Une. Préparation de l&#39;équipement <ol><li> Examiner le transducteur ultrasonore de défauts. En fonction de l&#39;équipement utilisé, cette étape peut ne pas être nécessaire. <ol><li> Si une bulle d&#39;air est observée, enlever la vis située sur le côté droit de la tête de capteur, et ajouter de l&#39;eau stérile à travers le trou d&#39;une aiguille 26 G. Les bulles d&#39;air à l&#39;intérieur de la tête de transducteur sont communs. Ils empêcher l&#39;acquisition d&#39;images de qualité. </li><li> Vérifiez la membrane qui recouvre la sonde de fuites ou de trous. Remplacer si nécessaire. </li></ol></li><li> Ouvrez le logiciel et initialiser la sonde. <ol><li> Choisissez le forfait cardiaque à partir du menu déroulant, avec le capteur approprié. Cliquez sur &quot;initialiser&quot;. Utilisez une sonde 20-60 MHz pour les souris de moins de 35 g et une sonde 15-45 MHz pour les souris de plus de 35 g. </li><li> Sélectionnez l&#39;opérateur, l&#39;animal et la date sur l&#39;écran de la démographie, et sélectionnez &quot;Démarrer&quot;. </li></ol></li></ol> 2. Souris Preparation Y compris l&#39;anesthésie, Épilation, et positionnement <ol><li> Anesthésie: Placez la souris dans une chambre d&#39;induction et anesthésier avec, dessus de table machine d&#39;anesthésie portable contenant un vaporisateur isoflurane et un récipient de gaz d&#39;échappement. <ol><li> Régler le vaporisateur à 3% avec un débit de 3 l / min de débit d&#39;oxygène. Ce taux d&#39;anesthésie relativement élevée est utilisé pour obtenir un effet anesthésique rapide et donc de minimiser la réponse au stress qui peuvent influer sur la fonction cardiaque. La courte durée du protocole minimise tout risque potentiel pour l&#39;animal. Il est très important de toujours garder le taux d&#39;anesthésie même. Ce protocole a été optimisé pour une utilisation exclusive de l&#39;isoflurane comme l&#39;anesthésie, donc des conditions optimales pour les autres agents peuvent varier de ce protocole. Une faible profondeur de l&#39;anesthésie peut être choisi en fonction des besoins expérimentaux, mais une fois un protocole d&#39;anesthésie est établi, il ne doit pas être modifié. Anesthésie affecte le rythme cardiaque et Other des mesures hémodynamiques. Par conséquent, si la profondeur de l&#39;anesthésie est changé au cours d&#39;une expérience, les données peuvent ne pas être utiles pour les analyses. Si plusieurs souris sont à imager en un jour, anesthésier séparément. </li><li> Surveillance de la température ambiante afin de s&#39;assurer qu&#39;elle est identique entre les groupes expérimentaux. La température ambiante peut affecter vasoréactivité, même lorsque la souris est sur une table chauffée, donc il doit être surveillé et gardé la même entre les groupes expérimentaux qui seront comparés. Bien que ce protocole ne permet pas de mesurer la température de l&#39;animal directement ambiante et la table température constante assure qu&#39;il ya peu de variation de température entre les groupes expérimentaux. </li></ol></li><li> Epilation: Enlever les poils de la poitrine avec une crème dépilatoire après que la souris est anesthésiée. Commencer l&#39;application avec un coton-tige, les clavicules, et continuera à juste au-dessous du diaphragme. <ol><li> Placer la souris en arrière dans la chambre de l&#39;anesthésie pendant 1 minpour permettre à l&#39;épilation au travail. Pour déterminer si l&#39;anesthésie est efficace, appuyez fermement sur l&#39;ongle du pouce contre l&#39;une des pattes de la souris. S&#39;il n&#39;y a pas de retrait, l&#39;anesthésie est suffisante. Si le membre se retire, placer la souris dans le dos de la chambre de l&#39;anesthésie pendant une minute. </li><li> Appliquez une petite quantité de lubrifiant pommade pour les yeux de la souris pour éviter d&#39;endommager la cornée. </li><li> Enlever les poils de la poitrine avec un 2 x 2 dans un tampon de gaze. Le produit chimique utilisé dans la crème dépilatoire est caustique, et nuira à la peau si elle est laissée trop longtemps, donc il faut prendre soin de retirer tous les produits de la peau. </li><li> Appliquez une crème hydratante de la peau après le retrait de cheveux. </li></ol></li><li> Positionnement: Placez la souris dans une position ventro-dorsale sur une table chauffée, installée à 37 ° C. Le positionnement correct est impératif de l&#39;acquisition d&#39;images de qualité. Utilisez une table qui peut capturer la température du corps, la respiration et le rythme cardiaque. Utilisation d&#39;un système de rail intégré toutux pour un positionnement précis et par la suite, optimisation de l&#39;image. <ol><li> Ruban adhésif doucement les quatre pattes et appliquer une quantité de taille dime de gel de transduction de la poitrine. </li></ol></li></ol> 3. Acquisition des images: Imagerie en parasternale long axe Voir <ol><li> Verrouiller le transducteur à ultrasons en place à l&#39;intérieur du montage sur le système ferroviaire, et le faire tourner de 10 ° vers la gauche, de sorte que la sonde métallique du transducteur est positionné directement au-dessus du cœur. Plus précisément, la sonde doit être sur le côté gauche de la poitrine, dans le 2ème ou 3ème espace intercostal, et latérale au sternum. <ol><li> Manipuler les x et y des axes situés sur le système ferroviaire, jusqu&#39;à ce que le point de vue correct est obtenu. </li><li> Sélectionnez &quot;Mode B&quot;. Il se trouve dans la partie supérieure droite de la console système, afin de projeter une image 2D en direct. </li><li> Voir les structures anatomiques suivantes sur l&#39;écran: <ol><li> L&#39;ensemble du coeur de sommet à Aorta - Le sommet sera visualisé à l&#39;extrême gauche de l&#39;écran, et l&#39;aorte à l&#39;extrême droite. </li><li> La lumière du ventricule gauche (LV) </li><li> paroi postérieure du ventricule gauche (LPW) </li><li> Septum interventriculaire (IVS) </li><li> La lumière du ventricule droit (VD) </li><li> Antérieures et postérieures feuillets de la valve mitrale (AML et PML) </li><li> Aorte ascendante (AO) </li><li> Oreillette gauche (LA) </li></ol></li></ol></li><li> Obtenir une mesure diamétrale de l&#39;aorte dans cette vue en appuyant sur le bouton de numérisation / de gel de &quot;geler&quot; l&#39;image. Ensuite, utilisez la souris pour tirer en arrière à travers la boucle vidéo au bas de l&#39;image jusqu&#39;à ce que le ventricule gauche est en systole et l&#39;aorte est à son plus grand diamètre. <ol><li> Cliquez sur l&#39;outil de mesure dans le coin supérieur gauche de l&#39;écran et sélectionnez l&#39;icône qui ressemble à une ligne diagonale. Cliquez à gauche sur votre souris et tracer une ligne droite à partir de la partie antérieure de la paroi postérieure de l&#39;aorte, perpendicular à son axe long. Enregistrer en appuyant sur le bouton &quot;Cadre de magasin&quot;. </li><li> Créer une vidéo en boucle en appuyant sur &quot;Cine Store&quot; </li></ol></li></ol> . 4 Acquisition d&#39;Images: Imagerie en parasternale petit axe Voir <ol><li> Repositionner le capteur aux positions 3 et 9 heures (transversales). Angle légèrement caudale en manipulant le transducteur de montage pour obtenir la meilleure vue de l&#39;aorte et lumière BT. La sonde métallique sera positionné horizontalement et directement sur le sternum. <ol><li> Manipuler les x et y des axes sur le système de rail jusqu&#39;à ce que le point de vue correct est obtenu. La lumière BT seront considérés, avec les muscles papillaires antérolatérale et postéro, qui sont visibles sur la droite de l&#39;écran. C&#39;est le point de référence pour l&#39;axe court, indiquant la partie médiane du ventricule gauche, Où les mesures de dimension sont faites. S&#39;écartant légèrement du point de référence avec les x et y axes d&#39;apporter différentes structures anatomiques en vue sera nécessaire, mais le positionnement est expliqué par référence à la vue ci-dessus. </li></ol></li><li> Obtenir les mesures suivantes dans la vue petit axe: <ol><li> mode B <ol><li> Deux mesures diamétrales plus de l&#39;aorte. </li><li> Trois mesures de la voie d&#39;éjection pulmonaire. </li></ol></li><li> Pulsé mode Doppler (PW) <ol><li> Trois mesures intégrales de temps de vitesse (VTI) de l&#39;aorte </li><li> Trois mesures VTI de l&#39;artère pulmonaire mesurée juste en amont de la valve pulmonaire. </li><li> Mesurer l&#39;artère pulmonaire temps d&#39;accélération en traçant la courbe VTI depuis le début de la circulation sanguine à vitesse maximale. </li></ol></li><li> mode M <ol><li> Trois mesures du diamètre interne du ventricule gauche en diastole (LVIDd) </li><li> Trois mesures du diamètre interne du ventricule gauche en systole (LVIDs) </li><li> Trois mesures du diamètre interne du ventricule droit (RVID). La lumière de RV ne seront visibles que dans cette vue si elle est dilatée. </li><li> Mesurer la fréquence cardiaque à l&#39;aide de trois fois en mode M en traçant la distance entre deux pics diastolique de la paroi antérieure de la LV pendant trois cycles cardiaques différents. </li></ol></li></ol></li><li> Mode B mesures: <ol><li> Manipuler l&#39;axe Y céphalique du point de vue de muscle papillaire, jusqu&#39;à ce que la valve semi-lunaire de l&#39;aorte est au point. </li><li> Obtenir des mesures de l&#39;aorte juste au-dessus de la vanne au plus grand diamètre. </li><li> Cliquez sur l&#39;outil de mesure dans le coin supérieur gauche de l&#39;écran, puis sélectionnez l&#39;icône qui ressemble à une ligne diagonale. </li><li> Clic gauche de votre souris et tracer une ligne droite à partir de la partie antérieure de la paroi postérieure de l&#39;aorte. </li><li> Manipuler til X et Y axes jusqu&#39;à l&#39;artère pulmonaire principale bifurque. Cette structure sera vu en avant, et vers la droite de l&#39;aorte sur le moniteur. </li><li> Manipuler le crânienne axe y jusqu&#39;à ce que l&#39;anneau de l&#39;artère pulmonaire principale est en vue. Il ne sera pas aussi clairement défini que l&#39;aorte. </li><li> &quot;Freeze&quot; l&#39;image et obtenir la mesure en systole. </li><li> Recueillir trois mesures au total. </li></ol></li><li> Doppler pulsé (DP) des mesures Doppler: Mode PW est principalement utilisé pour l&#39;évaluation hémodynamique de la circulation sanguine dans les artères et les veines. Dans ce protocole, il sera utilisé pour récupérer des trois mesures de temps de la vitesse intégrante de l&#39;aorte et l&#39;artère pulmonaire. <ol><li> Apportez l&#39;aorte retour en vue de la manière décrite à l&#39;étape 4.3.1, et 1 point de balle. <ol><li> Sélectionnez &quot;Mode PW&quot;. Il est situé sur le coin supérieur droit de la console du système et produire une lecture de Doppler du flux sanguin à travers l&#39;aorte. </li><li> Placez la SAvolume de mple juste au-dessus du niveau de la valve aortique. Peuvent avoir besoin d&#39;être ajustée légèrement pour obtenir des enveloppes Doppler suffisamment les x et y axes. Les enveloppes doivent avoir des bordures blanches, et un intérieur creux indiquant flux sanguin laminaire. </li><li> Une fois une vue suffisante est obtenue, &quot;geler&quot; l&#39;image et de tracer la frontière de l&#39;enveloppe de Doppler. Cet exemple va calculer le VTI. </li><li> Tourner le bouton &quot;Angle&quot; situé sur la console du système dans le sens horaire jusqu&#39;à ce que la ligne jaune segmenté vu dans l&#39;image sur le côté supérieur droit de l&#39;écran est à 0 °. Cette ligne jaune représente la direction de l&#39;écoulement sanguin à travers le vaisseau. Etant donné que le transducteur lui-même est inclinée de telle manière à produire une vue en coupe transversale ou transversale du coeur, la ligne doit être ajustée à 0 °, pour s&#39;aligner avec l&#39;écoulement vertical de sang à travers l&#39;aorte ascendante. </li></ol></li><li> Placer l&#39;proximale de volume de l&#39;échantillon au niveau de la valve pulmonaire dans le centre de l&#39;droit d&#39;éjection du ventricule et répéter les mesures VTI comme ci-dessus. L&#39;écoulement de sang doit apparaître inversé, ou en face de l&#39;écoulement du sang par rapport à l&#39;aorte sur le moniteur. </li></ol></li><li> Mesures en mode M: l&#39;imagerie en mode M fournit une haute résolution temporelle du mouvement du tissu le long d&#39;un faisceau ultrasonore unique, et est utilisé pour quantifier les dimensions de la cavité, et pour étudier valvulaire, infarctus, et le récipient un mouvement de paroi. <ol><li> Reprendre &quot;Mode B&quot; et repositionner la sonde pour obtenir la &quot;vue de référence» (la vue en coupe transversale du ventricule gauche au niveau des muscles papillaires). </li><li> Appuyez sur &quot;M-mode&quot;. Ceci va produire un flux vidéo continu dans lequel le mouvement des structures anatomiques suivantes sera visible comme un &quot;ruban&quot;. Si dilatée, la lumière de VR apparaîtront en haut de l&#39;alimentation comme un très mince ruban noir. Le septum interventriculaire (IVS) sera visible comme un ruban opaque directement en dessous de la RVlumen. La lumière BT seront visibles directement en dessous de l&#39;IVS. C&#39;est le grand espace noir qui occupe la majorité de la charge d&#39;alimentation. Ci-dessous, la lumière BT est la paroi postérieure LV (LVPW) qui sera considéré comme un ruban opaque. </li><li> Figer l&#39;image et tirez à travers la boucle de la vidéo si nécessaire à un point où la respiration ne se produit pas. Lorsque les souris respire, l&#39;acquisition de l&#39;image est perturbée par un mouvement de la paroi de la membrane et de la poitrine, en produisant ainsi un artefact déformée &quot;enduit&quot; dans la charge qui se produit avec une fréquence régulière. </li><li> Obtenir les mesures suivantes en utilisant l&#39;icône de la ligne diagonale: <ol><li> Trois mesures de LV finissent dimension diastolique, qui apparaît comme la plus grande distance entre le SVI et LVPW. </li><li> Trois mesures de LV fin systolique dimension, qui apparaît comme la plus courte distance entre l&#39;IVS et LVPW. </li><li> Trois mesures de la fréquence cardiaque, qui se fait en cliquant sur l&#39;icône de coeur et la mesure de pic systoliquepic systolique de la LVPW. </li><li> Si la lumière de RV est dilaté, obtenir trois mesures en utilisant l&#39;icône de la ligne diagonale. </li></ol></li><li> Enregistrer une vidéo en boucle de la vue parasternale axe court en mode &quot;B&quot; en appuyant sur le bouton &quot;Cine Store&quot;. </li><li> Allez dans &quot;Fichier&quot;, sélectionnez &quot;Parcourir étude&quot; pour récapituler vos mesures, cliquez sur &quot;Fin de session&quot;, puis &quot;Commit données de session.&quot; </li><li> Récupérer la souris comme indiqué par le protocole IACUC, et nettoyer. </li><li> Exporter des données dans un fichier CSV vers un lecteur de pouce pour une analyse ultérieure. </li></ol></li><li> Calculer les paramètres suivants de la fonction cardiaque (Tableau 1): <ol><li> Ventriculaire gauche zone des sorties de voies </li><li> Volume d&#39;éjection systolique du ventricule gauche </li><li> Le débit cardiaque du ventricule gauche </li><li> La fraction de raccourcissement </li><li> Niveau de l&#39;artère pulmonaire </li><li> Artère pulmonaire temps d&#39;accélération </li><li> Droit volume d&#39;éjection systolique du ventricule </li><li> L&#39;index cardiaque</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
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Les auteurs n&#39;ont rien à révéler.

Des modèles murins de la maladie, soit transgénique ou liés toxine, nécessitent validation phénotypique que le modèle reprend en fait la maladie chez l&#39;homme, il est destiné à émuler. Cette validation peut souvent être réalisée en présence ou en l&#39;absence d&#39;une caractéristique particulière, par exemple le développement d&#39;une tumeur. Toutefois, les modèles qui se traduisent par des anomalies hémodynamiques tels que les modèles de constriction de l&#39;aorte de l&#39;hypertrophie ventric...

Pression pulmonaire élevée et du ventricule droit (RV) de dysfonctionnement sont les maîtres mots de la maladie vasculaire pulmonaire dans des modèles animaux et des patients humains atteints d&#39;hypertension artérielle pulmonaire (HTAP). Transgénique et toxiques modèles (par exemple monocrotaline ou hypoxie) de HAP sont largement utilisés pour étudier la physiopathologie de l&#39;HTAP et d&#39;enquêter sur des traitements potentiels. Étant donné le coût et le temps nécessaires à la création de modèles animaux de la maladie, il est essentiel que les chercheurs disposent d&#39;outils pour évaluer avec précision l&#39;expression phénotypique de la maladie. L&#39;échocardiographie est le pilier de l&#39;évaluation non invasive de la fonction ventriculaire chez les rongeurs 1,2. L&#39;échocardiographie a l&#39;avantage de traduction claire à l&#39;homme en qui le même outil est utilisé. En outre, certains modèles génétiques présentent une pénétrance incomplète 3; la capacité d&#39;identifier de façon non invasive les animaux atteints de gagner du temps et des ressources précieuses. Évaluation non invasive de diseasoi gravité sans sacrifier un animal permet également aux chercheurs d&#39;étudier en série les effets des thérapies enquête. Ceci est particulièrement important compte tenu de la rapidité avec laquelle les thérapies traductionnelles peuvent progresser à des essais humains 4,5. Chez les humains, l&#39;évaluation échocardiographique de la taille de RV et l&#39;hypertension artérielle pulmonaire est particulièrement difficile en raison de la position rétrosternale et la forme irrégulière de la RV 6. modèles de rongeurs ont des défis supplémentaires de petite taille et le rythme cardiaque extrêmement rapide (300-700 battements / min). Les progrès récents, y compris des taux de trame plus élevés et les plus petits capteurs ont une meilleure qualité d&#39;image et l&#39;imagerie conscient même permis dans certains protocoles expérimentaux, mais la plupart d&#39;imagerie de rongeur se fait sous anesthésie 7,8. Excellents protocoles expérimentaux de l&#39;échocardiographie dans les modèles de rats de HAP ont été décrites et validées à l&#39;IRM et l&#39;hémodynamique invasives 1,9. Cependant, l&#39;échocardiographie publiéprotocoles dans des modèles murins de HAP font défaut. Dans cet article, nous décrivons un protocole d&#39;évaluation RV et la fonction vasculaire pulmonaire dans un modèle de souris de l&#39;HTAP avec une mutation BMPRII dominant négatif et un modèle de isolé RV post-charge après cerclage de l&#39;artère pulmonaire, mais ce protocole est applicable à toutes les maladies affectant la vasculaire pulmonaire ou cardiaque droite. Nous allons décrire la préparation de l&#39;animal et de l&#39;évaluation détaillée de la taille de RV et de la fonction ainsi que artère pulmonaire principale (PA) de taille. Nous démontrons également les techniques et les calculs nécessaires pour estimer le volume systolique et le débit cardiaque. Limitations techniques empêchent estimations Doppler précis de la pression pulmonaire, mais nous avons appliqué un substitut bien-validé, l&#39;artère pulmonaire temps d&#39;accélération, pour estimer la pression PA.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="55">
			<td height="55" style="height:55px;width:251px;">Vevo 770 High Resolution Micro-Ultrasound System</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="66">
			<td height="66" style="height:66px;width:251px;">RMV (Real-Time MicroVisualization) 704B 40 mH Scanhead w/ Encapsulated Transducer</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:251px;">Vevo Integrated Rail System including the Physioogical Monitoring System</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Computer Monitor set up for use with the Vevo770</td>
			<td style="width:164px;">DELL or other General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:251px;">Computer Mouse set up for use with the Vevo770</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:251px;">Vevo770 Cardiac Package Software</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:86px;width:251px;">VetEquip Portable Tabletop Anesthesia Machine with an Isoflurane Vaporizer</td>
			<td style="width:164px;">VetEquip</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at vetequip.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Activated Charcoal Waste Gas Containers</td>
			<td style="width:164px;">VetEquip/Vaporguard</td>
			<td style="width:188px;">931401</td>
			<td>get more info at vetequip.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Puralube Eye Ointment</td>
			<td style="width:164px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at henryschein.com</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:251px;">Ecogel 100 Ultrasound Gel</td>
			<td style="width:164px;">EcoMed Pharmaceuticals</td>
			<td style="width:188px;">30GB</td>
			<td>get more info at ecomed.com</td>
		</tr>
		<tr height="59">
			<td height="59" style="height:59px;width:251px;">3M Transpore Tape</td>
			<td style="width:164px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:188px;">1527-0</td>
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		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Small Flathead Screwdriver</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:251px;">Sterile H2O</td>
			<td style="width:164px;">DDI H2O from faucet and then autoclave</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="59">
			<td height="59" style="height:59px;width:251px;">6 in Cotton Tipped Applicators</td>
			<td style="width:164px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at fishersci.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Nair (depilatory cream)</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:251px;">2 in x 2 in Gauze Sponges</td>
			<td style="width:164px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at fishersci.com</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

echocardiographic assessment of the right heart in mice

Modèles transgéniques et toxiques de l&#39;hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) sont largement utilisés pour étudier la physiopathologie de l&#39;HTAP et d&#39;enquêter sur des traitements potentiels. Étant donné le coût et le temps nécessaires à la création de modèles animaux de la maladie, il est essentiel que les chercheurs disposent d&#39;outils pour évaluer avec précision l&#39;expression phénotypique de la maladie. Dysfonction ventriculaire droite est la principale manifestation de l&#39;hypertension pulmonaire. L&#39;échocardiographie est le pilier de l&#39;évaluation non invasive de la fonction ventriculaire droite dans les modèles de rongeurs et a l&#39;avantage de la traduction claire à l&#39;homme en qui le même outil est utilisé. Protocoles d&#39;échocardiographie publiés dans des modèles murins de HAP font défaut. Dans cet article, nous décrivons un protocole d&#39;évaluation RV et la fonction vasculaire pulmonaire dans un modèle de souris de l&#39;HTAP avec une mutation dominante négative BMPRII, mais ce protocole est applicable à toutes les maladies affectant le système vasculaire pulmonaire ou cardiaque droite. Nousfournir une description détaillée de la préparation de l&#39;animal, l&#39;acquisition des images et le calcul hémodynamique du volume systolique, débit cardiaque et une estimation de la pression artérielle pulmonaire.

Les principaux objectifs de ce protocole sont de quantifier la taille et la fonction VR, et de comprendre la mesure dans laquelle le système vasculaire pulmonaire est malade. Préparation appropriée de l&#39;équipement à la fois la souris et l&#39;échocardiographie est essentielle pour obtenir des résultats précis et reproductibles. Souris auraient leur poitrine épilée et membres solidaire de la plate-forme d&#39;imagerie avec du ruban adhésif. Anesthésie, dans ce cas, l&#39;isoflurane, est administré par c?...

Watch this Scientific Journal Video about Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice at JoVE.com

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Cet article fournit un protocole pour l&#39;évaluation échocardiographique de la taille du ventricule droit et l&#39;hypertension pulmonaire chez la souris. Les applications comprennent la détermination du phénotype et évaluation de série en modèles transgéniques et de souris induite par la toxine de myocardiopathie et une maladie vasculaire pulmonaire.

Évaluation échocardiographique du cœur droit chez la souris

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

22.7K vues.  Vanderbilt University Medical Center.  Cet article fournit un protocole pour l'évaluation échocardiographique de la taille du ventricule droit et l'hypertension pulmonaire chez la souris. Les applications comprennent la détermination du phénotype et évaluation de série en modèles transgéniques et de souris induite par la toxine de myocardiopathie et une maladie vasculaire pulmonaire. 

Vidéo: Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Magnetic Resonance Derived Myocardial Strain Assessment Using Feature Tracking

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF. Current technologies for CMR are time consuming and difficult to implement in clinical practice. Feature tracking is a technology that can lead to more automization and robustness of quantitative analysis of medical images with less time consumption than comparable methods.
Methods: An automatic or manual input in a single phase serves as an initialization from which the system starts to track the displacement of individual patterns representing anatomical structures over time. The specialty of this method is that the images do not need to be manipulated in any way beforehand like e.g. tagging of CMR images.
Results: The method is very well suited for tracking muscular tissue and with this allowing quantitative elaboration of myocardium and also blood flow.
Conclusions: This new method offers a robust and time saving procedure to quantify myocardial tissue and blood with displacement, velocity and deformation parameters on regular sequences of CMR imaging. It therefore can be implemented in clinical practice.

An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF.

Résonance Magnétique Dérivé évaluation souche du myocarde par fonctionnalité de suivi

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that ...

Recherche

Médecine

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Infarctus du myocarde et d&#39;évaluation fonctionnelle de résultats chez le porc

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. Pulmonary Hypertension (PH) was induced in 3-week-old piglets by a progressive obstruction of the pulmonary vascular bed. A ligation of the left Pulmonary Artery (PA) was performed first through a mini-thoracotomy. Second, weekly embolizations of the right lower pulmonary lobe were done under fluoroscopic guidance with n-butyl-2-cyanoacrylate during 5 weeks. Mean Pulmonary Arterial Pressure (mPAP) measured by ritght heart catheterism, increased progressively, as well as Right Atrial pressure and Pulmonary Vascular Resistances (PVR) after 5 weeks compared to sham animals. Right Ventricular (RV) structural and functional remodeling were assessed by transthoracic echocardiography (RV diameters, RV wall thickness, RV systolic function). RV elastance and RV-pulmonary coupling were assessed by Pressure-Volume Loops (PVL) analysis with conductance method. Histologic study of the lung and the right ventricle were also performed. Molecular analyses on RV fresh tissues could be performed through repeated transcutaneous endomyocardial biopsies. Pulmonary microvascular disease in obstructed and unobstructed territories was studied from lung biopsies using molecular analyses and pathology. Furthermore, the reliability and the reproducibility was associated with a range of PH severity in animals. Most aspects of the human CTEPH disease were reproduced in this model, which allows new perspectives for the understanding of the underlying mechanisms (mitochondria, inflammation) and new therapeutic approaches (targeted, cellular or gene therapies) of the overloaded right ventricle but also pulmonary microvascular disease.

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Chronique thromboembolique l&#39;hypertension artérielle pulmonaire et de l&#39;évaluation de la fonction ventriculaire droite dans la Porcinet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in rodents, with detailed descriptions of the appropriate methods for anesthesia, the echocardiographic windows used, the imaging planes and probe orientations for image acquisition, the methods for data analysis, and the limitations of emerging technologies for the evaluation of cardiac and valvular function. Importantly, we also highlight several future areas of research in cardiac and heart valve imaging that may be leveraged to gain insights into the pathogenesis of valve disease in preclinical animal models. We propose that using a systematic approach to evaluating cardiac and heart valve function in mice can result in more robust and reproducible data, as well as facilitate the discovery of previously underappreciated phenotypes in genetically-altered and/or physiologically-stressed mice.

This protocol provides a detailed description of the echocardiographic approach for comprehensive phenotyping of heart and heart valve function in mice.

Approches et protocoles échocardiographiques pour Comprehensive Caractérisation phénotypique de la maladie valvulaire chez les souris

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed in mice is high. Phenotypic characterization of these mouse models also requires the examination of cardiac function and morphology. Echocardiography and magnetic resonance imaging (MRI) are commonly used approaches to characterize cardiac function and morphology in mice. Echocardiographic and MRI equipment specialized for use in small rodents is&#160;expensive and requires a dedicated space. This protocol describes cardiac measurements in mice using a clinical echocardiographic system with a 15 MHz human vascular probe. Measurements are performed on anesthetized adult mice. At least three image sequences are recorded and analyzed for each animal in M-mode in the parasternal short-axis view. Afterwards, cardiac histological examination is performed, and cardiomyocyte diameters are determined on hematoxylin-eosin- or wheat germ agglutinin (WGA)-stained paraffin sections. Vessel density is determined morphometrically after Pecam-1 immunostaining. The protocol has been applied successfully to pharmacological studies and different genetic animal models under baseline conditions, as well as after experimental myocardial infarction by the permanent ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD). In our experience, echocardiographic investigation is limited to anesthetized animals and is feasible in adult mice weighing at least 25 g.

Echocardiographic examination is frequently used in mice. Expensive high-resolution ultrasound devices have been developed for this purpose. This protocol describes an affordable echocardiographic procedure combined with histological morphometric analyses to determine cardiac morphology.

Examen échocardiographique et histologique de morphologie cardiaque chez la souris

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

Mesure échocardiographique des paramètres diastoliques ventriculaires droits dans la souris

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Harvest of Endothelial Cells from the Balloon Tips of Swan-Ganz Catheters after Right Heart Catheterization

A variety of pathologies lead to pulmonary hypertension (PH), which is defined as a mean pulmonary artery pressure exceeding 25 mmHg at rest. To further diagnose and manage PH, patients undergo repeated right heart catheterizations (RHC) wherein a Swan-Ganz catheter is advanced into a branch of the pulmonary artery and a balloon is inflated to wedge the catheter tip. This article illustrates a protocol whereby pulmonary artery endothelial cells (PAECs) may be harvested from the balloon tips of Swan-Ganz catheters after RHC, and purified with an anti- CD146 affinity column technique to purify putative PAECs. These cells might be used to provide an in situ snapshot of the biological state of the pulmonary vasculature endothelium to complement hemodynamic measurements obtained during RHC. Harvested and purified PAECs may be used for either cell culture or for subsequent analytical assays such as flow cytometery.

This protocol describes the removal and purification of pulmonary artery endothelial cells (PAECs) that adhere to the balloon tips of Swan-Ganz catheters while they are wedged in the pulmonary artery during right heart catheterization and remain adherent to the deflated balloon following removal from the patient's body.

Récolte des cellules endothéliales de l’info-bulles des cathéters Swan-Ganz après cathétérisme cardiaque droit

A variety of pathologies lead to pulmonary hypertension (PH), which is defined as a mean pulmonary artery pressure exceeding 25 mmHg at rest. To further ...

Assessment and Characterization of Hyaloid Vessels in Mice

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed regression of hyaloid vessels can be seen in diseases such as persistent hyperplastic primary vitreous (PHPV), leading to an obstructed light path and impaired visual function. Understanding the mechanisms underlying the hyaloid vessel regression may lead to new molecular insights into the vascular regression process and potential new ways to manage diseases with persistent hyaloid vessels. Here we describe the procedures for imaging hyaloid in live mice with optical coherence tomography (OCT) and fundus fluorescein angiography (FFA) and a detailed technical protocol of isolating and flat-mounting hyaloid ex vivo for quantitative analysis. Low-density lipoprotein receptor-related protein 5 (LRP5) knockout mice were used as an experimental model of persistent hyaloid vessels, to illustrate the techniques. Together, these techniques may facilitate a thorough assessment of hyaloid vessels as an experimental model of vascular regression and studies on the mechanism of persistent hyaloid vessels.

This protocol describes both in vivo and ex vivo methods to fully visualize and characterize hyaloid vessels, a model of vascular regression in mouse eyes, using optical coherence tomography and fundus fluorescein angiography for the live imaging and ex vivo isolation and subsequent flat mount of hyaloid for quantitative analysis.

Évaluation et caractérisation des navires hyaïdis chez les souris

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to that of humans and that of other large animal models such as dogs and pigs. However, the rabbit model has the additional advantage of lower maintenance costs compared to other large animal models. The longitudinal evaluation of cardiac function using echocardiography, when appropriately implemented, is a useful methodology for preclinical assessment of novel therapies for heart failure with reduced ejection fraction (e.g. cardiac regeneration). The correct use of this non-invasive tool requires the implementation of a standardized examination protocol following international guidelines. Here we describe, step by step, a detailed protocol supervised by veterinary cardiologists for performing echocardiography in the rabbit model, and demonstrate how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Here we describe, step by step, a detailed protocol for performing echocardiography in the rabbit model. We show how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Examen échocardiographique transthoracique dans le modèle lapin

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et l'hypertension artérielle pulmonaire induite par l'hypoxie chez les souris

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...