Pour commencer, fixez le rat dans un cône de retenue en plastique, enfermez la grande extrémité du cône autour de la base de la queue. Assurez-vous que l’animal est à l’aise et que la respiration n’est pas restreinte tout au long de la procédure. Trempez la queue dans de l’eau tiède pendant environ une minute pour dilater la veine et séchez la queue avec une serviette en papier.
Dans la contention, placez l’animal face vers le bas, la queue reposant sur un coussin chauffant. Pour sélectionner la veine de queue appropriée pour l’échantillonnage, faites pivoter l’animal entier vers la droite ou la gauche. Utilisez le tiers terminal de la queue pour la perforation des vaisseaux sanguins, car les vaisseaux deviennent plus superficiels dans cette zone.
Essuyez la queue avec des lingettes à 70% d’éthanol au site de perforation et placez-la sur le bord du coussin chauffant, créant un angle dans le tiers terminal de la queue. Cela amène la veine à la surface et crée plus d’espace pour prélever l’échantillon. Pour le prélèvement sanguin, déplacez le piston d’avant en arrière dans la seringue plusieurs fois pour lisser le retrait, puis tirez sur le piston pour créer une pression négative dans la seringue.
Fixez la queue à plat sur le coussin chauffant à l’aide de l’index et du majeur non dominants. Placez le majeur à proximité et l’index distalement avec le site de ponction entre ces deux doigts. Faites glisser la seringue d’insuline contre l’index avec l’œil de l’aiguille pointant vers le haut jusqu’à ce qu’elle soit insérée dans la veine.
Cela crée un angle de 35 degrés entre l’aiguille et la queue. Une fois que l’aiguille est entrée dans la veine, le sang coule dans la seringue. Retirez lentement le piston de la seringue à un rythme régulier pour recueillir le volume souhaité.
Retirez la seringue de la queue et laissez une goutte de sang se former du côté perforant de la queue. Aspirez ce sang pour recueillir quelques microlitres de sang supplémentaires, en cas de procédure non stérile. Appliquez une pression sur le site de ponction pour arrêter le saignement et essuyez la zone avec une nouvelle lingette imbibée d’alcool.
Après avoir retiré le rat du cône, remettez-le dans sa cage. Les taux de réussite avec les méthodes de ponction de la veine de la queue ont été comparés au taux de réussite de la méthode de ponction de la veine du pénis sous anesthésie. Fait intéressant, sous anesthésie, la veine de la queue est devenue très peu fiable et a eu un taux de réussite de seulement 25%Les taux de réussite ont montré des résultats presque similaires pour la ponction de la veine de la queue chez les rats conscients et la ponction de la veine du pénis sous anesthésie.
Le prélèvement sanguin a été effectué en moins de six minutes dans la ponction de la veine de la queue sans anesthésie et la méthode de ponction de la veine du pénis sous anesthésie, tandis que la méthode de ponction de la veine de la queue sous anesthésie a pris plus de huit minutes en raison de multiples défaillances.
