מחקר זה נתמך בחלקו על ידי דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG), GZ פרויקט PI 771/1-1; SFB 656 &quot;מולקולרית והדמיה לב וכלי דם&quot;, מינסטר, גרמניה (פרויקטים C6, Z2, B3, ו PM3); האיחוד האירופי נואי &quot;אבחון הדמיה מולקולרית, דימי &quot;(WP 11.1 ו -11.2). המחקר מומן גם על ידי קרן הלב הבריטית, בריטניה בחלקו.

1. הכנת מתקן מתח גזירה (השרוול) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתקן מתח גזירה מורכב משני חצאים האורך של גליל עם לומן בצורת חרוט. פגזים המחצית עשויים polyetherketone תרמופלסטיים המיוצרים על ידי הליך הליהוק פלסטיק. גורמים משתתפים נשלחות בזמן עדיין מחובר הרץ. לפיכך, חצאים צריך להיות מנותקים לפני השימוש. הטיל מכיל קליפות חצי בגדלים שונים הנעים בין 150 מיקרומטר - 300 מיקרומטר (קוטר פנימי הנמוך ביותר בסוף במורד הזרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנה השרוול צריכה להתבצע תחת מיקרוסקופ כירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את החצי שרוול פגז עם מלקחיים בוטה בעדינות לחתוך אותו מן השחקנים באמצעות אזמל חד. הליך זה יוביל לחצי מבשרי פגז אשר צריך להיות מעובד יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הף מבשר על הצלחת אפילו לא חלקלק; לתקן את זה עם מלקחיים בוטה לחתוך אותו בדיוק לאורך החתך preformed כדי remove סוף סגור. זו תניב חצי שרוול פגז מוכן לשימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפיקוח על חצאים מתחת למיקרוסקופ בעדינות להסיר כל קצוות חדים הנותרים. לומן הפנימי חרוטי חיונית גרימת איכויות שונות של לחץ בתוך גזירה, במעלה או במורד השרוול של המושתל. חריץ על פני השטח החיצוני של חצאים פועל בניצב לומן הפנימי משמש מנחה עבור חוט אשר בסופו של דבר המקלות חצאים יחד כדי ליצור את השרוול תפקודית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חנות חצאים השרוול, מסווגים לפי גודל, באתנול 70%. </li></ol> 2. להשתיל את השרוול סביב עורק הצוואר הימני <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים ApoE נוקאאוט צריך להיות סביב 10 שבועות של גיל במשקל של לפחות 20 גרם. אם התפתחות פלאק יש לחקור תחת דיאטה כולסטרול גבוה, החל כגון דיאטה סוג המערבי 4 שבועות לפני ההשתלה השרוול מומלץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך כירורגי כל צריךלהתבצע תחת לפחות חצי סטרילי תנאים: לבשי חלוק הניתוחים, מסכה, כובע וכפפות סטריליות. לחטא את המכשירים עבור 30 שניות מעקר מכשיר חרוז ומניחים אותם על גיליון אטום סטרילית. היזהרו! מכשירים צריך להתקרר לפני השימוש! </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקמו את העכבר בתא הרדמה אינדוקציה מלא 3% isoflurane עד שהוא מורדם לחלוטין. בדיקת עומק של הרדמה עם תגובה לצבוט הבוהן. לחלופין, ניתן לבצע הרדמה עם זריקה (IP) intraperitoneal של קטמין (80 מ&quot;ג / ק&quot;ג) ו Xylazine (10 מ&quot;ג / ק&quot;ג) או הרדמה חלופי שאושר על ידי IACUC. עבור הזרקה ip, להחזיק את העכבר במצב פרקדן ולהזריק ההרדמה ברבע התחתון השמאלי של הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר על צלחת מחוממת כירורגית, במצב שכיבה. על מנת למנוע את עיני פועל יבש להרטיב אותם עם משחה העין (למשל Bepanthen קרם העיניים והאף). מורחים את הקדמי ואת הכפות האחוריות, קלטת אותם לצלחת. אם ביצוע הרדמה isoflurane, את זרימת הגז נרקוטיים (2% isoflurane) חייב להיות מסופק באמצעות מסכה מכרסם קטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת שיער בין הלסת התחתונה ואת עצם החזה על ידי סוכן או מקריח יישום (למשל Pilca מד) או באמצעות קנס מכונת גילוח חשמלית (למשל Wella Contura). גילוח חייב להתבצע בזהירות כדי למנוע עור מעצבן. אם באמצעות סוכן מקריח, לתת לו 1-2 דקות בשביל לחדור את השיער, לאחר מכן, לשפשף בעדינות עד שכל השיער סוכן מקריח מוסר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האם מוכן מוכן בעבר half השרוול פגזים בגדלים שונים (שניים בכל גודל) ו 2.5 ס&quot;מ באורך פיסת תפר 6-0 משי מקשרות את הפגזים וחצי באתר של חסימת עורק התרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את השדה הפעלה עם כמות ליברלית של בבטאדין. השתמש במספריים חדים קטן כדי לפתוח את העור ואת fascia הבסיסית של הצוואר על ידי חתך 4-5mm המדיאלי החל מהחלק העליון של עצם החזה (manubrium). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרחב את הפתיחה שלhift בלוטת הפרוטיד ימין הצידה להוסיף מפזר כירורגית. אז בבוטות לנתח לתוך עמוק, עזב רק של קנה הנשימה (מתצוגת מנתחים), שבו השריר sternomastoideus זכות חוצה את השריר omohyoid הנכון, עד שתוכלו לזהות את הראש הפועם המשותף הנכון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מלקחיים או בזווית מעוגלת יפה מאוד (למשל דומון # 5 / 45), לנתח את עורק התרדמה המשותף הימני בעדינות על ידי הסרת רקמת החיבור שמסביב. הפרד את הראש מן העצב התועה - אובייקט לבן, סיבי פועל ישירות לאורך התרדמה - צעד זה הכרחי לחלוטין לחשוף את כלי השיט. היזהר לא לפגוע העצב התועה ולא סניף של וריד הצוואר השמאלי הפנימי, שהוא גם בקשר קרוב הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת לבחור את גודל השרוול הימני, להשוות את הקוטר של הראש החשוף בקוטר הפנימי של השרוול חצאים: רוחבו הגדול ביותר של לומן האזיקים צריך לפגוש את הקוטר החיצוני של הראש. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> כעת, בזהירות את קצה מלקחיים תחת הראש, לפתוח את מלקחיים, חוט פיסת תפר 6-0 משי תחת הראש ואת צורת לולאה. בין לולאה לבין מקום התרדמה one השרוול פגז וחצי מתחת הראש. הצד של היצרות הגדול חייב להיות במורד הזרם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את מעטפת המחצית השנייה השרוול בתוך הלולאה על גבי הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להדק בעדינות את הלולאה תפר באמצעות מלקחיים תפירת ואת הצומת חוט. בכך גזירה משנה את התפקוד הלחץ נוצר. למדידה מדויקת של החפת זה הכרחי כי תפר פועל בדיוק בתוך החריץ preformed על פני השטח החיצוני של השרוול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז את בלוטת הפרוטיד זכות חזרה למיקום המקורי שלה, המקורב ולסגור את העור או באמצעות כמות קטנה של תפר 6-0 prolene או, לחילופין, ניתן להשתמש קליפים הפצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק מנה בודדת של Carprofen 5 מ&quot;ג / ק&quot;ג (למשל Rimadyl) מתחת לעור על מנת לספק טיפול מניעתי ואת מקום הכאבהעכבר בתא ההתחממות עד משחזרת. בדרך כלל זה לוקח 30-60 דקות כאשר בהרדמה קטמין / Xylazine. בעת שימוש isoflurane משאיפת הרדמה תקופת התאוששות קצרה יותר באופן משמעותי (10-20 דקות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניסיוננו, חיות להחזיר פעילות unstressed נורמלי בתוך 24 השעות הראשונות לאחר ההשתלה השרוול עם התערבות מתבצע על ידי מנתח מנוסה. עם זאת, אם בעל החיים נראה במצוקה אפילו יום אחד לאחר הניתוח, לחזור על הטיפול משכך כאבים ולהתייעץ עם צוות וטרינרי. </li></ol> 3. Explanting השרוול ואת עורקי הראש <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניתוח היסטולוגית עורקי הראש צריך להיות שנקטפו בסוף תקופת התצפית. לפני שמתחילים explantation, החיה צריך להיהרג בהתאם להנחיות IACUC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם את החצי פגזים השרוול נועדו לשימוש חוזר, להסיר בזהירות את כל שברי רקמות חיבור תפר מאלמנטים פלסטיק, דיסsecting של עורקי הראש, לשטוף ולאחסן את הפגזים חצי פתרון אלכוהול 70%. ראוי לזכור כי השרוול מוטבע הידבקויות רקמת החיבור לאחר מספר שבועות של ההשתלה כי יש לנתח את השרוול בזהירות כדי לא לפגוע בקירות כלי שיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחלופין, השרוול יכול להיות explanted ומוטבעים יחד עם עורק הצוואר. חומר פלסטי של השרוול הוא עמיד פתרונות קיבעון ממיסים נורמלי משמש להטבעת פרפין. כמו כן, דגימות המוטבע ניתן לחתוך באמצעות microtome נורמלי מצויד להבים רגילים. </li></ol> 4. נציג תוצאות השרוול צריך להיות ממוקם תמיד סביב אחד משני עורקי הראש המשותף של בעל חיים (איור 1A, 1B) - הצד הנגדי משמש כביקורת. על התמונה מציגה את שני פגזים חצי שרוול (איור 1B) צורה חרוטית של לומן הפנימי גלוי. זו צורה חרוטית חיונית establishing שלושת האזורים עם זרימת הדינמיקה ברורה. טיפוסי דפוסי מתח גזירה הנגרמת על ידי השחקנים מחושב ממדידות דופלר 11 ואת מהירויות זרימת המקביל מבוסס על שלב לעומת מהירות MR הדמיה 12 מקבלים באיור 2. כאשר השרוול הוא מושתל עכברים בנוקאאוט ApoE תזונה סוג המערבי הזרימה משתנה הדינמיקה גזירה הנגרמת לעורר מתח בתצהיר פלאק טרשת עורקים (איור 3): Upstream של מתח חרוטי נמוך התכווצות למינרית גזירה מוביל להתפתחות מסיבית של פלאק טרשת עורקים של יותר פנוטיפ פגיע, המאופיינת ליבות השומנים קרוב לומן המרכזי מכוסה רק על ידי כובע סיביים דקים (איור 3A1). לומן הפנימי חרוטי של השרוול שמוביל לעלייה מהירות הזרימה. כמעט אין בתצהיר פלאק הוא ציין בתחום זה. במורד הזרם ישירות באתר של צוואר הבקבוק מיידית הרחבת התוצאות עורק באזור של מערבולות ו פלו oscillatoryw פרמטרים, מה שגורם להתפתחות פלאק המורחבת של פנוטיפ פחות יציבה יותר (כלומר, ליבות פחות שומנים אשר מקומי קרוב יותר לאמצעי התקשורת). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig1.jpg" /> איור 1 צירוף מתח גזירה - הרכבה מיקום (א) ציור סכמטי של האזיק מושתל:.. השרוול ממוקם סביב עורק התרדמה המשותף הימני (RCCA) - הצד הנגדי (LCCA = שמאל העורק הראשי משותף) משמש בקרה . (ב) vivo MRI אנגיוגרפיה בעכבר: ב הקרנת העוצמה המקסימלית של שלושה ממדי הזמן של הטיסה MR אנגיוגרפיה התכווצות חרוטי המושרה על ידי השחקנים (חץ לבן) נראה (לפרטים ראו 12). (H = ראש, F = מטר, R = ימין, L = שמאל). בפינה הימנית העליונה להציג מקרוסקופית על לומן הפנימי ואת המשטח החיצוני של חצאים השרוול הוא נתון. כאשר התאספו, שני חצאים יוצרים גליל חרוטי, אשר משנה<html> הזרימה הדינמיקה בתוך כלי השיט בצורה מוגדרת. כדי להבטיח את ההתאמה הנכונה, חריץ על פני השטח החיצוני של השרוול (חץ צהוב) משמש מנחה עבור תפר המקשר. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig2.jpg" /> באיור 2. אזורים שונים של דינמיקה זרימת מתח גזירה. השרשה של השרוול הדינמיקה תזרים משנה ומתח גזירה לאחר מכן בעורק הראש מכווץ באופן מוגדר. באיור הסכמטי העליון המאפיינים את זרימת שונים מצוינים ואת הערכים משוער המקומית מתח גזירה מקבלים (מבוסס על מדידות דופלר 11). להלן, מהירויות זרימת המקביל חיה אחת נמדד על ידי בדיקת MRI במעלה הזרם של השרוול מושתל מוצגים תמונה-MRI T1-משוקלל חתך של הצוואר (שלב בניגוד הדמיה מהירות, לפרטים ראה 12). &gt; <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig3.jpg" /> באיור 3. הלחץ שאר המושרה התפתחות פלאק בעכברים בנוקאאוט ApoE. בפינה השמאלית העליונה מראה את התצוגה מקרוסקופית על הצוואר נפתחה חשוף עורקי הראש של העכבר בנוקאאוט ApoE תחת דיאטה גבוה (סוג המערבי) שומן 8 שבועות לאחר ההשתלה של מתח גזירה משנה סביב עורק התרדמה המשותף הימני (RCCA). אזור לבן אטום של כלי השיט (*) במעלה הזרם של השרוול מתאים לאתר של בתצהיר נרחב פלאק טרשת עורקים. החץ הצהוב מציין את חוט המשלבת את שני חצאי השרוול. לעומת זאת, אין סימנים של בתצהיר פלאק העורק הכלילי השמאלי משותף (LCCA). (א) - (ג) נציג HE מוכתם חתכי רוחב של עורק התרדמה המשותף הימני של העכבר בנוקאאוט ApoE תחת דיאטה סוג המערבי 8 שבועות לאחר ההשתלה של השרוול. האיור הסכמטי נותן המטוסים המקביל (קווים מקווקווים) wherדואר הסעיפים אותרו. (א) Upstream של טרשת עורקים השרוול שמוביל בתצהיר פלאק מסיבי. ליבות השומנים גדול (חצים אדומים), אשר בחלק ממוקמים בקרבת מרכזי לומן (פרט A1) לאפיין את אופי הפגיעה של השלטים האלה. (ב) מטוס של צוואר הבקבוק השרוול כמעט שום התפתחות פלאק ברור, בעוד הזרם ישירות של השרוול (ג) תזרים oscillatory מוביל מתונה התפתחות פלאק מסוג יציב יותר (כלומר פחות שומנים ליבות או לא). (C1, C2 = פגזים מחצית השרוול, P = הפלאק, כוכבית = כלי לומן)

<ol>
	<li>Chiu, J. J., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+disturbed+flow+on+vascular+endothelium:+pathophysiological+basis+and+clinical+perspectives.">Effects of disturbed flow on vascular endothelium: pathophysiological basis and clinical perspectives.</a> Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).</li><li>Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+shear+stress+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">The role of shear stress in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Lab. Invest. 85, 9-23 (2005).</li><li>Ali, F., Zakkar, M., Karu, K., Lidington, E. A., Hamdulay, S. S., Boyle, J. J., Zloh, M., Bauer, A., Haskard, D. O., Evans, P. C., Mason, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+the+cytoprotective+enzyme+heme+oxygenase-1+by+statins+is+enhanced+in+vascular+endothelium+exposed+to+laminar+shear+stress+and+impaired+by+disturbed+flow.">Induction of the cytoprotective enzyme heme oxygenase-1 by statins is enhanced in vascular endothelium exposed to laminar shear stress and impaired by disturbed flow.</a> J. Biol. Chem. 284, 18882-18892 (2009).</li><li>Hastings, N. E., Simmers, M. B., McDonald, O. G., Wamhoff, B. R., Blackman, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis-prone+hemodynamics+differentially+regulates+endothelial+and+smooth+muscle+cell+phenotypes+and+promotes+pro-inflammatory+priming.">Atherosclerosis-prone hemodynamics differentially regulates endothelial and smooth muscle cell phenotypes and promotes pro-inflammatory priming.</a> Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 293, C1824-C1833 (2007).</li><li>Zheng, J., Abendschein, D. R., Okamoto, R. J., Yang, D., McCommis, K. S., Misselwitz, B., Gropler, R. J., Tang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI-based+biomechanical+imaging:+initial+study+on+early+plaque+progression+and+vessel+remodeling.">MRI-based biomechanical imaging: initial study on early plaque progression and vessel remodeling.</a> Magn. Reson. Imaging. 27, 1309-1318 (2009).</li><li>Stone, P. H., Coskun, A. U., Kinlay, S., Clark, M. E., Sonka, M., Wahle, A., Ilegbusi, O. J., Yeghiazarians, Y., Popma, J. J., Orav, J., Kuntz, R. E., Feldman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+endothelial+shear+stress+on+the+progression+of+coronary+artery+disease,+vascular+remodeling,+and+in-stent+restenosis+in+humans:+in+vivo+6-month+follow-up+study.">Effect of endothelial shear stress on the progression of coronary artery disease, vascular remodeling, and in-stent restenosis in humans: in vivo 6-month follow-up study.</a> Circulation. 108, 438-444 (2003).</li><li>Pedersen, E. M., Oyre, S., Agerbaek, M., Kristensen, I. B., Ringgaard, S., Boesiger, P., Paaske, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+early+atherosclerotic+lesions+in+the+human+abdominal+aorta+correlates+with+wall+shear+stresses+measured+in+vivo.">Distribution of early atherosclerotic lesions in the human abdominal aorta correlates with wall shear stresses measured in vivo.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 18, 328-333 (1999).</li><li>Buchanan, J. R., Kleinstreuer, C., Truskey, G. A., Lei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+between+non-uniform+hemodynamics+and+sites+of+altered+permeability+and+lesion+growth+at+the+rabbit+aorto-celiac+junction.">Relation between non-uniform hemodynamics and sites of altered permeability and lesion growth at the rabbit aorto-celiac junction.</a> Atherosclerosis. 143, 27-40 (1999).</li><li>Nam, D., Ni, C. W., Rezvan, A., Suo, J., Budzyn, K., Llanos, A., Harrison, D., Giddens, D., Jo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 297, 1535-1543 (2009).</li><li>Cheng, C., van Haperen, R., de Waard, M., van Damme, L. C., Tempel, D., Hanemaaijer, L., van Cappellen, G. W., Bos, J., Slager, C. J., Duncker, D. J., van der Steen, A. F., de Crom, R., Krams, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress+affects+the+intracellular+distribution+of+eNOS:+direct+demonstration+by+a+novel+in+vivo+technique.">Shear stress affects the intracellular distribution of eNOS: direct demonstration by a novel in vivo technique.</a> Blood. 106, 3691-3698 (2005).</li><li>Cheng, C., Tempel, D., van Haperen, R., van der Baan, A., Grosveld, F., Daemen, M. J., Krams, R., de Crom, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerotic+lesion+size+and+vulnerability+are+determined+by+patterns+of+fluid+shear+stress.">Atherosclerotic lesion size and vulnerability are determined by patterns of fluid shear stress.</a> Circulation. 113, 2744-2753 (2006).</li><li>van Bochove, G. S., Straathof, R., Krams, R., Nicolay, K., Strijkers, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI-determined+carotid+artery+flow+velocities+and+wall+shear+stress+in+a+mouse+model+of+vulnerable+and+stable+atherosclerotic+plaque.">MRI-determined carotid artery flow velocities and wall shear stress in a mouse model of vulnerable and stable atherosclerotic plaque.</a> MAGMA. 23, 77-84 (2010).</li><li>Cuhlmann, S., Van der Heiden, K., Saliba, D., Tremoleda, J. L., Khalil, M., Zakkar, M., Chaudhury, H., Luong, L. A., Mason, J. C., Udalova, I., Gsell, W., Jones, H., Haskard, D. O., Krams, R., Evans, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+Blood+Flow+Induces+RelA+Expression+via+c-Jun+N-Terminal+Kinase+1:+A+Novel+Mode+of+NF-{kappa}B+Regulation+That+Promotes+Arterial+Inflammation.">Disturbed Blood Flow Induces RelA Expression via c-Jun N-Terminal Kinase 1: A Novel Mode of NF-{kappa}B Regulation That Promotes Arterial Inflammation.</a> Circ. Res. 108, (2011).</li></ol>

המחברים אין לחשוף.

כדי למזער וריאציה ניסיוני מומלץ לעבוד עם בעלי חיים גיל כמעט זהה עם ההיסטוריה תזונה זהה. תחקיר שפורסם לאחרונה מוכיח כי מתקן מתח להחיל גזירה בעכברים wildtype יכול להיות מודל טוב חקירת תפקוד האנדותל תגובות דלקתיות מוקדם המושרה על ידי זרם שונה דינמיקת 13. עם זאת, חקירה ש...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם </td><td> חברה </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> הלחץ משנה גזירה (polyetherketone) </td><td> Promolding BV <a href="http://promolding.nl">http://promolding.nl</a> </td><td> מטיל נשלחות בזמן עדיין מחובר הרץ. לפיכך, אחד האלמנטים חייבים להיות מנותקים לפני השימוש. </td></tr></tbody></table>

implantation of a carotid cuff for triggering shear-stress induced atherosclerosis in mice

מקובל כי שינויים גזירה הלחץ בכלי הדם לעורר את הביטוי של גנים דלקתיים בתאי האנדותל ובכך לגרום לטרשת עורקים (הנסקרת ב 1 ו -2). תפקידה של מתח גזירה נחקרה בהרחבה במבחנה חוקרת את ההשפעה של זרימה על הדינמיקה לתאי אנדותל בתרבית 1,3,4 ו - in vivo בבעלי חיים גדולים ובני אדם 1,5,6,7,8. עם זאת, לשעתקו מאוד במודלים של בעלי חיים קטנים המאפשר חקירה שיטתית של השפעת הלחץ גזירה על התפתחות פלאק הם נדירים. לאחרונה, הציג נאם et al. 9 במודל עכבר שבה קשירת הענפים של עורק הצוואר יוצר אזור של זרם נמוך oscillatory. אף על פי מודל זה גורם תפקוד האנדותל היווצרות מהירה של טרשת עורקים בעכברים hyperlipidemic, לא ניתן לשלול כי התגובה הדלקתית הוא ציין, לפחות בחלקה, תוצאה of אנדותל ו / או נזק לכלי בשל קשירת. כדי למנוע מגבלות כאלה, חפתים מתח גזירה שינוי פותחה על סמך דינמיקה של נוזלים מחושב, אשר חרוט לומן הפנימי בצורת נבחרה כדי ליצור אזורים מוגדרים של מתח נמוך, גזירה גבוהה oscillatory בתוך עורק התרדמה המשותף 10. על ידי יישום מודל זה אפוליפופרוטאין E (ApoE) נוקאאוט בעכברים שקיבלו כולסטרול גבוה המערבי דיאטה סוג, לפתח נגעים של כלי הדם במורד הזרם מן השרוול. הפנוטיפ שלהם היא בקורלציה עם הדינמיקה האזורית תזרים 11 כפי שאושרו על ידי הדמיה vivo תהודה מגנטית (MRI) 12: הלחץ גזירה נמוכה למינרית במעלה הזרם של השרוול גורם להיווצרות פלאק נרחב של פנוטיפ פגיע יותר, ואילו oscillatory מתח הזרם גזירה של השרוול גורם טרשת עורקים יציבה 11. באותם אזורים של מתח גזירה גבוהה וזרימה למינרית גבוה בתוך השרוול,בדרך כלל אין פלאק טרשת עורקים הם נצפו. לסיכום, נוהל גזירה מתח שינוי השרוול היא גישה כירורגית אמין לייצר טרשת עורקים שונים phenotypically ב-ApoE לקוי בעכברים.

Watch this Scientific Journal Video about Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice at JoVE.com

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

השרוול הצרת המוצגים במאמר זה נועד לגרום לטרשת עורקים בעורק התרדמה Murine משותף. בשל בצורת חרוט של לומן הפנימי שלה את האזיק מושתל יוצרת אזורים מוגדרים היטב של מתח נמוך, גזירה גבוהה oscillatory מפעילה את התפתחות טרשת עורקים של פנוטיפים דלקתיות שונות.

השרשה של קאף הראש מפעילה שאר מתח טרשת עורקים המושרה עכברים

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

implantation-carotid-cuff-for-triggering-shear-stress-induced

Research

JoVE Journal

Medicine

20.0K Views.  Westfälische Wilhelms-University Münster. השרוול הצרת המוצגים במאמר זה נועד לגרום לטרשת עורקים בעורק התרדמה Murine משותף. בשל בצורת חרוט של לומן הפנימי שלה את האזיק מושתל יוצרת אזורים מוגדרים היטב של מתח נמוך, גזירה גבוהה oscillatory מפעילה את התפתחות טרשת עורקים של פנוטיפים דלקתיות שונות.

Video: Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified version of carotid partial ligation methods [1,2] to show that it acutely induces low and oscillatory flow conditions, two key characteristics of disturbed flow, in the mouse common carotid artery. Using this model, we have provided direct evidence that disturbed flow indeed leads to rapid and robust atherosclerosis development in Apolipoprotein E knockout mouse [3]. We also developed a method of endothelial RNA preparation with high purity from the mouse carotid intima [3]. Using this mouse model and method, we found that partial ligation causes endothelial dysfunction in a week, followed by robust and rapid atheroma formation in two weeks in a hyperlipidemic mouse model along with features of complex lesion formation such as intraplaque neovascularization by four weeks. This rapid in vivo model and the endothelial RNA preparation method could be used to determine molecular mechanisms underlying flow-dependent regulation of vascular biology and diseases. Also, it could be used to test various therapeutic interventions targeting endothelial dysfunction and atherosclerosis in considerably reduced study duration.

This describes a partial carotid ligation surgery, which causes disturbed flow conditions and subsequent atherosclerosis development (in two weeks) with intraplaque neo-vascularization (in four weeks) in the mouse common carotid artery. We also describe a novel method of RNA isolation from the carotid intima, providing high purity endothelial RNA.

המודל של טרשת עורקים Flow-induced מופרע על העורק הראשי עכבר ידי קשירת חלקי שיטה פשוטה של ​​בידוד RNA מן התרדמה האנדותל

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

דגם Murine של השתלת תומכן בעורק הראשי לחקר restenosis

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

חיתוך רוחב עצב הטיביאלי - מודל סטנדרטי לניוון שרירים שלד מושרה denervation בעכברים

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Inducing Myointimal Hyperplasia Versus Atherosclerosis in Mice: An Introduction of Two Valid Models

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque formation and stenosis, as observed for example in ischemic heart disease. Two highly reproducible mouse models&#160;&#8211;&#160;both resulting in artery stenosis but each underlying a different pathway of development&#160;&#8211; are introduced here. The models represent the two most common causes of artery stenosis; namely one mouse model for each myointimal hyperplasia, and atherosclerosis are shown. To induce myointimal hyperplasia, a balloon catheter injury of the abdominal aorta is performed. For the development of atherosclerotic plaque, the ApoE -/- mouse model in combination with western fatty diet is used. Different model-adapted options for the measurement and evaluation of the results are named and described in this manuscript. The introduction and comparison of these two models provides information for scientists to choose the appropriate artery stenosis model in accordance to the scientific question asked.

This video shows two models of intimal plaque development in murine arteries and emphasizes the differences in myointimal hyperplasia and atherosclerosis.

גרימת Myointimal היפרפלזיה נגד טרשת עורקים בעכברים: מבוא של שני מודלים חוקיים

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

חליטות עורק הראשי לpharmacokinetic וpharmacodynamic ניתוח של taxanes בעכברים

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive astrogliosis. Reactive astrocytes exert both inflammatory and protective effects that inhibit and promote, respectively, neural repair. The mechanisms underlying the diverse functional properties of reactive astrogliosis are not well understood. Achieving a greater understanding of these mechanisms is critical to developing therapeutic strategies to treat the injured CNS. Here we demonstrate a method to trigger reactive astrogliosis in the adult mouse forebrain using a forebrain stab lesion. This lesion model is simple, reliable, and requires only a stereotaxic device and a scalpel blade to produce the injury. The use of stab lesions as an injury model in the forebrain is well established and amenable to studies addressing a broad range of neuropathological outcomes, such as neuronal degeneration, neuroinflammation, and disruptions in the blood brain barrier (BBB). Thus, the forebrain stab injury model serves as a powerful tool that can be applied for a broad range of studies on the CNS response to trauma.

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

This article describes a detailed protocol to produce a forebrain stab injury in adult mice. The stab injury induces severe reactive gliosis and glial scar formation which can be subsequently examined by standard immunohistochemistry methods.

מפעילה תגובתי דבקה<em&gt; In vivo</em&gt; על ידי המוח הקדמי דקירת פגיעה

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ischemic in origin and occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA). Currently the only Food and Drug Administration (FDA) approved drug for the treatment of this devastating disease is tissue plasminogen activator (tPA). However, tPA has a small therapeutic window for administration (3 - 6 hr), and is only effective in 4% of the patients who actually receive it. Current research focuses on understanding the pathophysiology of stroke in order to find potential therapeutic targets. Thus, reliable models are crucial, and the MCA occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) is deemed to be the most clinically relevant surgical model of ischemic stroke, and is fairly non-invasive and easily reproducible. Typically the MCAo model is used with rodents, especially with mice due to all the genetic variations available for this species. Here we describe (and present in the video) how to successfully perform the MCAo model (with reperfusion) in mice to generate reliable and reproducible data.

In order to understand the pathophysiology of stroke, it is important to use reliable models. This paper will describe one of the most frequently used stroke models in mice, termed the middle cerebral artery occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) with reperfusion.

גישה ניתוחית עבור העורקים התיכון ספיגה מוחין ושבץ reperfusion מושרה של עכברים

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The &quot;Wire-Injury&quot; Model

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

אינדוקציה של טרשת עורקים מואצת בעכברים: מודל "פגיעת חוט"

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.

העכבר מודל עבור השתלת לבלב בטכניקה השינוי הצמיד

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

פקקת הברזל ותחמוצת כלוריד-induced הכלבי העורק הראשי: דגם בעל חיים גדול של פגיעה בכלי הדם

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...