עבודה זו מומנה על ידי מענק NIH CA113734 הוענק לF Yull והמחלקה לענייני יוצאי הצבא (TS לקוול).

כל הניסויים בבעלי החיים אושרו על ידי הטיפול באוניברסיטה ונדרבילט המוסדי בעלי החיים ושימוש ועדה. 1. הכנת עכברים הטרנסגניים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקבות עכברים, חיוביים לNGL (N-F-κB-G FP-L uciferase) הכתב transgene (שתואר לעיל 1) משמשים להליך זה. כאשר נקבות לפחות 6 שבועות של גיל, חבר אותם עם זכר סוג פראי FVB. הרמון רבייה ניתן להשתמש (עד 4 נקבות בכלוב עם זכר 1). (לתשומת הלב: עכברי מתח FVB שמשו למחקר הנוכחי עכברי מתח כהים כגון C57Bl6 עשויים לשמש גם, אבל עכברים אלו חייבים להיות מגולחים לפני ההדמיה.). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מ 15 ימים לאחר הזדווגות, בדוק את הנשים באופן קבוע לסימנים של הריון (היקף גדול בולט). כל נקבה יש להפריד לאחר ההריון והזכר הוסר מהכלוב הפעם הנקבה האחרונה להריון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צפו הנקבות המופרדותד לשים לב לתאריך לידה, כאשר המלטה מופיעה. המלטה של ​​לפחות 6 גורים נדרשת להנקה מספקת. שמונה ימים לאחר לידתו של ההמלטה, להמשיך בפרוטוקול (ראה איור 1 עבור סכמטי ציר זמן). </li></ol> 2. הכנה להזרקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממס את ה LPS coli בPBS לריכוז סופי של 0.1 מיקרוגרם / μl. 50 μl של פתרון זה, או סך של 5 מיקרוגרם, יהיה ניתן להזריק לתוך בלוטת החלב. הכן את המבחנה שנייה של PBS לבד לשמש להזרקת שליטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדרת ביתור וציוד הרדמה isoflurane. מנגנון אף מחודד צריך להיות מאובטח לשלב של הביתור שבו הניח את העכבר. מקור אור טוב, בין אם מההיקף עצמו או מפנסי תאורה נוספים צריך גם להיות מוכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שההגדרה היא מוחלטת, להפעיל את מכונת isoflurane וזרימת אוויר. </li></ol> 3. הזרקת Intraductal של LPS <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען את מזרק מחט הקצרה עם 50 μl של פתרון LPS. להגדיר את זה בצד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדם את העכבר להיות מוזרק על ידי הנחת הראשון הנקבה לתוך קופסה מלאה isoflurane ואז ברגע נשימה מואטת, להעביר אותה לבמה ומניח את אפה בתוך האף המחודד. השתמש קמצוץ בוהן כדי לאשר את העכבר הוא מורדם באופן מלא. לפקח הנשימה של העכבר לאורך התהליך ולהתאים את רמת isoflurane בהתאם. הכלוב ובו של הגורים שהנקבה כבר נלקחה מיש להפריש בזהירות עד שניתן יהיה להחזיר את הסכר לאחר ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בטיפה קטנה של אתנול 70% כדי להפוך את המעייל שכב ולעזור לדמיין הפטמה המחוברת לבלוטת חלב # 4 מפשעתי ממש על הבטן התחתונה של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התמקד הביתור לתצוגה מיטבית של הפטמה. זהירות להשתמש בערכה של מלקחיים עדינים יותר כדי למשוך את הפטמה מהעור, אך אין לנקב או לפצוע את הפטמה בצורה כלשהי.מלקחיים לא צריכים להיות שלובים בכוח כאשר מניפולצית הרקמה, אבל שימוש עם אחיזה קלה הדורשת את הכמות המינימאלית של לחץ על הפטמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במלקחיים ביד השמאל בעדינות להחזיק את הפטמה במקום. לאט לאט תביא את מזרק preloaded לתוך שדה ראייה של שימוש ביד ימין. המזרק צריך להיות מוחזק כך שאף מיקום מחדש צריך להתרחש כדי להזריק את התוכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהמזרק נמצא בתצוגה, מטרה בזהירות בפתיחת ductal הקטנה בתוך מרכז הפטמה, ולהכניס את המזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבלי למקם מחדש את היד, להזרים את תכולת המזרק ולהוציא את המחט מהפטמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען מזרק שני עם 50 μl של PBS להזרקת השליטה. למקם את העכבר על במה ולתצוגה הטובה ביותר של הפטמה השמאלית # 4 מפשעתי חלב הבלוטה בצד השני של הבטן התחתונה של העכבר. חזור על שלבים 3.4-3.7 באמצעות מזרק PBS הטעון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שתי הזריקות Complete, להפסיק הרדמה ולהזיז את העכבר לכלוב התאוששות. לפקח על הנקבה כדי להבטיח שהיא הופכת ניידת בתוך 5 דקות. אפשר העכבר כדי להישאר בכלוב ההתאוששות לשעה 1. לאחר 1 שעה של התאוששות, הנח את הגב הנשי לכלוב עם גוריה של גורים. עכברים צריכים להיות במעקב תקופתי להזרקת 6 שעתי הודעה לפני שימשיכו להדמיה. מניסיוננו, השלכות שליליות נרשמו באו נקבה או את הגורים במהלך התקופה שבין הזרקה והדמיה. עם זאת, אם סימני המצוקה הם נצפו בנקבה (למשל היציבה הכפופה, נושכים או שמירה על מקום ההזרקה, עייפות כללית) או את הגורים (אין תנועה, צבע כחלחל של עור) הניסוי יש להפסיק. </li></ol> 4. Bioluminescent הדמיה למדמיינת פעילות NF-κB <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שעכברים כבר הועברו למתקן ההדמיה, תתחיל לבצע את הליך ההדמיה על ידי פתיחת התוכנה ומאתחל את המחשב. הפעל הואמכונת oflurane וזרימת אוויר, ולהבטיח כי ההרדמה זורמת לשניהם תיבה וחדר ההדמיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר תחת הרדמת isoflurane בתיבת ההרדמה הברורה. ברגע שיש האטת נשימה, השתמש קמצוץ בוהן כדי לאשר את העכבר הוא מורדם באופן מלא. ואז, להזרים 100 μl של מצע luciferin לעכבר בזריקה רטרו מסלולית 5 שימוש במזרק סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מייד להעביר את העכבר לחדר ההדמיה ולהציב את אפה תחת אף קונוס isoflurane ממוקם שם. העכבר צריך להיות פרקדן. לאבטח כל רגל לבמה עם קלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקלט את ההגדרות המתאימות לתוכנת IVIS לקחת גם תמונה לבנה אור צילום ותמונה של פעילות bioluminescent. זמן החשיפה צריך להיות 10 שניות. לרכוש את התמונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שתמונות שרכשו, מאפשר עכבר כדי להתאושש ואז למקם אותה בכלוב עם גוריה ולעקוב מעת לעת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צילום וזורחתמונות הם כיסו באופן אוטומטי ומוצגות על המסך, כמו באיור 2. לנתח את התמונות שנרכשו על ידי צבת האזור של עניין או חוגים &quot;החזר על השקעה&quot; של גודל שווה על כל צד של הבטן התחתונה של העכבר (אחד מעל בלוטת PBS הזריק ואחת מעל בלוטת LPS הזריק-). הגדר את הקריאה לפוטונים. מספר צריך להיות מוצג מצביע הארה זוהתה בתוך כל החזר על השקעה (ראה איור 2B). השתמש במספר זה בניתוח סטטיסטי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להציג את התמונה האופטימלית, בהמשך להתאים את הסף של האות המוצגת. זה לא ישנה את ההארה המוחלטת קריאה החוצה אבל יאפשר לך להסיר את אות רקע ולהמחיש את ההבדלים בין השליטה ובלוטת LPS-טופל. להקטין את כמות ההארה הראתה עד בלוטת PBS הזריק הוא ללא אות רקע. זה צריך לעזוב את האותות המוגברים בבלוטה עדיין ניכרת בתמונה, כפי שניתן לראות באיור 2 LPS-טופלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Additionaניתוח הליטר, כולל מבחני RNA חלבון ו, ניתן להשלים עם רקמת שד הנשי שנגבתה מנתיחה שלאחר המוות 6. </li></ol> 5. נציג תוצאות כדי להשיג תוצאות לפרש מהשיטות הללו, LPS (או PBS) חייב להיות חדור רק לצינוריות החלב, ומשאיר את הרקמות הסמוכות באין מפריע. הזרקה לתוך הרקמה התת עורית מסביב לפטמה תגרום דלקת עקב פציעה ולא הזיהום המדומה. ההזרקה של trypan הכחול צבע המדוללת ב PBS היא מועילה כאשר לומדים את הטכניקה. 3A האיור מראה בלוטה הוזרקה בהצלחה רוויה עם 100 μl של trypan כחול ב PBS. כפי שניתן לראות, רק עץ ductal צריך להיות מלא בפתרון המוזרק, ולא אמור להיות בולוס באזור ההזרקה. &quot;בולוס&quot; בהקשר זה הוא ההצטברות של הנוזל שהוזרק בפטמה או ברקמות המקיפות את הפטמה בלי עירוי לתוך עץ ductal. זה shלבד באיור 3B. שים לב כי הזריקות בפועל מוצגות באיור 3 הושלמו בנקבה ביום 21 להנקה. בזמן השיא של הנקה (יום 8-10, בשלב שבי LPS מוזרק באמצעות הפרוטוקול הנוכחי), חלב בשפע, וקשה לדמיין את הצינוריות ולקבוע אם הזריקה הושלמה כהלכה. לכן, כעבור זמן נקודות בהנקה הן טובות יותר לזריקות בפועל. זריקה מוצלחת של LPS לתוצאות צינוריות החלב בפעילות מוגברת NF-κB בתוך הבלוטה. זה צריך להיות ברור בעכבר על כתב IVIS הדמיה, ובלוטת LPS הזריק צריכה לוציפראז פעילות גבוהה באופן משמעותי (שנמדד על ידי פוטון ספירה) מבלוטת PBS-המוזרקת, כפי שמוצג באיור 2 (בממוצע, בלוטת LPS קוראה 200% של אות שליטת PBS). עלייה משמעותית מבחינה סטטיסטית בהארה בתוך בלוטות LPS-טופלה כcompared לשליטה הנגדית הושג למרות השלמת קבוצה של 4 עכברים 4. מחקר נוסף אפשר גם נצל הזרקת החלב intraductal של או E. חיידק או LPS לNF-κB כתב הטרנסגניים. דומה לעבודה שלנו, מחברים אלה ראו גידול משמעותי ב6 שעתי פעילות כתב לאחר ה coli הזרקה 2. שימו לב, עקב פעילות מכוננת NF-κB במוח ובאברי בטן אחרים, הראשים והבטן של עכברי כתבתנו מראים בעקביות אות כאשר צלמו, אפילו בתחילת מחקר לפני כל מניפולציה. לפיכך, האות הזה יש להתעלם בנוגע לניסוי זה. אות ברורה צריכה להישאר בבלוטת החלב LPS הזריק אחרי התמונה לקריאה מתוך מותאמת ללמזער הארת רקע בבלוטת PBS. תרשים 2 מציג תמונות עם הרקע מופחת. זריקה לא מוצלחת של הבלוטה תהיהתוצאה ככל הנראה ניזק לפטמה. זה יגרום הצביע דלקת, עור ברמה שתהיה ברור על הדמיה. סוג זה של פציעת אות יהיה חזק מאוד ומוגבל לאזור הפטמה שבו הניזק התרחש, אינו בוקע בכל הבלוטה, כפי שראה לאחר זריקה מוצלחת LPS לתוך הצינורות. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/4030/4030fig1.jpg" /> איור 1. סכמטי של הליך. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/4030/4030fig2.jpg" /> איור 2. תוצאות מייצגות מן IVIS bioluminescent ההדמיה. () נרכשות תמונה עם רקע מופחת, חושפות פעילות לוציפראז גדל בבלוטת LPS-המוזרקת. (ב) תמונה מתוך באזור quantifications ריבית נוספת. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4030/4030fig2large.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.</a> <img alt = &quot;איור 3&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/4030/4030fig3.jpg&quot; /&gt; איור 3 הזרקת עיסוק:.. בלוטת חלב מוזרקת עם צבע באמצעות הזרקת intraductal כדי לבדוק את הדיוק של משלוח דרך הפטמה, עכבר ב 21 יום של הנקה היה מוזרק עם 100 μl של הצבע הכחול trypan המדולל ב PBS. בעקבות קרבה, הבלוטה נחשפה להדמיה. () זריקה מוצלחת ו( B) בולוס של צבע בפטמה.

<ol>
	<li>Everhart, M. B., Han, W., Sherrill, T. P., Arutiunov, M., Polosukhin, V. V., Burke, J. R., Sadikot, R. T., Christman, J. W., Yull, F. E., Blackwell, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duration+and+intensity+of+NF-&#954;B+activity+determine+the+severity+of+endotoxin-induced+acute+lung+injury.">Duration and intensity of NF-&#954;B activity determine the severity of endotoxin-induced acute lung injury.</a> The Journal of Immunology. 176, 4995-5005 (2006).</li><li>Notebaert, S., Carlsen, H., Janssen, D., Vandenabeele, P., Blomhoff, R., Meyer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+NF-&#206;&#186;B+activity+during+Escherichia+coli-induced+mammary+gland+infection.">In vivo imaging of NF-&#206;&#186;B activity during Escherichia coli-induced mammary gland infection.</a> Cellular Microbiology. 10, 1249-1258 (2008).</li><li>Elazar, S., Gonen, E., Livneh-Kol, A., Rosenshine, I., Shpigel, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+recruitment+in+endotoxin-induced+murine+mastitis+is+strictly+dependent+on+mammary+alveolar+macrophages.">Neutrophil recruitment in endotoxin-induced murine mastitis is strictly dependent on mammary alveolar macrophages.</a> Veterinary Research. 41, 10 (2010).</li><li>Connelly, L., Barham, W., Pigg, R., Sait-Jean, L., Sherrill, T., Cheng, D. S., Chodosh, L. A., Blackwell, T. S., Yull, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+nuclear+factor+kappaB+in+mammary+epithelium+promotes+milk+loss+during+mammary+development+and+infection.">Activation of nuclear factor kappaB in mammary epithelium promotes milk loss during mammary development and infection.</a> J. Cell. Physiol. 222, 73-81 (2010).</li><li>Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+injections+in+mice.">Retro-orbital injections in mice.</a> Lab Animal. 40, 155-160 (2011).</li><li>Plante, I., Stewart, M. K., Laird, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+mammary+gland+development+and+function+in+mouse+models.">Evaluation of mammary gland development and function in mouse models.</a> J. Vis. Exp. (21), e2828 (2011).</li><li>Behbod, F., Kittrell, F. S., LaMarca, H., Edwards, D., Kerbawy, S., Heestand, J. C., Young, E., Mukhopadhyay, P., Yeh, H., Allred, D. C., Hu, M., Polyak, K., Rosen, J. M., Medina, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+intraductal+human-in-mouse+transplantation+model+mimics+the+subtypes+of+ductal+carcinoma+in+situ.">An intraductal human-in-mouse transplantation model mimics the subtypes of ductal carcinoma in situ.</a> Breast Cancer Research. 11, R66 (2009).</li><li>Zheng, J., Watson, A. D., Kerr, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+expression+analysis+of+lipopolysaccharide-induced+mastitis+in+a+mouse+model.">Genome-wide expression analysis of lipopolysaccharide-induced mastitis in a mouse model.</a> Infection and Immunity. 74, 1907-1915 (2006).</li><li>Nguyen, D., Beeman, N., Lewis, M., Schaack, J., Neville, M. C., Ip, M. M., Asch, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Intraductal Injection into the Mouse Mammary Gland. Methods in Mammary Gland Biology and Breast Cancer Research. , 259-270 (2000).</li><li>Lee, J. W., Paape, M. J., Zhao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+bovine+soluble+CD14+reduces+severity+of+experimental+Escherichia+coli+mastitis+in+mice.">Recombinant bovine soluble CD14 reduces severity of experimental Escherichia coli mastitis in mice.</a> Veterinary Research. 34, 307-316 (2003).</li><li>Elazar, S., Gonen, E., Livneh-Kol, A., Rosenshine, I., Shpigel, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+neutrophils+but+not+mammary+alveolar+macrophages+in+a+murine+model+of+acute+Escherichia+coli+mastitis.">Essential role of neutrophils but not mammary alveolar macrophages in a murine model of acute Escherichia coli mastitis.</a> Veterinary Research. 41, 53 (2010).</li><li>Bannerman, D. D., Paape, M. J., Hare, W. R., Sohn, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+levels+of+LPS-binding+protein+in+bovine+blood+and+milk+following+bacterial+lipopolysaccharide+challenge.">Increased levels of LPS-binding protein in bovine blood and milk following bacterial lipopolysaccharide challenge.</a> Journal of Dairy Science. 86, 3128-3137 (2003).</li><li>Gonen, E., Vallon-Eberhard, A., Elazar, S., Harmelin, A., Brenner, O., Rosenshine, I., Jung, S., Shpigel, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+4+is+needed+to+restrict+the+invasion+of+Escherichia+coli+P4+into+mammary+gland+epithelial+cells+in+a+murine+model+of+acute+mastitis.">Toll-like receptor 4 is needed to restrict the invasion of Escherichia coli P4 into mammary gland epithelial cells in a murine model of acute mastitis.</a> Cellular Microbiology. 9, 2826-2838 (2007).</li><li>Notebaert, S., Demon, D., Vanden Berghe, ., Vandenabeele, T., P, ., Meyer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+mediators+in+Escherichia+coli-induced+mastitis+in+mice.">Inflammatory mediators in Escherichia coli-induced mastitis in mice.</a> Comparative Immunology, Microbiology, and Infectious Diseases. 31, 551-565 (2008).</li><li>Osterman, K. L., Rahm, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lactation+mastitis:+bacterial+cultivation+of+breast+milk+symptoms,+treatment,+and+outcome.">Lactation mastitis: bacterial cultivation of breast milk symptoms, treatment, and outcome.</a> Journal of Human Lactation. 16, 297-302 (2000).</li><li>Sordillo, L. M., Streicher, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+Gland+Immunity+and+Mastitis+Susceptibility.">Mammary Gland Immunity and Mastitis Susceptibility.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 7, 135-146 (2002).</li><li>Blackwell, T. S., Yull, F. E., Chen, C. L., Venkatakrishnan, A., Blackwell, T. R., Hicks, D. J., Lancaster, L. H., Christman, J. W., Kerr, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+genetically+altered+mice+to+investigate+the+role+of+nuclear+factor-kappa+B+activation+and+cytokine+gene+expression+in+sepsis-induced+ARDS.">Use of genetically altered mice to investigate the role of nuclear factor-kappa B activation and cytokine gene expression in sepsis-induced ARDS.</a> Chest. 116, 73S-74S (1999).</li><li>Stathopoulos, G. T., Sherrill, T. P., Cheng, D. S., Scoggins, R. M., Han, W., Polosukhin, V. V., Connelly, L., Yull, F. E., Fingleton, B., Blackwell, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+NF-kappaB+activation+promotes+urethane-induced+lung+carcinogenesis.">Epithelial NF-kappaB activation promotes urethane-induced lung carcinogenesis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 104, 18514-18519 (2007).</li><li>Blackwell, T. S., Hipps, A. N., Yamamoto, Y., Han, W., Barham, W. J., Ostrowski, M. C., Yull, F. E., Prince, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NF-&#954;B+signaling+in+fetal+lung+macrophages+disrupts+airway+morphogenesis.">NF-&#954;B signaling in fetal lung macrophages disrupts airway morphogenesis.</a> The Journal of Immunology. 187, 2740-2747 (2011).</li><li>Chiang, S. H., Bazuine, M., Lumeng, C. N., Geletka, L. M., Mowers, J., White, N. M., Ma, J. T., Zhou, J., Qi, N., Westscott, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+protein+kinase+IKKepsilon+regulates+energy+balance+in+obese+mice.">The protein kinase IKKepsilon regulates energy balance in obese mice.</a> Cell. 138, 961-975 (2009).</li><li>Singh, M. V., Kapoun, A., Higgins, L., Kutschke, W., Thurman, J. M., Zhang, R., Singh, M., Yang, J., Guan, X., Lowe, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2+/calmodulin-dependent+kinase+II+triggers+cell+membrane+injury+by+inducing+complement+factor+B+gene+expression+in+the+mouse+heart.">Ca2+/calmodulin-dependent kinase II triggers cell membrane injury by inducing complement factor B gene expression in the mouse heart.</a> The Journal of Clinical Investigation. 119, 986-996 (2009).</li></ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

כאן אנו מנצלים עכבר מהונדס NF-κB כתב וטכניקת הזרקה מותאמת לדלקת בשד מודל, דלקת ברקמת השד נגרמת לרוב על ידי זיהום חיידקים. השלב הקריטי ביותר בהליך זה הוא הזרקת intraductal עצמו. בפועל, זה בדרך כלל ברור אם הזרקת intraductal הייתה מוצלחת. ההזרקה ש?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> Lipopolysaccharide מחיידקי Escherichia (LPS) </td><td> סיגמא </td><td> L 2880 </td><td> סרוטיפ 055: B5 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Mediatech, Inc </td><td> 46-013-CM </td><td></td></tr><tr><td> מזרק אינסולין מד 31 </td><td> הקיטון דיקינסון </td><td> 328438 </td><td> מחט קצרה </td></tr><tr><td> מצבטים </td><td> מכשירי Precision העולם </td><td> 15908 </td><td></td></tr><tr><td> ביתור היקף </td><td> ליקה </td><td> M3Z </td><td></td></tr><tr><td> טרל isoflurane, USP </td><td> MINRAD Inc עבור Rx עלית </td><td> NDC 66794-011-25 </td><td></td></tr><tr><td> 200 מערכת IVIS הדמיה &lt;/ Td&gt; <td> קליפר (לשעבר Xenogen) </td><td> N / </td><td></td></tr><tr><td> מזרק להזרקת luciferin </td><td> הקיטון דיקינסון </td><td> 309597 </td><td> 1cc; 26G5 / 8 </td></tr><tr><td> D-luciferin Firefly, monohydrate מלח נתרן (מצע luciferin) </td><td> כימיה וביולוגית ביוסינט </td><td> L-8240 </td><td> דלל עד 10 מ&quot;ג / מ&quot;ל </td></tr></tbody></table>

intraductal injection of lps as a mouse model of mastitis: signaling visualized via an nf-&kappa;b reporter transgenic

מודלים בבעלי חיים למחלות אנושיות הם הכרחיים על מנת ללמוד בקפדנות שלבי התקדמות מחלה ומנגנונים נלווים, וסופו של דבר, כמודלים טרום קליניים כדי לבדוק התערבויות. בשיטות אלה, אנו מתארים טכניקה שבה lipopolysaccharide (LPS) מוזרקת לתוך בלוטת החלב המניק עכבר דרך הפטמה, ביעילות הדלקת בשד דוגמנות, או דלקת, של הבלוטה. תוצאות זיהום זה מדומה במוגבר גרעינית גורם kappa B (NF-κB) איתות, ראו בעיני רווחו באמצעות הדמית bioluminescent של עכבר כתב לוציפראז NF-κB 1. המטרה שלנו בפיתוח שיטות אלה הייתה ללמוד הדלקת קשורה בדלקת בשד בבלוטת המניקות, אשר לעתים קרובות כוללת אדמומיות, נפיחות, וחדירה לתא חיסונית 2,3. לכן, היינו מודעים היטב לכך שחתך, או כל סוג של פציעה של העור, הפטמה, או בלוטה כדי להציג את יכל LPSלא להיות מנוצל בשיטות שלנו מאז שהגישה הזאת עשויה לבלבל את הקריאה מתוך של דלקת. אנחנו גם רצויים שיטה ישר קדימה, שלא הצריך pipettes נעשה במיוחד מצויר ביד או על השימוש בmicromanipulators להחזיק כלים מיוחדים האלה במקום. לפיכך, אנו נחושים להשתמש במזרק אינסולין זמין מסחרי ולהזריק לתוך סוכן צינור החלב של פטמה ללא פגע. שיטה זו הייתה מוצלחת ואפשרה לנו ללמוד הדלקת קשורה בהזרקת LPS ללא תופעות נוספות מעולפות על ידי התהליך של הזרקה. בנוסף, שיטה זו מנוצלת גם NF-κB לוציפראז כתב מהונדס עכבר וטכנולוגיית הדמית bioluminescent חזותי וכמותית להראות גדל NF-κB איתות בתוך הבלוטה LPS-4 המוזרקת. שיטות אלה הן עניין לחוקרים מתחומים רבים המבקשים למחלת מודל בתוך בלוטת חלב מניקות, כסופו של דבר, הטכניקהמתואר כאן יכול להיות מנוצל עבור זריקה של מספר החומרים, ואינו מוגבל לLPS בלבד.

Watch this Scientific Journal Video about Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-ÎºB Reporter Transgenic at JoVE.com

Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-&amp;kappa;B Reporter Transgenic

מתואר כאן היא טכניקה שבה lipopolysaccharide מוזרקת לתוך בלוטת החלב המניק באמצעות עכבר הפטמה כדי לדמות דלקת בשד, מצב שנגרם בדרך כלל על ידי זיהום חיידקים. תוצאות הזרקה בLipopolysaccharide מוגברת גרעינית גורם kappa B (NF-κB) איתות, מדמיינים באמצעות הדמית bioluminescent של עכבר כתב לוציפראז NF-κB.

הזרקת Intraductal של LPS כמודל עכבר של דלקת בשד: איתות מדמיינת דרך NF-κB כתב מהונדס

Animal models of human disease are necessary in order to rigorously study stages of disease progression and associated mechanisms, and ultimately, as ...

intraductal-injection-lps-as-mouse-model-mastitis-signaling

Research

JoVE Journal

Medicine

Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-&kappa;B Reporter Transgenic

19.1K Views.  Vanderbilt University Medical Center. מתואר כאן היא טכניקה שבה lipopolysaccharide מוזרקת לתוך בלוטת החלב המניק באמצעות עכבר הפטמה כדי לדמות דלקת בשד, מצב שנגרם בדרך כלל על ידי זיהום חיידקים. תוצאות הזרקה בLipopolysaccharide מוגברת גרעינית גורם kappa B (NF-κB) איתות, מדמיינים באמצעות הדמית bioluminescent של עכבר כתב לוציפראז NF-κB.

Video: Intraductal Injection of LPS as a Mouse Model of Mastitis: Signaling Visualized via an NF-&kappa;B Reporter Transgenic

Mouse Bladder Wall Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. Before starting injections, the surgical area must be cleaned with soap and water and antiseptic solution. Surgical equipment must be sterilized before use and between each animal. Each mouse is placed under inhaled isoflurane anesthesia (2-5% for induction, 1-3% for maintenance) and its bladder exposed by making a midline abdominal incision with scissors. If the bladder is full, it is partially decompressed by gentle squeezing between two fingers. The cell suspension of interest is intramurally injected into the wall of the bladder dome using a 29 or 30 gauge needle and 1 cc or smaller syringe. The wound is then closed using wound clips and the mouse allowed to recover on a warming pad. Bladder wall injection is a delicate microsurgical technique that can be mastered with practice.

Mouse bladder wall injection is a useful approach to orthotopically study bladder stem cell and cancer biology. This delicate microsurgical method can be mastered with careful technique and practice.

שלפוחית ​​השתן עכבר וול Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in exponential tumor growth and metastasis to distal tissues and the collapse of anti-tumor immunity. Many useful animal models exist to study breast cancer, but none completely recapitulate the disease progression that occurs in humans. In order to gain a better understanding of the cellular interactions that result in the formation of latent metastasis and decreased survival, we have generated an inducible transgenic mouse model of YFP-expressing ductal carcinoma that develops after sexual maturity in immune-competent mice and is driven by consistent, endocrine-independent oncogene expression. Activation of YFP, ablation of p53, and expression of an oncogenic form of K-ras was achieved by the delivery of an adenovirus expressing Cre-recombinase into the mammary duct of sexually mature, virgin female mice. Tumors begin to appear 6 weeks after the initiation of oncogenic events. After tumors become apparent, they progress slowly for approximately two weeks before they begin to grow exponentially. After 7-8 weeks post-adenovirus injection, vasculature is observed connecting the tumor mass to distal lymph nodes, with eventual lymphovascular invasion of YFP+ tumor cells to the distal axillary lymph nodes. Infiltrating leukocyte populations are similar to those found in human breast carcinomas, including the presence of &#945;&#946; and &#947;&#948; T cells, macrophages and MDSCs. This unique model will facilitate the study of cellular and immunological mechanisms involved in latent metastasis and dormancy in addition to being useful for designing novel immunotherapeutic interventions to treat invasive breast cancer.

Activation of latent mutations with adenovirus-Cre into the mammary ductal system results in a clinically relevant metastatic breast cancer. Incorporation of a YFP promoter allows tracking of distal metastatic tumor cells. This model is useful to study latent metastasis, anti-tumor immunity, and for designing novel immunotherapies to treat breast cancer.

חניכה של סרטן השד גרורתי על ידי מיקוד של האפיתל ductal עם Adenovirus-Cre: דגם רומן מהונדס עכבר של סרטן השד

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As such, primary or &#39;neuronal-like&#39; cell culture systems are commonly utilized. While&#160;these systems are relatively easy to work with, and are useful model systems in which various functional outcomes (such as cell death) can be readily quantified, the examined outcomes and pathways in cultured immature neurons (such as excitotoxicity-mediated cell death pathways) are not necessarily the same as those observed in mature brain, or in intact tissue. Therefore, there is the need to develop models in which cellular mechanisms in mature neural tissue can be examined. We have developed an in vitro technique that can be used to investigate a variety of molecular pathways in intact nervous tissue. The technique described herein utilizes rat cortical tissue, but this technique can be adapted to use tissue from a variety of species (such as mouse, rabbit, guinea pig, and chicken) or brain regions (for example, hippocampus, striatum, etc.). Additionally, a variety of stimulations/treatments can be used (for example, excitotoxic, administration of inhibitors, etc.). In conclusion, the brain slice model described herein can be used to examine a variety of molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

We have developed a brain slice model which can be used to examine molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.&#160;This technique generates viable mature brain tissue and reduces animal numbers required for experimentation, whilst keeping the neuronal circuitry, cellular interactions, and postsynaptic compartments partly intact.

הפעלת יתר רעיל גירוי של המוח כMicroslices<em&gt; במבחנה</em&gt; דגם של שבץ

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson's Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on animal models. The identification of PD-associated genes has led to the development of genetic PD models. Most transgenic &#945;-SYN mouse models develop gradual &#945;-SYN pathology but fail to display clear dopaminergic cell loss and dopamine-dependent behavioral deficits. This hurdle was overcome by direct targeting of the substantia nigra with viral vectors overexpressing PD-associated genes. Local gene delivery using viral vectors provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. Specific brain regions can be targeted (e.g. the substantia nigra), expression can be induced in the adult setting and high expression levels can be achieved. Further, different vector systems based on various viruses can be used. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based alpha-synuclein animal model for Parkinson&#39;s disease.

Development of an Alpha-synuclein Based Rat Model for Parkinson&#039;s Disease via Stereotactic Injection of a Recombinant Adeno-associated Viral Vector

This manuscript describes how viral vector-mediated local gene delivery provides an attractive way to express transgenes in the central nervous system. The protocol outlines all crucial steps to perform a viral vector injection in the substantia nigra of the rat to develop a viral vector-based animal model for Parkinson's disease.

פיתוח של מודל עכברוש מבוסס אלפא-synuclein עבור מחלת פרקינסון באמצעות הזרקת stereotactic של וקטור ויראלי הקשורים מוקטורים

In order to study the molecular pathways of Parkinson&#39;s disease (PD) and to develop novel therapeutic strategies, scientific investigators rely on ...

Induction and Micro-CT Imaging of Cerebral Cavernous Malformations in Mouse Model

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have been established by tamoxifen induced deletion of Ccm genes in postnatal animals. These mouse models provide invaluable tools to investigate molecular mechanism and therapeutic approaches for CCM disease. An accurate and quantitative method to assess lesion burden and progression is essential to harness the full value of these animal models. Here, we demonstrate the induction of CCM disease in a mouse model and the use of the contrast enhanced X-ray micro computed tomography (micro-CT) method to measure CCM lesion burden in mouse brains. At postnatal day 1 (P1), we used 4-hydroxytamoxifen (4HT) to activate Cre recombinase activity from the Cdh5-CreErt2 transgene to cleave the floxed allele of Ccm2. CCM lesions in mouse brains were analyzed at P8. For micro-CT, iodine based Lugol&#39;s solution was used to enhance contrast in brain tissue. We have optimized the scan parameters and utilized a voxel dimension of 9.5 &#181;m, which lead to a minimum feature size of approximately 25 &#181;m. This resolution is sufficient to measure CCM lesion volume and number globally and accurately, and provide high-quality 3-D mapping of CCM lesions in mouse brains. This method enhances the value of the established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for CCM and other cerebrovascular diseases.

This protocol demonstrates the induction of cerebral cavernous malformation disease in a mouse model and uses contrast enhanced micro computed tomography to measure lesion burden. This method enhances the value of established mouse models to study the molecular basis and potential therapies for cerebral cavernous malformation and other cerebrovascular diseases.

אינדוקציה והדמיה מיקרו-CT של המוח מומים חלול במודל עכבר

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant for targeting neovascular glaucoma, a sight-threatening complication of diabetic retinopathy. This method is based on the induction of iris vascular response by a series of self-sealing uveal punctures on BALB/c mice and takes advantage of the postpartum maturation of mouse ocular vasculature. Mouse pups undergo uveal punctures from postnatal day 12.5, when the pups naturally open their eyes, until postnatal day 24.5. Due to the transparency of the cornea, iris vasculature can be analyzed easily through time by noninvasive in vivo methods. Furthermore, the semitransparent iris of BALB/c mice can be flatmounted for detailed immunohistologic analysis with minimal non-specific background staining. In this model, angiogenesis is mainly driven by the inflammatory and plasminogen activating systems. The puncture-induced model is the first to induce iris neovascularization in small rodents, and has the advantage of allowing direct noninvasive in vivo analysis of the angiogenic process. Moreover, the model can be combined with angiogenic modulating substances, which highlights its potential in the study of angiogenesis with an in vivo perspective.

Iris neovascularization, a common complication of ischemic retinal disease, may lead to sight-threatening neovascular glaucoma. Here, we describe a murine protocol for inducing experimental iris neovascularization that may be used for noninvasive evaluation of angiogenesis-modulating substances.

ניקוב-Induced כורוידאלית איריס כמודל העכבר של Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit patients. Despite treatment advances over the last decades, ARDS patients still suffer mortality rates between 35 and 40%. There is still a need for further research to improve the outcome of patients suffering from ARDS. One problem is that no single animal model can mimic the complex pathomechanism of the acute respiratory distress syndrome, but several models exist to study different parts of it. Oleic acid injection (OAI)-induced lung injury is a well-established model for studying ventilation strategies, lung mechanics and ventilation/perfusion distribution in animals. OAI leads to severely impaired gas exchange, deterioration of lung mechanics and disruption of the alveolo-capillary barrier. The disadvantage of this model is the controversial mechanistic relevance of this model and the necessity for central venous access, which is challenging especially in smaller animal models. In summary, OAI-induced lung injury leads to reproducible results in small and large animals and hence represents a well-suited model for studying ARDS. Nevertheless, further research is necessary to find a model that mimics all parts of ARDS and lacks the problems associated with the different models existing today.

In this article, we present a protocol to induce acute lung injury in pigs by central-venous injection of oleic acid. This is an established animal model for studying the acute respiratory distress syndrome (ARDS).

הזרקת חומצה אולאית חזירים כמודל עבור תסמונת מצוקה נשימתית חריפה

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Precision-Cut Liver Slices as an Ex Vivo Model of Liver Biology

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic fatty liver disease, metabolic liver disease, and liver cancer) requires experimental manipulation of animal models and in vitro cell cultures. Both techniques have limitations, such as the requirement of large numbers of animals for in vivo manipulation. However, in vitro cell cultures do not reproduce the structure and function of the multicellular hepatic environment. The use of precision-cut liver slices is a technique in which uniform slices of viable mouse liver are maintained in laboratory tissue culture for experimental manipulation. This technique occupies an experimental niche that exists between animal studies and in vitro cell culture methods. The presented protocol describes a straightforward and reliable method to isolate and culture precision-cut liver slices from mice. As an application of this technique, ex vivo liver slices are treated with bile acids to simulate cholestatic liver injury and ultimately assess the mechanisms of hepatic fibrogenesis.

This protocol provides a simple and reliable method for the production of viable precision-cut liver slices from mice. The ex vivo tissue samples can be maintained under laboratory tissue culture conditions for multiple days, providing a flexible model to examine liver pathobiology.

מורנה דיוק-גזור פרוסות הכבד כמודל Vivo Ex של ביולוגיה של הכבד

Understanding the mechanisms of liver injury, hepatic fibrosis, and cirrhosis that underlie chronic liver diseases (i.e., viral hepatitis, non-alcoholic ...

A Mouse Model for Chronic Pancreatitis via Bile Duct TNBS Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. Several rodent models have been developed to study CP, of which the bile duct 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) infusion model replicates the features of neuropathic pain seen in CP. However, bile duct drug infusion in mice is technically challenging. This protocol demonstrates the procedure of bile duct TNBS infusion for generation of a CP mouse model. TNBS was infused into the pancreas through the ampulla of Vater in the duodenum. This protocol optimized drug volume, surgical techniques, and drug handling during the procedure. TNBS-treated mice showed features of CP as reflected by bodyweight and pancreas weight reductions, changes in pain-associated behaviors, and abnormal pancreatic morphology. With these improvements, mortality associated with TNBS injection was minimal. This procedure is not only critical in generating pancreatic disease models but is also useful in local pancreatic drug delivery.

Chronic pancreatitis (CP) is a disease characterized by inflammation and fibrosis of the pancreas, often associated with intractable abdominal pain. This article focuses on refining the technique to generate a mouse model of CP via bile duct infusion with 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS).

מודל עכבר לדלקת לבלב כרונית באמצעות עירוי TNBS צינור המרה

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. ...