1 הגדרה של סטרילי שדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבוש ההולם דון כוללים כובע ומסכה. משקפי מגן בעת ​​בחדר העיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את השטח לעיבוד. בעת השימוש בחדר עיבוד, לשמור על פעולה רציפה של המאוורר כדי ליצור לחץ חיובי בחדר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף את כל הציוד. בדוק את תאריכי תפוגה, שלמות חבילה, ומחוון עיקור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף את הידיים ודון כפפות שאינן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את ערכות סטריליות להקמת שדה סטרילי. בעת השימוש בחדר עיבוד, למקם את ערכות על השולחן וסביבה נקי מחיידקים לפתוח עוטף. אל לנצל ½ 1 סנטימטר החיצוני של לעטוף כחלק משדה סטרילי כמגזר זה נחשב לא סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות טכניקת ספטית, פתוח ושחרר את פריטים סטריליים על שדה סטרילי, אלא אם כן כבר חלק מחבילת התערובת של העוגיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז מיקרוסקופ, כך שהוא נמצא מעל לשדה סטרילי, פונה במקור אור של מיקרוסקופ, ולהתאים oculars לפי צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> OBTרקמת קרנית עין להיות חשופה (בתקשורת שימור) ומקום בסמוך לאזור העיבוד סטרילי מוכן. שחרר כובע של חדר צפייה ולתת לו לנוח על גבי הצפייה קאמרית בסיס ללא אשכולות עוסקים. בטל כפפות שאינן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זוג אחד פתוח של כפפות סטריליות ושמלה סטרילי עם מגבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע לקרצף כירורגית. לשים על שמלת סטרילי, אז כפפות סטריליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיבות מכשיר פתוחות, כך שכל האספקה ​​נגישות. לחות פתוחה וילון אטום כדי ליצור את אזור העבודה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מחט למזרק 5 סמ&quot;ק. באמצעות hemostat, להכין את מחט G 30 ידי הצבת מ&quot;מ עיקול 1 מפוע, ומ&quot;מ עיקול 1 אחר מהבסיס (כדי ליצור צורה &quot;S&quot;). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרכב את מזרק הזכוכית לכתם הכחול trypan על ידי הצבת הבוכנה לתוך המזרק והאצבע להדק את הבוכנה. צרף צינורית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף את הצינורית לבקבוק תמיסת מלח מאוזנת (BSS). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את אגרוף המקדחה מגוש הוואקוםומניח בצד. מרכז את בלוק הוואקום בתוך שדה הראייה של המיקרוסקופ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להביא את בלוק הוואקום אל מוקד על ידי התאמת הגדרות מיקרוסקופ. </li></ol> 2 נוהל הכנת רקמות התורמות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה Lift צפייה קאמרי באמצעות כיכר רדיד כמחסום. עם יד נגדית ובאמצעות מלקחיים, בעדינות לתפוס קרנית על ידי לובן העין מעטרת כדי להסיר קרנית. להחליף מכסה של צפייה קאמרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגמרי לדכא את מזרק השאיבה, ואז למקם את צד אפיתל קרנית על בלוק הוואקום ולוודא שהוא מרוכז. (איור 1) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טבעת ישיבה בעדינות נמוכה יותר לבלוק הוואקום באמצעות הודעות המדריך. לעסוק ואקום על ידי שחרור בוכנה של מזרק היניקה לאט. הסר את טבעת הישיבה ומניח בצד. (איור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע trephination חלקי להבקיע דרך הקרום של Descemet. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם זום מיקרוסקופ ולהתמקד באופן שהרקמה דמיין גם. </li><li&gt; הטה את בלוק הוואקום ולהשתמש חנית ספוגית סטרילית הונחה בימבוס כדי להסיר בינוני עודף. (איור 3) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מספיק כתם בימבוס להכתים את הקצה של הקרום של Descemet הבקיע. לאפשר את הכתם להישאר על האנדותל ל60-90 שניות. (איור 4) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר את הכתם: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הטה את בלוק הוואקום לשפוך את הכתם של הקרנית ועל תחבושת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בחניתות כירורגי כדי להסיר כתם עודף מאזור limbal של הקרנית, נזהר שלא לגעת בהאנדותל. (איור 5) </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בכמה טיפות של BSS לשטוף את הקרנית של פתרון מכתים, וחניתות ספוגית סטרילית כדי להסיר BSS העודף. (איור 6) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים 1-2 טיפות של BSS על שפת לובן העין כדי למנוע רקמות מייבוש. חזור על צורך לאורך כל ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע נתיחה חלקית של הקרום של Descemet: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל שבו צינורות להתחברים לבלוק הוואקום, באמצעות מלקחיים פתוחים, מקום קצה אחד בקצה של סימן הציון והקרום של Descemet עדינות הנפרד והאנדותל מסטרומה. (איור 7). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקרום של Descemet הנפרד והאנדותל מ&quot;מ לא יותר מ 1 מקצה הבקיע ולהמשיך לנתיחה 360 ° מסביב. (איור 8). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערה מיקום של כל מיקרו דמעות על ידי הצבת נקודה על בלוק הוואקום עם סמן העור. הערה: אם המקדחה לא חדרה לחלוטין דרך הממברנה של Descemet, להשתמש בקצה המשופע של מחט G 30 מוכנה להשלים הציון דרך הקרום של Descemet במידת צורך, ואחריו יישום שני של צביעה במידת הצורך. אם דביק של הקרום של Descemet מפריע לנתיחה החלקית, להסיר את האנדותל מחוץ לאזור trephinated לפי צורך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים כדי להסיר כל תגי האנדותל חופפים סימן הציון. </li> &lt;li&gt; קחו למשל את המיקום של דמעות מיקרו מסומנים בעבר ולסובב את בלוק הוואקום כך הגדול ביותר הוא בשעה 6. זה יהפוך את הציר של הדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחיים, לתפוס הקרום של Descemet בשעה 12. בעדינות להפריד הקרום של Descemet מstroma על ידי קילוף לכיוון הציר. צור הציר על ידי עצירת מ&quot;מ הפרדת 2 מסימן הציון. הערה: קצוות היקפיים של כנף יתחילו לגלול בהפרדה. (איור 9). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להניח את הדש למקום בסטרומה. השתמש בחניתות BSS והספוגית לunscroll האנדותל ולהחזיר אותו למקומו המקורי. (איור 10A-C) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר נוזל שיורי מבין הקרום וסטרומה של Descemet עם חניתות ספוגית סטרילית כך הדש נשאר בעמדה. (איור 11) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בחניתות ספוגית סטרילית כדי לספוג את כל לחות עודפת מלובן העין ליד הציר. השתמש בסמן העור לציירn ראש החץ על שפת לובן העין מצביעה על מרכז הציר, להסיר כל דיו עודף באמצעות חנית ספוגית סטרילית. (איור 12) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשחרר ואקום על ידי לחיצה על הבוכנה של המזרק מחובר לבלוק הוואקום. בעוד הוואקום מתנתק, להשתמש במלקחיים כדי להסיר את הקרנית מגוש הוואקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסה Lift צפייה קאמרי באמצעות כיכר רדיד כמחסום. מניחים את הקרנית בתא הצפייה, צד אנדותל, ולהחליף את המכסה של הצגה קאמרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על צעדי הליך עם קרנית בן זוג, אם קיימים. השתמש בגזה כדי לנקות את בלוק הוואקום לפני עיבוד הרקמות השניה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדק את מכסה תא צפייה (ות) ולהסיר רקמה מאזור העיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשבור את שדה סטרילי על ידי סילוק של פריטים על פי ביולוגית מסוכנת פסולת תכנית ניהול. הסר את כפפות מזוהמות, ושמלה. שטוף את הידיים ודון כפפות שאינן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הערכת מנורת סדק לחתוך הודעה ומיקרוסקופיה specular של הקרנית (ים)ולהקליט את הממצאים. </li></ol>

<ol>
	<li>Fernandez, M., Afshari, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Keratoplasty:+From+DLEK+to+DMEK.">Endothelial Keratoplasty: From DLEK to DMEK.</a> Middle East African Journal of Ophthalmology. 17 (1), 5-8 (2010).</li><li>Kruse, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Stepwise+Approach+to+Donor+Preparation+and+Insertion+Increases+Safety+and+Outcome+of+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty.">A Stepwise Approach to Donor Preparation and Insertion Increases Safety and Outcome of Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li><li>Dapena, I., Moutsouris, K., Droutsas, K., Ham, L., van Dijk, K., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+'No-Touch'+Technique+for+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty.">Standardized 'No-Touch' Technique for Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Archives of Ophthalmology. 129, 88-94 (2011).</li><li>Tourtas, T., Laaser, K., Bachmann, B., Cursiefen, C., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty+versus+Descemet+Stripping+Automated+Endothelial+Keratoplasty.">Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty versus Descemet Stripping Automated Endothelial Keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 153 (6), 1082-1090 (2012).</li><li>Guerra, F., Anshu, A., Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Keratoplasty:+fellow+eyes+comparison+of+Descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty+and+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">Endothelial Keratoplasty: fellow eyes comparison of Descemet stripping automated endothelial keratoplasty and Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (12), 1382-1386 (2011).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 2012 Eye Banking Statistical Report: Surgical Use and Indications for Corneal Transplant Statistical Report Analysis. , (2012).</li><li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet's+stripping+endothelial+keratoplasty.">Descemet's stripping endothelial keratoplasty.</a> Current Opinion Ophthalmology. 18 (4), 290-294 (2007).</li><li>Woodward, M., Titus, M., Mavin, K., Shtein, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Donor+Tissue+Preparation+for+Endothelial+Keratoplasty.">Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e3847 (2012).</li><li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet's+membrane+endothelial+keratoplasty+surgery:+update+on+the+evidence+and+hurdles+to+acceptance.">Descemet's membrane endothelial keratoplasty surgery: update on the evidence and hurdles to acceptance.</a> Current Opinion Ophthalmology. 24 (4), 329-335 (2013).</li><li>Venzano, D., Pagani, P., Randazzo, N., Cabiddu, F., Traverrso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descemet+Membrane+air-bubble+separation+in+donor+cornea.">Descemet Membrane air-bubble separation in donor cornea.</a> Journal of Cataract and Refractive Surgery. 36 (12), 2022-2027 (2010).</li><li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> DSEK: What you need to know about endothelial keratoplasty. , (2009).</li><li>Studeny, P., Sivekova, D., Lieheova, K., Vokrojova, M., Kuchynka, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hybrid+technique+of+lamellar+keratoplasty+(DMEK-S).">Hybrid technique of lamellar keratoplasty (DMEK-S).</a> Journal of Ophthalmology. 2013, 2013.254383 (2013).</li><li>Muraine, M., Gueudry, J., He, Z., Piselli, S., Lefevre, S., Toubeau, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+for+the+preparation+of+corneal+grafts+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">Novel technique for the preparation of corneal grafts for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (5), 851-859 (2013).</li><li>Lie, J. T., Birbal, R., Ham, L., van der Wees, J., Melles, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+tissue+preparation+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">Donor tissue preparation for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Journal of Cataract Refractive Surgery. 34 (9), 1578-1583 (2008).</li><li>Kruse, F. E., Laaser, K., Cursiefen, C., Heindl, L. M., Schlotzer-Schrehardt, U., Riss, S., Bachmann, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+stepwise+approach+to+donor+preparation+and+insertion+increases+safety+and+outcome+of+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty.">A stepwise approach to donor preparation and insertion increases safety and outcome of Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li><li>Rudolph, M., Kaaser, L., Bachmann, B., Cursiefen, C., Epstein, D., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+higher-order+aberrations+after+Descemet&#8217;s+membrane+endothelial+keratoplasty.">Corneal higher-order aberrations after Descemet&#8217;s membrane endothelial keratoplasty.</a> Ophthalmology. 119 (3), 528-535 (2012).</li><li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+endothelial+keratoplasty.">Evolution of endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 32, 28-32 (2013).</li><li>Dapena, I., Dapena, L., Dirisamer, M., Ham, L., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+and+endothelial+cell+density+following+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty+(DMEK).">Visual acuity and endothelial cell density following Descemet membrane endothelial keratoplasty (DMEK).</a> Arch Soc Esp Oftalmol. 86 (12), 395-401 (2011).</li></ol>

יש לי חסן Tausif וד&quot;ר Navasuja Chandrasekaran שום דבר לגלות. בני הזוג. מיאן, שטיין, וודוורד הינו דירקטורים רפואיים לבנק העיניים מישיגן. מר Mavin, מר טיטוס, והגב &#39;ג&#39; ונסון הם עובדי הבנקים העין המערב התיכון.

שכבת תאי האנדותל בקרנית משחקת תפקיד קריטי בשמירה על בהירות בקרנית באמצעות התייבשות. מחלות של תאי האנדותל יכולות לגרום לפגיעה בראייה משמעותית. DMEK שואף להחליף את תאי האנדותל החולים עם שתל תורם המורכב משכבת ​​תאי הקרום ואנדותל של Descemet. הכנת רקמת תורם עם DM שלם וספירת תאי אנדותל נאותה הן קריטיות להישרדותה של רקמת השתל. קריעה של DM במהלך הכנת רקמת תורם יכולה לגרום לאובדן ובזבוז של רקמות תורמות רקמה. יישום נרחב של DMEK היה מוגבל על ידי האתגרים בהכנת רקמת השתל ומאסטרינג הטכניקה ניתוחית המורכבת. עם שיפורים במכשור וזמינות של רקמות שנחתכו מראש פוזר עיניים בנק מוכנה, יש בהליך זה הפוטנציאל להפוך לטיפול הסטנדרטי במחל האנדותל בקרנית. שיטות קיימים כיום להכנת רקמת תורם כוללות שימוששל אוויר בועות להפריד DM מסטרומה כדי להקל על ההסרה של רקמת שתל מתורם קרנית 10. טכניקת הצלילה (קרנית שקועה באמצעות משם רקעים) של הכנת שתל DMEK כרוכה קצירת הרקמות התורמות תחת Optisol או תמיסת מלח מאוזנת (BSS), מזעור המתח הפנים וסיכויים של קריעת 11. עם זאת, טכניקה נוספת בהכנת שתל DMEK עוזבת שפה היקפית של סטרומה מניב שתל שהוא קל יותר לידית והכנס ב12. הרקמות התורמות עשויות גם להיות מוכנות עם מקדחה מותאמת אישית לעזוב צירים של DM שלם בעודך מרים את השתל עם 13 BSS. שיעור ההצלחה הכולל עם הטכניקה שלנו להכנת שתל DMEK היה מוגבל בהשוואה לטכניקות שפורסמו בעבר ל76% אשר עשוי לשקף כי אלה היו 50 הרקמות הראשונות שהוכנו על ידי שני טכנאי בנק עין 14,15. עם זאת, התוצאות לא תשתפרנה במחצית השנייה של קדם רקמהpared. בנוסף, הטכניקה שלנו אינה דורשת מכשירים מיוחדים, מה שהופך את DMEK נגיש בקלות, כמו גם יותר חסכוני. ההתאוששות החזותית יכולה להיות מהירה יותר וטוב יותר עם ​​DMEK בשל חוסר ממשק סטרומה 5. מחקרים גם הראו סטיות מסדר גבוהות יותר פחות על פני השטח האחורי של הקרנית מאשר DSEK או PKP 16. שכיחות של דחיית שתל היא נמוכה באופן משמעותי עם DMEK מאשר עם טכניקות keratoplasty אחרות 17. צפיפות תאי האנדותל הבא DMEK דומה לשלילה האוטומטית של האנדותל Keratoplasty של Descemet (DSAEK) 18. DMEK מציע ניתוחים זעירים פולשניים שמירה על השלמות המבנית של העין ולהקטין את הסיכון של אסטיגמציה שלאחר ניתוח, דליפות פצע וגלאוקומה לאחר ניתוח קשור לשימוש בסטרואידים אקטואלי ממושך. לסיכום, DMEK מאפשר החלפת האנדותל חולה מבלי להסיר סטרומה קרנית נמען או נוספתרקמה. הטכניקה הניתוחית היא מאתגרת בין שאר בשל שחזור של הכנת רקמות תורמות. הכנת בנק עין DMEK עשויה לאפשר להסתגלות משופרת של DMEK הדומה לטכניקות keratoplasty האנדותל קודמות.

אנדותל Keratoplasty (EK) החליף במהירות חודר keratoplasty (PKP) כהליך של בחירה לטיפול במחל אנדותל והיוו מעל 50% מכל ההשתלות שבוצעו בארצות הברית ב2012 6. PKP מוגבל על ידי שיקום חזותי ממושך עם גבוהה אסטיגמציה וחוסר יציבות שבירה, אובדן שלמות העולם וסיבוכים הקשורים לתפר. נהלים מוקדם דור EK, כוללים העמוק טבלית האנדותל Keratoplasty (dlek) מעורבים נתיחה ידנית של סטרומה הקרנית עם השתלה של רקמות תורמות עובי חלקיים. נהלים אלה היו מוצלחים בהשתלת רקמת האנדותל תורם, תוך שמירה על פני השטח של קרנית ללא פגע אבל היו מאתגרים מבחינה טכנית וגרמו למוגבלים חדות ראייה מתוקנות הטוב ביותר בשל ממשק שבשבת קרנית לא סדיר 1. הליך EK הנוכחי של בחירה הוא שלילת האנדותל Keratoplasty של Descemet (DSEK) אשר מציע קלאר קרניity עם התאוששות מהירה יותר של חזון, ממזער שגיאה שבירה שלאחר הניתוח ואסטיגמציה, ומקטין את סיכון של בקיעת פצע טראומטית, תוך שמירה על פני השטח של קרנית 7. הליך זה כרוך הסרת הקרום של Descemet החולה והאנדותל והחלפה עם רקמת קרנית תורם עובי חלקי הכוללת שכבת תאי האנדותל חדשה. קרנית התורם גזור עם microkeratome להכין את הרקמה האחורית שהושתלה 8. הכנה של הרקמות התורמות בעין-הבנקים כבר סייעה בצמיחה המהירה ו, ניתן לטעון, ההצלחה של הליך זה. העלייה ליד 16 של פי נהלי DSEK בארצות הברית בין 2005 ו 2012 מתכתבת עם כמעט מחצית מהרקמה אשר נמצאים בהכנה על ידי העין הבנקים 6. למרות DSEK יכול לשפר את חדות ראייה ל20/40 או טוב יותר, רוב החולים אינם משיגים חזון 20/20 בשל אובך ממשק סטרומה ואור מוגברלפזר מהתוספת של רקמת סטרומה תורם 7. הטכניקה הניתוחית EK התקדמה לממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet (DMEK) הכולל השתלה של הקרום של התורם רק Descemet (DM) והאנדותל. יש הליך זה שיעור גבוה יותר של חולים שהשיגו 20/20 חזון, התאוששות חזותית מהר יותר, וסיכון נמוך יותר לאנדותל דחייה 9. עם זאת, הכנה של רקמות תורמות היא מאתגרת יותר בשל ממדי שתל דקים יותר.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="770">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:268px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">VisionBlue&#160;</td>
			<td style="width:268px;">D.O.R.C., Zuiland, The Netherlands</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Barron vacuum punch</td>
			<td style="width:268px;">Katena, Denville, New Jersey</td>
			<td style="width:119px;">K20-2112</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

corneal donor tissue preparation for descemet's membrane endothelial keratoplasty

ממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet (DMEK) הוא סוג של השתלת קרנית שבו רק שכבה אחת של תאים, האנדותל בקרנית, יחד עם הממברנה שלו במרתף (הקרום של Descemet) הוא הציג על סטרומה האחורית של הנמען 3. בניגוד לשלילה האוטומטי של האנדותל Keratoplasty של Descemet (DSAEK), שבו stroma תורם נוסף הוא הציג, אין ממשק סטרומה לסטרומה לא טבעי נוצר. כתוצאה מכך, את האנטומיה הטבעית של הקרנית נשמרה ככל האפשר ומאפשר לזמן התאוששות משופר וחדות ראייה 4. אנדותל Keratoplasty (EK) הוא ההליך של בחירה לטיפול בתפקוד לקוי של האנדותל. היתרונות של EK כוללים התאוששות מהירה של חזון, שימור שלמות עינית ושינוי שבירה מינימאלי עקב שימוש בחתך קטן, בפריפריה 1. DSAEK מנצל רקמות תורמות מוכנות עם סטרומה עובי חלקית והאנדותל. Succ המהירess והניצול של הליך זה ניתן לייחס לזמינות של העין בנק מוכן רקמות שנחתכו מראש פוזר. היתרונות של הכנת העין בנקאית של רקמות תורמות כוללים חיסול צורך בציוד מיוחד בחדר הניתוח והזמינות של גיבוי רקמות תורמות במקרה של ניקוב רקמות במהלך הכנה. בנוסף, הכנת כמות גדולה של רקמות תורמות ידי טכנאי עיניים בנק עשויה לספק איכות משופרת של רקמות תורמות. DSAEK אולי מוגבל חדות ראייה מתוקנות הטוב ביותר עקב יצירת ממשק סטרומה בין התורם וקרנית נמען. ביעור של ממשק זה עם השתלה של הקרום של התורם רק Descemet והאנדותל בDMEK עשוי לשפר את התוצאות חזותיות ולהפחית סיבוכים לאחר EK 5. בדומה לDSAEK, הצלחה לטווח ארוכה וקבלת DMEK תלוי בקלות הזמינות של חתוך, עיניים בנק מוכן רקמות תורמות. כאן אנו מציגים גישת שלבים להכנת רקמת תורם אשר עשוי להפחית חלק Barriהעיניים הבנקים ERS פנים במתן שתלי DMEK.

הפרדה נאותה של DM והאנדותל מסטרומה היא חיונית בהכנת רקמות שנחתכו מראש פוזר לDMEK. חמישים קרניות תורם בגיל ממוצע של 65 ± 6 שנים (טווח 55-75), מוות לזמן עיבוד של 5.9 ± 2.3 ימים (טווח 1-10) וצפיפות תאי האנדותל (ECD) של 2,616 ± 321 תאים / מ&quot;מ 2 ( טווח 2,049-3,247) שימש להערכת היתכנות ושחזור של טכניקת הכנת ניתוח על ידי שני טכנאי בנק עין. שיעור ההצלחה היה 72% ב25 המקרים הראשונים ועלה ל 80% במחצית השנייה עם שיעור הצלחה כולל של 76%. מתאם הנקודה biserial (RPB) שימש כדי לקבוע מתאם עם גורמי רקמות לפני ניתוח. גיל התורם (RPB = 0.18), המוות לזמן עיבוד (RPB = 0.07) וECD (RPB = -0.11) לא לתאם עם הכנה מוצלחת של רקמה. ההודעה ההכנה-ECD (n = 37) של 2,676 ± 284 (טווח 2,041-3,205) לא הייתה שונה באופן משמעותי מלפני ההכנה ECD (p = 0.72). Unsuccess<html> תוצאות פול נבעו מדמעות DM (10%), ואובדן חמור תא (14%). מקרים אלה גם היו קשורים עם קושי לתלות שוב רקמה וצביעה חלקית של קצה DM. הערכת Eye-בנק של תוצאות מטופל מספקת נתונים חיוניים להצלחה קלינית ותופעות לוואי הקשורות לDMEK אשר עשוי לעזור לשפר את ההתאמה של הטכניקה הניתוחית בפועל וניצול של העין בנק מוכן רקמה. תשע רקמת DMEK מראש לחתוך נמסרו לחמישה מנתחים ל9 חולים. מקרה אחד היה נקע ביום 1 ובשבוע ללא צורך בrebubbling 1. חדות ראייה ביום 1 נעו בין 20/400 לתפיסת אור ועל ידי 1 שבוע השתפר ל20 / 103 (טווח 20 / 30-20 / 200). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig1highres.jpg" /> רקמות .1 איור הרכבה. רקמת הקרנית היא רכובה ומרוכזות בשכונה trephination. <html> ss = &quot;jove_content&quot; FO: לשמור-together.within-page = &quot;תמיד&quot;&gt; <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig2highres.jpg" /> איור 2 trephination רקמות. טבעת הוואקום יושבת ורקמת קרנית trephined באופן חלקי כולל הקרום של Descemet. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig3highres.jpg" /> איור 3 הסרת מדיית אחסון. אמצעי אחסון עודף מוסר לפני להכתים יישום. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig4highres.jpg" /> איור 4 יישום כחול Trypan. החל כתם כחול trypan על פני השטח הקרום של Descemet עם מילוי של הבאר ל60-90 שניות. <html> _upload / 51919 / 51919fig5highres.jpg &quot;/&gt; איור 5 הסרת כתמים. יש לשטוף trypan כחול עם BSS. <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig6highres.jpg" /> איור 6 הסרת כתמים. הסרה מלאה של כתם. <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig7highres.jpg" /> מלקחיים איור 7 נתיחת הקרום של Descemet. קשירה משמשים לביצוע 360 ° נתיחה חלקית. <img alt="איור 8" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig8highres.jpg" /> איור 8 הפשטת הקרום של Descemet. בגין להתפשט הקרום של Descemet. <img alt="&lt;/ Html"><html> src = /&gt; &quot;/ קבצים / ftp_upload / 51919 / 51919fig9highres.jpg&quot; &quot;9 איור&quot; איור 9 הפשטת הקרום של Descemet. המשך להתפשט הקרום של Descemet. <img alt="איור 10" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig10highres.jpg" /> איור 10. הקרום של המיקום מחדש Descemet. הקרום של חזרה Descemet למיטת סטרומה, () יישום (B) BSS כדי לסייע בהנפת הקרום של Descemet, והנפה מלאה (C) של הקרום של Descemet למיקום מקורי. <img alt="איור 11" src="/files/ftp_upload/51919/51919fig11highres.jpg" /> איור 11. מאוזן מלח פתרון ההסרה. הסרת BSS הנוסף מתחת לדש. 2 &quot;src =&quot; / קבצים / ftp_upload / 51919 / 51919fig12highres.jpg &quot;/&gt; סימן איור 12. צירים. זיהוי של ציר עם סמן עור.

Watch this Scientific Journal Video about Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty at JoVE.com

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet&#039;s Membrane Endothelial Keratoplasty

keratoplasty האנדותל הוא טכניקה כירורגית ברציפות מתפתחת כמו התקדמות לגרום להשתלת שתלי דקים יותר עם ​​כל רצף 1. כאן אנו מציגים טכניקה לנתיחה רקמה ידנית מבוקרת על מנת לאפשר הפרדה בטוחה ודיר של האנדותל והקרומים של Descemet מכפתורי corneoscleral תורם להשתלה 2.

הכנת רקמות התורמות קרנית לממברנה האנדותל Keratoplasty של Descemet

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

corneal-donor-tissue-preparation-for-descemet-s-membrane-endothelial

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

15.2K Views.  University of Michigan.  keratoplasty האנדותל הוא טכניקה כירורגית ברציפות מתפתחת כמו התקדמות לגרום להשתלת שתלי דקים יותר עם ​​כל רצף 1. כאן אנו מציגים טכניקה לנתיחה רקמה ידנית מבוקרת על מנת לאפשר הפרדה בטוחה ודיר של האנדותל והקרומים של Descemet מכפתורי corneoscleral תורם ל?...

Video: Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Single Port Donor Nephrectomy

In 2007, Rane presented the first single port nephrectomy for a small non-functioning kidney at the World Congress of Endourology. Since that time, the use of single port surgery for nephrectomy has expanded to include donor nephrectomy. Over the next two years the technique was adopted for many others types of nephrectomies to include donor nephrectomy. We present our technique for single port donor nephrectomy using the Gelpoint device. We have successfully performed this surgery in over 100 patients and add this experience to our experience of over 1000 laparoscopic nephrectomies. With the proper equipment and technique, single port donor nephrectomy can be performed safely and effectively in the majority of live donors. We have found that our operative times and most importantly our transplant outcomes have not changed significantly with the adoption of the single port donor nephrectomy. We believe that single port donor nephrectomy represents a step forward in the care of living donors.

Single port laparoscopic surgery is changing the standard of care in surgical care like nothing since the laparoscopic technique was introduced 20 years ago. We present out technique of single port donor nephrectomy using the Gelpoint device. We have successfully performed this surgery in 100 patients.

Nephrectomy יחיד נמל התורם

In 2007, Rane presented the first single port nephrectomy for a small non-functioning kidney at the World Congress of Endourology.  Since that time, the ...

Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full thickness corneal transplantation has been the treatment to restore sight in those limited by corneal disease. Some disadvantages to this approach include a high degree of post-operative astigmatism, lack of predictable refractive outcome, and disturbance to the ocular surface. The development of Descemet's stripping endothelial keratoplasty (DSEK), transplanting only the posterior corneal stroma, Descemet's membrane, and endothelium, has dramatically changed treatment of corneal endothelial disease. DSEK is performed through a smaller incision; this technique avoids 'open sky' surgery with its risk of hemorrhage or expulsion, decreases the incidence of postoperative wound dehiscence, reduces unpredictable refractive outcomes, and may decrease the rate of transplant rejection3-6.
Initially, cornea donor posterior lamellar dissection for DSEK was performed manually1 resulting in variable graft thickness and damage to the delicate corneal endothelial tissue during tissue processing. Automated lamellar dissection (Descemet's stripping automated endothelial keratoplasty, DSAEK) was developed to address these issues. Automated dissection utilizes the same technology as LASIK corneal flap creation with a mechanical microkeratome blade that helps to create uniform and thin tissue grafts for DSAEK surgery with minimal corneal endothelial cell loss in tissue processing.
Eye banks have been providing full thickness corneas for surgical transplantation for many years. In 2006, eye banks began to develop methodologies for supplying precut corneal tissue for endothelial keratoplasty. With the input of corneal surgeons, eye banks have developed thorough protocols to safely and effectively prepare posterior lamellar tissue for DSAEK surgery. This can be performed preoperatively at the eye bank. Research shows no significant difference in terms of the quality of the tissue7 or patient outcomes8,9 using eye bank precut tissue versus surgeon-prepared tissue for DSAEK surgery. For most corneal surgeons, the availability of precut DSAEK corneal tissue saves time and money10, and reduces the stress of performing the donor corneal dissection in the operating room. In part because of the ability of the eye banks to provide high quality posterior lamellar corneal in a timely manner, DSAEK has become the standard of care for surgical management of corneal endothelial disease.
The procedure that we are describing is the preparation of the posterior lamellar cornea at the eye bank for transplantation in DSAEK surgery (Figure 1).

Endothelial corneal transplantation is a surgical technique for treatment of posterior corneal diseases. Mechanical microkeratome dissection to prepare tissue results in thinner, more symmetric grafts with less endothelial cell loss and improved outcomes. Dissections can be performed at the eye bank prior to corneal transplantation surgery.

קרנית התורם רקמות הכנה Keratoplasty האנדותל

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full ...

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous perfusion of organs provides the opportunity to improve organ quality and allows ex situ viability assessment of donor livers prior to transplantation. This video article provides a step by step protocol for ex situ normothermic machine perfusion (37 &#176;C) of human donor livers using a device that provides a pressure and temperature controlled pulsatile perfusion of the hepatic artery and continuous perfusion of the portal vein. The perfusion fluid is oxygenated by two hollow fiber membrane oxygenators and the temperature can be regulated between 10 &#176;C and 37 &#176;C. During perfusion, the metabolic activity of the liver as well as the degree of injury can be assessed by biochemical analysis of samples taken from the perfusion fluid. Machine perfusion is a very promising tool to increase the number of livers that are suitable for transplantation.

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Here we present a protocol describing oxygenated ex situ machine perfusion of donor liver grafts. This article contains a step by step protocol to procure and prepare the liver graft for machine perfusion, prepare the perfusion fluid, prime the perfusion machine and perform oxygenated normothermic machine perfusion of the liver graft.

באתרו לשעבר Normothermic מכונת זלוף של כבדים תורמים

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene and cell therapies are highly promising alternative approaches for CVD treatment. However, the broad clinical application of gene therapy is greatly limited by the lack of suitable gene delivery systems. The development of appropriate gene delivery vectors can provide a solution to current challenges in cell therapy. In particular, existing drawbacks, such as limited efficiency and low cell retention in the injured organ, could be overcome by appropriate cell engineering (i.e., genetic) prior to transplantation. The presented protocol describes the efficient and safe transient modification of endothelial cells using a polyethyleneimine superparamagnetic magnetic nanoparticle (PEI/MNP)-based delivery vector. Also, the algorithm and methods for cell characterization are defined. The successful intracellular delivery of microRNA (miR) into human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) has been achieved without affecting cell viability, functionality, or intercellular communication. Moreover, this approach was proven to cause a strong functional effect in introduced exogenous miR. Importantly, the application of this MNP-based vector ensures cell magnetization, with accompanying possibilities of magnetic targeting and non-invasive MRI tracing. This may provide a basis for magnetically guided, genetically engineered cell therapeutics that can be monitored non-invasively with MRI.

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

This manuscript describes the efficient, non-viral delivery of miR to endothelial cells by a PEI/MNP vector and their magnetization. Thus, in addition to genetic modification, this approach allows for magnetic cell guidance and MRI detectability. The technique can be used to improve the characteristics of therapeutic cell products.

הכנה<em&gt; במבחנה</em&gt; אפיון ממוגנטים miR-modified לתאי אנדותל

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two dimensional (2D) and three dimensional (3D) culture has generated a wealth of information not only about corneal biology but also about wound healing, myofibroblast biology, and scarring in general. The goal of the protocol is an assay system for quantifying myofibroblast development, which characterizes scarring. We demonstrate a corneal organ culture ex vivo model using pig eyes. In this anterior keratectomy wound, corneas still in the globe are wounded with a circular blade called a trephine. A plug of approximately 1/3 of the anterior cornea is removed including the epithelium, the basement membrane, and the anterior part of the stroma. After wounding, corneas are cut from the globe, mounted on a collagen/agar base, and cultured for two weeks in supplemented-serum free medium with stabilized vitamin C to augment cell proliferation and extracellular matrix secretion by resident fibroblasts. Activation of myofibroblasts in the anterior stroma is evident in the healed cornea. This model can be used to assay wound closure, the development of myofibroblasts and fibrotic markers, and for toxicology studies. In addition, the effects of small molecule inhibitors as well as lipid-mediated siRNA transfection for gene knockdown can be tested in this system.

A protocol for an ex vivo corneal organ culture model useful for wound healing studies is described. This model system can be used to assess the effects of agents to promote regenerative healing or drug toxicity in an organized 3D multicellular environment.

Ex-Vivo איברים הקרנית מודל תרבות עבור ריפוי פצעים מחקרים

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for experimental investigations as they are normally needed for transplantation. Endothelial cell cultures often do not translate well to in vivo situations. Due to the biostructural characteristics of non-human corneas, stromal swelling during cultivation induces substantial corneal endothelial cell loss, which makes it difficult to perform cultivation for an extended period of time. Deswelling agents such as dextran are used to counteract this response. However, they also cause significant endothelial cell loss. Therefore, an ex vivo organ culture model not requiring deswelling agents was established. Pig eyes from a local slaughterhouse were used to prepare split corneal buttons. After partial corneal trephination, the outer layers of the cornea (epithelium, bowman layer, parts of the stroma) were removed. This significantly reduces corneal endothelial cell loss induced by massive stromal swelling and Descemet&#39;s membrane folding throughout longer cultivation periods and improves general preservation of the endothelial cell layer. Subsequent complete corneal trephination was followed by the removal of the split corneal button from the remaining eye bulb and cultivation. Endothelial cell density was assessed at follow-up times of up to 15 days after preparation (i.e., days 1, 8, 15) using light microscopy. The preparation technique used allows a better preservation of the endothelial cell layer enabled by less stromal tissue swelling, which results in slow and linear decline rates in split corneal buttons comparable to human donor corneas. As this standardized organo-typically cultivated research model for the first time allows a stable cultivation for at least two weeks, it is a valuable alternative to human donor corneas for future investigations of various external factors with regards to their effects on the corneal endothelium.

Here, a step-by-step protocol for the preparation and cultivation of porcine split corneal buttons is presented. As this organo-typically cultivated organ culture model shows cell death rates within 15 days, comparable to human donor corneas, it represents the first model allowing long-term cultivation of non-human corneas without adding toxic dextran.

מודל של הקרנית של הקרניות הפותל באמצעות לחצני הקרנית מפוצלת

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Development of a Noninvasive, Laser-Assisted Experimental Model of Corneal Endothelial Cell Loss

Nd:YAG lasers have been used to perform noninvasive intraocular surgery, such as capsulotomy for several decades now. The incisive effect relies on the optical breakdown at the laser focus. Acoustic shock waves and cavitation bubbles are generated, causing tissue rupture. Bubble sizes and pressure amplitudes vary with pulse energy and position of the focal point. In this study, enucleated porcine eyes were positioned in front of a commercially available Nd:YAG laser. Variable pulse energies as well as different positions of the focal spots posterior to the cornea were tested. Resulting lesions were evaluated by two-photon microscopy and histology to determine the best parameters for an exclusive detachment of corneal endothelial cells (CEC) with minimum collateral damage. The advantages of this method are the precise ablation of CEC, reduced collateral damage, and above all, the non-contact treatment.

Here, we present a protocol to detach corneal endothelial cells (CEC) from Descemet&#8217;s membrane (DM) using a neodymium:YAG (Nd:YAG) laser as an ex vivo disease model for bullous keratopathy (BK).

פיתוח של מודל פולשני, בסיוע לייזר של הקרנית הפסד של תא אנדותל

Nd:YAG lasers have been used to perform noninvasive intraocular surgery, such as capsulotomy for several decades now. The incisive effect relies on the ...

Rodent Heart and Brain Tissue Preparation for Digital Macro Photography after Ischemia-reperfusion

Macro photography is applicable for imaging various tissue samples at high magnification to perform qualitative and quantitative analyses. Tissue preparation and subsequent image capture are steps performed immediately after the ischemia-reperfusion (IR) experiment and must be performed in a timely manner and with appropriate care. For the evaluation of IR-induced damage in the heart and brain, this paper describes 2,3,5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC)-based staining followed by macro photography. Scientific macro photography requires controlled lighting and an appropriate imaging setup. The standardized methodology ensures high-quality, detailed digital images even if a combination of an inexpensive up-to-date digital camera and macro lens is used. Proper techniques and potential mistakes in sample preparation and image acquisition are discussed, and examples of the influence of correct and incorrect setups on image quality are provided. Specific tips are provided on how to avoid common mistakes, such as overstaining, improper sample storage, and suboptimal lighting conditions. This paper shows the appropriate methodology for rat heart and brain tissue slicing and staining and provides guidelines for establishing lighting and camera setups and photography techniques for high-resolution image acquisition.

Presented here is a protocol for the standardized methodology of rodent tissue preparation after the ischemia-reperfusion experiment and guidelines for establishing lighting and camera setups for high-resolution image acquisition. This method is applicable to all experimental small-animal organ photography.

הכנת לב ורקמות מוח מכרסמים לצילום מאקרו דיגיטלי לאחר איסכמיה-רפרטפוזיה

Macro photography is applicable for imaging various tissue samples at high magnification to perform qualitative and quantitative analyses. Tissue ...

An Epithelial Abrasion Model for Studying Corneal Wound Healing

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its transparency. However, due to its external position, the cornea is highly susceptible to a wide variety of injuries that can lead to the loss of corneal transparency and eventual blindness. Efficient corneal wound healing in response to these injuries is pivotal for maintaining corneal homeostasis and preservation of corneal transparency and refractive capabilities. In events of compromised corneal wound healing, the cornea becomes vulnerable to infections, ulcerations, and scarring. Given the fundamental importance of corneal wound healing to the preservation of corneal transparency and vision, a better understanding of the normal corneal wound healing process is a prerequisite to understanding impaired corneal wound healing associated with infection and disease. Toward this goal, murine models of corneal wounding have proven useful in furthering our understanding of the corneal wound healing mechanisms operating under normal physiological conditions. Here, a protocol for creating a central corneal epithelial abrasion in mouse using a trephine and a blunt golf club spud is described. In this model, a 2 mm diameter circular trephine, centered over the cornea, is used to demarcate the wound area. The golf club spud is used with care to debride the epithelium and create a circular wound without damaging the corneal epithelial basement membrane. The resulting inflammatory response proceeds as a well-characterized cascade of cellular and molecular events that are critical for efficient wound healing. This simple corneal wound healing model is highly reproducible and well-published and is now being used to evaluate compromised corneal wound healing in the context of disease.

Here, a protocol for creating a central corneal epithelial abrasion wound in the mouse using a trephine and a blunt golf club spud is described. This corneal wound healing model is highly reproducible and is now being used to evaluate compromised corneal wound healing in the context of diseases.

מודל שחיקה אפיתליאלית לחקר ריפוי פצעי הקרנית

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its ...

A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts and complications such as primary graft dysfunction and graft rejection. The recent clinical use of an ex vivo perfusion device in cardiac transplantation introduces a unique opportunity for treating cardiac allografts with therapeutic interventions to improve function and avoid deleterious recipient responses. Establishing a translational, large-animal model for therapeutic delivery to the entire allograft is essential for testing novel therapeutic approaches in cardiac transplantation. The porcine, heterotopic heart transplantation model in the intraabdominal position serves as an excellent model for assessing the effects of novel interventions and the immunopathology of graft rejection. This model additionally offers long-term survival for the pig, given that the graft is not required to maintain the recipient's circulation. The aim of this protocol is to provide a reproducible and robust approach for achieving ex vivo delivery of a therapeutic to the entire cardiac allograft prior to transplantation and provide technical details to perform a survival heterotopic transplant of the ex vivo perfused heart.

We present a protocol for utilizing a normothermic ex vivo sanguinous perfusion system for the delivery of therapeutics to an entire cardiac allograft in a porcine heterotopic heart transplant model.

פרוטוקול השתלת לב הטרוטופית חזירית להעברת טיפולים לאלוגרפט לבבי

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts ...