מקורות המימון: עבודה זו נתמכת על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענקים HL067177, HL096845 ו P01AI084853 ל DSW

1. התורם נוהל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליכים כירורגיים כל בוצעו תוך ניצול טכניקה סטרילית. אנטיביוטיקה לא נותנים לתורם והן בעכברים הנמענים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אינדוקציה של הרדמה של העכבר התורם נשלחת עם 5% Isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכבר הוא מחובר לצינורות orotracheally עם קטטר 20-מד תוך ורידי והניח לאחר מכן למכונת הנשמה מכרסם, באמצעות 100% חמצן בקצב של 125 נשימות בדקה וכ 0.5 מ&quot;ל נפח הגאות (2% ממשקל גופו). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה נשמר עם בשאיפה 1-2% Isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכבר תורם ממוקם בתנוחה אופקית, הכינו עם אלכוהול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Laparosternotomy מבוצע כמו קו האמצע בשילוב חתך רוחבי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרין ב 100 ק&quot;ג / u מוזרק הנחות הווריד הנבוב (IVC), ממש מתחת לכבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרעפת היא לחתוך לאורך מצורף costal הגחון לכיוון עמוד השדרה, ואת חלל בית החזה נחשף על ידי חיתוך משני צידי החזהמקיר אל הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר incising IVC ברמה של הסרעפת, תוספת פרוזדורים הנכון לחתוך הריאות סמוקות מ&quot;ל 2 של קירור (4 ° C) הזרקת רינגר לקטט ושל 0.1 מ&quot;ל של הפרין דרך חתך רוחבי השורש של עורק הריאה ( הרשות הפלסטינית) תא המטען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעצר אוורור בשני שלישים האינפלציה סוף גאות, לחסום לב ריאה הוא נכרת ומאוחסן על הקרח (4 ° C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הריאה השמאלית התורם מוכן הנמען על ידי החיבור של האזיקים. רצועה ריאתי הוא חקוק עד עורק ריאתי (PV). Hilum מובא על ידי הסרת הוושט ואבי העורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את הרשות הפלסטינית, הממוקם היבט גולגולתי רוב hilum, כמו גם את הסמפונות העיקריים המחוברים (BR). בזהירות לנתח את הרשות הפלסטינית מן הסמפונות את. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השרוול הרשות עשוי קטטר 24 מד (IV) תוך ורידי וחותכים ל 0.5 מ&quot;מ באורך עם סיומת של 0.7 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פני השטח של השרוול היא הכתה אז כדי להקל על anastomosis. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השרוול של הסמפונות נגזר קטטר IV 20-מד, וחותכים באורך של 1.0 מ&quot;מ עם הרחבה של 0.7 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בחומרים אותם, השרוול PV משתנה עם משקל של העכבר התורם. באופן ספציפי, על עכברים 24-27 גרם גודל השרוול הוא 22-מד, 0.7 מ&quot;מ אורך עם סיומת 0.7 מ&quot;מ. על עכברים במשקל 27-32 גרם, המחקרים מנוצל קטטר 20-מד כלומר 0.7 מ&quot;מ אורך עם סיומת 0.7 מ&quot;מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האזיקים מוכנסים לתוך הקצוות המרוחקים של הרשות הפלסטינית PV ו Br ומאובטחת עם תפר 9-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ריאה מתורם סמוקות ורחצה עם מי מלח סטרילית עם הפרין סטרילי לפני האחסון. ריאה מתורם עטוף מכן עם גזה סטרילית ספוגה מלח סטרילית על הקרח (4 ° C), אשר שומר על הריאות מאוד נקי וסטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק microvessel מושם על הסמפונות כדי למנוע כניסה רינגר לקטט לתוך דרכי הנשימה. </li></ol> 2. הנמען נוהל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אינדוקציה של anesthesia, אוורור מכני זהים כמתואר לעיל עבור התורם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בית החזה השמאלי הוא מגולח הכינו עם אלכוהול 70% ו בתחום כירורגית הוא עטוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתך פתיחת בית החזה נעשית בחלל השמאלי בין צלעי השלישי, הרחבת החתך קרוב dorsally לעמוד השדרה, וכן מהדק microvessel דגש על כלי ריאתי הסמפונות שמאל הסמוכים ללב. אתה יכול לראות את הרשות הפלסטינית בכל היבט גולגולתי, PV בסוף הזנב של hilum ו Br ביניהם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות גרירה עדינה על hemostat כדי לגרום למתח קל על, הרשות הפלסטינית בר ו PV, הריאה השמאלית הוא שלף מחלל בית החזה תוך השארת המבנים המרכזיים hilar הידק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> , הרשות PV ו Br מבודדים על ידי דיסקציה קהה ואחריו הנחת תפר 9-0 ממוצבת באופן רופף סביב, הרשות הפלסטינית PV ו - Br. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר לנתח הרשות לחלוטין נדן adventitial שלו, חתך רוחבי קטן של 4 בערך של היקף של כלי הואלהפוך הקיר הקדמי, והשאיר את המשך בחלק הגבי של העורק ללא שינוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ריאה מתורם, עטופה בתחבושת קרה, רינגר לקטט ספוג כותנה מוכן כמתואר לעיל, היא ממוצבת לתוך חלל בית החזה, ואת האזיקים מוכנס לתוך הרשות הפלסטינית הנמען, PV ו Br ומאובטחת עם תפר 9-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק את הצלב hilar מוסר המאפשר reperfusion ואוורור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הצבת ריאות המושתל אל תוך בית החזה הנמען, החתך נסגר באמצעות פתיחת בית החזה תפר 5-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכבר מותר להתאושש מן ההרדמה. עצירות (0.05-0.15 מ&quot;ג / ק&quot;ג) ניתנת מיד לאחר הניתוח, ובמשך כל 8 שעות למשך 2-3 ימים לאחר הניתוח. </li></ol> 3. נציג תוצאות הניסיון שלנו לימד אותנו, כי זה דורש מספר חודשים של תרגול חוזר להיות בקיאים מודל העכבר הריאות להשתלה. לאחר שליטה מושגת, אנחנוchieved בשיעור 96% (96/100 ניתוחים רצופים) הישרדות perioperative עם מקרי מוות שאירעו בתוך 7 ימים שלאחר הניתוח. שני מקרי המוות היו תוצאה של דימום שהחל intraoperatively, ו pneumothraces היו סיבת המוות בשני עכברים אחרים. עבור פרוצדורות כל, זמן איסכמיה חמה היה 14.32 ± 3.14 דקות, וזמן איסכמיה קר היה 58.51 ± 18.06 דקות. שלוש קבוצות orthotopic השתלת ריאה נחקרו: isograft: C57BL / 6 → C57BL / 6, allograft: C57BL/10 → C57BL / 6 ו C57BL / 6 → C57BL/10. השתמשנו רק בעכברים ממין זכר, אך הטכניקה שלנו יכול להיות מיושם גם נקבות עכברים, כי אין הבדל אנטומי משמעותי בין המינים. לדירוג של דחייה הפתולוגיה נערך באופן עיוור ניצול קריטריונים סטנדרטיים עבור השתלת ריאות קלינית 7 (טבלה 1). ואילו צפינו דחייה קלה או ללא isograft (C57BL / 6 → C57BL / 6), שתי שילובים allograft פיתח compaדחייה אקוטית או כרונית rable (איור 1). לעומת זאת, היה OB באופן משמעותי את שכיחות יותר C57BL/10 → C57BL / 6 מ C57BL / 6 → C57BL/10 קבוצה ידי day28 (טבלה 1). <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> C57BL / 6 → C57BL / 6 </td><td> C57BL/10 → C57BL / 6 </td><td> C57BL / 6 → C57BL/10 </td><td> P-value </td></tr><tr><td> דחייה פתולוגיה &quot;A&quot; ציוני בכל יום 28 </td><td> 0.67 ± 0.89 </td><td> * 3.33 ± 0.82 </td><td> * 3.29 ± 0.76 </td><td> * P &lt;0.05 </td></tr><tr><td> OB / עכברים סך הכל ב 21 יום ו 28 </td><td> 0/24 (0%) </td><td> ** 14/34 (42.1%) </td><td> ** 2/16 (12.5%) </td><td> ** P &lt;0.05 </td></tr></tbody></table> טבלה 1. עשרות היסטולוגית של דחייה חריפה השכיחות של השתלת bronchiolitis סותם הודעה. הניקוד של דחייה חריפה (&quot;A&quot; ציוני) קנה מידה CRIteria כמתואר תוצאות מייצגים. הנתונים מייצג את ממוצע ± סטיית תקן של &quot;A&quot; ציוני בכל השתלת הודעה 28 ימים. הנתונים מייצג את כמות ואחוז עכברים בכל קבוצה שהתפתחו OB ב 21 ו 28 ימים השתלת פוסט. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3947/3947fig1.jpg" /> באיור 1. ממצאים מאקרוסקופיים אנליזה פתולוגית בכליה ב 28 ימים השתלת ריאות הדואר. לוח 1 א לייצג ממצאים מאקרוסקופיים ו-H &amp; E ריאה Isograft מוכתם ריאות נאיבי הנכון. 1 ב &#39;פאנל 1 ג מייצג H &amp; E ו Trichrome צבעונית של מייסון BL/10 allograft ריאות הושתלו הנמען BL / 6 העכבר, שפיתחה OB OB ולא, בהתאמה. החץ הלבן 1B מזהה נגעים של OB. 1D לוח מראה BL / 6 allograft ריאות הושתלו הנמען BL/10 העכבר. פתרון בעיות במהלך ההליך העיקרי היו כדלקמן. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זרימת דם הפרעה: ריאה מתורם פלאש עדהצבע הופך להיות בצבע לבן. הפעלת לחץ מוגזם יכול לגרום בצקת ריאות. אבל לא לדחוף יותר מדי כדי למנוע בצקת לאחר ההשתלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקושי של הכניסה לתוך השרוול התורם: לוודא vasculature הוא באורך מספיק חינם של רקמות שומן החיבור המצורפים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דימום במקום anastomotic: השתמש טיפים q כדי להפעיל לחץ במקום הפגוע למשך כ 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקבל חסימה בזרימת הדם הרשות הפלסטינית: נגרמת בעיקר במהלך החדרת השרוול על ידי פיתול של. אם האוויר הוא ציין בתוך הרשות מחדש לעשות השקה של הכרחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קשה השקה PV: ממברנה של PV הוא דק מאוד ובקלות דמעות. בחר גודל השרוול תקין להכניס ישר PV של הנמען בעדינות רבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקבל חסימה בזרימת הדם PV: ודא את המיקום ואת הכיוון של השרוול. לשחרר את הדחיסה מן השרוול הסימפונות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Pneumothorax: זו עשויה להיגרם על ידי ניקוב או הסימפונות בשל manipulation של דרכי הנשימה, או ניקוב של פני השטח ריאות עקב טראומה הקשורה הליך ההשתלה. לשעבר מטופל עם סגירת כירורגית של חור בתוך הקיר דרכי הנשימה, וזו מטופלת על ידי oversewing הדליפה על פני הריאות באמצעות 10-0 תפר ניילון. </li></ol>

<ol>
	<li>Asimacopoulos, P. J., Molokhia, F. A., Pegg, C. A., Norman, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+transplantation+in+the+rat.">Lung transplantation in the rat.</a> Transplant Proc. 3, 583-585 (1971).</li><li>Yoshida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+of+experimental+lung+transplantation+in+rabbits.">Surgical technique of experimental lung transplantation in rabbits.</a> Ann. Thorac. Cardiovasc. Surg. 11, 7-11 (2005).</li><li>McDyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant.">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proc. Am. Thorac. Soc. 4, 37-43 (2007).</li><li>Sato, M., Keshavjee, S., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research:+animal+models+of+obliterative+bronchiolitis+after+lung+transplantation.">Translational research: animal models of obliterative bronchiolitis after lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 9, 1981-1987 (2009).</li><li>Okazaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic+vascularized+aerated+lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation.</a> Am. J. Transplant. 7, 1672-1679 (2007).</li><li>Fan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutralizing+IL-17+Prevents+Obliterative+Bronchiolitis+in+Murine+Orthotopic+Lung+Transplantation.">Neutralizing IL-17 Prevents Obliterative Bronchiolitis in Murine Orthotopic Lung Transplantation.</a> Am. J. Transplant. 11, 911-922 (2011).</li><li>Stewart, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revision+of+the+1996+working+formulation+for+the+standardization+of+nomenclature+in+the+diagnosis+of+lung+rejection.">Revision of the 1996 working formulation for the standardization of nomenclature in the diagnosis of lung rejection.</a> J. Heart Lung Transplant. 26, 1229-1242 (2007).</li><li>Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified rat lung transplantation using a cuff technique.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 97, 578-581 (1989).</li><li>Jungraithmayr, W. M., Korom, S., Hillinger, S., Weder, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic,+single-lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic, single-lung transplantation.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 137, 486-491 (2009).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+vascularized+right+lung+transplantation+in+the+mouse.">Orthotopic vascularized right lung transplantation in the mouse.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. , (2010).</li></ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

השתלת ריאות Orthotopic בעכברים הוא מאתגר בשל דרישות microsurgical ואת שבריריותם קיצוני של רקמות. מבוא של הטכניקה השרוול אפשרה לשימוש נרחב של השתלת ריאות orthotopic בחולדות 8. זה הפך את הבסיס לפיתוח מודל השתלת orthotopic ריאות בעכברים במעבדה שלנו. בעכברים וחולדות, שלא כמו בני האדם, הריאה השמאלי מכיל רק 1 האונה ו מהווה רק 25% ממסת הריאות הכולל. זה עושה שמאל אחת השתלת ריאות אפשרי במודל murine ללא צורך במערכת תמיכה הדם. ניתוחים ראשונית שלנו עולה כי אוורור זלוף של הריאה המושתלת היתה תלויה מאוד בגודל של PV השקה. גודל מסוים PV anastomotic השרוול נוצלו כדי להתאים התורם מקבלי כפי שדווח 9. השרוול לשינוי גודל בלתי הולם הביא atelectasis אחת הריאות בקיעה המושתל או anast PVomosis. Okazaki et al דיווחו על שימוש קשירת כלי משולב גזר 5 הסמפונות. במחקר הנוכחי אנו משתמשים קליפ מפרצת עבור כל המבנים hilar, אשר אנו מציעים עלולה לקצר את זמן איסכמי חמים. מגבלה אחת של השתלת ריאות orthotopic שמאל במודל murine היא שבעלי חיים הנמען יכול לשרוד אחרי נמק alloimmune בתיווך של allografts שלהם 5. לכן, מחקרים הישרדות לא ריאלי והערכה השתל תלויה בבדיקה היסטולוגית של הריאה המושתלת 10. באמצעות טכניקה זו, פיתחנו מודל קליני bronchiolitis סותם בעכברים. באופן ספציפי, העכבר הוא C57BL/10 התורם והמקבל הוא C57BL / 6. הדבר מצביע על תפקידו של קטין, ולא גדולים, אנטיגנים histocompatibility בהיווצרות bronchiolitis סותם 6. יתר על כן, דיווחנו נטרול IL-17 מונע bronchiolitis סותם במודל murine. במצב זהאני מייצג כלי מחקר חדשנית לבדיקת ריאות השתלת וקידום השתלות ריאה קליניים.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם הציוד </td><td> חברה </td><td> קטלוג מספר </td></tr><tr><td> Zeiss Opmi 6SFC-1880 </td><td> פרסקוט של בע&quot;מ </td><td> PMZ014 </td></tr><tr><td> הרווארד מאוורר מכרסמים </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 55-7058 </td></tr><tr><td> 20 מד IV קטטר </td><td> Terumo רפואי Corporation </td><td> 100510D </td></tr><tr><td> 22-מד IV קטטר </td><td> Terumo רפואי Corporation </td><td> 081015S </td></tr><tr><td> 24 מד IV קטטר </td><td> Terumo רפואי Corporation </td><td> 100522A </td></tr><tr><td> 9/0 מט משי כחול הבתולה </td><td> Ashaway קו &amp; CO פתילים Mfg. </td><td> MBVS-90 </td></tr><tr><td> 10-0 אלקון ניתוח קשירת </td><td> Alcon Laboratories, Inc </td><td> 8065-192101 </td></tr><tr><td> BLack משי 5-0/18inches קלועה </td><td> הנרי שיין </td><td> M652630 </td></tr><tr><td> הפרין 1000 יחידות / מ&quot;ל </td><td> APP Pharmaceuticals </td><td> 407156 </td></tr><tr><td> בבטאדין פתרון </td><td> פרדו מוצר </td><td> 67618-150 </td></tr><tr><td> לקטט רינגר של הזרקה </td><td> Hospira </td><td> NDC 0409-7953-03 </td></tr></tbody></table><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> זן של עכברים </td><td> מוכר </td><td> גיל משקל </td><td> מגדר, תגובות </td></tr><tr><td> C57BL/10 </td><td> הרלן Sprague-Dawley </td><td> 8-12 שבועות, 25-30G </td><td> תורמים זכר, </td></tr><tr><td> C57BL / 6 </td><td> הרלן Sprague-Dawley </td><td> 8-12 שבועות, 25-30G </td><td> , זכר התורם או המקבל </td></tr></tbody></table> טבלה 2. טבלה של עכברים, specifIC ריאגנטים וציוד.

development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation

השתלת ריאות Orthotopic בחולדות דווח לראשונה על ידי Asimacopoulos ועמיתים ב 1971 1. כיום, שיטה זו מקובלת גם ואחיד לא רק לחקר דחייה-Allo, אלא גם בין זנים syngeneic לבחינת מנגנוני פציעה איסכמיה reperfusion לאחר השתלת ריאה. אם כי יישומם של עכברוש ובעלי חיים אחרים מודל גדול 2 תרומה משמעותית להבהרת של מחקרים אלה, היקף החקירות האלה היא מוגבלת על ידי מיעוט של נוק אאוט ו חולדות מהונדס. בשל אין טיפולים יעילים bronchiolitis סותם, הגורם המוביל למוות בקרב חולים השתלת ריאות, חלה בחיפוש אינטנסיבי אחר קדם קליניים מודלים הדומים bronchiolitis סותם. המודל allograft קנה הנשימה הוא הנפוץ ביותר ויכול לשחזר כמה מן התכונות של היסטופתולוגיות bronchiolitis סותם 3. עם זאת, חוסר vasculat ללא פגעיור ללא קשר דרכי הנשימה ביצוע של הנמען, ותכונות פתולוגיים שלם של bronchiolitis סותם להגביל את השירות של מודל זה 4. שלא כמו השתלת איברים מוצקים אחרים, vascularized השתלות ריאה העכבר רק לאחרונה דווח על ידי Okazaki ועמיתיו לראשונה בשנת 2007 5. יישום עקרונות היסוד של השתלת ריאות חולדה, במעבדה שלנו יזמה את המודל bronchiolitis סותם באמצעות קטין histoincompatible Murine אנטיגן orthotopic אחת לשמאל השתלות ריאה המאפשר מחקר נוסף של immunopathogenesis bronchiolitis סותם 6.

Watch this Scientific Journal Video about Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation at JoVE.com

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Bronchiolitis סותם היא הפגיעה המפתח להישרדות ארוכת טווח של השתלת ריאה וחוסר מודל קליני חזק מונע בחינת immunopathogenesis bronchiolitis סותם. שלא כמו אחרים השתלות איברים מוצקים, vascularized העכבר השתלת ריאות יש רק לאחרונה פותחו. כאן אנו מציגים מודל שפותח באופן עצמאי שלנו bronchiolitis סותם לאחר ההשתלה Murine אחת הריאות orthotopic.

פיתוח Bronchiolitis סותם במודל Murine של השתלת ריאות Orthotopic

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

development-obliterative-bronchiolitis-murine-model-orthotopic-lung

Research

JoVE Journal

Medicine

20.1K Views.  Indiana University School of Medicine. Bronchiolitis סותם היא הפגיעה המפתח להישרדות ארוכת טווח של השתלת ריאה וחוסר מודל קליני חזק מונע בחינת immunopathogenesis bronchiolitis סותם. שלא כמו אחרים השתלות איברים מוצקים, vascularized העכבר השתלת ריאות יש רק לאחרונה פותחו. כאן אנו מציגים מודל שפותח באופן עצמאי שלנו bronchiolitis סותם לאחר ?...

Video: Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and subsequent cell adhesion. After their bladders are transurethrally catheterized and drained, animals are again catheterized to permit insertion of a platinum wire into bladders without damaging the urethra or bladder. The catheters are made of Teflon to serve as an insulator for the wire, which will conduct electrical current into the bladder to create a burn injury. An electrocautery unit is used to deliver 2.5W to the exposed end of the wire, burning away extracellular layers and providing attachment sites for carcinoma cells that are delivered in suspension to the bladder through a subsequent catheterization. Cells remain in the bladder for 90 minutes, after which the catheters are removed and the bladders allowed to drain naturally. The development of tumor is monitored via ultrasound. Specific attention is paid to the catheterization technique in the accompanying video.

Bladder tumors are established in female mice in a minimally invasive fashion through catheterization, local cauterization, and subsequent adhesion of carcinoma cells to the burn sites.

דגם orthotopic של סרטן שלפוחית ​​השתן Murine

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Small bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with short gut syndrome and failure of parenteral nutrition (irreversible intestinal failure). In specialized centers improved operative and managing strategies have led to excellent short- and intermediate term patient and graft survival while providing high quality of life 1,3. Unlike in the more common transplantation of other solid organs (i.e. heart, liver) many underlying mechanisms of graft function and immunologic alterations induced by intestinal transplantation are not entirely known6,7. Episodes of acute rejection, sepsis and chronic graft failure are the main obstacles still contributing to less favorable long term outcome and hindering a more widespread employment of the procedure despite a growing number of patients on home parenteral nutrition who would potentially benefit from such a transplant. The small intestine contains a large number of passenger leucocytes commonly referred to as part of the gut associated lymphoid system (GALT) this being part of the reason for the high immunogenity of the intestinal graft. The presence and close proximity of many commensals and pathogens in the gut explains the severity of sepsis episodes once graft mucosal integrity is compromised (for example by rejection). To advance the field of intestinal- and multiorgan transplantation more data generated from reliable and feasible animal models is needed. The model provided herein combines both reliability and feasibility once established in a standardized manner and can provide valuable insight in the underlying complex molecular, cellular and functional mechanisms that are triggered by intestinal transplantation. We have successfully used and refined the described procedure over more than 5 years in our laboratory 8-11. The JoVE video-based format is especially useful to demonstrate the complex procedure and avoid initial pitfalls for groups planning to establish an orthotopic rodent model investigating intestinal transplantation.

Small bowel transplantation has become an accepted treatment option for patients with irreversible intestinal failure. Our experimental model of orthotopic small bowel transplantation in rats serves as a reliable tool to address underlying immunologic and inflammatory processes that complicate intestinal transplantation.

השתלות מעי דק orthotopic בחולדות

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each year. While several animal models exist for this procedure and mice are the species that is most commonly used. The reasons for using mice are the relative cost of using this species, the existence of many genetically defined strains that allow for the study of immune responses, and the existence of an extensive array of reagents that can be used to further define responses in this species. This model has been used to define factors in the cornea that are responsible for the relative immune privilege status of this tissue that enables corneal allografts to survive acute rejection in the absence of immunosuppressive therapy. It has also been used to define those factors that are most important in rejection of such allografts. Consequently, much of what we know concerning mechanisms of both corneal allograft acceptance and rejection are due to studies using a murine model of corneal transplantation. In addition to describing a model for acute corneal allograft rejection, we also present for the first time a model of late-term corneal allograft rejection.

Mice have been used as a model for studying many forms of transplantation, including corneal transplantation. We describe in this report a murine model for both acute and late-term corneal transplantation.

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. As this technology expands and improves, the ability to potentially evaluate and improve the quality of substandard lungs prior to transplant is a critical need. In order to more rigorously evaluate these approaches, a reproducible animal model needs to be established that would allow for testing of improved techniques and management of the donated lungs as well as to the lung-transplant recipient. In addition, an EVLP animal model of associated pathologies, e.g., ventilation induced lung injury (VILI), would provide a novel method to evaluate treatments for these pathologies. Here, we describe the development of a rat EVLP lung program and refinements to this method that allow for a reproducible model for future expansion. We also describe the application of this EVLP system to model VILI in rat lungs. The goal is to provide the research community with key information and &#8220;pearls of wisdom&#8221;/techniques that arose from trial and error and are critical to establishing an EVLP system that is robust and reproducible.

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed lung transplantation in humans to become more readily available by enabling the ability to assess organs and expand the donor pool. Here, we describe the development of a rat EVLP program and refinements that allow for a reproducible model for future expansion.

שיטה של ​​מבודד<em&gt; Ex Vivo</em&gt; ריאות זלוף במודל עכברוש: ​​לקחים מפיתוח תכנית EVLP עכברוש

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information about this disease. The human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model provides a useful alternative approach for understanding the specific interactions between genetically and molecularly altered tumor cells, their organ microenvironment, and for evaluation of efficacy of therapeutic regimens. This is a well characterized model designed to study the molecular events of primary tumor development and it recapitulates the early events in the metastatic cascade prior to embolism and entry of tumor cells into the circulation. Thus it allows elucidation of molecular mechanisms underlying the initial phase of metastatic disease. In addition, this model can annotate drug targets of clinical relevance and is a valuable tool to study prostate cancer progression. In this manuscript we describe a detailed procedure to establish a human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model.

Prostate cancer is the second most common cause of cancer-related deaths in the United States. An orthotopic cancer model provides a useful approach to understand the biology of prostate cancer and to evaluate the efficacy of therapeutic regimens. This protocol describes detailed steps necessary to establish an orthotopic prostate cancer mouse model.

דגם Murine Orthotopic פרה-קליני של סרטן ערמונית האדם

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

להרחיב הנשמת קיבת חומצה שאיפת Murine הדגם של פגיעה החריפה ריאות תוצאות ב מקסימלי חריפה קטלנית פגיעת ריאות

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

מודל הפרה-קליני של השתלת לב אורתוטופית

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...