L’objectif global de ce protocole est de radiosynthétiser un traceur de tryptophane radiomarqué F18 par une approche à un pot et en deux étapes. Le radiotraceur peut trouver une application répandue pour l’imagerie du métabolisme du tryptophane. La technique utilise le radio-isotope avec une demi-vie plus longue, moins de précurseur de réaction et moins de volume de réaction, et une phase de purification sans danger pour l’environnement.
Le radiotraceur peut être utilisé pour le diagnostic de divers troubles affectant le cerveau, y compris, mais sans s’y limiter, l’épilepsie, les troubles neuropsychiatriques et la neuro-oncologie. Cette méthode peut être appliquée à d’autres modules de radiomarquage disponibles dans le commerce. Une fois que la solution de fluorure F18 est reçue, commencez par inspecter la boîte de plomb à la surface et, à partir de la distance d’un mètre, enregistrez les taux d’exposition au rayonnement maximaux.
Après avoir effectué un test d’essuyage pour s’assurer que la boîte d’expédition n’est pas contaminée, enregistrez la dose et l’heure du fluorure F18. Transférer la solution de fluorure de F18 dans le système de synthèse radiochimique. Connectez la ligne d’argon avec une aiguille courte et la ligne de transfert de fluorure F18 avec une aiguille longue au flacon de fluorure F18.
Ensuite, fermez la porte en verre de la cellule chaude et la porte principale. Activez la ligne d’alimentation en argon en cliquant sur Argon Supply. Augmentez la pression d’argon et allumez la ligne de poussée de fluorure F18 pour pousser le fluorure Aqueux F18 à travers la cartouche lumineuse QMA.
Une fois que toute la radioactivité est piégée dans la cartouche lumineuse QMA et que la lecture du détecteur de radioactivité est stable, augmentez la pression d’argon et soufflez de l’argon à travers la cartouche pendant cinq minutes supplémentaires pour éliminer l’excès d’eau. Après avoir coupé la ligne de poussée de fluorure F18, réduisez la pression d’argon à zéro et basculez la vanne à deux positions à six ports de la position de piégeage du fluorure F18 à la position d’élution. Ouvrez le flacon de réaction, allumez la position MVP d’entrée une ligne d’argon et poussez la solution de K222 et de carbonate de potassium dans la position MVP d’entrée un flacon à travers la cartouche lumineuse QMA pour éluer la radioactivité dans le flacon de réaction.
Basculez la position d’élution du fluorure F18 sur la position de piégeage. Cliquez sur le bouton Chaleur pour chauffer le réacteur à 110 degrés Celsius, activer la ligne d’argon de sortie MVP position quatre qui se connecte au réacteur et évaporer le solvant dans le flacon de sortie MVP position quatre. Cliquez sur le bouton Refroidir pour refroidir le réacteur à température ambiante avec du dioxyde de carbone comprimé.
Éteignez la ligne de balayage, changez la position MVP d’entrée un à la position deux et ajoutez l’acétonitrile anhydre dans le flacon deux. Deux allument la ligne de balayage et le chauffage pour sécher azéotropiquement le fluorure F18 à 110 degrés Celsius. Une fois que le réacteur atteint la température ambiante, éteignez la ligne de balayage, changez la position MVP d’entrée deux à la position trois et ajoutez le précurseur de radiomarquage au tosylate dans le flacon trois.
Fermez le réacteur et chauffez les mélanges réactionnels à 100 degrés Celsius pendant 10 minutes. Pour évaporer le solvant de réaction, une fois que le réacteur refroidit, allumez la ligne de balayage et évaporez le solvant de réaction à 100 degrés Celsius. Une fois le réacteur refroidi, éteignez la ligne de balayage et changez la position MVP d’entrée trois en position quatre.
Lorsque le mélange d’acétonitrile d’acide chlorhydrique est ajouté, chauffer la réaction à 100 degrés Celsius pendant 10 minutes pour déprotéger les groupes protecteurs tert-butyle et tert-butyloxycarbonyle dans le précurseur de radiomarquage. Pour neutraliser la réaction, lorsque le réacteur atteint la température ambiante, basculez la position MVP d’entrée quatre à la position cinq et ajoutez deux hydroxyde de sodium molaire au mélange réactionnel et éteignez la ligne d’argon MVP d’entrée. Ensuite, commencez à transférer le mélange réactionnel vers le fichier intermédiaire en cliquant sur le bouton F dans le MVP de sortie pour basculer le MVP de sortie de la position de ventilation quatre à la position cinq, puis en cliquant sur le bouton F dans le MVP d’entrée pour basculer le MVP d’entrée de la position cinq à la position six.
Après avoir allumé la ligne d’argon MVP de sortie, poussez le mélange réactionnel à travers les cartouches d’oxyde d’aluminium neutre et de C8 empilées jusqu’au flacon intermédiaire installé avant la boucle d’échantillonnage HPLC. Pour rincer le réacteur, basculer la position MVP de sortie cinq à la position six, pousser la solution de rinçage dans le flacon de sortie MVP position six à travers le flacon de réaction, les cartouches et le flacon intermédiaire, successivement. Ensuite, commencez la purification du mélange en basculant la boucle HPLC de la position d’injection à la position de charge et en allumant la ligne d’argon MVP d’entrée.
Lorsque le mélange est chargé dans la boucle HPLC de cinq millilitres, basculez le bouton Charger sur Injecter, cliquez sur Injecter HPLC pour démarrer le chromatogramme HPLC à un débit de trois millilitres par minute, puis cliquez sur le bouton HPLC Monitor pour accéder au chromatogramme HPLC en temps réel. Cliquez sur le bouton Diversion MVP pour détourner la fraction HPLC cible vers la courte colonne C18 à environ 12 minutes. Une fois la radioactivité cible collectée dans la colonne C18, passez la vanne de dérivation à deux positions à quatre ports à la position de collecte des déchets et rincez la colonne chirale à raison de quatre millilitres par minute pendant six minutes pour éliminer l’énantiomère D F18 FETrp mineur et d’autres impuretés ultraviolettes.
Cliquez sur le bouton Diversion MVP pour rediriger la phase mobile HPLC vers la formulation MVP position un à trois millilitres par minute. Observez que la phase mobile passe à travers la colonne chirale et la colonne C18 pour purifier le FETrp L-F18 retenu dans la colonne C18. À environ 32 à 34 minutes, recueillir la fraction cible dans la formulation MVP position deux flacons.
Ensuite, poussez la formulation MVP position deux solution de flacon à travers la ligne d’administration et le filtre stérile dans le flacon de dose finale. Analyser l’activité et le volume de la dose finale après avoir retiré le filtre stérile. Rincez le système avec de l’eau ultra pure suivie d’éthanol à un débit de quatre millilitres par minute pendant au moins 15 minutes par lavage.
Éteignez la pompe HPLC et le boîtier PLC, fermez le programme, arrêtez la compagnie aérienne comprimée, la ligne d’argon, la ligne de dioxyde de carbone et la puissance principale du module. Prélever environ 0,1 millilitre de la dose finale dans un insert de 0,2 millilitre d’un flacon de CQ. Exécutez l’échantillon à chaud car le programme de séquence partielle est décrit dans le manuscrit de texte.
Analyser les données de CQ en calculant les puretés chimiques et radiochimiques de l’excès énantiomère et de l’activité molaire. Après avoir déterminé la valeur du pH, relâchez la dose si tous les résultats des tests dépassent la plage acceptable. Les chromatogrammes HPLC représentatifs pour qc sont affichés.
Les pics insignifiants entre le volume du vide en 10 minutes du programme ont été détectés dans le chromatogramme vierge. La référence étalon non radiomarquée L-fluoroéthyl-trytophane a montré la présence d’un seul isomère bien séparé de la référence standard de son homologue D. La dose finale de tryptophane L-F18 a montré une pureté chimique et une pureté radiochimique élevées.
Les essais de stabilité du produit final à la dose la plus élevée pendant huit heures ont montré que le tryptophane L-F18 était stable en termes de pureté chimique, de pureté radiochimique, d’excès énantiomère et de valeur du pH. Les puretés chimiques et radiochimiques supérieures à 95% ont été obtenues à l’aide de ce protocole. Deux colonnes sont utilisées pour la purification des traceurs.
N’oubliez pas de passer à la colonne C18 pour éliminer les impuretés chimiques. Nous pouvons rapidement adapter cette méthode à la production clinique du radiotraceur de tryptophane marqué au fluor 18.
