Collecte de sang par perforation subclavienne de veine chez la souris. La collecte d’échantillons de sang chez la souris est essentielle dans la plupart des laboratoires de recherche. Les approches conventionnelles pour la collecte de sang chez la souris est la coupe de la queue, lorsque moins de 100 microlitres d’échantillon sont nécessaires.
Toutefois, si plus de 100 microlitres de sang sont nécessaires à un moment non terminal, les saignements rétroorbitaux, submandibulaires ou submentaux de sang sont les techniques les plus couramment considérées. Dans certains endroits, l’incision ou le cathétérisme jugulaire de veine ont été adoptés comme méthodes alternatives. Néanmoins, les méthodes ci-dessus sont blessantes pour les souris.
Sur la base de nos recherches formelles, nous introduisons ici une nouvelle stratégie économique et douce pour la collecte de sang de la veine subclavienne chez la souris. L’innocuité et la faisabilité, et le volume sanguin obtenu avec cette technique, sont présentés et discutés. Après anesthésie générale, allongez la souris en position supine.
Nettoyez l’espace infraclavicular avec 75% d’éthanol. Confirmer la clavicule et le fossae suprasternal avant la perforation. Identifier le site de perforation au milieu de la clavicule.
Déplacez les aiguilles supérieures et vers le haut vers le fossae suprasternal, juste postérieur à la clavicule. Après avoir avancé de trois à quatre millimètres, maintenez la pression négative dans la seringue et reculez lentement l’aiguille. Le sang s’écoulera dans la seringue au cours du retrait.
Après la collecte de sang, appuyez doucement sur le site de perforation pendant une à deux minutes pour arrêter de saigner. Préparer les matériaux nécessaires, y compris 75 % d’éthanol, de ruban adhésif, d’agent épilateur, de tubes, de seringue de 1,0 millilitre reliée à l’aiguille, à l’écaille électronique, à l’héparine et à la solution saline. Après une anesthésie générale satisfaisante, placez la souris sur la table d’opération en position supine, et à deux à quatre centimètres du bord de la table pour faciliter la perforation des veines.
Fixez les membres dans une position confortable, comme le montre la figure 2. Aucune intubation ou ventilation mécanique n’a été nécessaire dans l’ensemble de la procédure. Appliquer l’agent épilateur autour de l’espace infraclavicular avec l’écouvillon de coton.
Trois minutes plus tard, laver l’agent épilateur avec un coton-tige humide, pour enlever la fourrure et toute saleté visible. Stériliser l’espace infraclavicular avec 75% d’éthanol, puis sécher avec de la gaze propre. Identifier l’emplacement de l’os de la clavicule et du fossae suprasternal avec un doigt.
Localiser le site de perforation, près du milieu de l’os de la clavicule, et l’attraper. Placez l’index gauche latéral au site de perforation pour fixer la peau et le tissu sous-cutané. Déplacez l’aiguille vers le haut dans un crâne se jeter vers le fossae suprasternal.
Une fois que l’aiguille entre dans le tissu sous-cutané, l’annulaire de la main droite doit reculer pour former une pression négative. Avancez la seringue de trois à quatre millimètres, mais arrêtez-vous s’il n’y a pas de fuite de sang dans la seringue. Puis lentement tirer en arrière de la seringue, et de garder la pression négative en elle.
Dans la plupart des cas, le sang entrera dans la seringue au cours du recul. Une fois que le sang entre dans la seringue, fixez la seringue et maintenez la pression négative, jusqu’à ce que le volume de sang nécessaire soit recueilli dans la seringue. Après la collecte de sang, retirer l’aiguille de perforation, et appuyez sur le site de perforation avec un coton-tige légèrement pendant une à deux minutes pour arrêter le saignement, puis renvoyer les souris dans des cages.
Transférez l’échantillon de sang dans notre tube d’héparine. Nous avons répété cette procédure chez 10 souris Quimi. Neuf procédures ont réussi dans le côté droit.
Un cas a échoué dans trois tentatives dans le côté droit, et la collecte de sang a réussi dans le côté gauche. Le temps s’est d’une distance comprise entre 35 et 126 secondes. Le volume de collecte de sang a été fixé à environ 200 microlitres.
La collecte de sang a été réussie avec une à quatre tentatives. L’échantillonnage de sang a réussi à la première tentative chez deux souris, et à quatre tentatives dans une souris, à deux à trois tentatives chez d’autres souris. Toutes les données ont été illustrées dans le tableau 1.
Tous les animaux ont survécu et se sont rétablis dans les 30 minutes suivant l’échantillonnage sanguin. Il n’y avait pas de différence significative entre les rapports sexuels pour tous les paramètres observés. En conclusion, la perforation subclavian de veine est une méthode sûre et efficace pour la collecte de sang chez les souris.
Outre la coupe des veines de queue et la collecte de sang rétro-orbitale de plexus, cette méthode est faisable et appropriée pour des recherches observationnelles à plusieurs moments chez la souris.
