Le mécanisme sous-jacent CRPS I reste incertain. L’établissement d’un modèle animal préclinique imitant CRPS I sera crucial pour explorer les mécanismes sous-jacents CRPS I.The rat CPIP modèle présente de nombreux CRPS J’aime la simitance, qui comprennent l’œdème post-limite et l’hyperémie au stade précoce. Après l’établissement du modèle, suivi d’hypersensibilités thermiques et mécaniques persistantes.
Commencez par anesthésier tous les rats avec du phénobarbital de sodium. Assurez-vous que les rats sont correctement anesthésiés en pinçant leur patte arrière ou leur queue avec des forceps. Et placez l’onguent vétérinaire sur les yeux.
Gardez le rat sur un coussin chauffant de 37 degrés Celsius pendant l’intervention. Lubrifier la patte arrière droite et la cheville avec du glycérol. Puis faites glisser un anneau nitrile 70 durometer O dans le côté plus grand d’un tube d’un point de cinq millilitres avec le bouchon cassé coupé.
Insérez soigneusement la patte arrière dans le tube creux jusqu’à ce qu’elle atteigne le fond. Faites glisser graduellement l’anneau O du tube vers l’arrière droit près de l’articulation de la cheville. Et laissez-le là pendant trois heures.
Appliquer le même traitement au groupe factice de rats, sauf avec un anneau o cassé qui ne devrait pas induire l’ischémie. Après trois heures, couper l’anneau O et surveiller le rat jusqu’à ce qu’il retrouve suffisamment de conscience pour maintenir la récumbence sternale. Ne placez pas le rat en compagnie d’autres rats jusqu’à ce qu’il soit complètement récupéré de l’anesthésie.
Placez le rat dans une chambre transparente en plexiglas sur un plancher en maille et habituez le rat à l’environnement pendant 30 minutes avant tout test comportemental. Utilisez des filaments von frey pour tester l’allodynie mécanique du rat. Commencez le test à partir du filament moyen en l’appliquant verticalement à la surface plantaire moyenne de la patte arrière.
Appliquer une force appropriée pour plier le filament jusqu’à cinq secondes. Une rétractation soudaine de la patte est considérée comme un comportement nocifensive. Effectuez le test d’allodynie mécanique les jours trois, deux, un et tous les deux jours jusqu’au jour 13.
Appliquez la méthode d’essai vers le haut vers le bas pour tester le seuil et une méthode dickson pour calculer le seuil de retrait de patte de 50 pour cent. Pour tester l’hyperalgésie thermique, utilisez la méthode hargreaves en visant directement le faisceau lumineux émis par une ampoule de 50 watts à la patte arrière. Mesurez la latence de retrait de la patte, en fixant 20 secondes comme seuil de coupure pour éviter les blessures excessives.
Répétez chaque test trois fois en intervalles de cinq minutes pour chaque patte arrière, et prenez la moyenne comme latence de retrait de patte. Effectuez le test d’hyperalgésie thermique les jours trois, deux, un et tous les deux jours jusqu’au jour 13. Pour tester le comportement nocifensif aigu induit par la capsaïcine, préparez la solution de stock de capsaïcine de 200 millimlaires avec DMSO, et diluez-la encore un à 1000 dans PBS pour injection.
La capsaïcine est un reagent, qui peut causer une irritation articulaires de la peau, des yeux et de la respiration. Il est important de porter un masque et des lunettes lors de la préparation de la solution de capsaïcine. Injectez ensuite 50 microlitres de capsaïcine ou un véhicule dans la patte arrière à l’aide d’une aiguille de calibre 30 fixée à une seringue d’un millilitre.
Enregistrez un comportement nocifensif, comme lécher, mordre ou broncher la patte injectée à l’aide d’une caméra vidéo pendant 10 minutes après l’injection. Évaluez l’oedème de patte arrière en mesurant l’augmentation du diamètre des pattes à 15 minutes, 24 heures, 48 heures et 72 heures après l’établissement du modèle. Après avoir placé l’anneau d’O sur la cheville, la peau ipsilateral de patte postérieure a montré la cyanose, une indication de l’hypoxie de tissu.
Après avoir coupé l’anneau O, la patte a commencé à se remplir de sang et a montré un gonflement robuste, indiquant une hyperémie intense. Le gonflement a graduellement diminué et est revenu à la normale 48 heures après la procédure. Un jour après l’établissement de modèle, la patte arrière ipsilateral du groupe cpip a exhibé l’allodynia mécanique évidente qui a persisté pendant 13 jours du délai d’observation.
La patte postérieur contralatérale du groupe CPIP a également montré l’hyperalgésie mécanique pendant 13 jours. Quand l’hyperalgésie thermique a été mesurée, les pattes postérieures bilatérales des rats de CPIP ont exhibé la latence sensiblement réduite de retrait en réponse aux stimulus thermiques nocifs, comparés aux rats faux de groupe. L’hyperalgésie thermique de la patte arrière ipsilateral a persisté jusqu’à la fin du délai d’observation, tandis que l’hyperalgésie thermique de la patte arrière contralatérale a duré pendant sept jours.
Les groupes sham et CPIP ont été testés pour le comportement nocifensive avec l’injection de capsaïcine. Lorsqu’un véhicule a été injecté, le groupe factice a montré une légère réaction nocifensive et le groupe CPIP a montré une réponse significativement plus élevée. Plus important encore, les rats CPIP ont montré des réponses significativement plus élevées à l’injection de capsaïcine que le groupe factice, ce qui suggère que les rats CPIP présentent un phénomène similaire aux patients humains atteints de CRPS I.By cette procédure, les rats sont anesthésiés avant et pendant l’établissement du modèle.
Le modèle de rat CPIP décrit dans ce protocole établi par ischémie et CRPS humain J’aime la simitance. Familles de ces modèles, plus de mécanisme sur CRPS je peux être exploré.
