1. סיליקה ג'ל סלברי

1. יוצקים את ג'ל הסיליקה לבקבוק ארלנמייר. המשקל של חומר האריזה צריך להיות בערך 50x מזה של המדגם המופרד. אם התרכובות המופרדות יש ערכי R_f דומים מאוד, אז זה עשוי לדרוש באמצעות כמות גדולה יותר של סיליקה לכל מדגם, שהוא המקרה בדוגמה זו.
   1. מניחים 10 גרם של סיליקה בבקבוק ארלנמאייר, שכן 50 מ"ג של מדגם (45 מ"ג פלואורנון ו 5 מ"ג של טטרפנילפורפירין) מבודדים.
2. הוסף את מערכת הממס (hexane /dichloromethane, 70%: 30%) לבקבוק ארלנמאייר המכיל את ג'ל סיליקה. הוסף מספיק ממס כדי להבטיח כי כל ג'ל סיליקה הוא מפוף היטב. הסיליקה לא תתמוסס, אבל התערובת תהיה מורגשת חזותית כאשר פתיר. לאחר הממס נוספה מערבולת את בקבוק Erlenmeyer כדי להבטיח כי כל סיליקה הוא פתיר היטב.

2. הכנת הטור

1. בחר את העמודה בגודל המתאים. בדרך כלל יש למלא את העמודה בערך באמצע הדרך עם רפת ג'ל סיליקה. ככל שהדגימה מטוהרת גדולה יותר, כך העמודה הנדרשת גדולה יותר.
2. חבר את החלק התחתון של העמודה עם חתיכת צמר זכוכית. בעזרת מוט ארוך, ודאו שהצמר תקוע היטב בתחתית העמוד ממש מעל הסטופקוק.
3. ברגע שהצמר נמצא במקומו, יש למרוח שכבה דקה של חול על צמר הזכוכית.
   הערה: אם העמודה מצוידת בפריט זכוכית מעל הסטופקוק, יש להשמיט שלב זה.
4. מהדק את העמודה במיקום האנכי למעמד טבעת.
5. בעזרת משפך, יוצקים בעדינות את הבוץ המוכן של ג'ל סיליקה לתוך העמוד. ייתכן שיהיה עליך להוסיף ממס נוסף כדי להעביר את העגמה מבקבוק Erlenmeyer לעמודה. באמצעות פיפטה, לשטוף את כל ג'ל סיליקה שנדבק לצדי העמוד.
   1. כאשר ג'ל הסיליקה מתיישב בעמודה, הקש בעדינות על צידי העמוד כדי להבטיח שג'ל סיליקה ייארז בחוזקה ולא יכלול בועות אוויר.
6. פתח את stopcock ולאפשר ממס לנקז לתוך בקבוק Erlenmeyer נקי עד ממש לפני ג'ל סיליקה ואת חזית ממס נפגשים. ג'ל סיליקה לא צריך להתייבש עד ההליך הושלם.
7. מניחים שכבה דקה של חול על גבי ג'ל הסיליקה(איור 1). באמצעות פיפטה, לשטוף כל חול שאולי נדבק לצדי העמוד.
8. מסננים כל ממס נוסף עד שהחול יבש, אך לא לשכבת ג'ל הסיליקה.

איור 1. ההגדרה המתאימה לניסוי כרומטוגרפיה של עמודה לפני הוספת המדגם.

3. הוספת הדוגמה לעמודה

1. להמיס את המדגם בכמות הקטנה ביותר של ממס אפשרי (באמצעות אותו ממס ששימש כדי להפוך את סיליקה ג'ל slurry).
2. בעזרת פיפטה, הוסיפו בעדינות את הדגימה לראש העמודה.
3. לאחר המדגם הוחל על החלק העליון של העמודה, לפתוח את stopcock ולאפשר ממס לנקז דרך שכבת החול אבל לא שכבת ג'ל סיליקה. השתמש בכמות קטנה מאוד של ממס לשטוף כל מדגם שאולי נצמד לצדי העמודה. לנקז ממס נוסף זה דרך שכבת החול גם כן.

4. ללוטן את המדגם דרך העמודה

1. באמצעות פיפטה, בעדינות רבה להוסיף 4-5 מ"ל של ממס באופן כזה שאינו מפריע שכבת החול.
2. מניחים משפך בחלק העליון של העמודה וממלאים לאט ובעדינות את שארית העמודה בממס.
3. פתח את stopcock ולאפשר לממס לנקז דרך העמודה.
4. התחל לאסוף את השלב הנייד כפי שהוא מתנקז מהעמוד לתוך מבחנות.
   1. מבחנות צריכות להיות ממוקמות בארון מבחנה באופן רציף.
5. הוסף ממס נוסף לראש העמודה לפי הצורך עד שכל התרכובות הרצויות יתבהרו מהעמודה.

5. השבת הבוחרים

1. אם התרכובות צבועות, אז הם יכולים להיות מזוהים חזותית. עם זאת, אם התרכובות חסרות צבע, יהיה יהיה לזהות אותם באמצעות אור ulta-גלוי (UV) (אם התרכובות מכילות הטיות) או עם הכתם המתאים. טוהר התרכובות ניתן לאמת באמצעות כרומטוגרפיה שכבה דקה.
2. זהה את המבחנות המכילות את התרכובות הרצויות.
3. מזג את כל השברים המכילים את התרכובות המבודדות הרצויות לבקבוקון עגול (RB) ששוקל מראש. עשה זאת עבור כל מתחם מבודד.
4. לאדות את הממס על ידי הצבת בקבוקון RB על המאייד הסיבובי.
5. לאחר כל הממס הוסר, לשקול את RB עם המוצר היבש ולהפחית את המשקל הראשוני של RB כדי להשיג תשואה.