עבודה זו נתמכה על ידי NIH NS057195 מענק, פרס reac קליפורניה בסן פרנסיסקו, ו קנט סטייט הזנק קרן WH צ&#39;ו.

<html> 1. שיטת MCAO פרוטוקול זה אושר על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים וועדות השתמש באוניברסיטת קליפורניה בסן פרנסיסקו ו קנט סטייט, ולאחר פועלת לפי המכון הלאומי לבריאות הנחיות לשימוש בחיות מעבדה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גזור תפר 5-0 monofilament (הרווארד Apparatus, Holliston, MA) לתוך 20 קטעים מ&quot;מ. סיבוב קצה של כל פלח ידי חימום זה ליד cauterizer (Braintree Scientific, Inc, Braintree, MA). מדוד את הקוטר של קצה באמצעות מיקרומטר (יישומי Image Inc, רוצ&#39;סטר, ניו יורק). אנו משתמשים תפר בקוטר קצה הסופי של 0.21-0.22 מ&quot;מ עבור עכבר עם משקל גוף של 25-30 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את כל כלי הניתוח על ידי מעוקר (מינימום 121 ° C, 15 PSI, במשך 15 דקות). לטהר את שולחן הניתוח וציוד נלווה באמצעות אתנול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי 8-12 בן שבוע העכבר (25-30 גרם) עם 5% isoflurane (Aerrane, בקסטר, Deerfield, IL) ב 30% O 2 / 70% N 2 O באמצעות מערכת ה-V-10 הרדמה (VetEquip, Inc ., Pleasanton, CA). בעקבות אינדוקציה של הרדמה, להפחית את רמת isoflurane ולתחזק אותו 1.5%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את העכבר בעמדת פרקדן על משטח חימום. הכנס בדיקה רקטלית, לפקח ולשמור על טמפרטורת הגוף בין 36.5-37.5 מעלות צלזיוס באמצעות TR-200 המערכת טמפרטורה homeothermic (Fine המדע כלים בע&quot;מ, פוסטר סיטי, קליפורניה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הפרווה שעל באזור הצוואר הגחון עם קוצץ חשמלי (Braintree Scientific) כדי לחשוף את העור. לחטא את האתר כירורגית באמצעות שלושה יישומים של אתנול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת מיקרוסקופ לנתח סטריאו (ניקון, יפן), לעשות 1 ס&quot;מ חתך קו האמצע ארוך על הצוואר. השתמש retractors (Braintree Scientific) כדי לחשוף את שדה הניתוח ולזהות את עורק התרדמה המשותף הימני (CCA), חיצוני העורק הראשי (ECA), ו פנימי העורק הראשי (רשפ&quot;ת). בזהירות לנתח את העורקים ללא שמסביב עצבים fascia. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנתחים את ECA נוסף distally ו להקריש ECA ו עורק התריס מעולה (STA) הסניף באמצעות coagulator דו קוטבית (הווארד כלי Inc, Tuscaloosa, א.ל.). חותכים את ECA ו STA בכל מגזר קרוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Loosely קושרים שתי 8-0 תפרים משי סביב הגדם ECA. החל מהדק וסקולרית (כלי מדעי פיין) בשעה הסתעפות של המרכז לאמנות עכשווית לתוך ECA ו ICA. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בסוף ECA גדם עם Vannas בסגנון מספריים באביב (כלים המדע פיין). מדוד ורשום את אורך תפר 5-0 monofilament מעוגלים בקצה. הכנס את תפר את החתך ולהתקדם מהדק. הדקו את שני התפרים משי סביב לומן מספיק כדי לאבטח עדיין לשמר הניידות של תפר ב-המגורים monofilament. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מהדק מ הסתעפות. בעדינות לקדם את תפר monofilament מ לומן של ECA לתוך ICA למרחק של 9-10 מ&quot;מ מעבר הסתעפות של המרכז לאמנות עכשווית כדי לחסום את המקור של MCA. משך הניתוח הוא כ - 30-45 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפר את החתך על הצוואר במקום עכבר בתיבת 35 ° C סיעוד להתאושש מן ההרדמה, ולהחזיר אותו לכלוב. זה בדרך כלל לוקח 50-10 דקות עבור העכברים כדי להתאושש מן ההרדמה. כדי לבצע MCAO חולף, החוקר יכול להרדים מחדש את העכבר למשוך את תפר בחזרה גדם של ECA לאחר תקופה מסוימת, בדרך כלל בין 0.5-2 ח </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עשרים וארבע שעות לאחר גיוס של MCAO, להרדים את העכבר עם 5% ו isoflurane להרדים אותו על ידי נקע בצוואר הרחם. לערוף את העכבר לאסוף את המוח. פורסים את המוח coronally לארבע פרוסות 2 מ&quot;מ עם מטריצה ​​המוח (Braintree Scientific) על קרח. דגירה את פרוסות המוח 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC) (סיגמא אולדריץ &#39;) ב 1X PBS עבור 20 דקות בטמפרטורת החדר, כדי לקבוע את הגודל וההיקף של אוטם. תקן את פרוסות המוח ב -10% ניטרלית שנאגרו פתרון פורמלין (סיגמא אולדריץ &#39;) בשעה 4 ° C עד הדמיה. היקף אוטם ניתן לכמת כמתואר יופיטר פרוטוקול 955 ( <a href="http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=955">http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=955</a> ) 9. </li></ol> 2. נציג תוצאות אוטמים שנוצר על ידי MCAO נראים בסטריאטום ואת קליפת דורסולטרלי. הסטריאטום הוא רגיש יותר לאיסכמיה מאשר בקליפת המוח. שלושים דקות של MCAO יפיק האוטם רק בסטריאטום, בעוד יותר משעה של MCAO יפגע הן הסטריאטום ואת קליפת המוח. לאחר 24 שעות MCAO קבוע, אחוז האוטם הכולל הוא ~ 40 ± 5% בחצי הכדור ואת שיעור התמותה לאחר הניתוח הוא ~ 10%. אנו לא כוללים עכברים ממחקרים נוספים אם דימום יתר מתרחשת במהלך הניתוח, את זמן הניתוח עולה על 90 דקות, עכברים מצליחים להתאושש מן ההרדמה בתוך 15 דקות, או דימום נמצא את פרוסות המוח או בבסיס המעגל של ויליס במהלך הבדיקה שלאחר המוות . 61/2761fig1.jpg &quot;alt =&quot; איור 1 &quot;/&gt; באיור 1. נציג תמונות של TTC מוכתם פרוסות המוח (רמת העטרה 1-4) לאחר 24 שעות של MCAO קבע. בכל רקמה חיה TTC הוא מופחת על ידי enzymatically dehydrogenases ל 1,3,5-triphenylformazan (TPF), שבו הוא בצבע אדום, ואילו באזורים נמקי הוא נשאר לבן בשל היעדר הפעילות האנזימטית כאלה. לכן, בתחום של אוטם ניתן לזהות לפי צבע לבן שלה בשל חוסר ההמרה של TTC כדי TPF. הערה: TTC הוא חום מעט אור לא יציב כל כך להגן על החלקים המוכתמים מהחום והאור כמה שיותר.

<ol>
	<li>Howard, G., Howard, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Distribution of stroke: hetrogeneity of stroke by age, and sex. , 3-12 (2004).</li><li>Thom, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2006+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee.">Heart disease and stroke statistics--2006 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 113, e85-e151 (2006).</li><li>Mohr, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Middle cerebral artery disease. , 123-166 (2004).</li><li>Longa, E. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Chou, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+protein+kinase+Cdelta+as+a+mediator+of+stroke-reperfusion+injury.">Neutrophil protein kinase Cdelta as a mediator of stroke-reperfusion injury.</a> J. Clin. Invest. 114, 49-56 (2004).</li><li>Hudgins, W. R., Garcia, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+electrocautery,+atmospheric+exposure,+and+surgical+retraction+on+the+permeability+of+the+blood-brain-barrier.">The effect of electrocautery, atmospheric exposure, and surgical retraction on the permeability of the blood-brain-barrier.</a> Stroke. 1, 375-380 (1970).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ischemic+stroke:+overview+of+major+experimental+rodent+models,+pathophysiology,+and+therapy+of+focal+cerebral+ischemia.">Acute ischemic stroke: overview of major experimental rodent models, pathophysiology, and therapy of focal cerebral ischemia.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 87, 179-197 (2007).</li><li>Taniguchi, H., Andreasson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypoxic-ischemic+encephalopathy+model+of+perinatal+ischemia.">The hypoxic-ischemic encephalopathy model of perinatal ischemia.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

אין לנו שום אינטרסים מנוגדים פוטנציאל לחשוף.

MCAO בעכברים נפוץ מודל איסכמיה מוקד בבני אדם. שימוש בעכברים ללימודי שבץ הפכה שכיחה יותר בגלל הזמינות של זנים מהונדס ו בנוקאאוט. ישנם כמה פרטים קריטיים לציין בפרוטוקול: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זה חיוני כדי לשמור על טמפרטורת הגוף עכבר במהלך הניתוח ולפני זה לגמרי מתאושש מן ההרדמה. טמפרטורת הגוף יש השפעות על היקף של אוטם: ירידות היפותרמיה ו היפרתרמיה מגבירה את גודל האוטם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד לחשוף לבודד את המרכז לאמנות עכשווית ו ECA, למנוע נזק העצב התועה סמוך לקנה הנשימה, מה שיכול להגדיל את גודל האוטם ואת הכדאיות ירידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעולם לא להכניס את תפר monofilament יותר מ -10 מ&quot;מ להעביר את הסתעפות. תפר מוכנס מדי יכולים לנקב את עורק מוחי כתוצאה הקדמי וגם דימום מוחי. התנגדות ניתן לחוש כאשר תפר מתקדמת על 9-10 מ&quot;מ מעבר לנקודת הסתעפות. במקרה זה, החוקר צריך להפסיק לקדם את תפר ולאשר את המרחק. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>Isoflurane</td><td>Chemical</td><td>Baxter Internationl Inc.</td><td>95045-588</td><td></td></tr><tr><td>V-10 Anesthesia system</td><td>Equipment</td><td>VetEquip</td><td>901807</td><td></td></tr><tr><td>TR-200 Temp Controller</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>21060</td><td></td></tr><tr><td>Electric clipper</td><td>Equipment</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>CLP-9931</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td>Equipment</td><td>Nikon Instruments</td><td>SMZ745T</td><td></td></tr><tr><td>Retractor system</td><td>Equipment</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>ACD-014</td><td></td></tr><tr><td>Bipolar coagulator</td><td>Equipment</td><td>Howard Instrument</td><td>64000</td><td></td></tr><tr><td>Silk suture</td><td>Material</td><td>Harvard Apparatus</td><td>510479</td><td></td></tr><tr><td>Monofilament suture</td><td>Material</td><td>Harvard Apparatus</td><td>723351</td><td></td></tr><tr><td>Vascular clamp</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td></td></tr><tr><td>Vannas scissor</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Brain matrix</td><td>Equipment</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>BS-2000C</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-triphenyltetrazolium chloride</td><td>Chemical</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8877</td><td></td></tr><tr><td>10% neutral buffer formalin</td><td>Chemical</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT5011</td><td></td></tr></tbody></table>

mouse model of middle cerebral artery occlusion

שבץ היא מחלה נוירולוגית קטלנית הנפוצה ביותר בארצות הברית 1. רוב מקרי השבץ (88%) כתוצאה חסימה של כלי דם במוח (שבץ איסכמי) 2. מאז שבץ איסכמי ביותר (~ 80%) מתרחשות בשטח של עורק המוח האמצעי (MCA) 3, במודלים של בעלי חיים רבים שבץ שפותחו התמקדו עורק זה. המודל monofilament intraluminal של חסימת עורק המוח האמצעי (MCAO) כרוכה החדרת נימה כירורגית לתוך עורק הצוואר חיצוני להשחיל אותו קדימה לעורק התרדמה הפנימי (רשפ&quot;ת) עד קצה חוסם את מקורם של MCA, וכתוצאה מכך הפסקת זרימת הדם לבין אוטם מוחי לאחר מכן ב 4 השטח MCA. הטכניקה יכולה לשמש מודל חסימה קבועה או חולפת 5. אם תפר יוסר לאחר פסק זמן מסוים (30 דקות, 1 שעות, או 2 ח), reperfusion מושגת (MCAO חולף); אם הסיב נשאר במקומו (24 שעות) בהליך מתאים כמודל MCAO קבע . טכניקה זו אינה דורשת craniectomy, הליך נוירוכירורגי להסיר חלק בגולגולת, אשר עשויים להשפיע על לחץ תוך גולגולתי והטמפרטורה 6. זה הפך את השיטה הנפוצות ביותר בשימוש לחקות קבע חולף איסכמיה מוחית מוקד חולדות ועכברים 7,8. כדי להעריך את מידת אוטם מוחי, אנו כתם פרוסות המוח עם כלוריד 2,3,5-triphenyltetrazolium (TTC) כדי לזהות רקמות מוח איסכמי 9. בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את השיטה MCAO וקביעת גודל האוטם על ידי מכתים TTC.

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion at JoVE.com

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).

עכבר דגם ספיגה התיכון עורק מוחי

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

mouse-model-of-middle-cerebral-artery-occlusion

Research

JoVE Journal

Medicine

77.5K Views.  Ernest Gallo Clinic and Research Center, University of California, San Francisco. אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).

Video: Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are very limited. To meet the need for novel therapeutic approaches, experimental stroke research frequently employs rodent models of focal cerebral ischaemia. Most researchers use permanent or transient occlusion of the middle cerebral artery (MCA) in mice or rats.
Proximal occlusion of the middle cerebral artery (MCA) via the intraluminal suture technique (so called filament or suture model) is probably the most frequently used model in experimental stroke research. The intraluminal MCAO model offers the advantage of inducing reproducible transient or permanent ischaemia of the MCA territory in a relatively non-invasive manner. Intraluminal approaches interrupt the blood flow of the entire territory of this artery. Filament occlusion thus arrests flow proximal to the lenticulo-striate arteries, which supply the basal ganglia. Filament occlusion of the MCA results in reproducible lesions in the cortex and striatum and can be either permanent or transient. In contrast, models inducing distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA occlusion typically spare the striatum and primarily involve the neocortex. In addition these models do require craniectomy. In the model demonstrated in this article, a silicon coated filament is introduced into the common carotid artery and advanced along the internal carotid artery into the Circle of Willis, where it blocks the origin of the middle cerebral artery. In patients, occlusions of the middle cerebral artery are among the most common causes of ischaemic stroke. Since varying ischemic intervals can be chosen freely in this model depending on the time point of reperfusion, ischaemic lesions with varying degrees of severity can be produced. Reperfusion by removal of the occluding filament at least partially models the restoration of blood flow after spontaneous or therapeutic (tPA) lysis of a thromboembolic clot in humans.
In this video we will present the basic technique as well as the major pitfalls and confounders which may limit the predictive value of this model.

Filamentous occlusion of the Middle cerebral artery is a common model for studying ischemic stroke in mice.

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United States in 20091,2. The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was developed by Koizumi4 in 1986 to simulate this 
impactful human pathology in the rat. A modification of the MCAO method was later presented by Longa3. Both techniques have been widely used to identify 
molecular mechanisms of brain injury resulting from ischemic stroke and potential therapeutic modalities5. This relatively noninvasive method in rats has been 
extended to use in mice to take advantage of transgenic and knockout strains6,7. To model focal cerebral ischemia, an intraluminal suture is advanced via 
the internal carotid artery to occlude the base of the MCA. Retracting the suture after a specified period of time mimics spontaneous reperfusion, but the 
suture can also be permanently retained. This video will be demonstrating the two major approaches for performing intraluminal MCAO procedure in mice in a 
stepwise fashion, as well as providing insights for potential drawbacks and pitfalls. The ischemic brain tissue will subsequently be stained by 
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to evaluate the extent of cerebral infarction8.

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is the most frequent used model among experimental ischemic stroke models. Here we will demonstrate the entire model in detail with the guide of Laser Doppler flowmetry, and its representative results.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining

Stroke is the third cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic stroke accounts for approximately 80% of all strokes. However, the thrombolytic tissue plasminogen activator (tPA) is the only treatment of acute ischemic stroke that exists. This led researchers to develop several ischemic stroke models in a variety of species. Two major types of rodent models have been developed: models of global cerebral ischemia or focal cerebral ischemia. To mimic ischemic stroke in patients, in whom approximately 80% thrombotic or embolic strokes occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), the intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is quite relevant for stroke studies. This model was first developed in rats by Koizumi et al. in 1986 1. Because of the ease of genetic manipulation in mice, these models have also been developed in this species 2-3.
	Herein, we present the transient MCA occlusion procedure in C57/Bl6 mice. Previous studies have reported that physical properties of the occluder such as tip diameter, length, shape, and flexibility are critical for the reproducibility of the infarct volume 4. Herein, a commercial silicon coated monofilaments (Doccol Corporation) have been used. Another great advantage is that this monofilament reduces the risk to induce subarachnoid hemorrhages. Using the Zeiss stereo-microscope Stemi 2000, the silicon coated monofilament was introduced into the internal carotid artery (ICA) via a cut in the external carotid artery (ECA) until the monofilament occludes the base of the MCA. Blood flow was restored 1 hour later by removal of the monofilament to mimic the restoration of blood flow after lysis of a thromboembolic clot in humans. The extent of cerebral infarct may be evaluated first by a neurologic score and by the measurement of the infarct volume. Ischemic mice were thus analyzed for their neurologic score at different post-reperfusion times. To evaluate the infarct volume, staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) was usually performed. Herein, we used cresyl violet staining since it offers the opportunity to test many critical markers by immunohistochemistry. In this video, we report the MCAO procedure; neurological scores and the evaluation of the infarct volume by cresyl violet staining.

The intraluminal middle cerebral occlusion model in mice is herein presented. The extent of cerebral infarct is evaluated by a neurologic score and cresyl violet staining, an alternative staining to TTC, offering the great advantage to test in parallel many interest markers.

מודל עכבר של MCAO intraluminal: הערכת אוטם מוחית על ידי כתמים סגולים Cresyl

Stroke is the third  cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic  stroke accounts for approximately 80% of all strokes. ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

דוגמנות שבץ בעכברים: קרישה קבועה של עורקי דיסטלי התיכון מוחין

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse model is useful for investigating the pathophysiology of cerebral ischemia-reperfusion and determining potential therapeutic strategies for patients with stroke. Variations in the anatomy of the circle of Willis of C57BL/6 mice affects their infarct volume after cerebral-ischemia-induced injury. Studies have indicated that distal MCA occlusion (MCAO) can overcome this problem and result in a stable infarct size. In this study, we establish a two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion through the interruption of the blood flow to the right MCA. We distally ligate the right MCA and right common carotid artery (CCA) and restore blood flow after a certain period of ischemia. This ischemia-reperfusion injury induces an infarct of stable size and a behavioral deficit. Peripheral immune cells infiltrate the ischemic brain within the 24 h infiltration period. Additionally, the neuronal loss in the cortical area is less for a longer reperfusion duration. Therefore, this two-vessel occlusion model is suitable for investigating the immune response and neuronal recovery during the reperfusion period after cerebral ischemia.

A mouse model of cerebral ischemia-reperfusion is established to investigate the pathophysiology of stroke. We distally ligate the right middle cerebral artery and right common carotid artery and restore blood flow after 10 or 40 min of ischemia.

שתיים, כלי סגר דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

Neuroscience

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. To investigate pathological mechanisms of retinal ischemia, relevant experimental models need to be developed. Anatomically, a main retinal blood supplying vessel is the ophthalmic artery (OpA) and OpA originates from the internal carotid artery of the common carotid artery (CCA). Thus, disruption of CCA could effectively cause retinal ischemia. Here, we established a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion (tBCCAO) to tie the right CCA with 6-0 silk sutures and to occlude the left CCA transiently for 2 seconds via a clamp, and showed that tBCCAO could induce acute retinal ischemia leading to retinal dysfunction. The current method reduces reliance on surgical instruments by only using surgical needles and a clamp, shortens occlusion time to minimize unexpected animal death, which is often seen in mouse models of middle cerebral artery occlusion, and maintains reproducibility of common retinal ischemic findings. The model can be utilized to investigate the pathophysiology of ischemic retinopathies in mice and further can be used for in vivo drug screening.

Here, we describe a mouse model of retinal ischemia by transient bilateral common carotid artery occlusion using simple sutures and a clamp. This model can be useful for understanding the pathological mechanisms of retinal ischemia caused by cardiovascular abnormalities.

דגם מורין של פגיעה איסכמית ברשתית הנגרמת על ידי חסימת עורקים דו-צדדית משותפת חולפת

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

הקמת מודל עכברי חסימת עורק מוחי אמצעי תוך גולגולתי

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

מחבר זרקור: טכניקות חדשניות וכיוונים עתידיים בחקר שבץ מוחי 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

עכבר דגם ספיגה התיכון עורק מוחי

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

מודל עכבר של MCAO intraluminal: הערכת אוטם מוחית על ידי כתמים סגולים Cresyl

דוגמנות שבץ בעכברים: קרישה קבועה של עורקי דיסטלי התיכון מוחין

שתיים, כלי סגר דגם העכבר של איסכמיה מוחית-פגיעה reperfusion

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

דגם מורין של פגיעה איסכמית ברשתית הנגרמת על ידי חסימת עורקים דו-צדדית משותפת חולפת

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים