מודל תרומה של בעלי חיים גדולים לאחר מוות במחזור הדם וזילוח אזורי נורממי להערכת לב

Summary

הפרוטוקול מתאר מודל של תרומה של בעלי חיים גדולים (חזיריים) לאחר מוות במחזור הדם, ואחריו זילוח אזורי נורמתרמי של בית החזה, המדמה באופן הדוק את התרחיש הקליני בהשתלת לב, ויש לו פוטנציאל להקל על מחקרים ואסטרטגיות טיפוליות.

Abstract

העלייה בביקוש להשתלות לב לאורך השנים הגבירה את העניין בתרומה לאחר מוות במחזור הדם (DCD) כדי להרחיב את מאגר תורמי האיברים. עם זאת, תהליך DCD קשור לסיכון לפגיעה ברקמת הלב עקב התקופה הבלתי נמנעת של איסכמיה חמה. זילוח אזורי נורממי (NRP) מאפשר הערכת איברים באתרם , ומאפשר רכישת לבבות שנקבעו כבני קיימא. כאן, אנו מתארים מודל רלוונטי מבחינה קלינית של בעלי חיים גדולים של DCD ואחריו NRP. מוות במחזור הדם נקבע בחזירים מורדמים על ידי הפסקת אוורור מכני. לאחר תקופת איסכמיה חמה שנקבעה מראש, נעשה שימוש במחמצן קרום חוץ-גופי (ECMO) למשך תקופת NRP הנמשכת לפחות 30 דקות. במהלך תקופת רפרפוזיה זו, המודל מאפשר איסוף ביופסיות שונות של שריר הלב ודגימות דם לצורך הערכה לבבית ראשונית. לאחר גמילת NRP, ניתן לבצע הערכות ביוכימיות, המודינמיות ואקו לב של תפקוד הלב וחילוף החומרים לפני רכישת איברים. פרוטוקול זה מדמה באופן הדוק את התרחיש הקליני שתואר בעבר עבור DCD ו- NRP בהשתלות לב, ויש לו פוטנציאל להקל על מחקרים שמטרתם להפחית את הפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה ולשפר את שימור תפקוד הלב והתאוששותו.

Introduction

מעל 300,000 אנשים מתים בצפון אמריקה מדי שנה מאי ספיקת לב (HF); השתלת לב נותרה אפשרות הטיפול היחידה עבור חלק מחולים אלה עם מחלה סופנית¹. מבחינה היסטורית, המקור הבלעדי להשתלת לב היה לבבות תורמים שהושגו לאחר קביעת מוות נוירולוגית (NDD), אך גם אז, רק כ-40% מהם היו מתאימים להשתלה². בין 15% ל-20% מהחולים נפטרים בזמן ההמתנה לתרומת לב, כאשר מחסור בלבבות תורמים הוא אחת הסיבות ליצירת פער בין הלבבות הזמינים ללבבות הזקוקים². על מנת להגדיל את מאגר תורמי האיברים, אחד השיקולים החשובים הוא השימוש בלבבות שנתרמו לאחר מוות במחזור הדם (DCD)³. קיימת רתיעה משימוש בלבבות DCD מכיוון שאיברים אלה נשלחים תמיד לתקופה של איסכמיה לא מוגנת (חמה) לאחר הפסקת זרימת הדם ועלולים לסבול מנזק בלתי הפיך. למרות שדיווחים על השתלת לב DCD מוצלחת עם תוצאות מוקדמות מצוינות קיימים^4,5, יש צורך לפתח שיטת הערכה מתוקפת כדי לקבוע אם לבבות אלה שמישים ולחזות את הביצועים שלהם לאחר ההשתלה ^6,7. כדי להגביל תקופות איסכמיות של לבבות DCD ולנטר אותם ברציפות במהלך אחסון והובלה, פותחו מערכות זילוח לב ex-situ ⁸. עם זאת, טכנולוגיה זו מסתמכת על מכונות מורכבות עם ציוד זילוח, ויש לה עלות גבוהה מראש ללא כל ערובה כי האיבר שנרכש יהיה מתאים להשתלה. פרוטוקול חדשני להשתלת לב DCD המבוסס על זילוח אזורי נורמותרמי (NRP) הוצע על ידי מסר ואחרים³. טכניקה זו כוללת שחזור זילוח שריר הלב בזמן שהלב עדיין נמצא בתורם ולמעט מחזור המוח. זה מאפשר הערכה תפקודית באתרו לפני רכש³.

בעת שימוש במודלים של בעלי חיים גדולים, הלב החזירי הוא אחת הפלטפורמות המועדפות לביצוע מחקר ניתוחי לב בהתחשב בדמיון האנטומי שלו ללב האנושי. עם זאת, יש לקחת בחשבון כמה גורמים חשובים בלבבות חזיריים בעת שימוש במודל זה. לדוגמה, רקמת לב חזירית היא שברירית מאוד פריכה והיא נוטה לקרעים, במיוחד בעורק הריאה ובאטריום הימני⁹. גורם חשוב נוסף שיש לקחת בחשבון הוא שהלב החזירי רגיש מאוד לאיסכמיה ונוטה להפרעות קצב, ולכן יש לתת תרופות אנטי-אריתמיות באופן שגרתי לכל בעל חיים לפני הניסוי; עם זאת, זה עדיין נחשב מודל מתאים לחקר איסכמיה חריפה בהשתלת לב⁹.

כתב יד זה מתאר מודל של בעלי חיים גדולים (חזיריים) של תרומה לאחר מוות במחזור הדם ואחריו זילוח אזורי נורמתרמי של בית החזה, המדמה באופן הדוק את התרחיש הקליני בהשתלת לב ויש לו פוטנציאל להקל על מחקרים טיפוליים חדשניים ואסטרטגיות למחקר תרגומי.

Protocol

הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של Centre de Recherche du Centre Hospitalier de l'Université de Montréal (CRCHUM) אישרה את כל פרוטוקולי הניסוי, ובעלי חיים טופלו בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. לצורך פרוטוקול זה נעשה שימוש בחזירים לבנים גדולים או נקבות בנות 3-4 חודשים במשקל 50-60 ק"ג. גודל בעלי החיים יכול להשתנות בהתאם למטרות הניסוי של החוקרים.

1. הכנת בעלי חיים והשראת הרדמה

1. Premedate את החיה באמצעות הזרקה תוך שרירית של אטרופין (0.04 מ"ג / ק"ג), midazolam (0.3 מ"ג / ק"ג), קטמין (20 מ"ג / ק"ג). יש לתת איזופלורן בריכוז גאות ושפל של 1%-3% ב-3 ליטר/דקה O₂, תוך שימוש במסכת פנים להשראת הרדמה ותחזוקה.
2. ודא הרדמה נאותה על ידי בדיקת טונוס לסת רגוע, והיעדר כאב באמצעות תגובת צביטת בוהן. ודא כי בעל החיים ממוקם במצב דקוביטוס גבי ומתוחזק בנורמותרמיה באמצעות שמיכה מחממת.
3. לאחר אישור הלימות ההרדמה, לבצע אינטובציה orotracheal באמצעות צינור endotracheal 6.5-8 מ"מ כמתואר ב ¹⁰.
4. הנח את צג ריווי החמצן על האוזן או השפה התחתונה של בעל החיים לניטור רציף. כוונן את האוורור ללחץ סופי חיובי (PEEP) של 5 ס"מ H 2 O, לחץ השראתי שיא (PIP) של 15 ס"מ H 2 O, שבריר חמצן השראה (FIO 2) של 0.5, וקצב נשימה (RR) של 15 נשימות לדקה המגיע לנפח גאות (TV) של 6-8 מ"ל/ק"ג, ולחץ חלקי רגיל של O 2 ו-CO ₂. כוונן את RR כדי לשמור על רמת CO₂ של 35-45 מ"מ כספית.
5. קבל גישה היקפית תוך ורידית דרך וריד האוזן באמצעות קטטר 20 גרם. התחל עירוי תחזוקה של תמיסת מלח רגילה (0.9% NaCl) ולתת 2 גרם של מגנזיום גופרתי (MgSO₄) כמו בולוס תוך ורידי כדי למנוע הפרעות קצב.
6. הכינו את אתרי הניתוח על ידי גילוח וקרצוף נאות של בית החזה והמפשעות. יש לחטא את המפשעות והצוואר באמצעות כלורהקסידין ולעטוף כראוי תוך מתן גישה ורידית ועורקית.
7. הניחו את כרית האלקטרודה הצווארית על גב החיה. מקם את בעל החיים במצב Trendelenburg כדי להקל על גישה ורידית מרכזית.
8. אתר את וריד הצוואר הימני באמצעות אולטרסאונד. לאחר האיתור, באמצעות מחט, להיכנס לעור בזווית של 45 מעלות עד הדם נראה המחט נראה בווריד על אולטרסאונד.
9. הניחו את חוט ההנחיה במחט ולאחר מכן הכניסו נדן ורידי מרכזי מלעורי 7 Fr מעל חוט המנחה.
10. הסר את חוט ההנחיה תוך שמירה על מכנס הנדן במקומו, ולאחר מכן הכנס צנתר ברבורים-גנץ כדי להבטיח מדידות תפוקת לב וצנתור לב ימין.
    הערה: ניתן להשתמש בווריד הצוואר השמאלי במקום בימין. אם הגישה אינה אפשרית, הכנס את הנדן ישירות לווריד הצוואר הפנימי (שמאל או ימין) לאחר סטרנוטומיה של קו האמצע. במקרה כזה, הקפד לנתח את הווריד.
11. באותה טכניקה, מחדירים צנתר ורידי מרכזי (למשל, לומן כפול) לווריד הצוואר השמאלי.
12. הכנס עוד נדן ורידי מרכזי מלעורי 7 Fr לתוך וריד הירך הימני באמצעות טכניקת סלדינגר כמתואר בשלבים 1.7. ל 1.10., להכנסת קטטר מוליך לחדר ימין (RV). זה יכול להיעשות באופן מלעורי עם הנחיית אקו, או לאחר סטרנוטומיה קו האמצע.
13. אפשר פרק זמן של יציבות למשך 10 דקות לאחר האינטובציה והמניפולציה, ולאחר מכן מדוד פרמטרים המודינמיים ותפקודי לב בסיסיים, כולל לחצים ריאתיים ומערכתיים, תפוקת לב, לולאות נפח לחץ RV ו- LV ואקוקרדיוגרפיה טרנס-חזה.

2. הקמת גישה כירורגית

1. באמצעות עט צוואר, לבצע חתך קו האמצע מאזור אמצע צוואר הרחם אל xiphoid. לאחר מכן, לחלק את השומן התת עורי, שכבה אחר שכבה, לאורך קו האמצע באמצעות electrocautery כדי להגיע peri-sternum.
2. חתכו סביב החריץ של עצם החזה והשתמשו באצבע כדי לסגת ולטאטא רקמות רכות מתחת לחזה. פתח את עצם החזה עם מסור עצם וודא שעצם החזה מחולקת לחלוטין תוך זהירות עם הווריד מתחת לחלק העליון של עצם החזה. יש לצרוב את עצם החזה ו/או למרוח שעוות עצם כדי להבטיח המוסטאזיס נאות.
3. באמצעות electrocautery, לנתח ולהסיר את בלוטת התימוס על ידי הרמה אותו מן קרום הלב. צרוב את כלי הדם המספקים את בלוטת התימוס מאבי העורקים ואת הווריד הנבוב העליון (SVC) כדי למנוע דימום.
4. בזהירות לחתוך את קרום הלב פתוח עם cautery. הכנס אצבעות מתחת לקרום הלב בזמן חיתוך כדי למנוע פגיעה בלב.
5. יש לתת 300 יחידות/ק"ג של הפרין IV להשגת נוגדי קרישה מערכתיים. אם הבדיקה זמינה, ודא זמן קרישה מופעל (ACT) ˃ 300 שניות.

3. הפסקת טיפולים מאריכי חיים והכרזת מוות

1. יש לתת בולוס של 3 מ"ג/ק"ג פרופופול IV, ולאחר מכן להפסיק את האוורור המכני ולנתק את הצינור האנדוטרכאלי.
   הערה: שלב זה מתאים ל"נסיגה של תמיכת חיים" כדי להפעיל את הזילוח האזורי הנורממי. לגבי תנאי המתת חסד, עיין בסעיף 8.
2. עקוב אחר לחץ עורקי ורוויה היקפית O₂ . התחל איסכמיה חמה פונקציונלית זמן כאשר לחץ סיסטולי < 50 מ"מ כספית.
3. לקבוע מעצר במחזור הדם כאשר יש אסיסטולה (או פרפור חדרים) והיעדר פעימה עורקית. להתחיל שלב תצפית מינימלי של 5 דקות לאחר שנקבע מעצר מחזור הדם (תקופת המתנה) ולאחר מכן להכריז על מוות של בעלי חיים.

4. מיקום של זילוח אזורי נורמתרמי thoracoabdominal

1. באמצעות cautery, בזהירות לנתח את החלל aortopulmonary. החזירו את דרכי זרימת ה-RV בנחיתות, את עורק הריאה משמאל ואת אבי העורקים מימין כדי למנוע נגעים ישירים לאחרון. קח עזרה עוזרים במידת הצורך במהלך שלב זה.
2. לנתח ולקשור את כלי אבי העורקים העל-אבי העורקים כדי למנוע ולהוציא זילוח מוחי. לחלופין, להחיל מהדק צולב גדול על כלי הדם.
3. הכנס שני צנתרים של 18 גרם לקרוטיד באופן דו-צדדי לחסימה כדי להעריך זרימת דם פוטנציאלית למוח. לאסוף ולמדוד דם במהלך הניסוי ולהזרים מחדש באמצעות מעגל NRP.
4. בעזרת המצנבאום והמלקחיים ישרי הזווית, מנתחים בעדינות בין ה-SVC לעורק הנומינציה, ובין ה-IVC לקרום הלב. הקיפו את ה-SVC וה-IVC באמצעות סרט טבור או תפר משי פשוט והדקו אותם בעזרת חוסם עורקים.
5. באמצעות תפר 3-0, מניחים שני תפרי ארנק-חוט קונצנטריים על אבי העורקים העולה הדיסטלי adventitia; הימנעו מתפרים בעובי מלא. הניחו תפר מיתר ארנק על האטריום הימני (RA). אבטחו את כל התפרים בעזרת חוסם עורקים.
6. הקמה ותכנון מערכת NRP בהתאם לצרכי החוקרים והניסוי. עבור פרוטוקול זה, השתמש במעגל ECMO עם משאבה צנטריפוגלית, עם 2 ליטר של תמיסת קריסטלואיד המכילה 500 מ"ג סולומדרול, 200 מ"ל של 8.4% סודיום ביקרבונט (NaOH), 300 יחידות / ק"ג של הפרין, ו -2 גרם של MgSO₄.
   הערה: המערך המשמש כאן דומה לזה המשמש את רופאי הזילוח של המוסד במחלקה לניתוחי לב.
7. באמצעות צינורית עורקית 17 עד 21 F, קנוס את אבי העורקים, ולאחר מכן הידק את חוסם העורקים המחזיק את תפר חוט הארנק כדי לאבטח את הצינורית במקומה.
   הערה: לחלופין, הכנס צינורית חמצן חוץ-גופית (ECMO) באמצעות טכניקת סלדינגר כדי למזער את איבוד הדם. שיטה נוספת כוללת שימוש בצינורית עורקית עוקפת סטנדרטית. צינורית אבי העורקים מחוברת לקו העורקי של מעגל NRP באמצעות מחבר 3/8-3/8; הקפידו על אוורור מלא כדי למנוע תסחיף אוויר.
8. צור חתך של 5 מ"מ במרכז מיתר הארנק על RA, ולאחר מכן הרחב אותו באמצעות כלי בעל זווית קטנה כמו זווית ישרה או הצמדה. מכסים את החתך באצבע כדי למנוע דימום מוגזם.
9. השתמש צינורית ורידי דו שלבי כדי cannulate RA ולאחר מכן להדק את התפרים חוט הארנק באמצעות חוסם עורקים כדי לאבטח את הצינורית במקומה.
10. חבר את הצינוריות לקו הוורידי של מעגל NRP באמצעות מחבר 1/2-3/8 וודא אוורור מלא כדי למנוע נעילת אוויר במערכת.
11. ודא כי לפחות 15 דקות חלפו בין ההכרזה על המוות לבין תחילת NRP כדי להקיף את הזמן הדרוש בהכנה לתרגול קליני, ניקוז וגישה ללב.
12. יש להתחיל NRP 15 דקות לאחר תחילת זמן איסכמיה חמה פונקציונלית. לשמור על נורמותרמיה לאורך כל ההליך. כוונן את קצבי הזרימה בהדרגה כדי להגיע למדד זילוח של 2.5 ליטר/דקה/מ"^{ר 2}. הפעל מחדש את האוורור המכני עם FIO₂ של 50% וטלוויזיה של 6 מ"ל/ק"ג.
    הערה: שנה הגדרות אלה בהתאם לתכנון הניסוי.
13. יש להחדיר ברציפות 10 מק"ג/ק"ג/דקה של דופמין ו-4 יחידות/דקה של וזופרסין IV. השתמש אפינפרין ונוראפינפרין במהלך זילוח ראשוני ולאחר מכן titrate אותם לפי הצורך כדי לסייע בוויסות הלחץ תוך שמירה על לחץ עורקי מעל 50 מ"מ כספית.

5. שמירה על רפרפוזיה ומטרות לגמילה

1. יש לסובב את הלב למשך 30 דקות לפני שתנסו להיגמל מ-NRP. אם הגמילה אינה מצליחה, בצעו 15 דקות נוספות של רפרפוזיה לתמיכה ב-NRP לפני שתנסו להיגמל שוב למשך זמן פרפוזיה מקסימלי כולל של 180 דקות.
2. המשך להערכת לב לאחר גמילה מוצלחת. אם הגמילה לא מושגת לאחר זמן זה, הפסיקו את הניסוי ודווחו על הבעיה.
   הערה: יש להתאים זאת למטרות של כל חוקר.
3. להעריך את קריטריוני הגמילה של NRP ולוודא שכל הקריטריונים מתקיימים כמפורט בטבלה 1.

6. הערכת התאוששות לב

1. צור ניתוחי לולאה של נפח לחץ (PV) כדי למדוד את התכווצות הלב. צנתר ההולכה מאפשר מדידות רציפות של יחסי LV-PV.
   1. השג הקלטות מצב יציב כדי ליצור פרמטרים תלויי נפח, עבודת שבץ ולחץ מפותח, והסתר את ה- IVC עם סרט טבור כדי ליצור פרמטרים בלתי תלויים בנפח באמצעות חסימה, כלומר עבודת שבץ הניתנת לגיוס מראש.
2. מדדו לחץ ורידי מרכזי, לחץ עורק ריאתי, תפוקת לב, לחץ RV ולחץ טריז נימי ריאתי באמצעות צנתר ברבורים-גנץ שהוכנס בתחילת הניסוי.
3. לנתח את תפקוד הלב באמצעות אקוקרדיוגרפיה באמצעות בדיקה טרנס-וושטית סטנדרטית ובדיקה טרנס-חזה הממוקמת ישירות על הלב.
4. בצע הערכות מטבוליות על ידי איסוף דגימות דם עורקי וורידי לניתוחים. יש לשאוב דם ישירות מהסינוס הכלילי כדי להעריך את תפקוד חילוף החומרים בלב באופן ספציפי. לנתח גזים בדם ורמות לקטט.
5. בנוסף, יש לאסוף ביופסיות שריר הלב מה-RV וה-LV במידת הצורך. קבל דגימות מאיברים אחרים להשתלה בעלי עניין (למשל, ריאות, כבד, כליות), בהתאם למטרות החוקר.

7. הסרת NRP והערכת לב

1. כאשר עומדים בקריטריונים לגמילה, הפסיקו את NRP. הסר את הצינורית מה- RA והדק במהירות את תפר חוט הארנק כדי למזער את איבוד הדם. אבטחו את התפר באמצעות קשרים ועקבו אחר אותו הליך להסרת צינורית אבי העורקים.
2. הערך את תפקוד הלב כל 30 דקות במשך שעתיים לאחר הפסקת NRP כמתואר בשלבים 6.1. ל-6.4.

8. סיום הניסוי

1. לאחר שעתיים, מניחים קטטר קרדיופלגיה 16 G או 18 G באבי העורקים העולה. חבר את הצינורית למעגל NRP.
2. לאחר מכן, לשחרר את הלחץ על חללי הלב הימני על ידי חתך IVC ואת החללים השמאליים על ידי חתך אטריום שמאל באמצעות cautery.
3. מהדקים את אבי העורקים העולה לאחר החדרת הצינורית ונותנים 1.5 ליטר של תמיסת קרדיופלגיה דל נידו ב 4 מעלות צלזיוס ללב. ודא כי לחץ זילוח הוא 50 מ"מ כספית.
4. יש להפסיק את האוורור המכני ולהניח ברד קרח (0.9% NaCl) בחלל בית החזה לאחר התחלת הקרדיופלגיה לקירור. המשך עם cardiectomy באופן מסורתי לאחר עירוי cardioplegia הושלמה.
5. השתמש בלב שנאסף כדי לקבל ביופסיות שריר הלב נרחב להערכה והערכה. בצע ביופסיות אחרות מאיברים אחרים (כגון ריאות, כבד, כליות) בהתאם לתכנון הניסוי ומטרת החוקרים
   הערה: איור 1 מספק סיכום של שלבי הפרוטוקול המוצגים וטבלה 1 מספקת הגדרה של הפרמטרים והקריטריונים ששימשו במחקר זה.

איור 1: סיכום סכמטי של פרוטוקול הניסוי. קיצורים: NRP = זילוח אזורי נורממי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

	הגדרה/קריטריונים
תקופת איסכמיה חמה פונקציונלית	תקופה שמתחילה כאשר הלחץ הסיסטולי < 50 מ"מ כספית ומסתיימת כאשר NRP מופעל. בפרוטוקול זה, פרק זמן זה הוא 15 דקות
מעצר במחזור הדם	זה נקבע כאשר הלב הוא אסיסטולה או בפרפור חדרים
תקופת המתנה	תקופה שמתחילה במעצר מחזור הדם ומסתיימת בהכרזת המוות. בפרוטוקול זה, פרק זמן זה הוא 5 דקות
גמילה מוצלחת מ-NRP	שימוש מינימלי של inotropes ו vasopressors
	CI > 2.2 ליטר/דקה/מטר2
	מפה > 55 מ"מ כספית
	RAP < 15 מ"מ כספית
	PCWP < 15 מ"מ כספית
	תפקוד LV ו-RV רגיל

טבלה 1: הגדרה מייצגת של פרמטרים וקריטריונים המשמשים בפרוטוקול זה. קיצורים: CI = אינדקס לב; MAP = לחץ עורקים ממוצע; NRP = זילוח אזורי נורממי; PCWP = לחץ טריז נימי ריאתי; RAP = לחץ פרוזדורים ימני.

תוצאות

מודל פרה-קליני זה שימש בהצלחה במוסד שלנו לניסויים מרובים. ראשית, הראינו כי לבבות DCD, שבתחילה היו מבולבלים עם NRP, הדגימו התאוששות תפקודית דומה לאחר ההשתלה בהשוואה לתרומת לב פועם קונבנציונלית שנשמרה עם אחסון קר. יתר על כן, השתמשנו בפרוטוקול זה כדי להראות כי הערכה תפקודית לבבית לאחר NRP ניבאה הת?...

Discussion

כתב יד זה מתאר תרומת מודל של בעלי חיים גדולים לאחר מוות במחזור הדם (DCD) ואחריה זילוח אזורי נורמתרמי של בית החזה. בניסוי זה, הלב מנוטרל למשך 30 דקות לפחות ומקסימום 3 שעות לפני שהוא נגמל ממעגל האקמו. לאחר מכן הלב מתפקד בכוחות עצמו במשך שעתיים, מה שמאפשר הערכת לב חשובה בטווח הקצר. לכן, המגבלה העיקר?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Amiodarone			As available in the institution
Angiocath 20G	BD	381704
Atropine 0.4 mg/mL			As available in the institution
Biomedicus Centrifugal Pump	Medtronic
Cardioplegia Solution (Del Nido)	in-house made		Another solution can be used at the discretion of the researcher
Cautery Pencil	Covidien	E2515H
Central Venous Catheter double-lumen	Cook Medical	C-UDLM-501J-LSC
Central Venous Sheath Introducer 7 Fr
Conductance Catheter
CPB pack	Medtronic
DLP Aortic Root Cannula	Medtronic	12218
DLP double-stage venous cannula (29 or 37 F)	Medtronic
Dobutamine			As available in the institution
Dopamine			As available in the institution
Electrode Polyhesive	Covidien	E7507
EOPA Arterial Cannula (17 or 21 F)
Epinephrine			As available in the institution
O2 Face Mask			As available in the institution
Gloves, Nitrile, Medium	Fischer	27-058-52
Heparin 1000 IU/mL			As available in the institution
Inhaled Isofurane			Provided by the institution's animal facility
Jelco 16 or 18 G catheter
Ketamine inj. 50 mL vial (100 mg/mL)	Health Canada		Health Canada approval is required
Lidocaine/Xylocaine 1%			As available in the institution
Magnesium Sulfate 5 g/10 mL			As available in the institution
Midazolam inj. 10 mL vial (5 mg/mL)	Health Canada		Health Canada approval is required
MPS Quest delivery disposable pack	Quest Medical	5001102-AS
Norepinephrine			As available in the institution
Normal Saline (NaCl 0.9%) 1L bag	Baxter	JB1324
Pipette Tips 1 mL	Fisherbrand	02-707-405
Propofol 1 mg/mL			As available in the institution
Rocuronium			As available in the institution
Set Admin Prim NF PB W/ Checkvalve	Smith Medical	21-0442-25
Sodium Bicarbonate (NaOH) 8.4%			As available in the institution
Sofsil 0 wax coated	Covidien	S316
Solumedrol 500 mg/5 mL			As available in the institution
Suction Tip	Covidien	8888501023
Suction Tubing 1/4'' x 120''	Med-Rx	70-8120
Suture 3.0 Prolene Blu M SH	Ethicon	8523H
Suture 5.0 Prolene BB	Ethicon	8580H
Suture Prolene Blum 4-0 SH 36	Ethicon	8521H
Suture BB 4.0 Prolene	Ethicon	8881H
Tracheal Tube, 6.5 mm	Mallinckrodt	86449
Vasopressin			As available in the institution