Method Article
* These authors contributed equally
כדי לשפר את היציבות והסטריליזציה של ציפויים מבוססי צ'יטוזן ולהרחיב את היישום של ננו-חלקיקים ספציפיים בשימור מזון, חומרים מרוכבים Ag/TiO2 מסונתזים כדי לתפעל ציפויי צ'יטוזן לשימור ביצים. מורפולוגיה של קליפת הביצה, ירידה במשקל, יחידת Haugh ו- pH חלבון משמשים לאפיון ביצועי השימור של הציפויים.
ביצים הן מקור מצוין לחלבונים, מינרלים וויטמינים, אשר נצרכו באופן פופולרי בתזונה היומית בכל רחבי העולם. עם זאת, המיקרו-נקבוביות והמיקרו-סדקים בקליפות הביצים מובילים לאובדן לחות ולבריחה של CO2, וכתוצאה מכך להאצת הידרדרות הביצים ואובדן כלכלי. כדי לשפר את היציבות והסטריליזציה של חומרי הציפוי הקיימים מבוססי צ'יטוזן ולפתח ננו-מרוכבים רב-תכליתיים חדשים לשימור אנטי בקטריאלי וביציות, חומרים מרוכבים מכסף/טיטניום דו חמצני (Ag/TiO2) מסונתזים ומיושמים כדי לשנות את הצ'יטוזן להארכת חיי המדף של הביצים. תמונות מיקרוסקופ אלקטרונים (SEM) משמשות לניתוח המבנה והמורפולוגיה של חלקיקים מרוכבים והמורפולוגיה של קליפות ביצה מצופות. ביצועי השימור של ציפויים מרוכבים מוערכים על ידי פרמטרים שונים: ירידה במשקל, יחידת Haugh, pH חלבון ומורפולוגיה של קליפת הביצה של הדגימות. אימוץ חומרים מרוכבים Ag/TiO2 תורם להשפעה סינרגטית על צ'יטוזן, מה שיכול להאריך את תקופת השימור עוד יותר. הביצועים של ציפוי צ'יטוזן, לעומת זאת, מוגבלים כיום על ידי מיני החלקיקים והריכוז הקיימים, מה שדורש אופטימיזציה במחקרים עתידיים. השיטות במחקר זה בוחנות חומרי ציפוי חדשניים, שניתן ליצור על ידי הוספת ננו-חלקיקים ספציפיים לקודמן הציפוי, כדי להשיג את ההשפעות הקומבינטיביות של הננו-חלקיק והמבשר, כמו גם להכין ציפויים רב-תכליתיים חדשים בתחום שימור המזון.
כמקורות מצוינים ופופולריים לחלבון, מלח אנאורגני וויטמינים, ביצים הן ספקיות פופולריות לתזונה אנושית, המיוצרות ונצרכות ברחבי העולםבקנה מידה גדול 1,2. למרות שקליפות ביצה הן מחסומי הגנה טבעיים, הן שבירות מכדי לשמור על שלמותן במהלך הובלת הביצים ואחסונן. חילופי הגזים והחדירה המיקרוביאלית בין חלבון הביצה לסביבה, שיכולים להתרחש בקלות דרך נקבוביות זעירות על קליפות הביצים, יובילו לאובדןCO2 כמו גם להידרדרות באיכות הביצים 3,4. יתר על כן, סדקים זעירים בקליפות הביצים יגדילו את הסיכון לזיהום מיקרוביאלי. לכן, יש לפתח בדחיפות שיטות יעילות לשימור ביציות לתועלת כלכלית ולבריאות האדם.
נכון לעכשיו, ישנם שני סוגים של מסלולים לשימור ביצים. הדרך הראשונה היא לנטרל את המיקרואורגניזמים על קליפות הביצה 5,6,7,8. תהליך ההשבתה מאריך את תקופת שימור הביציות על ידי פינוי פני קליפת הביצה הרחק משחיקת מיקרואורגניזמים סביבתיים ולחות. מצד שני, ציפוי הנקבוביות והסדקים הזעירים על קליפת הביצה בחומרים פונקציונליים ספציפיים יכול לשמש גם כשיטה מצוינת למניעת אובדן אדי מים ו-CO2 מחלבון הביצה, כמו גם להגנה על קליפת הביצה מפני הרס מיקרואורגניזמים. מכיוון שהם פשוטים, יעילים וחסכוניים באנרגיה, ציפויים מושכים תשומת לב הולכת וגוברת לשימור ביציות. העקרונות העיקריים שחומרי ציפוי מתאימים צריכים לעמוד בהם הם יציבות כימית, חדירות יעילה, זמינות רחבה ובטיחות אמינה. חומרי הציפוי הנחקרים ביותר הם שמן 9,10, חלבונים11, ביופולימרים3 וצ'יטוזן12.
צ'יטוזן נחשב לחומר ציפוי פופולרי בגלל תכונותיו המצוינות של היווצרות סרטים, פעילות אנטיבקטריאלית ובטיחות13. הוכח כי השינויים הפיזיקוכימיים והזיהום המיקרוביאלי של הביצה מוגנים על ידי ציפוי צ'יטוזן, ששימש כדרך יעילה לשימור ביציות. עם זאת, כפולימר הידרופילי עם מחסום אדי מים וספיגת לחות לקוי, צ'יטוזן אינו יציב בסביבת לחות גבוהה, מגביל את השפעות השימור ומפחית את חיי המדף של ביצים במידה מסוימת.
כדי להתגבר על בעיה זו ולקדם את ביצועי שימור הצ'יטוזן, ננו-חלקיקים ספציפיים שימשו כחומר נואף בציפויים מבוססי צ'יטוזן. לפיכך, כחומר מילוי ננו בעל אופי אנטיבקטריאלי14, ננו כסף (Ag) מסומם לצ'יטוזן. תוספת Ag יכולה לא רק לשפר את תכונת המחסום של סרט צ'יטוזן, אלא גם לשפר את האפקט האנטיבקטריאלי שלו, שהוכח כמשפר את אפקט השימור של הציפוי. עם זאת, הצבירה הקלה והמבנה הפשוט של חלקיקי Ag עשויים להפחית את היציבות והעמידות של סרט הצ'יטוזן, אשר אומתו כמשופרים על ידי הפקדת ננו-חלקיקים ספציפיים. טיטניום דו חמצני (TiO2) הוא תרכובת תחמוצת מתכת טיפוסית בעלת תכונות מצוינות כגון יציבות כימית, רעילות נמוכה כמו גם עלויות סבירות. תכונות פונקציונליות אלה מעניקות ל-TiO2 פוטנציאל גדול בתחומי מחקר רבים15. לדוגמה, חלקיקי TiO2 יכולים לשמש כתוספים במכשירים רפואיים ובביו-חומרים בשל הדבקתם ופעילותם החיידקית. עם זאת, היישום בפועל של חלקיקי TiO2 מוגבל במידה רבה על ידי התרמודינמיקה הלא יציבה ומגמות הצבירה שלהם. לכן, סימום חומרים פונקציונליים ספציפיים לתוך TiO2 הוצע כדי להשיג את האפקט המשולב של פעילות אנטיבקטריאלית, פיזור משופר ויציבות תרמית.
במחקר זה, חומרים מרוכבים אנטיבקטריאליים Ag/TiO2 מסונתזים ומיושמים על ציפוי צ'יטוזן לשימור ביציות. תמונות SEM משמשות לניתוח המבנה והמורפולוגיה של חלקיקי Ag/TiO2 וקליפות הביצים. ביצועי השימור של הציפוי מוערכים ומושווים על ידי ירידה במשקל, יחידת Haugh, pH חלבון ומורפולוגיה של קליפת ביצה. מחקר זה מדגים את האפשרות והפוטנציאל של ציפויי צ'יטוזן מעורבבים ננו מרוכבים בשימור מזון.
1. סינתזה של חומרים מרוכבים ננו Ag/TiO2
2. הכנת ציפוי צ'יטוזן
3. תצפית מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM)
4. ניסויים בשימור ביציות
הערה: הביצים הטריות המוטלות הן ביצי עוף המסופקות על ידי חווה מקומית בשנג'ן, סין.
גודל החלקיקים של מרכיבי Ag/TiO2 נע בין 100-300 ננומטר, המושפע מתנאי הסינתזה (איור 1).
איור 1: תמונות SEM של חלקיקים מרוכבים Ag/TiO2 ביחסי רזולוציה שונים (500 ננומטר). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
ירידות המשקל של דגימות ביצים שונות במהלך האחסון מוצגות בטבלה 1. ירידה מוגברת במשקל ברציפות נובעת מבריחת חלבון CO2 ואדי מים דרך הנקבוביות על קליפות הביצים, מה שמוביל להידרדרות באיכות הביצים. הירידה במשקל של ביצי WE גבוהה בהרבה מאשר בקבוצות אחרות, מה שמעיד על יכולת ההגנה של ציפויים מבוססי צ'יטוזן לאיכות הביצים. לאחר הציפוי על ידי צ'יטוזן, הסדקים בקליפת הביצה מצטמצמים באופן ניכר, מה שמגביל את אובדן ה-CO2 ואדי המים.
זמן אחסון (יום) | ירידה במשקל (wt%) | ||||
אנחנו | Ag/TiO 2-CS0 | Ag/TiO 2-CS1 | Ag/TiO 2-CS2 | Ag/TiO 2-CS3 | |
6 | 0.78±0.09ג | 0.69±0.09ג | 0.53±0.12א | 0.49±0.21א,ב | 0.48±0.06א |
11 | 1.85±0.13ב | 1.54±0.18ג | 1.34±0.15א | 1.28±0.13א,ב | 1.26±0.21א |
16 | 2.53±0.21ב | 2.34±0.27ג | 1.95±0.21b | 1.93±0.35א | 1.89±0.38א |
21 | 4.01±0.25ג | 3.63±0.32ב | 3.21±0.09ב | 3.18±0.22א | 3.09±0.16א |
26 | 4.86±0.34ב | 4.18±0.25ב | 4.09±0.39ב | 4.05±0.29א | 3.98±0.21א,ב |
31 | 5.62±0.41א | 5.01±0.51ב | 4.76±0.48א | 4.69±0.17א | 4.58±0.35 א |
באותה שורה עם אותיות שונות שונות שונות זה מזה באופן משמעותי. |
טבלה 1: השונות של ירידה במשקל של ביצים שונות במהלך זמן האחסון.
יתר על כן, ציפויי צ'יטוזן מסוממים בחלקיקי Ag/TiO2 יעילים יותר באיטום הנקבוביות ויצירת שכבות צפופות, מה שמוביל לירידה במשקל מעוכבת במידה ניכרת. ככל שהמינון של חלקיקי Ag/TiO2 גדול יותר, כך ההשפעה של הציפוי המתאים להפחתת CO2 ואובדן אדים חזקה יותר (איור 2).
איור 2: תמונות SEM של משטחי קליפת הביצה הגולמיים ומשטחי קליפת הביצה שטופלו בצ'יטוזן ביום 0, 11, 16 ו-31. (A) משטחי קליפת הביצה הגולמית; (B) משטחי קליפת ביצה שטופלו בצ'יטוזן. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
יחידת Haugh מחושבת על ידי השינויים הקשורים לגיל של החלבונים הלבנים, המשקפים את וריאציה של דילול החלבון, הקשורה קשר הדוק לפרוטאוליזה של החלבון ול-pH של אלבומין. הירידה המהירה יותר והערכים הנמוכים יותר של יחידת Haugh בקבוצת ה-WE מאשר קבוצות ציפוי הצ'יטוזן מצביעים על יכולת ההגנה האפקטיבית של צ'יטוזן. ביצים בקבוצות שטופלו בצ'יטוזן שומרות על דרגה A עליונה במשך 26 ימים, בעוד שקבוצת WE יורדת לדרגה B לאחר יום 6. הערכים של יחידת Haugh ב-Ag/TiO 2-CS1 הם תמיד הגבוהים ביותר מבין כל הקבוצות המטופלות, מה שמצביע על כך: (i) תוספת של חלקיקי Ag/TiO2 תורמת לאפקט סינרגטי עם צ'יטוזן, שהם יעילים יותר לייצוב הציפוי ולבקרת חיידקים; בעוד (ii) עודף חלקיקי Ag/TiO2 יהרוס את המבנה השכבתי של ציפוי הצ'יטוזן, מה שיוביל ליכולת שימור ירודה יותר. על פי התוצאות בטבלה 2, צ'יטוזן מסומם עם חלקיקי Ag/TiO2 של 1% (wt) מציג את הביצועים הטובים ביותר להאטת ההידרדרות של חלבוני חלבון, ובכך מאריך את חיי המדף עד 30 יום.
זמן אחסון (יום) | יחידת הו | ||||
אנחנו | Ag/TiO 2-CS0 | Ag/TiO 2-CS1 | Ag/TiO 2-CS2 | Ag/TiO 2-CS3 | |
6 | 73.23±0.68ג | 80.32±0.59b | 83.34±0.12א,ב | 81.60±1.41א | 77.06±0.35א |
11 | 69.86±3.25ג | 75.64±1.27ב | 77.18±2.45א,ב | 76.05±3.13א,ב | 74.32±1.41א |
16 | 67.31±2.43ב | 73.88±2.06ב | 75.36±1.34א | 75.61±2.15א | 71.53±2.18א |
21 | 62.93±5.32ג | 71.06±3.88ג | 73.20±3.09א | 72.94±3.52א | 69.35±1.34א,ב |
26 | 58.55±2.89 ב | 69.85±1.53ג | 71.85±2.39א | 70.34±4.19א,ב | 66.21±2.10א |
31 | 55.24±3.04א | 65.26±0.51א | 69.31±3.18א | 68.96±1.17א | 62.64±4.03א |
באותה שורה עם אותיות עיליות שונות שונות שונות באופן משמעותי |
טבלה 2: הווריאציה של יחידת Haugh של ביצים שונות בזמן האחסון.
השונות ב-pH של חלבומין נגרמת על ידי פינוי CO2, מה שמוביל לעלייה איטית של ערכי ה-pH עם זמן האחסון. ה-pH של ביצי WE עולה בחדות תוך 10 ימים, ומגיע עד 9.5 ביום ה-30. פירוק החלבונים לשומן ופפטון מוביל לירידה ב-pH. לאחר הגנה על ידי ציפוי צ'יטוזן, ה-pH החלבוניים מציג מגמות דומות תוך 20 יום, שמתייצבות בסביבות pH 8.0-8.2. לאחר היום ה-20, ערכי ה-pH של Ag/TiO 2-CS0 ו-Ag/TiO2-CS1 מראים תנודות קלות בסביבות pH 8.2 ומתייצבים בין pH 7.5-8.0 עבור Ag/TiO2-CS2 ו-Ag/TiO2-CS3. ה-pH היציב יחסית של הקבוצות שטופלו בהשוואה לקבוצת WE ממחיש את ההפחתה האפקטיבית של אובדןCO2 באלבומין (איור 3). תוספת של חלקיק Ag/TiO2 מקדמת את יציבות הצ'יטוזן, שיכול לשמור על יציבות טובה עד 31 יום (איור 4).
איור 3: שינויים ב-pH של ביצים שונות במהלך זמן האחסון. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 4: תמונות SEM של משטחי קליפת ביצה מצופים Ag/TiO2-CS ביום 0, 11, 16 ו-31. (א) Ag/TiO 2-CS1; (ב) Ag/TiO 2-CS2; (ג) Ag/TiO 2-CS3. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
ניתן להקל על בעיות של שימור איכות חלבון הביצה על ידי ציפוי צ'יטוזן, שהוכח כדרך יעילה להאריך את חיי המדף של הביצים. עם זאת, השימוש בציפוי צ'יטוזן יחיד יוצר מספר בעיות כגון חוסר יציבות, הגבלת תקופת השימור ויישום בפועל של ציפויים מבוססי צ'יטוזן. יש לציין כי סימום ננו-חלקיקים אנטיבקטריאליים ספציפיים לצ'יטוזן הוצע כדי להאריך את חיי המדף עוד יותר. במחקר זה, חלקיקי Ag/TiO2 מסונתזים בהצלחה ומסוממים לציפוי צ'יטוזן, מה שיכול להאריך את תקופת השימור ל-30 יום לפחות.
תמונות SEM משמשות לניתוח המבנה והמורפולוגיה של חלקיקי Ag/TiO2 , כמו גם המורפולוגיה של קליפות הביצה המצופות. ביצועי השימור של ציפויים מרוכבים מוערכים על ידי ירידה במשקל, יחידת Haugh, pH חלבון ומורפולוגיה של קליפת הביצה של הדגימות. אימוץ חומרים מרוכבים Ag/TiO2 תורם להשפעה סינרגטית על צ'יטוזן, מה שיכול להאריך את תקופת השימור עוד יותר.
גדלי החלקיקים של חומרים מרוכבים Ag/TiO2 הם בטווח של 100-300 ננומטר (נשלט על ידי תנאי הסינתזה), מה שעלול לחסום את הנקבוביות בחלק העליון של קליפת הביצה ולשפר את ביצועי השימור. עם זאת, עודף חלקיקי Ag/TiO2 יהרוס את המבנה השכבתי של ציפוי הצ'יטוזן, וכתוצאה מכך יכולת שימור נמוכה יותר.
עם זאת, נכון לעכשיו, הביצועים של ציפוי צ'יטוזן במחקר זה מוגבלים על ידי מיני החלקיקים והריכוזים הקיימים, מה שדורש אופטימיזציה במחקרים עתידיים.
השיטות במחקר זה מדגימות חומרי ציפוי חדשניים, שיכולים להיות מעורבבים על ידי ננו-חלקיקים ספציפיים לתוך קודמן הציפוי, כדי להשיג השפעות קומבינטיביות של ננו-חלקיקים וקודמן, כמו גם להכין ציפויים רב-תכליתיים חדשים בתחום שימור המזון.
למחברים אין מה לחשוף.
עבודה זו נתמכה על ידי מעבדת המפתח של גואנגשי לאנרגיה חדשה וקרן לחיסכון באנרגיה בבניין (מס' 19-J-21-17, 19-J-21-30), פרויקט המחקר המדעי של אוניברסיטאות גואנגשי (2020KY06029) וקרן החדשנות המשותפת של אוניברסיטת ווהאן לטכנולוגיה ואוניברסיטת טיבט (LZJ2020003).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
acetate | Aladdin | 64-19-7 | GR, 99.8% |
Benzenesulfonic acid | Aladdin | 03/11/1998 | 98% |
Chitosan | Aladdin | 9012-76-4 | <200 mPa•s |
Deionized water | prepared by ourselves | - | 18 MΩ•cm |
Electronic precision balance | Sartorius | BSA124S-CW | |
Ethanol | Aladdin | 64-17-5 | ≥99.8% |
Formate | Aladdin | 64-18-6 | Standard for GC, >99% |
pH meter | HeYi | PHS-25 | |
Scanning electron microscope | Hiatchi | SU8010 | |
Silver nitrate (AgNO3) | Aladdin | 7761-88-8 | ≥99.9% |
Sodium borohydride (NaBH4 ) | Aladdin | 16940-66-2 | 98% |
Temperature humidity chamber | YiHeng | LHS-50CH | |
Titanium butoxide (TBOT) | Aladdin | 5593-70-4 | CP,98% |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved