquer la fin gravé dans le tampon PBS sans bulles exempt de protéines pendant 1 heure. </li><li> Dépôt de 1 ul aliquote de la suspension de microsphères stockée sur l&#39;extrémité gravée du faisceau de fibres optiques. Protéger l&#39;installation de la lumière avec une boîte de papier d&#39;aluminium, et d&#39;attendre 15 min. Le volume de la suspension seradiminuer par évaporation et forcer les microsphères dans les puits gravés. Répétez cette étape de chargement une fois de plus. </li><li> Utilisez un tampon saturé avec une solution de l&#39;échantillon pour éliminer les microsphères qui ne sont pas piégés dans les puits. La puce à protéine est maintenant prêt à utiliser. Rendez-vous immédiatement à l&#39;étape 4.1 pour l&#39;analyse de la salive. </li></ol> 4. Analyse des échantillons de salive de puces à ADN utilisant des microsphères <ol><li> Ajouter une solution de 200 ul d&#39;échantillon (100 ul de surnageant de salive diluée avec un volume égal de StartingBlock T20 (PBS) du tampon de blocage. L&#39;protocole de collecte de salive surnageant a été publiée antérieurement 10). dans un autoclave microtube de 0,5 ml. Trempez la puce à protéine chargée sur la fibre dans la solution et incuber sur l&#39;agitateur à 600 tours par minute pendant 2 heures, protéger de la lumière en utilisant une boîte recouverte de papier d&#39;aluminium. </li><li> Préparer 20 ml de tampon de lavage par addition de 200 ul de solution de BSA à 10% et 200 ul de 10% de Tween-20 dans 19,6 ml de PBS, mix et en agitant doucement. </li><li> Trempez la puce à protéine dans un nouveau tube autoclave contenant 200 tampon de lavage ul et agiter à 600 tours par minute pendant 2 min. Répéter ce lavage 3x. </li><li> Incuber la puce à ADN en solution à 100 ul d&#39;un cocktail d&#39;anticorps de détection contenant 5 ug / ml d&#39;anti-VEGF, IP-10, IL-8, l&#39;EGF, la MMP-9, les anticorps de détection biotinylés IL-1β dans StartingBlock T20 (PBS) du tampon de blocage pendant 30 min à température ambiante sur agitateur à 600 rpm, protéger de la lumière en utilisant une boîte recouverte de papier d&#39;aluminium. </li><li> Laver 3x de puces à ADN avec le tampon de lavage comme décrit dans l&#39;étape 4.3. </li><li> Incuber la puce dans 200 ul de 20 pg / ml conjugué streptavidine-phycoérythrine R (SAPE) solution dans du PBS à 600 tours par minute sur l&#39;agitateur pendant 10 min, protéger de la lumière en utilisant une boîte recouverte de papier d&#39;aluminium. </li><li> Laver le 5x de puces à ADN avec le tampon de lavage comme décrit dans l&#39;étape 4.3. </li><li> Nettoyer l&#39;extrémité distale de la fibre (par exemple, à une distance de l&#39;extrémitédes microsphères) bundle avec un tampon saturé avec de l&#39;éthanol absolu. </li><li> Sécher les deux extrémités de la fibre avec de l&#39;air comprimé. Monter la fibre sur un microscope à épifluorescence et de l&#39;image à travers l&#39;extrémité distale de la fibre. </li><li> Acquérir les images microsphères correspondant à Eu-TTA, C30, et SAPE intensités d&#39;émission de fluorescence. Filtres optiques installation et temps d&#39;exposition pour l&#39;imagerie de fluorescence d&#39;Eu-TTA, C30, et SAPE sont représentés dans le tableau 2. </li></ol><table border="1"><tbody><tr><td> Canal </td><td> Eu-TTA </td><td> C30 </td><td> SAPE </td></tr><tr><td> Excitateur </td><td> 365/10x </td><td> 350/50x </td><td> 546/10x </td></tr><tr><td> Beamsplitter </td><td> 525DCLP </td><td> 400DCLP </td><td> 560LP </td></tr><tr><td> Émetteur </td><td> 620/60m </td><td> 460/50m </td><td> 580/30m </td></tr><tr><td> Temps d&#39;exposition </td><td> 1 s</td><td> 0,3 sec </td><td> 1 s </td></tr></tbody></table> Tableau 2. Paramètres pour les trois images fluorescentes de la puce.

<ol>
	<li>Schena, M., Shalon, D., Davis, R. W., Brown, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+monitoring+of+gene-expression+patterns+with+a+complementary-DNA+microarray.">Quantitative monitoring of gene-expression patterns with a complementary-DNA microarray.</a> Science. 270, 467-470 (1995).</li><li>Schena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Protein Microarray. , (2004).</li><li>Tam, S. W., Wiese, R., Lee, S., Gilmore, J., Kumble, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+analysis+of+eight+human+Th1/Th2+cytokines+using+microarrays.">Simultaneous analysis of eight human Th1/Th2 cytokines using microarrays.</a> J. Immunol. Methods. 261 (01), 157-165 (2002).</li><li>Wang, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Array-based+multiplexed+screening+and+quantitation+of+human+cytokines+and+chemokines.">Array-based multiplexed screening and quantitation of human cytokines and chemokines.</a> J. Proteome Res. 1, 337-343 (2002).</li><li>de Jager, W., Velthuis, t. e., Prakken, H., Kuis, B. J., W, G. T., Rijkers, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+detection+of+15+human+cytokines+in+a+single+sample+of+stimulated+peripheral+blood+mononuclear+cells.">Simultaneous detection of 15 human cytokines in a single sample of stimulated peripheral blood mononuclear cells.</a> Clin. Diagn. Lab. Immunol. 10, 133-139 (2003).</li><li>Lee, H. J., Nedelkov, D., Corn, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+plasmon+resonance+imaging+measurements+of+antibody+arrays+for+the+multiplexed+detection+of+low+molecular+weight+protein+biomarkers.">Surface plasmon resonance imaging measurements of antibody arrays for the multiplexed detection of low molecular weight protein biomarkers.</a> Anal. Chem. 78, 6504-6510 (2006).</li><li>Vignali, D. A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplexed+particle-based+flow+cytometric+assays.">Multiplexed particle-based flow cytometric assays.</a> J. Immunol. Methods. 243 (00), 243-255 (2000).</li><li>Rissin, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-molecule+enzyme-linked+immunosorbent+assay+detects+serum+proteins+at+subfemtomolar+concentrations.">Single-molecule enzyme-linked immunosorbent assay detects serum proteins at subfemtomolar concentrations.</a> Nat. Biotechnol. 28, 595-599 (2010).</li><li>Zhang, H., Nie, S., Etson, C. M., Wang, R. M., Walt, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oil-sealed+femtoliter+fiber-optic+arrays+for+single+molecule+analysis.">Oil-sealed femtoliter fiber-optic arrays for single molecule analysis.</a> Lab Chip. 12, 2229-2239 (2012).</li><li>Blicharz, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiber-Optic+Microsphere-Based+Antibody+Array+for+the+Analysis+of+Inflammatory+Cytokines+in+Saliva.">Fiber-Optic Microsphere-Based Antibody Array for the Analysis of Inflammatory Cytokines in Saliva.</a> Anal. Chem. 81, 2106-2114 (2009).</li><li>Mukhopadhyay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Devices+to+drool+for.">Devices to drool for.</a> Anal. Chem. 78, 4255-4259 (2006).</li><li>Wong, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+diagnostics+powered+by+nanotechnologies,+proteomics+and+genomics.">Salivary diagnostics powered by nanotechnologies, proteomics and genomics.</a> J. Am. Dent. Assoc. 137, 313-321 (2006).</li><li>Segal, A., Wong, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salivary+diagnostics:+enhancing+disease+detection+and+making+medicine+better.">Salivary diagnostics: enhancing disease detection and making medicine better.</a> Eur. J. Dent. Educ. 12, 22-29 (2008).</li><li>St John, M. A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+6+and+interleukin+8+as+potential+biomarkers+for+oral+cavity+and+oropharyngeal+squamous+cell+carcinoma.">Interleukin 6 and interleukin 8 as potential biomarkers for oral cavity and oropharyngeal squamous cell carcinoma.</a> Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. 130, 929-935 (2004).</li><li>Herr, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+immunoassays+as+rapid+saliva-based+clinical+diagnostics.">Microfluidic immunoassays as rapid saliva-based clinical diagnostics.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 5268-5273 (2007).</li><li>Pantano, P., Walt, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ordered+nanowell+arrays.">Ordered nanowell arrays.</a> Chem. Mater. 8, 2832-2835 (1996).</li><li>Schena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Protein Microarrays. , (2005).</li></ol>

Les auteurs déclarent qu&#39;ils n&#39;ont aucun intérêt financier concurrents.

Les chercheurs devraient accorder une attention supplémentaire pour les étapes suivantes: pour une meilleure précision de décodage, il est nécessaire de vérifier les microsphères ont été suspendus de manière homogène dans toutes les étapes de lavage et incubation pendant la procédure microsphères de codage. En outre, les microsphères doivent être codées à l&#39;abri de la lumière à travers toute l&#39;expérience. À la suite des procédures de codage et de stockage appropriées, nous avons constaté...

Depuis la première puce à ADN rapporté par Mark Schena et ses collègues dans le milieu des années 1990, ce puissant outil a été utilisé dans de nombreux domaines de la recherche biologique 1. Microréseaux d&#39;anticorps capables de détecter simultanément de multiples protéines dans des fluides de diagnostic, tels que le sang, ont des applications importantes dans les diagnostics cliniques et des biomarqueurs de dépistage 2-10. Salive, contenant un grand nombre des mêmes analytes que le sang, a été considéré comme une alternative préférable au sang, car la collecte de salive est sûre, non invasive, et peut être effectué par le personnel médical peu formés 11-13. Actuellement, l&#39;analyse des protéines multiplexé en utilisant des échantillons de salive est limitée par plusieurs facteurs importants, y compris la faible concentration de l&#39;analyte cible 14 et la large gamme de concentrations différentes de marqueurs biologiques 15. . Ici, nous démontrons l&#39;analyse de six protéines: facteur endothélial vasculaire de croissance humaine (VEGF), la protéine induite par l&#39;interféron-gamma 10 (IP-10), interleukine-8 (IL-8), facteur de croissance épidermique (EGF), la matrice métallopeptidase 9 (MMP-9), et l&#39;interleukine-1 bêta (IL-1β) . Les performances du procédé a d&#39;abord été vérifié à l&#39;aide de solutions standard d&#39;analyte constituant les protéines recombinantes et d&#39;un tampon de blocage. Échantillons de salive réels recueillies auprès de patients de différentes maladies respiratoires chroniques ainsi que des contrôles sains ont également été testés avec des performances satisfaisantes. Le protocole devrait être applicable à d&#39;autres analytes de protéines et d&#39;autres essais à base de microsphères. Cette plate-forme offre des avantages considérables dans le domaine de chimie analytique, car elle permet l&#39;analyse simultanée rapide, précis et reproductible de faibles concentrations de plusieurs protéines avec une large gamme dynamique, interactions non spécifiques minimales, la consommation réduite de l&#39;échantillon, et à faible coût par rapport à un analogue Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA).

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of Reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eu-TTA dye</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC42319-0010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>THF</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34865-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amber glass vial</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>03-339-23B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 30 dye</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546127-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microspheres</td>
			<td>Bangslabs</td>
			<td>PC05N/6698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 ml microcentrifuge tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>05-408-129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 10x concentrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5493-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>W4502-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34860-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tw-20</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7949-100 ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BupH MES buffered saline</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>28390</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>05030-500ML-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SS256-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe-lock microcentrifuge tube</td>
			<td>VWR labshop</td>
			<td>53511-997</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDC</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>22980</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfo-NHS</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>24510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human VEGF capture antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human IP-10 capture antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human IL-8 capture antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human EGF capture antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human MMP-9 capture antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human IL-1&#946; capture antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IgG1 isotype control antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StartingBlock (TBS) buffer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>37542</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl standard solution 1.0 N</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>318949-500 ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5 ml microcentrifuge tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>05-408-120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein-free (PBS) buffer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>37572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human VEGF 165</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>293-VE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human IP-10</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>266-IP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human IL-8</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>208-IL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human EGF</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>236-EG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human MMP-9</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>911-MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human IL-1&#946;</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>201-LB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StartingBlock T20 (PBS) buffer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>37539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blocker BSA in PBS</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>37525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated VEGF detection antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAF293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated IP-10 detection antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAF266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated IL-8 detection antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAF208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated EGF detection antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAF236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated MMP-9 detection antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAF911</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated IL-1&#946; detection antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>BAF201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptavidin, R-phycoerythrin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S-21388</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol (200 proof)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E7023-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multiplexed fluorescent microarray for human salivary protein analysis using polymer microspheres and fiber-optic bundles

Nous décrivons ici un protocole pour la mesure simultanée de six protéines de la salive à l&#39;aide d&#39;une base de microsphères puce à anticorps fibre optique. La technique d&#39;immuno-matrice employée combine les avantages de base de microsphères en suspension tableau fabrication à l&#39;utilisation de la microscopie à fluorescence. Comme décrit dans le protocole vidéo, disponibles dans le commerce microsphères de polymère de 4,5 um ont été codés en sept types différents, qui se différencient par la concentration de deux colorants fluorescents physiquement piégés à l&#39;intérieur des microsphères. Les microsphères codées contenant des groupes carboxyle de surface ont été modifiées avec des anticorps monoclonaux de capture à travers EDC / NHS couplage de la chimie. Pour assembler la puce à protéines, les différents types de microsphères codées et fonctionnalisées ont été mélangés et déposés de manière aléatoire dans les micropuits 4,5 um, qui ont été gravées chimiquement à l&#39;extrémité proximale d&#39;un faisceau de fibres optiques. Le faisceau de fibres optiques a été utilisé à la fois comme support et pour l&#39;imagerie de la microspheres. Une fois assemblée, la puce à ADN a été utilisée pour capturer des protéines dans le surnageant de la salive recueillie à partir de la clinique. La détection a été basé sur un dosage immunologique de type sandwich utilisant un mélange d&#39;anticorps de détection biotinylés pour différentes substances à analyser avec une sonde fluorescente conjuguée à la streptavidine, R-phycoérythrine. La puce a été imagée par microscopie de fluorescence en trois canaux différents, deux pour l&#39;enregistrement de la microsphère et une pour le signal de test. Les micrographies de fluorescence ont été ensuite décodées et analysées à l&#39;aide d&#39;un algorithme maison dans MATLAB.

Des images de fluorescence provenant de trois canaux qui montrent une petite section du faisceau à fibre optique sont représentées sur les figures 2A-C. Ces images ont été analysées en utilisant un algorithme écrit en MATLAB (comme décrit plus en détail dans la section Discussion). L&#39;analyse utilise à la fois des informations d&#39;image de codage Eu-TTA (Figure 2A) et l&#39;image de codage de C30 (figure 2B) pour décoder les microsphères, et les intensi...

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Multiplexed Fluorescent Microarray for Human Salivary Protein Analysis Using Polymer Microspheres and Fiber-optic Bundles

Nous décrivons une procédure pour le profilage de protéines salivaires utilisant multiplexés puces à anticorps à base de microsphères. Les anticorps monoclonaux ont été liés par covalence à 4,5 um microsphères de polymère de colorants fluorescents codé en utilisant la chimie du carbodiimide. Les microsphères modifiées ont été déposés dans des micropuits à fibres optiques pour mesurer les niveaux de protéine dans la salive en utilisant des dosages immunologiques par fluorescence en sandwich.

Multiplexé fluorescent puce à ADN pour salivaire humaine analyse des protéines en utilisant un polymère microsphères et faisceaux de fibres optiques

Herein, we describe a protocol for simultaneously measuring six proteins in saliva using a fiber-optic microsphere-based antibody array. The immuno-array ...

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Research

JoVE Journal

Chemistry

11.6K vues.  Tufts University.  Nous décrivons une procédure pour le profilage de protéines salivaires utilisant multiplexés puces à anticorps à base de microsphères. Les anticorps monoclonaux ont été liés par covalence à 4,5 um microsphères de polymère de colorants fluorescents codé en utilisant la chimie du carbodiimide. Les microsphères modifiées ont été déposés dans des micropuits à fibres optiques pour mesurer les niveaux de protéine dans la salive en utilisant des dosages im...

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Gyroid Nickel Nanostructures from Diblock Copolymer Supramolecules

Nanoporous metal foams possess a unique combination of properties - they are catalytically active, thermally and electrically conductive, and furthermore, have high porosity, high surface-to-volume and strength-to-weight ratio. Unfortunately, common approaches for preparation of metallic nanostructures render materials with highly disordered architecture, which might have an adverse effect on their mechanical properties. Block copolymers have the ability to self-assemble into ordered nanostructures and can be applied as templates for the preparation of well-ordered metal nanofoams. Here we describe the application of a block copolymer-based supramolecular complex - polystyrene-block-poly(4-vinylpyridine)(pentadecylphenol) PS-b-P4VP(PDP) - as a precursor for well-ordered nickel nanofoam. The supramolecular complexes exhibit a phase behavior similar to conventional block copolymers and can self-assemble into the bicontinuous gyroid morphology with two PS networks placed in a P4VP(PDP) matrix. PDP can be dissolved in ethanol leading to the formation of a porous structure that can be backfilled with metal. Using electroless plating technique, nickel can be inserted into the template&#39;s channels. Finally, the remaining polymer can be removed via pyrolysis from the polymer/inorganic nanohybrid resulting in nanoporous nickel foam with inverse gyroid morphology.

This article describes the preparation of well-ordered nickel nanofoams via electroless metal deposition onto nanoporous templates obtained from self-assembled diblock copolymer based supramolecules.

Gyroid Nickel Nanostructures de copolymère dibloc supramolécules

Nanoporous metal foams possess a unique combination of properties - they are catalytically active, thermally and electrically conductive, and furthermore, ...

Recherche

Chimie

Preparation of Highly Porous Coordination Polymer Coatings on Macroporous Polymer Monoliths for Enhanced Enrichment of Phosphopeptides

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous polymer monoliths. The developed approach is based on the preparation of a macroporous polymer containing carboxylic acid functional groups and the subsequent step-by-step solution-based controlled growth of a layer of a porous coordination polymer on the surface of the pores of the polymer monolith. The prepared metal-organic polymer hybrid has a high specific micropore surface area. The amount of iron(III) sites is enhanced through metal-organic coordination on the surface of the pores of the functional polymer support. The increase of metal sites is related to the number of iterations of the coating process.
The developed preparation scheme is easily adapted to a capillary column format. The functional porous polymer is prepared as a self-contained single-block porous monolith within the capillary, yielding a flow-through separation device with excellent flow permeability and modest back-pressure. The metal-organic polymer hybrid column showed excellent performance for the enrichment of phosphopeptides from digested proteins and their subsequent detection using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. The presented experimental protocol is highly versatile, and can be easily implemented to different organic polymer supports and coatings with a plethora of porous coordination polymers and metal-organic frameworks for multiple purification and/or separation applications.

A procedure for the preparation of porous hybrid separation media composed of a macroporous polymer monolith internally coated by a high surface area microporous coordination polymer is presented.

Préparation de la grande porosité de coordination Polymer Coatings sur macroporeuses Polymer monolithes pour enrichissement accrue des Phosphopeptides

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous ...

Functionalization of Single-walled Carbon Nanotubes with Thermo-reversible Block Copolymers and Characterization by Small-angle Neutron Scattering

We demonstrate a protocol for single-walled carbon nanotube functionalization using thermo-sensitive PEO-PPO-PEO triblock copolymers in an aqueous solution. In a carbon nanotube/PEO105-PPO70-PEO105 (poloxamer 407) aqueous solution, the amphiphilic poloxamer 407 adsorbs onto the carbon nanotube surfaces and self-assembles into continuous layers, driven by intermolecular interactions between constituent molecules. The addition of 5-methylsalicylic acid changes the self-assembled structure from spherical-micellar to a cylindrical morphology. The fabricated poloxamer 407/carbon nanotube hybrid particles exhibit thermo-responsive structural features so that the density and thickness of poloxamer 407 layers are also reversibly controllable by varying temperature. The detailed structural properties of the poloxamer 407/carbon nanotube particles in suspension can be characterized by small-angle neutron scattering experiments and model fit analyses. The distinct curve shapes of the scattering intensities depending on temperature control or addition of aromatic additives are well described by a modified core-shell cylinder model consisting of a carbon nanotube core cylinder, a hydrophobic shell, and a hydrated polymer layer. This method can provide a simple but efficient way for the fabrication and in-situ characterization of carbon nanotube-based nano particles with a structure-tunable encapsulation.

A method for the functionalization of carbon nanotubes with structure-tunable polymeric encapsulation layers and structural characterization using small-angle neutron scattering is presented.

Fonctionnalisation de Simple paroi Carbon Nanotubes avec Thermo-réversibles Copolymères blocs et Caractérisation par petits angles de diffusion neutronique

We demonstrate a protocol for single-walled carbon nanotube functionalization using thermo-sensitive PEO-PPO-PEO triblock copolymers in an aqueous ...

The Preparation and Properties of Thermo-reversibly Cross-linked Rubber Via Diels-Alder Chemistry

A method for using Diels Alder thermo-reversible chemistry as cross-linking tool for rubber products is demonstrated. In this work, a commercial ethylene-propylene rubber, grafted with maleic anhydride, is thermo-reversibly cross-linked in two steps. The pending anhydride moieties are first modified with furfurylamine to graft furan groups to the rubber backbone. These pendant furan groups are then cross-linked with a bis-maleimide via a Diels-Alder coupling reaction. Both reactions can be performed under a broad range of experimental conditions and can easily be applied on a large scale. The material properties of the resulting Diels-Alder cross-linked rubbers are similar to a peroxide-cured ethylene/propylene/diene rubber (EPDM) reference. The cross-links break at elevated temperatures (&#62; 150 &#176;C) via the retro-Diels-Alder reaction and can be reformed by thermal annealing at lower temperatures (50-70 &#176;C). Reversibility of the system was proven with infrared spectroscopy, solubility tests and mechanical properties. Recyclability of the material was also shown in a practical way, i.e., by cutting a cross-linked sample into small parts and compression molding them into new samples displaying comparable mechanical properties, which is not possible for conventionally cross-linked rubbers.

A simple two-step approach involving rubber modification and cross-linking yields fully reworkable, elastic rubber products.

La préparation et les propriétés des Thermo-réversiblement réticulé Rubber Chemistry Via Diels-Alder

A method for using Diels Alder thermo-reversible chemistry as cross-linking tool for rubber products is demonstrated. In this work, a commercial ...

Using Capillary Electrophoresis to Quantify Organic Acids from Plant Tissue: A Test Case Examining Coffea arabica Seeds

Carboxylic acids are organic acids containing one or more terminal carboxyl (COOH) functional groups. Short chain carboxylic acids (SCCAs; carboxylic acids containing three to six carbons), such as malate and citrate, are critical to the proper functioning of many biological systems, where they function in cellular respiration and can serve as indicators of cell health. In foods, organic acid content can have significant impact on taste, with increased SCCA levels resulting in a sour or &#34;acid&#34; taste. Because of this, methods for the rapid analysis of organic acid levels are of particular interest to the food and beverage industries. Unfortunately, however, most methods used for SCCA quantification are dependent on time-consuming protocols requiring the derivatization of samples with hazardous reagents, followed by costly chromatographic and/or mass spectrometric analyses. This method details an alternate method for the detection and quantification of organic acids from plant material and food samples using free zonal capillary electrophoresis (CZE), sometimes simply referred to as capillary electrophoresis (CE). CZE provides a cost-effective method for measuring SCCAs with a low limit of detection (0.005 mg/ml). This article details the extraction and quantification of SCCAs from plant samples. While the method provided focuses on measurement of SCCAs from coffee beans, the method provided can be applied to multiple plant-based food materials.

Using Capillary Electrophoresis to Quantify Organic Acids from Plant Tissue: A Test Case Examining Coffea arabica Seeds

This article presents a method for the detection and quantification of organic acids from plant material using free zonal capillary electrophoresis. An example of the potential application of this method, determining the effects of a secondary fermentation on organic acid levels in coffee seeds, is provided.

Utilisation de l&#39;électrophorèse capillaire à Quantifier acides organiques à partir de tissus végétaux: Un cas de test d&#39;examen<em&gt; Coffea Arabica</em&gt; Graines

Carboxylic acids are organic acids containing one or more terminal carboxyl (COOH) functional groups. Short chain carboxylic acids (SCCAs; carboxylic ...

Microfluidic Dry-spinning and Characterization of Regenerated Silk Fibroin Fibers

The protocol demonstrates a method for mimicking the spinning process of silkworm. In the native spinning process, the contracting spinning duct enables the silk proteins to be compact and ordered by shearing and elongation forces. Here, a biomimetic microfluidic channel was designed to mimic the specific geometry of the spinning duct of the silkworm. Regenerated silk fibroin (RSF) spinning doped with high concentration, was extruded through the microchannel to dry-spin fibers at ambient temperature and pressure. In the post-treated process, the as-spun fibers were drawn and stored in ethanol aqueous solution. Synchrotron radiation wide-angle X-ray diffraction (SR-WAXD) technology was used to investigate the microstructure of single RSF fibers, which were fixed to a sample holder with the RSF fiber axis normal to the microbeam of the X-ray. The crystallinity, crystallite size, and crystalline orientation of the fiber were calculated from the WAXD data. The diffraction arcs near the equator of the two-dimensional WAXD pattern indicate that the post-treated RSF fiber has a high orientation degree.

A protocol for the microfluidic spinning and microstructure characterization of regenerated silk fibroin monofilament is presented.

Microfluidique sec-spinning et caractérisation des fibres régénérées fibroïne de soie

The protocol demonstrates a method for mimicking the spinning process of silkworm. In the native spinning process, the contracting spinning duct enables ...

Electrochemical Impedance Spectroscopy as a Tool for Electrochemical Rate Constant Estimation

Electrochemical impedance spectroscopy (EIS) was used for advanced characterization of organic electroactive compounds along with cyclic voltammetry (CV). In the case of fast reversible electrochemical processes, current is predominantly affected by the rate of diffusion, which is the slowest and limiting stage. EIS is a powerful technique that allows separate analysis of stages of charge transfer that have different AC frequency response. The capability of the method was used to extract the value of charge transfer resistance, which characterizes the rate of charge exchange on the electrode-solution interface. The application of this technique is broad, from biochemistry up to organic electronics. In this work, we are presenting the method of analysis of organic compounds for optoelectronic applications.

Electrochemical impedance spectroscopy (EIS) of species that undergo reversible oxidation or reduction in solution was used for determination of rate constants of oxidation or reduction.

Spectroscopie d’impédance électrochimique comme outil d’Estimation constante taux électrochimique

Electrochemical impedance spectroscopy (EIS) was used for advanced characterization of organic electroactive compounds along with cyclic voltammetry (CV). ...

Time-resolved Photophysical Characterization of Triplet-harvesting Organic Compounds at an Oxygen-free Environment Using an iCCD Camera

Here, we present a sensible method of the acquisition and analysis of time-resolved photoluminescence using an ultrafast iCCD camera. This system enables the acquisition of photoluminescence spectra covering the time regime from nanoseconds up to 0.1 s. This enables us to follow the changes in the intensity (decay) and emission of the spectra over time. Using this method, it is possible to study diverse photophysical phenomena, such as the emission of phosphorescence, and the contributions of prompt and delayed fluorescence in molecules showing thermally activated delayed fluorescence (TADF). Remarkably, all spectra and decays are obtained in a single experiment. This can be done for solids (thin film, powder, crystal) and liquid samples, where the only limitations are the spectral sensitivity of the camera and the excitation wavelength (532 nm, 355 nm, 337 nm, and 266 nm). This technique is, thus, very important when investigating the excited state dynamics in organic emitters for their application in organic light-emitting diodes and other areas where triplet harvesting is of paramount importance. Since triplet states are strongly quenched by oxygen, emitters with efficient TADF luminescence, or those showing room temperature phosphorescence (RTP), must be correctly prepared in order to remove any dissolved oxygen from solutions and films. Otherwise, no long-lived emission will be observed. The method of degassing solid samples as presented in this work is basic and simple, but the degassing of liquid samples creates additional difficulties and is particularly interesting. A method of minimizing solvent loss and changing the sample concentration, while still enabling to remove oxygen in a very efficient and a repeatable manner, is presented in this work.

Here, we present a method of the spectroscopic characterization of organic molecules by means of time-resolved photoluminescence spectroscopy on the nanosecond-to-millisecond timescale in oxygen-free conditions. Methods to efficiently remove oxygen from the samples and, thus, limit luminescence quenching are also described.

Résolution temporelle des composés organiques Photophysiques caractérisation du Triplet-récolte à un sans oxygène environnement utilisant un iCCD caméra

Here, we present a sensible method of the acquisition and analysis of time-resolved photoluminescence using an ultrafast iCCD camera. This system enables ...

Using Cyclic Voltammetry, UV-Vis-NIR, and EPR Spectroelectrochemistry to Analyze Organic Compounds

Cyclic voltammetry (CV) is a technique used in the analysis of organic compounds. When this technique is combined with electron paramagnetic resonance (EPR) or ultraviolet-visible and near-infrared (UV-Vis-NIR) spectroscopies, we obtain useful information such as electron affinity, ionization potential, band-gap energies, the type of charge carriers, and degradation information that can be used to synthesize stable organic electronic devices. In this study, we present electrochemical and spectroelectrochemical methods to analyze the processes occurring in active layers of an organic device as well as the generated charge carriers.

In this article, we describe electrochemical, electron paramagnetic resonance, and ultraviolet-visible and near-infrared spectroelectrochemical methods to analyze organic compounds for application in organic electronics.

À l’aide de voltampérométrie cyclique, UV-Vis-NIR et EPR spectroélectrochimie pour analyser les composés organiques

Cyclic voltammetry (CV) is a technique used in the analysis of organic compounds. When this technique is combined with electron paramagnetic resonance ...

Sample Preparation in Quartz Crystal Microbalance Measurements of Protein Adsorption and Polymer Mechanics

In this study, we present various examples of how thin film preparation for quartz crystal microbalance experiments informs the appropriate modeling of the data and determines which properties of the film can be quantified. The quartz crystal microbalance offers a uniquely sensitive platform for measuring fine changes in mass and/or mechanical properties of an applied film by observing the changes in mechanical resonance of a quartz crystal oscillating at high frequency. The advantages of this approach include its experimental versatility, ability to study changes in properties over a wide range of experimental time lengths, and the use of small sample sizes. We demonstrate that, based on the thickness and shear modulus of the layer deposited on the sensor, we can acquire different information from the material. Here, this concept is specifically exploited to display experimental parameters resulting in mass and viscoelastic calculations of adsorbed collagen on gold and polyelectrolyte complexes during swelling as a function of salt concentration.

The quartz crystal microbalance can provide accurate mass and viscoelastic properties for films in the micron or submicron range, which is relevant for investigations in biomedical and environmental sensing, coatings, and polymer science. The sample thickness influences which information can be obtained from the material in contact with the sensor.

Préparation d'échantillons dans Quartz Crystal Microbalance Measurements of Protein Adsorption and Polymer Mechanics

In this study, we present various examples of how thin film preparation for quartz crystal microbalance experiments informs the appropriate modeling of ...