A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
כאן, אנו מציגים את ההכנה של מרתח א-שיאן (EXD) בארבעה שלבים - השריה, מרתח, סינון וריכוז - ומדגימים את הניהול של סרום מכין EXD מוכן לחולדות. שיטות אלה חלים על in vivo ובמחקר חוץ גופית של decoctions צמחים כגון תרופות סיניות מסורתיות.
צמחי מרפא מסורתיים, רפואה אלטרנטיבית בקליניקה הקלינית, זכו לתשומת לב מוגברת בשנים האחרונות. לפני המסירה לגוף, הליך החילוץ הנוסף נדרש בדרך כלל לשחרר את המרכיבים הפעילים מעשבי תיבול. מרתח מים הוא הליך החילוץ הקלאסי, כי הוא עדיין בשימוש נרחב בהגדרות הקליניות. כאן, אנו מציעים פרוטוקול מפורט עבור er-xian מרתח (EXD) על מנת ליישם decoctions צמחים למחקרים ניסיוניים. חישוב המינון המתאים לבעלי חיים מתואר, כמו גם את ארבעת השלבים העיקריים של EXD: השריה, מרתח מים, סינון, וריכוז. בנוסף, EXD המכיל בסרום הוא הציג חולדות כאמצעי אימות במבחנה . הנה, חולדות היו מנוהלים בעל פה EXD במשך שלושה ימים. לאחר מכן נאספו דגימות דם, הופעלו, צנטריפוגה, וסוננו. סרום, מדולל עם המדיום התרבות, ניתן להשתמש כדי לטפל בתאים או רקמות ב VJ less לדוגמה, EXD הוחל הן על vivo והן במבחנה מחקרים הוכיח כי EXD משפר osteogenesis. פרוטוקול זה יכול לשמש הפניה להכנת ויישום של תרופות צמחיות.
עניין במחקר ויישום של צמחי מרפא מסורתיים כיום גדל. בניגוד לתרופות מודרניות, שבהן מרכיבים כימיים מוגדרים, נוסחאות צמחיות כוללות חומרים לא ידועים ודורשות תהליכי מיצוי על מנת לאפשר את אספקת המרכיבים הפעילים שלהם. למרות שמחקרים רבים מנסים לבחור תרכובת קטנה אחת עם מבנה ידוע כמייצג של כל העשב או נוסחת צמחים, לא יעילות pharmacological ולא מנגנונים יכול להיחשב שווה 1 , 2 . בעוד טביעת אצבע מאפשרת ניתוח של המרכיבים של צמחי מרפא מורכבים, כמה המרכיבים עדיין לא ניתח בבירור, מה שמוביל אתגר כאשר שילוב של כל תמציות עבור מחקר 3 . האינטראקציות של המרכיבים / תמציות רבים מתווכים את ההשפעות הטיפוליות של תרופות צמחיות. כדי לשמור על יתרון זה, לחלץ את הטופס המסורתי decoct יון - עדיין בשימוש נרחב במרפאה. מאז הליך החילוץ יש השפעה רבה על יעילות טיפולית, פרוטוקול סטנדרטי של מרתח מים מסורתי הוא הכרחי, במיוחד עבור vivo מחקרים 4 , 5 .
מצד שני, כאשר חוקרים מנגנונים פרמקולוגיים, ניהול של צמחים decoctions במהלך במבחנה או vivo לשעבר מחקרים גם אתגר. הרעיון של סרום המכיל סמים הוצע לראשונה על ידי Tashino בשנת 1988 6 . מאז, מספר גדל והולך של חוקרים יש להחיל אותו על תרופות צמחיות 7 , 8 , 9 . למרות שלשימוש בסרום המכיל סמים יש מגבלות מסוימות, כגון השפעתם של מרכיבים מסוימים של הסרום, היא עדיין נחשבת כשיטה המחקה מקרוב את התנאים הפיזיולוגיים.
"Jove_content"> תמצית אר-שיאן פותחה בתחילת שנות החמישים כדי להקל על תסמיני גיל המעבר 10 , 11 , 12 , 13 . זה גם הוחל על הטיפול של anaemia 14 , אוסטיאופורוזיס גיל המעבר 15 , 16 , 17 , כישלון שחלות מוקדמות 18 , סרטן השד 19 , סרטן השחלות 20 , בגיל ההתבגרות מאוחרת 21 . כאן, אנו מציגים פרוטוקולים מפורטים להכנת שני ero-xian מרתח (EXD) ואת סרום המכיל סרום. בנוסף, אנו מתארים את היישום של EXD ו- EXD המכילים בסרום מודלים מוראופאוס אוסטיאופורוטיות.
EXD מורכב מ 9 גרם כל אחד Orcioides Orchioides Curculigo , Herbaa Epimedii , Radix Morindae Officinalis , ו- Radix Angelicae Sinensis ו- 6 גרם כל אחד מקליפת Phellodendri ו- Rhizoma Anemarrhenae למטופל מבוגר ליום. המינון המקביל לעכבר הוא 0.1418 EXD / kg / day בהתבסס על המשוואה הבאה 22 : dB = dA * RB / RA * (WA / WB) 1/3 . DA ו- dB מתייחסים למינון לכל משקל גוף (mg / kg) של האדם והעכבר, בהתאמה. המינון, במ"ג / ק"ג, מוחלף במספר EXD / kg. RA ו- RB מייצגים את גורם הגוף האנושי ואת גורם הגוף העכבר, בהתאמה, אשר פרופורציונלי ל (שטח משטח הגוף (m 2 ) / משקל גוף (ק"ג)) 2/3 (ראה טבלה 1 ). WA ו WB מצביעים על bodyweight (ק"ג) של האדם והעכבר, בהתאמה.
הפרוטוקול עוקב אחר הנחיות טיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת שנחאי של הרפואה הסינית המסורתית והוא אושר על ידי הניסוי בבעלי חיים שנחאי ועדת האתיקה של בעלי חיים.
1. פרוטוקול I: הכנת EXD
2. פרוטוקול II: הכנת EXD המכיל סרום
ההשפעה של EXD על צפיפות העצם של עכברי OVX
מכתבים של heatoxylin ו eosin (H & E) של סעיף החוליה המותני מראה גדל trabeculae העצם לאחר טיפול EXD ב vivo ( איור 1 א , פאנל ימין) לעומת אלה בקבוצת OVX ( איור 1 א
בשנים האחרונות הוקדשה תשומת לב רבה יותר לתרופות צמחיות, סוג אחד של רפואה אלטרנטיבית שהוחל בסביבה הקלינית בעולם המזרחי במשך אלפי שנים. שונה מן "הספסל למיטה" דפוס של הרפואה המודרנית, צמחי מרפא מסורתיים הראשון דורשים את "המיטה לספסל" דפוס להסביר את המנגנונים ש...
המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81573992). אנו מודים אמילי ק לו ו Kathleen DiNapoli לעזרה בעריכת השפה שלהם.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Curculigo orchioides Gaertn (9 g), Herbaa Epimedii (9 g), Radix Morindae Officinalis (9 g), Radix Angelicae Sinensis (9 g), Cortex Phellodendri (6 g), and Rhizoma Anemarrhenae (6 g) | Kang-qiao Chinese Medicine Yinpian Co. Ltd (Shanghai, CN) | 160922 | EXD components |
Filter paper | GElifesciences | 99-103-952 | Filter EXD decoction before concentration |
Imprinting Control Region (ICR) mice | Shanghai Laboratory Animal Center | SCXK 2007-0005 | In vivo study |
Sprague Dawley rats | Shanghai Laboratory Animal Center | SCXK 2007-0005 | EXD-containing serum preparation |
Syringe filter | Millipore | SLGP033RB | 0.22 µm |
gavage needles (10 ml) | Shanghai BO Ge trade sales department | 59104274 | Adminstration of EXD |
Ketamine (80 mg/kg) | Fujian Gutian Pharma Co. Ltd | H35020148 | Anesthesia |
Xylazine (10 mg/kg) | Sunway Pharma Co. Ltd | CB07591 | Anesthesia |
Dulbecco’s modification of Eagle’s medium Dulbecco (DMEM) culture medium | Gibco | 12800-116 | DMEM with 2 mM L-glutamine and without ribonucleosides and ribonucleotides |
Streptomycin | Sigma | 1277 | 100 µg / ml |
Penicillin | Sigma | 4687 | 100 µg / ml |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved