Sign In

הדמיה דגימות ביולוגיות עם מיקרוסקופיה אופטית וקונפוקל

Overview

מקור: פיימן שהביגי-רודפושטי וסינה שהבזמהאמדי, המחלקה להנדסה ביו-רפואית, אוניברסיטת קונטיקט, סטוררס, קונטיקט

מיקרוסקופים אופטיים קיימים כבר מאות שנים, ובעוד הם הגיעו למגבלה התיאורטית שלהם של רזולוציה לפני עשרות שנים, ציוד וטכניקות חדשות, כגון עיבוד תמונה קונפוקלית ודיגיטלית, יצרו נישות חדשות בתחום ההדמיה האופטית. המיקרוסקופים האופטיים הטובים ביותר יהיו בדרך כלל רזולוציה עד 200 ננומטר בתנאים אידיאליים. עם זאת, מיקרוסקופים אופטיים מוגבלים על ידי עקיפה של גלים, פונקציה של אורך הגל, שהוא סביב 500 ננומטר עבור אור גלוי. בעוד שהרזולוציה של מיקרוסקופים אופטיים אינה מגיעה לזה של מיקרוסקופי אלקטרונים, הם הכלים החשובים ביותר בהדמיה של מבני מאקרו ביולוגיים והם מרכיב עיקרי בכל מעבדה ביולוגית.

במיקרוסקופי אור קונבנציונליים, האות המופק מהאובייקט המצופה הוא מעובי מלא של הדגימה, אשר אינו מאפשר לרובו להיות בפוקוס לצופה. זה גורם לתמונה להיות "מחוץ לפוקוס טשטוש". המיקרוסקופ הקונפוקללי, לעומת זאת, מאיר את הדגימה דרך חור סיכה, ולכן הוא מסוגל לסנן את האור מחוץ לפוקוס מלמעלה ומתחת לנקודת המיקוד באובייקט.

הדגמה זו מספקת מבוא לרכישת תמונות בשיטות מיקרוסקופיה אופטית וקונפוקל. כאן, חתיכה חלקית של מוח העכבר תיחקר.  רכישת תמונה וניתוח, כולל הכלים ליצירת מפות טופוגרפיות ותמונות מורכבות, יכוסו. היתרונות והחסרונות של שיטות הדמיה שונות בכל הנוגע לרזולוציה, עומק המיקוד וסוג המדגם יידונו גם הם. מטרת הדגמה זו היא לספק מידע נוסף על מיקרוסקופים אופטיים וקונפוקל כדי לקבוע אם מודולי מיקרוסקופיה אלה מתאימים ביותר לסוג של מדגם ביולוגי.

Procedure

1. הדמיה קונפוקלית

  1. טען את הדגימה על הבמה. מרכז אותו מתחת לעדשה. זה לא יעלה על מגבלת המשקל של השלב, אשר במקרה זה הוא 5 ק"ג. המדגם לא צריך להיות יותר מ 100 מ"מ עובי.
  2. פתח את תוכנת ההדמיה ובחר "צור משימה".
  3. תחת העמודה טופוגרפיות, בחר בלחצן המסייע.
  4. צור תמונת מבט כוללת בהגדלה הנמוכה ביותר, פי 2.5. לפני החלפת ההגדלות, ודא שהדגימה נמצאת במוקד על-ידי שינוי מיקום Z עד שתראה תמונה ברורה. זה יכול להיעשות על ידי דחיפה למטה או משיכה על מניפולטור מיקרוסקופ 3D. תנועת Z עדינה יותר מושגת על-

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Results

התמונות הבאות נותנות סקירה כללית של תוצאות שניתן להשיג של מוח עכבר באמצעות מיקרוסקופ קונפוקל. הם מראים כיצד ניתן להשיג רמות שונות של מידע וכיצד מפה טופוגרפית של התוצאות חושפת את גובה המדגם.

Figure 5

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Application and Summary

בהדגמה זו, עומק המיקוד, שדה הראייה והרזולוציה המקסימלית וההגדלה של מיקרוסקופים אופטיים וקונפוקלים היו מותאמים לצפייה בדגימות ביולוגיות. הדגמה זו נועדה לעזור למשתתף להחליט איזה מודול מיקרוסקופיה הוא הטוב ביותר עבור יישום מסוים. לשני מצבי המיקרוסקופיה יש יתרונות בניתוח דגימות ביולוגיות ?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags
MicroscopyOptical MicroscopyConfocal MicroscopyBiological SamplesImagingDetailed StructureSamplesLensesMagnifyCompound MicroscopeAntonie Van LeeuwenhoekBacteriaYeastRed Blood CellsCirculationCapillary VesselsScientific ContributionsMicroscopic AdvancementsResearchClinical SettingsMedical DiagnosisPinholeOptical ResolutionContrastOperating PrinciplesHigh Resolution ImagesAnalysisApplicationsBiomedical Engineering

Skip to...

0:07

Overview

1:26

Principles of Confocal Microscopy

3:37

Confocal Imaging

6:09

Digital Optical Microscope

7:56

Results

9:05

Applications

10:16

Summary

Videos from this collection:

article

Now Playing

הדמיה דגימות ביולוגיות עם מיקרוסקופיה אופטית וקונפוקל

Biomedical Engineering

35.7K Views

article

הדמיית SEM של דגימות ביולוגיות

Biomedical Engineering

23.5K Views

article

ייחוס ביולוגי של נשאי ננו-תרופות: יישומים של SEM

Biomedical Engineering

9.3K Views

article

הדמיית אולטרסאונד בתדר גבוה של אב העורקים בבטן

Biomedical Engineering

14.4K Views

article

מיפוי מאמץ כמותי של מפרצת באבי העורקים בבטן

Biomedical Engineering

4.6K Views

article

טומוגרפיה פוטואקוסטית לדם תמונה ולומנים בבטורה האינפרא-רנאלית

Biomedical Engineering

5.7K Views

article

הדמיית תהודה מגנטית לבבית

Biomedical Engineering

14.7K Views

article

סימולציות דינמיקה של נוזל חישובי של זרימת דם במפרצת מוחית

Biomedical Engineering

11.7K Views

article

הדמיית פלואורסצנטיות כמעט אינפרא אדום של מפרצות באבי העורקים בבטן

Biomedical Engineering

8.2K Views

article

טכניקות למדידת לחץ דם לא פולשניות

Biomedical Engineering

11.8K Views

article

רכישה וניתוח של אות אק"ג (אלקטרוקרדיוגרפיה)

Biomedical Engineering

104.7K Views

article

חוזק מתיחה של ביו-חומרים הניתנים למיחזור

Biomedical Engineering

7.5K Views

article

הדמיית מיקרו-CT של חוט השדרה של העכבר

Biomedical Engineering

7.9K Views

article

הדמיה של ניוון מפרק הברך לאחר פציעת ACL לא פולשנית בחולדות

Biomedical Engineering

8.2K Views

article

הדמיית SPECT ו- CT משולבת כדי להמחיש את תפקוד הלב

Biomedical Engineering

11.0K Views

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved