ברצוננו להודות לעזרה הטכנית המצוינת של אנג&#39;לה Houwing ולסייע באיסוף נתונים מגרטה בושנל.

1. בחירת מטופל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נשים עם כאבי אגן כרוניים לעבור היסטוריה ובדיקה גופנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הלוקליזציה של כאב, בכל קשור לעיתוי מחזור הווסת, סימפטומים הקשורים בם תלונות מעי רגיז או תלונות שלפוחית ​​מצוינת והקליטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נשים שעברו ניתוח לפרוסקופי לכריתה הם הסכימו אפשרית של אנדומטריוזיס ושימוש ברקמותיהם למחקר. </li></ol> 2. טכניקות לפרוסקופי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפרוסקופיה מבוצעת באמצעות טכניקות סטנדרטיות דרך יציאת טבור 5 מ&quot;מ ו 5 מ&quot;מ יציאות נוספות בבטן התחתונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדיקה מדוקדקת של האגן מבוצעת כדי לתאם כל ממצא של אנדומטריוזיס עם לוקליזציה טרום הניתוחית של כאב, כפי שצוין על ידי המטופל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצבע כחול תילן מעורבב עם מלח 1:200 סטרילית ומוזרק על משטחי אגן באמצעות מחט שאיפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השקית שאיבה מבוצעת כדי להסיר עודפיםלצבוע ולשטוף את המשטחים הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האגן נבדק והאזורים של ספיגת צבע כחולה נרשמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר דבר אפשרי, כריתה של האזורים הנגועים של הצפק מבוצעת. </li></ol> 3. סריקה מיקרוסקופית אלקטרונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סעיפים הצפק מאחים בתפירה ללוח telfa סטרילי לשטח את הדגימה ולשמור על כיוון (בצד intraperitoneal מעלה) והניחו במקבע gluteraldehyde (Sigma, סנט לואיס, מיזורי) עבור SEM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דוגמאות היו בכיוון ולאחר קבועות ב1% נאגרו tetroxide אוסמיום לשעה 1 ומיובשת עם ריכוזי אתנול רציפים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דוגמאות יובשו באמצעות דו תחמוצת הפחמן נוזלית ומותקנים על גבי אלומיניום סריקת ספחי מיקרוסקופ אלקטרונים בדבק הכסף colloidal וגמגום מצופות בזהב: סגסוגת פלטינה לעובי של 20 ננומטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיקרוסקופיית אלקטרונים בוצעה באמצעות מודל מיקרוסקופי JEOL JSM-6400 סריקה וphotomicrographs מתקבלים מאזורים 12 אקראיים. </li&gt; </ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

כאבי אגן כרוניים בנשים הוא בעיה יקרה וגרוע הבינה 1. כאבי מחזור הוא הצורה השכיחה ביותר של כאבי אגן משפיעה על 60% מנשים 2 ו 72% מתוך 3 מתבגרים. אנדומטריוזיס הוא מצב דלקתי המשפיע על 5% מנשים נורמליות, אבל נמצא בעד 70% מנשים עם כאבים באגן. בעוד אנדומטריוזיס תורם לכאבי אגן כרוניים (CPP), מנגנון שבאמצעותו גורם לכאב נגעים נשאר לא ברור 4. באופן פרדוקסלי, את חומרת כאב אינה תואמת את החומרה של אנדומטריוזיס 5,6. תסמיני כאב כרוניים כוללים תסמונת מעי רגיז קשור (IBS) וIC יכולים ללכת מאובחנים במשך שנתי 7,8. עלותו המשוערת של אנדומטריוזיס היא מעל 22 מליארד דולרים בארה&quot;ב לבדה 9, אם כי חשבונאי אמיתי קשה להעריך מאז אנדומטריוזיס קשור למחלות כרוניות אחרות, כולל מיגרנה, תסמונת תשישות כרונית, תסמונת מעי רגיז וIC 10,11. הקמתה של אבחנה לאנדומטריוזיס דורשת לפרוסקופיה, אבל מחלה זו היא לעתים קרובות מאובחנת באיחור 12. מחלוקת על מה מהווה אנדומטריוזיס וחוסר ההכשרה מקצועית תורמת לזיהוי עכב 13. ברגע שדמיין, לא כל הנגעים חשודים יכולים להיות מאומתים על ידי פתולוג 14 ובמקרים רבים של CPP, אנדומטריוזיס לא זוכה להערכה 15, אולי בגלל צורות עדינות או סמויות של המחלה 16-19. ברור פרדיגמה חדשה יש צורך לטפל בפער הזה בין תסמינים קליניים של כאב ואת הגישה שלנו לאבחון מחלה משמעותית זה. בעוד מסלולים עצביים המעורבים באטיולוגיה של כאבים באגן קשור עם אנדומטריוזיס הם יותר ויותר למדו 20-25 מפתיעים מעט מאוד ידועים על אופן אנדומטריוזיס המתון תורם לכאבי אגן כרוניים מקומיים (CPP). ניהול כירורגי ורפואי לעתים קרובות אינו מצליח לטפל בכאבים הקשוריםעם 4 זה הפרעה והישנות הן שכיחים. בהתבסס על מחקרים שהוצגו במחקר זה, אנו משערים כי כאב מקומי, חוזר על עצמו וסת וסתית אגן קשור עם אנדומטריוזיס הוא כנראה עקב שיבוש בשלמות הצפק, משני לאנדומטריוזיס שמעליה. ציטוקינים דלקתיים ודם בתוך חלל הצפק של חולי אנדומטריוזיס יהיו גישה ישירה לרקמות אגן innervated הבסיסיות בנקודות של שיבוש הצפק. אמנם, החומר P כבר נמדד ולא מצא להיות שונים בחולי אנדומטריוזיס לעומת 26 פקדים, TNF-α וglycodelin שני מועמדים שנמצאו קשור בכאב בחולי אנדומטריוזיס 27. בעוד סיבי עצב תואר כבר ברירית רחם ונגעי endometriotic 25,28-30, ממצאים אלה איננו אחראים לכאב מקומי הקשור למחלה עדינה או מינימאלית. דוחות לשימוש בbl תילןue תאריך חזרה לשנת 1994, כאשר דיווח Manhes השירות שלה בזיהוי צורות עדינות של 31 אנדומטריוזיס. הצבע כחול תילן לא ה-FDA אשרה לצורך זיהוי של אנדומטריוזיס ולכן, אנו מכירים בכך שהוא מייצג את שימוש מחוץ להתוויה של מוצר זה. יש לנו להשתמש מכתים כחולה תילן של הצפק כדי לעזור לזהות אנדומטריוזיס עדין או בלתי נראה (לואיס וLessey התקציר AAGL / בריסביין גילים, אוסטרליה 2008). לאחרונה, רו-Hain ודיווחו לאופר שימוש דומה של אניל ארגמן לזהות צורות עדינות של מחלה 32 זה. מניסיוננו, אינדיגו ארגמן צבע אינו מבצע את אותו הדבר ואצל חלק מהחולים אינו מכתים אזורים של אנדומטריוזיס שMB מכיר. הבסיס של ספיגת צבע עשוי להיות קשור להפרעה במשטחי אפיתל, כפי שמוצג במודל חולדת שלפוחית ​​השתן ב -22 מוריסון. כאן אנו מדווחים על ראיות הפעם הראשונות שספיגת הצפק של צבע מזוהית עם הפרעת mesothelial וקשור עדיןאו אנדומטריוזיס בלתי נראה על ידי סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים. בנוסף, יציינו, כי משטחים הצפק המוכתמים הופיעו לתאם עם הלוקליזציה מראש ההערכה של כאב בנשים עם CPP. לדוגמה, אם מטופל מדינות שהכאב שלה הוא אופייני בצד ימין, שהוא הצד שאנו בדרך כלל רואים את כתמים כחולים. יתר על כן, מצא שיפור משמעותי בדו&quot;חות שלאחר ניתוח כאב ברוב החולים שבנגעים הצפק אלה resected או ablated. אנו מאמינים טכניקה פשוטה זו תאפשר דיוק אבחון טוב יותר לזיהוי של אנדומטריוזיס העדין, תוך מתן טיפול מלא יותר של אנדומטריוזיס קשור עם CPP. החוסר הפרדוקסלי של קשר בין השלב של אנדומטריוזיס ותפיסת כאב סוף הסוף יכול להיות מובן במונחים של ליקויי הצפק שמרחיבים הרבה יותר רחוק מהנגע הגלוי של אנדומטריוזיס. ניהול כירורגים לעתים קרובות תוצאות symptomaטיק השיפור 33,34 אלא 40 עד 50% מנשים שעברו טיפול יש הקלה חלקית או הישנות מהירה של תסמיניהם 35,36. אנדומטריוזיס Invisible או צורות תת קליניות של המחלה תואר 16-19,37. לכן, אנדומטריוזיס שכבת תאים מאוד עדין או אחת לא יכול להיות מזוהה בקלות, מה שמוביל לאבחנה שגויה של חולי CPP ואבד הזדמנויות כדי להקל על כאב. הצפק הוא שטח מתחת נחקר של ביולוגיה אנושית עם רק כמה מסמכים המתארים את הביולוגיה של ריפוי הצפק 38. מודלים ללימוד אינטראקצית הצפק-רירית רחם הראו הבטחה 39-43. כפי שהראה בעבר על ידי Witz 42, מצא כי תאי רירית רחם נמצאים על משטחים הצפק קשורים בשיבוש הצפק תאי תאים. שימוש explants של הצפק אנושי ותאי האפיתל וסטרומה רירית רחם מבודדים Witz ועמיתיו הראו כי תאי רירית רחם בקלותלדבוק mesothelium הצפק 42, ולפלוש דרך mesothelium ב18-24 שעות 44. בחי, מצאנו כי תאי רירית רחם לדבוק פני השטח החיצוניים של הצפק בלי לפלוש כנראה. לפיכך, אינם פולש אנדומטריוזיס משטח יכול להיות צורה יציבה ומתמשכת של אנדומטריוזיס. נגעי פני שטח &quot;אדומים&quot; עשויים להיות דומים והוכרו כצורה יותר פעילה מבחינה ביולוגית של אנדומטריוזיס 45. קוקס תאר התקשרות והפצה של תאי וסת, רק באזורים של הצפק שניזוקו או ייעדר 46, אבל עבודה עוד יותר על ידי קבוצה זו הציעה גורמים מסיסים גרמו הפרדת mesothelial תא, בדומה למה שנצפינו 47, כולל &quot;רתיעה, התכווצות ופער היווצרות &quot;. בעוד מחקרם והמחקר מאוחר יותר על ידי Witz 40 סכמו שיבוש שאפשר לאתרים של הידבקות ופלישה, הממצאים שלנו של פערים בmesothelium של חולים עם endometriosis קשור עם ספיגת מגה עולה כי נגעי endometriotic התפשטו הרחק מהנגע הראשוני ולשבש הצפק פני השטח מבלי פולש. משבשים ידועים של קשר תאי תאים בטא רירית רחם או אנדומטריוזיס כוללים TNF-α 48 וEphrin A1 49,50. כריתה או אבלציה של הצפק המוכתם MB היא עדיין לא הסטנדרט של הטיפול באנדומטריוזיס וCPP. אם באזורים כאלה של הצפק הם למעשה מצופה בmicrolayers של תאי endometriotic, אז השימוש בטכניקות צבע לזיהוי אזורים נגועים יכולים לשפר את דיוק האבחון לאנדומטריוזיס ולאפשר לכריתה מלאה יותר של שתלים אחרים בלתי נראים. במחקר זה ראשוני של CPP לפני ואחרי הניתוח, שאגב נמצאו כי רוב החולים דיווחו על שיפור בתסמיני כאב. הרד הציע שלושה קריטריונים לשמש כדי להוכיח את הקשר בין כאב ואנדומטריוזיס: 1) שהכאב יהיה מחזורי, 2) שendometriosis להיות מאובחן בלפרוסקופיה ו3) שטיפול רפואי או כירורגים משפר את הכאב 51. בעוד הוכחה נוספת נדרשת על מנת לאשר את הממצאים שלנו, את הקשר של מחלה מינימאלית, CPP ופגמים הצפק יתאימו לקריטריוני Hurd ומציע דרך חדשה לחשוב על ההערכה והטיפול בכאב באגן הקשור לאנדומטריוזיס. מחקר זה היה מוגבל על ידי חוסר סקר כאב פורמלי. מחקרים עתידיים הם עתה תכננו להשתמש בסקרים תקפים אגן כאב וקשקשת אנלוגית חזותית (VAS) לפני ואחרי הניתוח לכימות החלטה לטווח הארוך של כאב בנשים עם אנדומטריוזיס אלה עדינים וCPP טופל בכריתה של אזורי מכתים כחול הקשורים אנדומטריוזיס.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם המגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות (אופציונלי) </td></tr><tr><td> כחול מתילן </td><td> מגיב אמריקאי </td><td> NDC0517-0310-110 </td><td> 1:200 המעורבב בתמיסת מלח </td></tr></tbody></table>

intraoperative detection of subtle endometriosis: a novel paradigm for detection and treatment of pelvic pain associated with the loss of peritoneal integrity

אנדומטריוזיס היא מחלה נפוצה המשפיעה על 40-70% מנשים בגיל הפוריות סובלות מכאבי אגן כרוניים (CPP) ו / או עקרות. מטרתו של מחקר זה הייתה כדי להדגים את השימוש בצבע כחול (כחול תילן) להכתים משטחים הצפק במהלך לפרוסקופיה (L / S) כדי לזהות את אובדן יושרת הצפק בחולים עם כאבים באגן ואנדומטריוזיס חשד. ארבעים נשים עם CPP ו5 נשים ללא כאב הוערכו במחקר פיילוט זה. במהלך L / S, צבע מרוכז רוסס על משטחים הצפק, אז aspirated וקנח בפתרון Ringers קטט. תחומי ספיגת צבע מקומית הוערכו לנוכחות של נגעי endometriotic נראים לעין. תחומים מכתימים הצפק אינטנסיבי היו לכרות את הגידול וחלק קבוע בgluteraldehyde נאגר 2.5% ונבדקו על ידי סריקה מיקרוסקופית (SEM) אלקטרון. ספיגת צבע הכחולה הייתה שכיחה יותר בנשים עם אנדומטריוזיס וכאבי אגן כרוניים מפקדים (85% לעומת 40%). כריתה של הכחול staiאזורי נד חשפו אנדומטריוזיס ידי SEM והיעדר הקשר בין הצפק תאי תאים לעומת הצפק נורמלי, אינם מכתים. הצפק מושפע היה קשור עם שתלים גלויים endometriotic ברוב אך לא בכל המטופלים. הקלה על כאב הסובייקטיבית דווחה ב80% מנשאלים. בהתבסס על מיקרוסקופיית אלקטרונים, אנו מסיקים כי תאי רירית רחם להאריך הרבה מעבר שתלים גלויים של אנדומטריוזיס ויופיעו לשבש mesothelium הבסיסי. נגעים של אנדומטריוזיס עלולים עדינים לכן גורמים לכאבים באגן על ידי שיבוש יושרת הצפק, המאפשרים גישה לגורמי כאב קשור עצבי תחושה בסיסיות דם ווסת או ביוץ. כריתה מלאה של הצפק המושפע עשויה לספק טיפול לטווח הארוך טוב יותר לאנדומטריוזיס וCPP. טכניקה פשוטה זו מופיעה כדי לשפר את זיהוי של אנדומטריוזיס בלתי נראה עדין או הקרוב בנשים עם ממצאים חזותיים CPP ומינימאליים בL / S ויכולה לשמש כדי להעלות את דיוק אבחון לאנדומטריוזיסבלפרוסקופיה.

דוגמה של אנדומטריוזיס העדין שהייתה כמעט בלתי נראית מוצגת באיור 1 א. לפני יישום הצבע כחול אזור לא סדיר של הצפק המנומר היה מוערך בעזרת השתקפות של האור לפרוסקופי. בתרשים 1B, המראה של אותו אזור זה לאחר הצביעה מציג את אותו דפוס סדיר על שלפוחית ​​השתן (התרשים 1B). ברגע שחלק זה של הצפק היה לכרות את הגידול (האיור 1C) היה נתונה לSEM אשר הראה גבי תאים ושיבוש במגעי תאי תאים של mesothelium הבסיסי רירית רחם. הצפק רגיל מאזור מוכתם שאינם כחול מראה קשר שלם תא בתאים ולא תאי endometriotic להציג (1D איור). באישה אחרת עם CPP ואבחנה של דלקת שלפוחית ​​שתן interstitial (IC), לא ברור אנדומטריוזיס נתפס לפני יישום הצבע כחול (האיור 1E). עם יישום של צבע, שלפוחית ​​השתן הראתהכתמים כחולים ברורים (האיור 1F). תסמיניה של CPP ו IC השתפרו באופן דרמטי במשך 6 חודשים עם כריתה של אזורים אלה של הצפק המוכתם הכחול, למרות העובדה שאין אנדומטריוזיס נתפס באופן חזותי. אנדומטריוזיס היה לראות בדוח הפתולוגי משמאל ביופסית uterosacral, עם זאת. כפי שניתן לראות בטבלה 1, של 40 חולים עם CPP, מצאו כתמי מגה ב -34 (85%) לעומת 2/5 (40%) של נשים ללא CPP. הגיל היה דומה במקרים לעומת בקרות ולפי שלב אנדומטריוזיס מצא. ספיגת צבע הכחולה שראתה ברוב הדגימות עם אנדומטריוזיס ורק 2/5 מנשים ללא אנדומטריוזיס גלוי. אנדומטריוזיס היה מאוד קשור ללוקליזציה של הצבע הכחול. מבחינה סובייקטיבית, הקלה על כאב דווחה כי חלה שיפור בחולים ברוב (32/40; 80%), למעט להיות נשים ללא אנדומטריוזיס גלוי. <img src = alt &quot;/ files/ftp_upload/4313/4313fig1.jpg&quot; = &quot;איור 1&quot; fo: תוכן רוחב = &quot;5in&quot; fo: src = &quot;/ files/ftp_upload/4313/4313fig1highres.jpg&quot; /&gt; איור 1. דוגמאות לממצאים לפרוסקופי לפני יישום הצבע כחול מוצגות ב() ו (ה) בשתי נשים עם CPP, עם שני תלונות בשלפוחית ​​שתן שהחמירו בזמן הווסת. ב(), רק השתקפות של האור לפרוסקופי הראתה אזורים חשודים לנגעים של אנדומטריוזיס ברורים (חיצים). צבע הכחול יחול על אזורים אלה מוכתמים אזורים נפרדים של מעל שלפוחית ​​השתן (B (חיצים), ו-F). כריתה של הצפק המושפע נבדקה על ידי סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים סורקים (SEM). במדגם resected משלפוחית ​​השתן (C), שכבה יחידה של תאי endometriotic ניתן לראות על גבי הצפק על ידי סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים סורקים (SEM) (ד). תאי mesothelial של הצפק יש פערים במגעי תא הסלולרי שלהם חושפים מטריקס בסיסי. במקרה של הצפק הרגיל ללא כתמי צבע כחולים, התאי Ese מחוברים בחוזקה, כפי שמוצגים ב( G). ברי גודל לSEM כלולים ימניים תחתון (D ו-G). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4313/4313fig1large.jpg" target="_blank">לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.</a> <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> פרמטר </td><td> מקרים (n = 40) </td><td> פקדים (N = 5) </td><td> משמעות * (p &lt;0.05) </td></tr><tr><td> גיל (ממוצע ± סטיית תקן) </td><td> 30.17 ± 4.65 </td><td> 32.0 ± 2.55 </td><td> p = 0.39 </td></tr><tr><td> גיל לפי שלבים O (n = 6) I-II (n = 29) III-IV (n = 5) </td><td> 33.16 ± 3.82 29.2 ± 4.85 32.0 ± 3.03 </td><td> N / </td><td></td></tr><tr><td> ספיגת MB O (n = 6) I-II (n = 29) III-IV (n = 5) </td><td> (34/40) 85% (2/6) 33,3% (28/29) 96,5% (4/5) 80% </td><td> (2/5) 40% </td><td> p = 0.2 </td></tr><tr><td> MB המשויך w / אנדומטריוזיס O (n = 6) I-II (n = 29) III-IV (n = 5) </td><td> (0/6) 0% (28/29) 96,5% (5/5) 100% </td><td> N / </td><td></td></tr><tr><td> הקלה על כאב הסובייקטיבית </td><td> (32/40) 80% </td><td> N / </td><td></td></tr><tr><td height="76"> הקלה על כאב בשלב (%) O (n = 6) I-II (n = 29) III-IV (n = 5) </td><td> (1/6) 16.7% (27/29) 93,1% (4/5) 80% </td><td> N / </td><td></td></tr></tbody></table> טבלת 1. ניסיון עם כתמי צבע כחולים בנשים עם כאבי אגן כרוניים. <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השוואות סטטיסטיות בוצעו באמצעות אפונהמבחן rson צ&#39;י מרובע. </li></ul>

Watch this Scientific Journal Video about Intraoperative Detection of Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection and Treatment of Pelvic Pain Associated with the Loss of Peritoneal Integrity

Intraoperative Detection of Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection and Treatment of Pelvic Pain Associated with the Loss of Peritoneal Integrity

פגיעה בשלמות הצפק מספקת פרדיגמה חדשה להבנה ולטיפול בכאבי אגן כרוניים בנשים עם צורות קלות של אנדומטריוזיס וניתן לאתר בקלות באמצעות intraoperative החדרה של צבע בזמן לפרוסקופיה.

איתור intraoperative של אנדומטריוזיס העדין: פרדיגמה חדשה לאיתור וטיפול בכאב באגן הקשורים לפגיעה בשלמות פריטונאלית

Endometriosis is a  common disease affecting 40 to 70% of reproductive-aged women with chronic  pelvic pain (CPP) and/or infertility. The purpose of this ...

intraoperative-detection-subtle-endometriosis-novel-paradigm-for

Google

Research

JoVE Journal

Medicine

15.8K Views.  Greenville Hospital System. פגיעה בשלמות הצפק מספקת פרדיגמה חדשה להבנה ולטיפול בכאבי אגן כרוניים בנשים עם צורות קלות של אנדומטריוזיס וניתן לאתר בקלות באמצעות intraoperative החדרה של צבע בזמן לפרוסקופיה.

Video: Intraoperative Detection of Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection and Treatment of Pelvic Pain Associated with the Loss of Peritoneal Integrity

An Experimental Paradigm for the Prediction of Post-Operative Pain (PPOP)

Many women undergo cesarean delivery without problems, however some experience significant pain after cesarean section. Pain is associated with negative short-term and long-term effects on the mother. Prior to women undergoing surgery, can we predict who is at risk for developing significant postoperative pain and potentially prevent or minimize its negative consequences? These are the fundamental questions that a team from the University of Washington, Stanford University, the Catholic University in Brussels, Belgium, Santa Joana Women's Hospital in S&atilde;o Paulo, Brazil, and Rambam Medical Center in Israel is currently evaluating in an international research collaboration. The ultimate goal of this project is to provide optimal pain relief during and after cesarean section by offering individualized anesthetic care to women who appear to be more 'susceptible' to pain after surgery.
A significant number of women experience moderate or severe acute post-partum pain after vaginal and cesarean deliveries. 1 Furthermore, 10-15% of women suffer chronic persistent pain after cesarean section. 2 With constant increase in cesarean rates in the US 3 and the already high rate in Brazil, this is bound to create a significant public health problem. When questioning women's fears and expectations from cesarean section, pain during and after it is their greatest concern. 4 Individual variability in severity of pain after vaginal or operative delivery is influenced by multiple factors including sensitivity to pain, psychological factors, age, and genetics. The unique birth experience leads to unpredictable requirements for analgesics, from 'none at all' to 'very high' doses of pain medication. Pain after cesarean section is an excellent model to study post-operative pain because it is performed on otherwise young and healthy women. Therefore, it is recommended to attenuate the pain during the acute phase because this may lead to chronic pain disorders. The impact of developing persistent pain is immense, since it may impair not only the ability of women to care for their child in the immediate postpartum period, but also their own well being for a long period of time.
In a series of projects, an international research network is currently investigating the effect of pregnancy on pain modulation and ways to predict who will suffer acute severe pain and potentially chronic pain, by using simple pain tests and questionnaires in combination with genetic analysis. A relatively recent approach to investigate pain modulation is via the psychophysical measure of Diffuse Noxious Inhibitory Control (DNIC). This pain-modulating process is the neurophysiological basis for the well-known phenomenon of 'pain inhibits pain' from remote areas of the body. The DNIC paradigm has evolved recently into a clinical tool and simple test and has been shown to be a predictor of post-operative pain.5 Since pregnancy is associated with decreased pain sensitivity and/or enhanced processes of pain modulation, using tests that investigate pain modulation should provide a better understanding of the pathways involved with pregnancy-induced analgesia and may help predict pain outcomes during labor and delivery. For those women delivering by cesarean section, a DNIC test performed prior to surgery along with psychosocial questionnaires and genetic tests should enable one to identify women prone to suffer severe post-cesarean pain and persistent pain. These clinical tests should allow anesthesiologists to offer not only personalized medicine to women with the promise to improve well-being and satisfaction, but also a reduction in the overall cost of perioperative and long term care due to pain and suffering. On a larger scale, these tests that explore pain modulation may become bedside screening tests to predict the development of pain disorders following surgery.

An Experimental Paradigm for the Prediction of Post-Operative Pain PPOP

Diffuse noxious inhibitory control, temporal summation and wound hyperalgesia testing are demonstrated in the obstetric patient. These tests evaluate inhibitory and excitatory mechanisms of pain processing and are here utilized to evaluate endogenous analgesia at different time-points during pregnancy and the peripartum period to help reveal individual s risk for persistent pain.

פרדיגמה ניסויית עבור חיזוי של הכאבים שלאחר הניתוח (PPOP)

Many women undergo cesarean delivery without problems, however some experience significant pain after cesarean section. Pain is associated with negative ...

Multispectral Real-time Fluorescence Imaging for Intraoperative Detection of the Sentinel Lymph Node in Gynecologic Oncology

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical excision of the tumor with a full lymphadenectomy in the drainage area of the tumor. However, removal of lymph nodes is associated with increased morbidity due to infection, wound breakdown and lymphedema.4,5 As an alternative, the sentinel lymph node procedure (SLN) was developed several decades ago to detect the first draining lymph node from the tumor.6 In case of lymphogenic dissemination, the SLN is the first lymph node that is affected (Figure 1). Hence, if the SLN does not contain metastases, downstream lymph nodes will also be free from tumor metastases and need not to be removed. The SLN procedure is part of the treatment for many tumor types, like breast cancer and melanoma, but also for cancer of the vulva and cervix.7 The current standard methodology for SLN-detection is by peritumoral injection of radiocolloid one day prior to surgery, and a colored dye intraoperatively. Disadvantages of the procedure in cervical and vulvar cancer are multiple injections in the genital area, leading to increased psychological distress for the patient, and the use of radioactive colloid.
Multispectral fluorescence imaging is an emerging imaging modality that can be applied intraoperatively without the need for injection of radiocolloid. For intraoperative fluorescence imaging, two components are needed: a fluorescent agent and a quantitative optical system for intraoperative imaging. As a fluorophore we have used indocyanine green (ICG). ICG has been used for many decades to assess cardiac function, cerebral perfusion and liver perfusion.8 It is an inert drug with a safe pharmaco-biological profile. When excited at around 750 nm, it emits light in the near-infrared spectrum around 800 nm. A custom-made multispectral fluorescence imaging camera system was used.9.
The aim of this video article is to demonstrate the detection of the SLN using intraoperative fluorescence imaging in patients with cervical and vulvar cancer. Fluorescence imaging is used in conjunction with the standard procedure, consisting of radiocolloid and a blue dye. In the future, intraoperative fluorescence imaging might replace the current method and is also easily transferable to other indications like breast cancer and melanoma.

Fluorescence imaging is a promising innovative modality for image-guided surgery in surgical oncology. In this video we describe the technical procedure for detection of the sentinel lymph node using fluorescence imaging as showcased in gynecologic oncologicy. A multispectral fluorescence camera system, together with the fluorescent agent indocyanine green, is applied.

Multispectral הדמיה בזמן אמת Fluorescence לגילוי intraoperative של הצומת סנטינל הלימפה גניקולוגיות אונקולוגיה

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical ...

Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for Cancer Therapy Monitoring

In molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI) are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. PET is characterized by its excellent sensitivity and quantification ability while OI is notable for non-radiation, relative low cost, short scanning time, high throughput, and wide availability to basic researchers. However, both modalities have their shortcomings as well. PET suffers from poor spatial resolution and high cost, while OI is mostly limited to preclinical applications because of its limited tissue penetration along with prominent scattering optical signals through the thickness of living tissues.
 Recently a bridge between PET and OI has emerged with the discovery of Cerenkov Luminescence Imaging (CLI)4-6. CLI is a new imaging modality that harnesses Cerenkov Radiation (CR) to image radionuclides with OI instruments. Russian Nobel laureate Alekseyevich Cerenkov and his colleagues originally discovered CR in 1934. It is a form of electromagnetic radiation emitted when a charged particle travels at a superluminal speed in a dielectric medium7,8. The charged particle, whether positron or electron, perturbs the electromagnetic field of the medium by displacing the electrons in its atoms. After passing of the disruption photons are emitted as the displaced electrons return to the ground state. For instance, one 18F decay was estimated to produce an average of 3 photons in water5. 
 Since its emergence, CLI has been investigated for its use in a variety of preclinical applications including in vivo tumor imaging, reporter gene imaging, radiotracer development, multimodality imaging, among others4,5,9,10,11. The most important reason why CLI has enjoyed much success so far is that this new technology takes advantage of the low cost and wide availability of OI to image radionuclides, which used to be imaged only by more expensive and less available nuclear imaging modalities such as PET.
 Here, we present the method of using CLI to monitor cancer drug therapy. Our group has recently investigated this new application and validated its feasibility by a proof-of-concept study12. We demonstrated that CLI and PET exhibited excellent correlations across different tumor xenografts and imaging probes. This is consistent with the overarching principle of CR that CLI essentially visualizes the same radionuclides as PET. We selected Bevacizumab (Avastin; Genentech/Roche) as our therapeutic agent because it is a well-known angiogenesis inhibitor13,14. Maturation of this technology in the near future can be envisioned to have a significant impact on preclinical drug development, screening, as well as therapy monitoring of patients receiving treatments.

Cerenkov Luminescence Imaging CLI for Cancer Therapy Monitoring

Use of Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for monitoring preclinical cancer treatment is described here. This method takes advantage of Cerenkov Radiation (CR) and optical imaging (OI) to visualize radiolabeled probes and thus provides an alternative to PET in preclinical therapeutic monitoring and drug screening.

Cerenkov הארת ההדמיה (CLI) לניטור ריפוי הסרטן

In  molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI)  are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. ...

Detection of Disease-associated &#945;-synuclein by Enhanced ELISA in the Brain of Transgenic Mice Overexpressing Human A53T Mutated &#945;-synuclein

In addition to established methods like Western blot, new methods are needed to quickly and easily quantify disease-associated &#945;-synuclein (&#945;SD) in experimental models of synucleopathies. A transgenic mouse line (M83) over-expressing the human A53T &#945;S and spontaneously developing a dramatic clinical phenotype between eight and 22 months of age, characterized by symptoms including weight loss, prostration, and severe motor impairment, was used in this study. For molecular analyses of &#945;SD (disease-associated &#945;S) in these mice, an ELISA was designed to specifically quantify &#945;SD in sick mice. Analysis of the central nervous system in this mouse model showed the presence of &#945;SD mainly in the caudal brain regions and the spinal cord. There were no differences in &#945;SD distribution between different experimental conditions leading to clinical disease, i.e., in uninoculated and normally aging transgenic mice and in mice inoculated with brain extracts from sick mice. The specific detection of &#945;SD immunoreactivity using an antibody against Ser129 phosphorylated &#945;S by ELISA essentially correlated with that obtained by Western blot and immunohistochemistry. Unexpectedly, similar results were observed with several other antibodies against the C-terminal part of &#945;S. The propagation of &#945;SD, suggesting the involvement of a &#8220;prion-like&#8221; mechanism, can thus be easily monitored and quantified in this mouse model using an ELISA approach.

Detection of Disease-associated &amp;#945;-synuclein by Enhanced ELISA in the Brain of Transgenic Mice Overexpressing Human A53T Mutated &amp;#945;-synuclein

An ELISA offering a novel quantitative approach is described. It specifically detects disease-associated &#945;-synuclein (&#945;SD) in a transgenic mouse model (M83) of synucleinopathy using several antibodies against either the Ser129 phosphorylated &#945;S form or the C-terminal part of the protein.

איתור של α-סינוקלאין קשורים למחלות על ידי ELISA משופר במוח של עכברים הטרנסגניים ביתר A53T אדם מוטצית α-סינוקלאין

In addition to established methods like Western blot, new methods are needed to quickly and easily quantify disease-associated &#945;-synuclein (&#945;SD) ...

Whole Genome Sequencing of Candida glabrata for Detection of Markers of Antifungal Drug Resistance

Candida glabrata can rapidly acquire mutations that result in drug resistance, especially to azoles and echinocandins. Identification of genetic mutations is essential, as resistance detected in vitro can often be correlated with clinical failure. We examined the feasibility of using whole genome sequencing (WGS) for genome-wide analysis of antifungal drug resistance in C. glabrata. The aim was torecognize enablers and barriers in the implementation WGS and measure its effectiveness. This paper outlines the key quality control checkpoints and essential components of WGS methodology to investigate genetic markers associated with reduced susceptibility to antifungal agents. It also estimates the accuracy of data analysis and turn-around-time of testing.
Phenotypic susceptibility of 12 clinical, and one ATCC strain of C. glabrata was determined through antifungal susceptibility testing. These included three isolate pairs, from three patients, that developed rise in drug minimum inhibitory concentrations. In two pairs, the second isolate of each pair developed resistance to echinocandins. The second isolate of the third pair developed resistance to 5-flucytosine. The remaining comprised of susceptible and azole resistant isolates. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes linked to echinocandin, azole and 5-flucytosine resistance were confirmed in resistant isolates through WGS using the next generation sequencing.&#160;Non-synonymous SNPs in antifungal resistance genes such as FKS1, FKS2, CgPDR1, CgCDR1 and FCY2 were identified. Overall, an average of 98% of the WGS reads of C. glabrata isolates mapped to the reference genome with about 75-fold read depth coverage. The turnaround time and cost were comparable to Sanger sequencing.
In conclusion, WGS of C. glabrata was feasible in revealing clinically significant gene mutations involved in resistance to different antifungal drug classes without the need for multiple PCR/DNA sequencing reactions. This represents a positive step towards establishing WGS capability in the clinical laboratory for simultaneous detection of antifungal resistance conferring substitutions.

Whole Genome Sequencing of Candida glabrata for Detection of Markers of Antifungal Drug Resistance

This study implemented whole genome sequencing for analysis of mutations in genes conferring antifungal drug resistance in Candida glabrata. C. glabrata isolates resistant to echinocandins, azoles and 5-flucytosine, were sequenced to illustrate the methodology. Susceptibility profiles of the isolates correlated with presence or absence of specific mutation patterns in genes.

הגנום כולו רצף של קנדידה glabrata עבור זיהוי של סמנים של פטריות תרופתיים

Candida glabrata can rapidly acquire mutations that result in drug resistance, especially to azoles and echinocandins. Identification of genetic mutations ...

A Novel Non-invasive Method for the Detection of Elevated Intra-compartmental Pressures of the Leg

Acute Compartment Syndrome is a devastating consequence of musculoskeletal trauma. Currently the diagnosis is based on clinical signs and symptoms, and while adjuncts such as invasive intra-compartmental pressure measurements are often used to corroborate the physical exam findings, there remains no reliable objective test to aid in the decision to perform a decompressive fasciotomy. In a cadaver model of compartment syndrome, an ultrasound (US) based method has been shown to be a reliable measurement of increased intra-compartmental pressure. An absolute pressure of &#62;100 mbar or a difference of 50 mbar in the CFFP between the legs can be considered pathologic. Using an ultrasound transducer, coupled with a pressure sensor, the pressure needed to flatten the superficial fascia of the anterior compartment of lower legs (Compartment Fascia Flattening Pressure [CFFP]) can be measured. The CFFP of the injured leg is compared to the CFFP of the uninjured leg. This US measured index can then serve as an adjunct to the physical exam in evaluating injured lower extremities and assessing the need for decompressive fasciotomy. The advantages of this protocol include: being a non-invasive method and an easily reproducible technique.

An ultrasound probe coupled with a pressure sensor is used to assess the intra-compartmental pressure of the leg by directly measuring the compartment fascia flattening pressure (CFFP). This non-invasive protocol will provide reliable assessment of the pressure inside the anterior muscular compartment of the lower leg.

שיטה הרומן לא פולשנית לאיתור לחצים פנים compartmental של הרגל

Acute Compartment Syndrome is a devastating consequence of musculoskeletal trauma. Currently the diagnosis is based on clinical signs and symptoms, and ...

Chemiluminescence-based Assays for Detection of Nitric Oxide and its Derivatives from Autoxidation and Nitrosated Compounds

Nitric oxide (NO) activity in vivo is the combined results of its direct effects, the action of its derivatives generated from NO autoxidation, and the effects of nitrosated compounds. Measuring NO metabolites is essential to studying NO activity both at vascular levels and in other tissues, especially in the experimental settings where exogenous NO is administered. Ozone-based chemiluminescence assays allow precise measurements of NO and NO metabolites in both fluids (including plasma, tissue homogenates, cell cultures) and gas mixtures (e.g., exhaled breath). NO reacts with ozone to generate nitrogen dioxide in an excited state. The consequent light emission allows photodetection and the generation of an electric signal reflecting the NO content of the sample. Aliquots from the same sample can be used to measure specific NO metabolites, such as nitrate, nitrite, S-nitrosothiols, and iron-nitrosyl complexes. In addition, NO consumed by cell-free hemoglobin is also quantified with chemiluminescence analysis. An illustration of all these techniques is provided.

Here, we present protocols for detecting nitric oxide and its biologically relevant derivatives using chemiluminescence-based assays with high sensitivity.

מבחנים מבוססי כימילומינסנציה לזיהוי תחמוצת החנקן ונגזרותיה מאוטוקידציה ותרכובות ניטרוסטיות

Nitric oxide (NO) activity in vivo is the combined results of its direct effects, the action of its derivatives generated from NO autoxidation, and the ...

Establishment of a Simple and Effective Rat Model for Intraoperative Parathyroid Gland Imaging

Parathyroid gland (PG) identification is a critical unmet need in thyroidectomy. The identification of the PG is challenging in thyroid surgery as it is similar in color to the thyroid gland. The lack of effective animal models in preclinical research is a severe limitation for the development of PG identification techniques. This protocol allows for the establishment of a simple and effective rat model for PG identification. In this model, black iron oxide nanoparticles (IONPs) are injected locally in the thyroid gland and rapidly diffuse within the thyroid gland but not the PG. A negatively stained PG and a positively stained thyroid gland can be easily identified by the naked eye without requiring external microscopes. The position of the PG can be identified by increasing the color contrast between the thyroid gland and the PG, based on the color of the black IONPs. This rat model is low-cost and convenient for PG identification, and the IONPs are a novel PG contrast agent.

To date, the development of parathyroid gland (PG) identification methods is limited by the lack of animal models in preclinical research. Here, we establish a simple and effective rat model for intraoperative PG imaging and evaluate its effectiveness by using iron oxide nanoparticles as a novel PG contrast agent.

הקמת מודל חולדות פשוט ויעיל להדמיית בלוטת יותרת התריס תוך ניתוחית

Parathyroid gland (PG) identification is a critical unmet need in thyroidectomy. The identification of the PG is challenging in thyroid surgery as it is ...

Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. Chronic neuropathic pain results from lesions or diseases in the somatosensory system. To investigate potential therapies with reduced side effects, animal pain models are the gold standard in preclinical studies. Therefore, well-characterized and well-described models are crucial for the development and validation of innovative therapies. 
Partial ligation of the sciatic nerve (pSNL) is a procedure that induces chronic neuropathic pain in mice, characterized by mechanical and thermal hypersensitivity, ongoing pain, and changes in limb temperature, making this model a great fit to study neuropathic pain preclinically. pSNL is an advantageous model to study neuropathic pain as it reproduces many symptoms observed in humans with neuropathic pain. Furthermore, the surgical procedure is relatively fast and straightforward to perform. Unilateral pSNL of one limb allows for comparison between the ipsilateral and contralateral paws, as well as evaluation of central sensitization. 
To induce chronic neuropathic hypersensitivity, a 9-0 non-absorbable nylon thread is used to ligate the dorsal third of the sciatic nerve. This article describes the surgical procedure and characterizes the development of chronic neuropathic pain through multiple commonly used behavioral tests. As a plethora of innovative therapies are now being investigated to treat chronic pain, this article provides crucial concepts for standardization and an accurate description of surgeries required to induce neuropathic pain.

Partial sciatic nerve ligation induces long-lasting chronic neuropathic pain, characterized by exaggerated responses to thermal and mechanical stimuli. This mouse model of neuropathic pain is commonly used to study innovative therapies for pain management. This article describes in detail the surgical procedure to improve standardization and reproducibility.

קשירת עצבים סיאטית חלקית: מודל עכברי של כאב נוירופתי כרוני לחקר ההשפעה האנטינוסיצפטיבית של טיפולים חדשניים

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. ...

<meta charset="utf8"></head><body>נוהל עצבוב שרירים ממוקד לטיפול בכאב לאחר קטיעה

Targeted Muscle Reinnervation: Surgical Protocol for a Randomized Controlled Trial in Postamputation Pain

Over the past decade, the field of prosthetics has witnessed significant progress, particularly in the development of surgical techniques to enhance the functionality of prosthetic limbs. Notably, novel surgical interventions have had an additional positive outcome, as individuals with amputations have reported neuropathic pain relief after undergoing such procedures. Subsequently, surgical techniques have gained increased prominence in the treatment of postamputation pain, including one such surgical advancement - targeted muscle reinnervation (TMR). TMR involves a surgical approach that reroutes severed nerves as a type of nerve transfer to &#34;target&#34; motor nerves and their accompanying motor end plates within nearby muscles. This technique originally aimed to create new myoelectric sites for amplified electromyography (EMG) signals to enhance prosthetic intuitive control. Subsequent work showed that TMR also could prevent the formation of painful neuromas as well as reduce postamputation neuropathic pain (e.g., Residual and Phantom Limb Pain). Indeed, multiple studies have demonstrated TMR&#39;s effectiveness in mitigating postamputation pain as well as improving prosthetic functional outcomes. However, technical variations in the procedure have been identified as it is adopted by clinics worldwide. The purpose of this article is to provide a detailed step-by-step description of the TMR procedure, serving as the foundation for an international, randomized controlled trial (ClinicalTrials.gov, NCT05009394), including nine clinics in seven countries. In this trial, TMR and two other surgical techniques for managing postamputation pain will be evaluated.

<meta charset="utf8"></head><body>מחבר זרקור: התקדמות ואתגרים בטיפולים כירורגיים לכאב לאחר קטיעה

The protocol outlines the surgical procedure&#160;for the treatment of postamputation pain using Targeted Muscle Reinnervation (TMR). TMR will be compared with two other surgical techniques, specifically Regenerative Peripheral Nerve Interface (RPNI) and neuroma excision, followed by immediate burying within muscle under the context of an international, randomized controlled trial.

עצבוב שרירים ממוקד: פרוטוקול כירורגי לניסוי אקראי מבוקר בכאב לאחר קטיעה

Over the past decade, the field of prosthetics has witnessed significant progress, particularly in the development of surgical techniques to enhance the ...