Modèle d'injection de joues pour la mesure simultanée de la douleur et des comportements liés aux démangeaisons

Nos données indiquent que les algogènes réduisent les comportements de grattage, mais l’effet de la capsaïcine sur les comportements de grattage reste incertain. Par conséquent, une mesure simultanée de chaque quantité de douleur est importante. Méthode traditionnelle fournir des informations pour seulement les démangeaisons ou les sensations de douleur, mais le modèle d’injection de joue fournir des informations pour les démangeaisons et la douleur, séparément et simultanément.

L’injection de joues peut être difficile au début, car il faut de la pratique pour discriminer les comportements de grattage, d’essuyage et de toilettage. La démonstration vidéo de l’injection et de l’analyse comportementale peut être utile pour maîtriser les techniques. Pour une expérience d’injection de joues, la veille de l’évaluation, raser la fourrure sur la joue de chaque souris avec des tondeuses à cheveux, et monter une caméra vidéo avec un taux d’images de 30 à 60 images par seconde sur un trépied, dans une température, l’humidité et un environnement contrôlé par le son.

Placez quatre cages sous la caméra dans l’orientation indiquée, et placez des écrans entre chaque cage pour empêcher les souris de se voir. Un jour après le rasage, placez une souris dans chaque cage d’enregistrement pendant une heure pour acclimater les animaux aux conditions d’enregistrement. Si un traitement topique doit être utilisé, appliquez-le en ce moment.

Pendant que les animaux s’acclimatent, chargez la substance d’essai d’intérêt dans une seringue de 0,5 millilitre munie d’une aiguille de calibre 29 ou 30 par souris. À la fin de la période d’acclimation, commencez l’enregistrement vidéo avant l’injection. Injectez ensuite une solution de 10 microlitres de la substance d’essai de façon intradermally dans la joue rasée de l’animal éveillé.

Retournez ensuite les souris injectées dans leurs cages respectives et continuez l’enregistrement vidéo pendant 30 minutes. À la fin de l’expérience, chargez la vidéo dans un logiciel de montage vidéo approprié. Comptez chaque fois qu’une souris soulève une patte arrière vers la joue et gratte plusieurs fois sur une ou quelques secondes avant de poser sa jambe comme un combat de rayures.

Les souris utilisent une seule pattes antérieure pour essuyer, et les deux pattes antérieures pour le toilettage, mais seuls les comportements d’essuyage sont comptés comme des comportements liés à la douleur. Pour une expérience d’injection du cou, un jour avant l’expérience, rasez la fourrure sur la nuque de chaque souris avec des tondeuses à cheveux. Un jour après le rasage, acclimater les souris dans les cages d’enregistrement pendant une heure avant d’injecter 10 microlitres de la substance d’essai d’intérêt intradermally dans le cou rasé, dans des conditions éveillées.

Retournez les animaux injectés dans leurs cages d’enregistrement et enregistrez les comportements de la souris pendant 30 minutes. Ensuite, comptez les combats de grattage sur le cou et tous les comportements d’essuyage du visage comme vient de le démontrer. Dans le modèle d’injection du cou, l’histamine induit de forts comportements de grattage, tandis que le véhicule induit des rayures légères.

Dans le modèle d’injection de joues, la capsaïcine n’induit pas de comportements de grattage, mais induit des comportements d’essuyage, qui sont considérés comme liés à la douleur. Après injection dans la joue, l’histamine induit principalement des comportements de éraflure avec de faibles comportements d’essuyage. L’application d’un reagent anti-histamine inhibe les rayures, suggérant que les comportements de grattage induits par l’histamine sont causés par la réaction de l’histamine sur les récepteurs de l’histamine.

Dans cette expérience, l’application d’un médiateur démangeaison induit grattage, mais pas essuyer les comportements, indiquant que le médiateur testé agit comme un prurit, mais pas un algogène chez la souris, similaire à ses effets chez l’homme. Cette méthode permet aux démangeaisons et aux sensations de douleur d’être facilement et clairement distinguées avec une seule procédure. Une analyse détaillée du comportement peut être faite en se concentrant soit sur les démangeaisons ou la sensation de douleur.

Les démangeaisons et les comportements de douleur accordent des réponses différentes. En outre, ces techniques ne sont pas difficiles. La procédure d’injection et d’observation des joues peut laisser plusieurs de nos pairs d’entraînement maîtriser.

Nous apprécions l’introduction du modèle d’injection de joues par le professeur LaMotte à l’Université de Yale.