The experiments were supported by a grant from the Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada to CMSP. We thank Koppert Canada for their bumblebee colony donations. Portions of this manuscript, including some figures and tables have been published in Naturwissenschaften11, and reproduced here with permission from Springer.

<ol>
	<li>Plowright, C. M. S., Evans, S. A., Leung, J. C., Collin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preference+for+symmetry+in+flower-na&#239;ve+and+not-so-na&#239;ve+bumblebees.">The preference for symmetry in flower-na&#239;ve and not-so-na&#239;ve bumblebees.</a> Learn. Motiv. 42 (1), 76-83 (2011).</li><li>Streit, S., Bock, F., Pirk, C. W. W., Tautz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+life-long+monitoring+of+individual+insect+behaviour+now+possible.">Automatic life-long monitoring of individual insect behaviour now possible.</a> Zool. 106, 169-171 (2003).</li><li>Chittka, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+human+are+insects,+and+does+it+matter.">How human are insects, and does it matter.</a> Formosan Entomol. 31, 85-99 (2011).</li><li>Lihoreau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radar+tracking+and+motion-sensitive+cameras+on+flowers+reveal+the+development+of+pollinator+multi-destination+routes+over+large+spatial+scales.">Radar tracking and motion-sensitive cameras on flowers reveal the development of pollinator multi-destination routes over large spatial scales.</a> PLoS Biol. 10 (9), e1001392 (2012).</li><li>Brodbeck, D. R., Shettleworth, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matching+location+and+color+of+a+compound+stimulus:+Comparison+of+a+food-storing+and+a+nonstoring+bird+species.">Matching location and color of a compound stimulus: Comparison of a food-storing and a nonstoring bird species.</a> J. Exp. Psychol. Anim. Behav. 21 (1), 64-77 (1995).</li><li>Srinivasan, M., Lehrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+resolution+of+colour+vision+in+the+honeybee.">Temporal resolution of colour vision in the honeybee.</a> J. Comp. Physiol. A. 157 (5), 579-586 (1985).</li><li>Sokal, R. R., Rohlf, F. J., Freeman, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (2011).</li><li>Lunau, K., Fieselmann, G., Heuschen, B., van de Loo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+targeting+of+components+of+floral+colour+patterns+in+flower-na&#239;ve+bumblebees+(Bombus+terrestris;+Apidae).+.">Visual targeting of components of floral colour patterns in flower-na&#239;ve bumblebees (Bombus terrestris; Apidae). .</a> Naturwissenschaften. 93 (7), 325-328 (2006).</li><li>Lehrer, M., Horridge, G. A., Zhang, S. W., Gadagkar, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shape+vision+in+bees:+Innate+preference+for+flower-like+patterns.">Shape vision in bees: Innate preference for flower-like patterns.</a> Phil. Trans. R. Soc. B. 347 (1320), 123-137 (1995).</li><li>Thompson, E. L., Plowright, C. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+images+may+or+may+not+represent+flowers:+picture-object+correspondence+in+bumblebees+(Bombus+impatiens).">How images may or may not represent flowers: picture-object correspondence in bumblebees (Bombus impatiens).</a> Anim. Cognit. , (2014).</li><li>Orb&#225;n, L. L., Plowright, C. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+flower-like+and+non-flower-like+visual+properties+on+choice+of+unrewarding+patterns+by+bumblebees.">The effect of flower-like and non-flower-like visual properties on choice of unrewarding patterns by bumblebees.</a> Naturwissenschaften. 100 (7), 621-631 (2013).</li><li>Leonard, A. S., Papaj, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X&#8221;+marks+the+spot:+The+possible+benefits+of+nectar+guides+to+bees+and+plants.">X&#8221; marks the spot: The possible benefits of nectar guides to bees and plants.</a> Funct. Ecol. 25 (6), 1293-1301 (2011).</li></ol>

The authors have no competing financial interests.

טכנולוגית RFID מאפשרת למאה לומדים עובדים בודדים בקלות ודיוק גבוה, אבל המאפיינים של ההתנהגות שנרשמה שונים מתצפיות על ידי בני אדם והקלטות וידאו. התנהגות הבחירה הוקלטה על ידי ה- RFID יכולה להיות מתוארת כחקר פרחוני. זה קריטריון מאוד מחמיר של העדפה בהשוואה לקריטריונים המשמשים במחקרים אחרים, כגון גישה 8, כניסה למבוך זרוע 9,10, תגובת מחושים 8, או נחיתה על דפוס 11,12. על מנת להשוות את תוקפן של הגדרות התנהגות בחירה, וכדי לאמת את שיטת ה- RFID החדשה להתנהגות unrewarded, הקלטות וידאו של נחיתה נצפו בניסוי 2. כל אמצעי הבחירה אינם שווים: קריטריון RFID כפי שנמדדו על ידי כניסה פרחונית, הצביע על כך ש הרכוש החזותי של מיקום תבנית הוא חשוב יותר לבחירת דבורה, ואילו נתוני וידאו הצביעו על כך שהרכוש החזותי מסוג התבנית הוא חשוב יותר לבחירת דבורה. אחד האתגרים הכלליים בלימוד שלא נלמדה התנהגות בחירה הוא שזה קשה מאוד למשוך פרח נאיבי, דבורים לא מאומנים לפרחים מלאכותיים שאינו מציעים שום אבקה או צוף. ואכן, רבים מהניסויים הקודמים נקטו אימון דבורים בסביבת הבדיקות בגירויים שהם חשבו להיות רלוונטיים להתנהגות בחירה בגירויי בדיקות. RFID והקלטות וידאו תנועה רגישה להתגבר על מכשול זה על ידי מתן אפשרות הקלטה רציפה, 24 שעות ביום, ללא הפיקוח המתמיד של החוקר, ועל ידי הגדלת גודל המדגם 15-20 דבורים לכמה מאה דבורים. בעוד בחירות unrewarded על ידי דבורים לא מאומנים יישארו נדירה, פרמטרים עיצוב ניסיוני החדשים אלה הופכים את התצפית אפשרית. שיפורים נוספים המוצעים על ידי שתי הטכניקות הללו כוללים חיסול של הטיה מדגם, שיפור התוקף חיצוני, ומעקב אחר הבדלים אישיים. Samplהטיה דואר עשויה להיות הציגה כאשר לומדים רק כתריסר דבורים במושבה. ישנם הבדלים משמעותיים במוזרויות התנהגותיות פני עובדים בודדים אפילו בתוך אותה המושבה שסביר שלא נענו משום שרק עובדים אלה הם נצפו שיקרו &quot;לשתף פעולה&quot; עם החוקר בזמן נתון. לומד 15-20 דבורים במושבה של 300 או יותר דבורים, מייצג קטן כמו 5% מהמושבה הכוללת, שבו ההטיה מקרה של דגימה עשויה להיות משמעותית. תיוג והתבוננות בהתנהגות של כל העובדים מבטלת את הבעיה לחלוטין. מספר אפשרויות גירויים בו זמנית גם ניתן להשפיע. הצענו אפשרויות בינארי בניסוי שלנו מסיבות טכניות, אבל בחירה יחידה או כמה עיצובי בחירה הן גם אפשרית. במונחים של תוקף חיצוני, לומדים דבורים בסביבת מעבדה באופן מסורתי מלאכותי במידה רבה, שפגע ביכולת ההכללה של תוצאות. לדוגמא, חוקרי יחסי הציבור היו צריכים להיותesent לאיסוף נתונים, דבורים נאלצו לחפש מזון בסביבת בדיקות אחת לאחת, ובדיקה הייתה מוגבלת לחלון זמן קטן. הטכניקות החדשות שתוארו במאמר זה להסיר את המגבלות מלאכותיות הללו על ידי ביצוע התצפית ללא השגחה וללא מגבלות. לבסוף, הבדלים אישיים בהתנהגות יכולים להיות מתועדים כי אנחנו יכולים לבדוק אם אלה חזרו על עצמם החלטות על ידי דבורה בודדת או על ידי מספר דבורים. תנועה רגישה, יש לי מצלמות וידאו ברזולוציה גבוהה במרחב היתרון על פני טכניקות RFID במונחים של הגמישות של עיצובי גירויים: הופעתו של גירוי חזותי יכולה להיות כמעט בכל צורה ואופן כל עוד זיהוי של הנושא יכול להיות שנתפס על לפחות כמה מסגרות. עיבוד וידאו הוא קצת יותר זמן רב יותר מאשר העיבוד של נתוני RFID בגלל ההזדהות צריכה להיקרא על ידי החוקר, אשר דורש בדיקה ידנית של כל סרטון וידאו. אם עיצוב הגירוי החזותי יכול לענות על האילוצים של RFID קורא (כלומר, תגי RFID על הדבורה חייבים להגיע ללפחות 3-4 מ&quot;מ של קורא RFID), ולאחר מכן טכנולוגיית RFID יש יתרון על פני איסוף נתונים בקנה מידה גדולה אוטומטי. מחקר איכותני עלול ימשיך להיות מועדף על ידי ניתוח וידאו. כפי שניתן לראות בניסוי זה, קוראי RFID יכולים לצבור ערכות נתונים גדולות מאוד שאינו דורשת קידוד ידני. יתרונות מעט שונים הקשורים לכל טכניקה מציעים כי בעתיד הם יכולים לשמש באופן משלים. עתידם של שני הטכנולוגיות יכול להיות טמון בכימות המדויק של התנהגויות נדירות המתרחשות. לדוגמא, אפשרות סבירה אחת ליישומים עתידיים היא להעסיק את הטכניקות הללו בחממות ובסביבות יותר נטורליסטי אחרים. השילוב של נטורליזם ושליטה ניסיונית יאפשר התמודדות עם שאלות שלא היו אפשריים לענות לפני. באופן כללי, טכניקות אלה מציעים שתי דרכים חדשות להתבוננות בהתנהגות במחמירהצורה יעילה nd. RFID ווידאו תנועה רגישה הם צעד משמעותי קדימה לא רק עבור חוקרים לומדים מאביקים או חרקים, אך טכניקות אלו יכולות גם לפנות למדעני התנהגות אחרים.

בעיה מרכזית בלימוד שלא נלמדה התנהגות בחירה על ידי דבורים ודבורים היא שפרח-נאיבי, עובדים לא מיומנים לא בקלות להיכנס למקום שבו הבדיקות ניתן למדוד את העדפות. כתוצאה מכך, חוקרים רבים מסתמכים על טכניקה אידיאלית פחות מ: עובדים טרום הכשרה להאכיל בתוך חלל בדיקות מגירויים ניטרליים לכאורה, כי חוקרים רואים להיות שונה מהגירויים הניסיוניים. עם זאת, ניסויים שנעשו לאחרונה הראו כי גירויים שנחשבו לניטראליים (כלומר, גירויים שאינו משפיעים על המשך התנהגות בחירה בפגישת בדיקות) השפיעו על העדפות בדרכים בלתי צפויות 1. מערכות אוטומטיות הכוללות זיהוי בתדר רדיו (RFID) 2 והקלטות וידאו תנועה רגישה עשויות להציע הזדמנות לפתור את הבעיה הזו. מטרת המחקר הייתה כפולה: (1) בעיקר לתרום לספרות על העדפות פרחוניות שלא נלמדו על ידי דבורים, (2) ומשני לEValuate שתי מערכות מדידת בחירה, כפי שנרשם על ידי שני התקני הקלטה אוטומטיים שונים. שתי מערכות אוטומטיות 3 יושמו במחקר הנוכחי לצפות נלמדה התנהגות בחירה: RFID והקלטות וידאו תנועה רגישה. שני אלמנטים חיוניים של שני המערכות הם שבחירות אינן מתוגמלים, והתצוגה של רמזים חזותיים שונים ניתן להשפיע. וידאו תנועה רגישה (High Definition, הקלטה ברזולוציה mp 1) לא רק מאפשר תצפית רציפה של עובדים לחקור באופן חופשי בחדר טיסה, אבל הוא קריטי עבור התצפית היעילה של אירועים נדירים יחסית 4. שאלת המחקר בניסוי 1 נוגעת לאופן שונה מאפיינים חזותיים אינטראקציה כאשר מוצגים יחד. מחקר זה מבקש לבחון את החשיבות היחסית של מיצוב דפוס ביחס לסוג דפוס. (כלומר, דואר שור באמצעות עיצוב 2 x 2, רדיאלי (כלומר, שמש) וקונצנטרייםאתם) סוגי דפוס ממוקמים גם במרכז או שולי בפרחים מלאכותיים (ראה איור 1 לדוגמאות של גירויים). קוראי RFID בנויים לתוך גירויי פרחים מלאכותיים אלה שתוכננו במיוחד, ודבורים מקבלים תגי RFID מאפשר המאפשרים לנו להקליט כל עובד מתויג שנכנס לגירוי הפרחים המלאכותי. תצפית RFID עובדת על ידי מנגנון הקורא (שנבנה לפרחים המלאכותיים) שולח אותות בתדרי רדיו (13.56 MHz במקרה זה), שהם מווסתים על ידי הנוכחות של תגים פסיביים. הקורא יכול לזהות ולתעד את אפנון אות אלה, המשתנים מעט לאורך תגים המאפשרים זיהוי ייחודי תג. השאלות של ניסוי 2 הן משולשת. ראשון, הם פרח-כניסה, הנמדד על ידי ה- RFID, ונחיתה, כפי שנמדד על ידי הקלטות וידאו קריטריוני בחירה שווה ערך? בחירה נמדדת בנקודות שונות (נחיתה לוידאו, וכניסת פרחים לRFID), אשר יכול לתרגם אמצעים שוניםשל העדפה. שנית, מהי ההשפעה של מרכז לעומת פריפרית מיצוב? זה לא ידוע אם או לא עובדים היו בוחרים דפוס מרכזי אם שילוב המורכב משני דפוסים רדיאלי בעמדות שונות הוצגו (ראה איור 4). שלישית, מהי החשיבות היחסית של עמדת דפוס לעומת סוג הדפוס? במילים אחרות, יהיו דבורים לנחות על דפוסים מהסוג העדיף הדפוס, או עמדת הדפוס המועדפת? דבורים יכולים מעדיפים מרכזי-רדיאלי לדפוס היקפי-קונצנטריים, אבל ההעדפה יכולה להיות בגלל סוג התבנית או המיקום המרכזי שלה. בניסוי זה, שני משתני להתחרות זה 5 (ראה איור 4C, ד) אחר. בניסוי 2, השתמשנו הקלטות וידאו תנועה רגישה בגירויים דמויי פרח. פרחים מלאכותיים הונחו בתוך כלוב טיסה, ומצלמות וידאו בהבחנה גבוהה תנועה רגישה שהצביעו על הפרחים האלה מfront והעליון. באופן ספציפי יותר, שתי מצלמות וידאו הוצבו כדי ללכוד את הנוף החזיתי של כל אחד משני הגירויים בחלל הבדיקות. מצלמת וידאו נוספת הוצבה בין הגירויים להקליט מרחף התנהגות מלמעלה, ושנתפסה התנהגות משני פרחים מלאכותיים. דבורים זוהו באמצעות תגי מספר שאפשר לקרוא על קטעי וידאו בהבחנה גבוהה. ריחוף, התנהגויות antennation והנחיתה נצפו.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="708">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:143px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:231px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Miniaturized mic3 tags</td>
			<td style="width:143px;">Microsensys</td>
			<td style="width:119px;">mic3 TAG 64 bit RO</td>
			<td>RFID tags to glue to bee</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">RFID reader 2k6 head</td>
			<td style="width:143px;">Microsensys</td>
			<td style="width:119px;">2k6</td>
			<td>RFID readers built into artificial flowers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">IP camcorders</td>
			<td style="width:143px;">Vivotek</td>
			<td style="width:119px;">IP8161</td>
			<td>Motion-sensitive video recorders</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Opalith Plattchen number tags and non-toxic glue</td>
			<td style="width:143px;">Beeworks.com</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Number tags to glue to bees</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bumblebee Colony for Research</td>
			<td style="width:143px;">Koppert Canada</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Artificial flowers</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Developed by campus biology shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Artificial flower stand</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Developed by campus biology shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Flight room</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Developed by campus biology shop</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Laptop with Windows</td>
			<td style="width:143px;">Generic hardware / Microsoft software</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to download RFID data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">RS 232 to USB converter</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Connect RFID reader to computer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Desktop</td>
			<td style="width:143px;">IBM</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to transmit video data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Second NIC</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;">10/100M NIC PCI</td>
			<td>Used to transmit video data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Network hub</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;">4-port</td>
			<td>Used to transmit video data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">High precision tweezer</td>
			<td style="width:143px;">SPI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to glue number and RFID tags to bees</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sugar</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to mix with water to create sugar-water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pollen</td>
			<td style="width:143px;">Any local apiarist</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Fed to bumblebees</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Marking cage with plunger</td>
			<td style="width:143px;">Beeworks.com</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Aids tagging process</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Honey</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to mix with water ot create pollen paste</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bake clay</td>
			<td style="width:143px;">Sculpey</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for RFID</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Clay shaping tools</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for RFID</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">White paper</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for Video</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Laser printer</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for Video</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Wood</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for Video -- attachment clip</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radio frequency identification and motion-sensitive video efficiently automate recording of unrewarded choice behavior by bumblebees

אנו מציגים שתי שיטות להתבוננות בחירת דבורת התנהגות במרחב בדיקה מצורף. השיטה הראשונה כוללת זיהוי בתדר רדיו (RFID) לקוראים מובנים בפרחים מלאכותיים המציגים רמזים חזותיים שונים, ותגי RFID (כלומר, משיבים פסיביים) הדבוקים לבית החזה של עובדי דבורה. החידוש ביישום שלנו הוא שקוראי RFID בנויים ישירות לתוך פרחים מלאכותיים שמסוגלים להציג מספר מאפיינים חזותיים מובהקים כגון צבע, סוג הדפוס, תדר המרחבי (כלומר, &quot;עסקנות&quot; של הדפוס), וסימטריה (תדר המרחבי ו סימטריה לא מניפולציה בניסוי זה). בנוסף, הצגה ויזואלית אלה בשיתוף עם המערכות האוטומטיות היא מסוגל להקליט unrewarded ולא מאומנת התנהגות בחירה. השיטה השנייה מורכבת מהקלטת התנהגות בחירה בפרחים מלאכותיים באמצעות מצלמות וידאו בהבחנה גבוהה תנועה רגישה. Bumbיש לי lebees תגי מספר דבוק לthoraces לזיהוי ייחודי. היתרון ביישום זה על RFID הוא שבנוסף להתבוננות נחיתת התנהגות, אמצעים חלופיים של העדפה כגון ריחוף וantennation יכולים גם להיות שנצפו. שתי שיטות האוטומציה להגביר את השליטה ניסיונית, ותוקף פנימי כך שהוא מאפשר מחקרים בקנה מידה גדולים יותר, הלוקחים בחשבון הבדלים בין-אישיים. תוקף חיצוני הוא גם שיפור כי דבורים יכולים באופן חופשי להיכנס ולצאת מסביבת הבדיקות ללא אילוצים כגון הזמינות של עוזר מחקר באתר. בהשוואה לתצפית אנושית בזמן אמת, בשיטות האוטומטיות הן חסכוניים יותר ואולי פחות מועדות לטעויות.

<html> ניסוי 1: RFID נתונים כל 375 העובדים במושבה תויגו RFID, ו318 של עובדים אלו (85%) נכנס לטיסת כלוב בשלב מסוים במהלך המחקר. בסך הכל 197 (62% מדבורים שעזבו את המושבה) ביקר לפחות אחת מארבעת גירויי פרחים מלאכותיים. הגדרה של בחירה בחירה הוגדרה כעובדת שנכנסה לפרח המלאכותי (ראה איור 1). אנחנו כותרת התנהגות זו בשם &quot;חקר פרחוני.&quot; הגדרה זו של בחירה היא מחמירה יותר מאלה המשמשים בספרות, אשר, בהתאם למחקר, להשתמש בחלק שילוב של הריחוף, antennation או נחיתה. חיפושים פרחוניים הוא הגדרה מחמירה של בחירה מכיוון שהיא דורשת כי דבורים להשתתף לא רק לגירוי על-ידי ריחוף, antennating, ונחיתה עליו, אלא גם על ידי לחקור אותו. ניהול נתונים יש לי&gt; טכניקות RFID היכולת לאסוף כמות עצומה של נתונים ביחס לשיטות אחרות. ניסוי זה הופק 310,221 רשומות. תכנית מסד נתונים כמו MySQL היא כלי הכרחי כדי לאחסן כמות זו של נתונים ושאילתות SQL הן חשובות באותה מידה בשימוש כדי להקניט את התשובות לשאלות המחקר. לדוגמא, נושא אחד הוא ההגדרה של בחירה. קוראי RFID היו מוגדרים להקליט את נוכחותו של תג כל msec 1, אשר, במקרה של דבורים שנשארו בתוך הפרחים המלאכותיים לדקות או אפילו שעות, יכול לתרגם כמה אלף הקלטות. ההגדרה של בחירה שלנו הייתה ביקור שנמשך אלפית שני לפחות 1, אבל ביקור חדש לא ייחשב עד שהחוט הנוכחי של הקלטות נשבר על ידי לפחות הפסקת 1 דקות. סיכום של ניסוי טוב ארבעה משוכפל-של בדיקות התאמה בוצע בכל הבחירות מ&quot; המפגש הנאיבי &quot;של דבורים כדי להשוות p בחירהroportions לשווי תיאורטי של סיכוי 7. המפגש הנאיבי של דבורה מתייחס למצב הבדיקה הראשון שבה הדבורה &quot;השתתף&quot;. G-הבדיקות מגלות העדפה למיקום מרכזי (ראה טבלה 1) וסוג התבנית מעגלית. איור 4 מראה כי העדפת דפוס מבוטל כאשר הדפוס קונצנטריים ממוקם באופן מרכזי והתבנית המעגלית ממוקמת שולית. עם זאת, אם מיקום מוחזק קבוע כמו באיור 4 א וד, העדפת תבנית היא בכיוון דפוס רדיאלי. איור 4 מראה שהפרופורציות היחסית של בחירות הראשונות לכל תבנית לכל צירוף היו דומות לממדים שמוצגים לכל האפשרויות. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/52033/52033fig4highres.jpg"/> תוצאות ניסויי RFID 4. איור. תדרי בחירה בtהוא ארבעה שילובי פרחים שונים בניסוי 1. גרף עמודות חום הכהה להציג את כל האפשרויות מההפעלה הנאיבית של הדבורה (ציר y בצד שמאל), והברים בצבע חום בהירים מצביעים על הבחירה הראשונה של כל עובד (ציר y בצד ימני ). ל, אבל עם כוח &quot;כל האפשרויות&quot; דפוסים דומים תכנית &quot;בחירה הראשונה&quot; גדול יותר סטטיסטי. התרשימים בר להראות שהמיקום של דפוסים חשוב יותר מאשר הסוג של דפוס. דפוס הממוקם במרכז הועדף גם אם סוג הדפוס מוצג דפוס קונצנטריים אחר פחות עדיף. כוכבית מצביעה שיעור בחירה, שהיא שונה באופן משמעותי מסיכוי. שים לב. * P &lt;.05, ** p &lt;.01, *** p &lt;.001. נתון זה שונה מet al אורבן. 11. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td rowspan="2"> תנאים </td><td colspan="3"> Pooled </td><td colspan="3"> ההטרוגניות </td><td></td></tr><tr><td> GP </td><td> DF </td><td> p </td><td> Gh </td><td> DF </td><td> p </td><td></td></tr><tr><td> מרכז-רדיאלי לעומת המרכז-קונצנטריים </td><td> 3.96 </td><td> 1 </td><td> 0.047 </td><td> 197.55 </td><td> 41 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr><tr><td> היקפי-רדיאלי לעומת המרכז-קונצנטריים </td><td> 33.77 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 210.81 </td><td> 42 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr><tr><td> מרכז-רדיאלי לעומת היקפי-קונצנטריים </td><td> 508.31 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 345.78 </td><td> 30 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr><tr><td> היקפי-רדיאלי לעומת היקפי-קונצנטריים </td><td> 7.42 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 84.06 </td><td> 24 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr></tbody></table> טבלת 1. </sטרונג&gt; היסקית סטטיסטיקה של RFID נתונים. ניסוי 1. טבלה זו שונה מאורבן et al. (2013) 11. p G מתייחס לסטייה משמעותית של חלק קבוצה מסיכוי, וh G מתייחס לבדיקות להבדלים אישיים ( כלומר, הטרוגניות). עיין בכתב היד לקבלת פרטים מלאים על המבחנים הסטטיסטיים. ניסוי 2: וידאו נתונים בסך הכל 264 בחירות נרשמו על פני ארבעה תנאים על פני שלושה מפגשי בדיקה. טבלה 2 מראה את מספר העובדים והבחירות תרמו מכל מושבה. הגדרה של בחירה נתוני וידאו מאפשר ההקלטה של ​​שלושה סוגים של התנהגות בחירה: ריחוף, antennation ונחיתה. בעוד ניתן לראות את כל שלושת הסוגים של התנהגויות, מרחף וantennation הוא difficuLT לקשר עם מספר תג בשל תנועות מהירות שמצלמות וידאו עם רזולוציה נמוכה, או במהירות נמוכה לא יכול להקליט. זה חיוני כדי להשתמש במצלמת וידאו בהבחנה גבוהה (אם כי זה לא היה זמין לנו, באופן אידיאלי מצלמת וידאו שיעור גבוהה מסגרת צריכה להשתמש כדי למזער את הטשטוש) כדי להבטיח מספרי תג שיופיעו רק במספר קטן של מסגרות ניתן לקרוא . שיטה זו הייתה בשימוש גם כדי להשוות את דפוסי בחירה בטכניקת RFID, אשר מזהה חקר פרחוני. שיקולי רגישות Motion אחת הסוגיות המרכזיות בייצור ניסוי מוצלח הוא התצורה של מצלמות וידאו התנועה רגישה. מצלמת וידאו כי הוא רגיש מדי ירשום יותר מדי נתונים שאינם מעשי ויכולים להיות מאוד יקר לעבד. לדוגמא, בתחילה מצלמת הווידאו שלנו היה מופעלת על ידי תנודות רגילות בבניין (למשל, אנשים שעברו במסדרון, המזגן, וכו &#39;), אשר הביא ל1R11; 2 נקודות של מידע תקפים לכל 150-200 קטעי וידאו שהוקלטו. מצד השני, שגיאה חמורה עוד יותר היא תצורת רגישות נמוכה, שיכול לפספס את נתוני מפתח. זה חיוני כדי להגדיר את כל מצלמות וידאו באותו אופן, אחרת, טעויות דגימה יכולות להטות את התוצאות. סיכום של ניסוי ארבעה טוב משוכפל של בדיקות התאמה נמצא שלושה ממדי קבוצה שחרגו באופן משמעותי מסיכוי, ושיעור כולל לא משמעותי אחת (ראה טבלה 3 ואיור 5). (1) התבנית חשובה: העדפה משמעותית למרכז-רדיאלי על הדפוס המרכזי-קונצנטריים נמצאה (ראה טבלה 3). (2) קבוצה של התבנית מעגלית פחות חשוב: ההצגה של שילוב רדיאלי המרכזי-רדיאלי והיקפי לא הראתה הבדל משמעותי מסיכוי. (3) המרכזי-רדיאלי והציוד נלווה-קונצנטריים הביאו העדפה חזקה לכיווןזה הדפוס המרכזי-רדיאלי. שילוב המרכזי-קונצנטריים והיקפי-רדיאלי שהושרו העדפה משמעותית לכיוון הדפוס ההיקפי-רדיאלי. תבנית שווא מיקום. הבדלים אישיים היו לא משמעותיים בכל ארבעת שילובים (ראה טבלה 3). <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/52033/52033fig5highres.jpg"/> . 5. תוצאות איור תנועה רגישה וידאו תדרי בחירה בארבעת שילובי פרחים שונים בניסוי 2. התוצאות מראות את החשיבות של סוג דפוס על מיצוב דפוס: דפוסי רדיאלי הועדפו גם אם הדפוסים הוצבו שולי. ערכים מצביעים על מספר האפשרויות של הדפוס מוצג. כוכבית מצביעה שיעור בחירה, שהיא שונה באופן משמעותי מסיכוי. שים לב. ** P &lt;0.01, *** p &lt;0.001. נתון זה שונה מ11 אורבן. <tablגבול e = &quot;0&quot; = cellspacing cellpadding &quot;0&quot; = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td rowspan="2"> תנאים </td><td> מושב 1 </td><td colspan="2"> מושב 2 </td><td colspan="2"> מפגש 3 </td></tr><tr><td> מושבה 1 </td><td> מושבה 2 </td><td> מושבה 3 </td><td> מושבה 4 </td><td> מושבה 5 </td></tr><tr><td> מס &#39;עובדים </td><td> 45 </td><td> 7 </td><td> 2 </td><td> 8 </td><td> 23 </td></tr><tr><td> מס &#39;של אפשרויות </td><td> 151 </td><td> 25 </td><td> 2 </td><td> 20 </td><td> 65 </td></tr></tbody></table> טבלה 2. תיאורית סטטיסטיקה של וידאו Data Motion-רגיש. סה&quot;כ בחירות נרשמו בפרחים המלאכותיים בניסוי 2 לכל מושבה, ומספרם של העובדים לקבל החלטות אלה. טבלה זו שונה מet al אורבן. 11. עיין בכתב הידלקבלת פרטים מלאים. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td rowspan="2"> תנאים </td><td colspan="3"> אקווה </td><td colspan="3"> ההטרוגניות </td></tr><tr><td> GP </td><td> DF </td><td> p </td><td> Gh </td><td> DF </td><td> p </td></tr><tr><td> מרכז-רדיאלי לעומת המרכז-קונצנטריים </td><td> 17.98 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 40.72 </td><td> 29 </td><td> 0.073 </td></tr><tr><td> מרכז-רדיאלי לעומת היקפי רדיאלי </td><td> 1.85 </td><td> 1 </td><td> 0.173 </td><td> 53.63 </td><td> 39 </td><td> 0.060 </td></tr><tr><td> היקפי רדיאלי לעומת מרכזי קונצנטריים </td><td> 6.57 </td><td> 1 </td><td> 0.010 </td><td> 26.31 </td><td> 27 </td><td> 0.500 </td></tr><tr><td> מרכז רדיאליים לעומת היקפי קונצנטריים </td><td> 18.18 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 41.92 </td><td> 37 </td><td>0.256 </td></tr></tbody></table> וידאו נתונים טבלה 3. סטטיסטיקה היסקית תנועה רגיש. ניסוי 2. טבלה זו שונה מet al אורבן. 11. P G מתייחס לסטייה משמעותית של חלק קבוצה מסיכוי, וh G מתייחס לבדיקות להבדלים אישיים ( כלומר, הטרוגניות). עיין בכתב היד לקבלת פרטים מלאים על המבחנים הסטטיסטיים.

Watch this Scientific Journal Video about Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees at JoVE.com

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees.

זיהוי תדר רדיו ווידאו Motion רגיש ביעילות אוטומציה של ההקלטה של ​​התנהגות unrewarded בחירה על ידי צרעות

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

radio-frequency-identification-motion-sensitive-video-efficiently

Research

JoVE Journal

Neuroscience

10.8K Views.  University of Ottawa. This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees. 

Video: Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly enriched neuronal cultures. For this protocol the freezing medium used is 10% dimethyl sulfoxide (DMSO) diluted in Hank's Buffered Salt Solution (HBSS). Blocks of cortical tissue are transferred to cryovials containing the freezing medium and slowly frozen at -1&deg;C/min in a rate-controlled freezing container. Post-thaw processing and dissociation of frozen tissue blocks consistently produced neuronal-enriched cultures which exhibited rapid neuritic growth during the first 5 days in culture and significant expansion of the neuronal network within 10 days. Immunocytochemical staining with the astrocytic marker glial fibrillary acidic protein (GFAP) and the neuronal marker beta-tubulin class III, revealed high numbers of neurons and astrocytes in the cultures. Generation of neural precursor cell cultures after tissue block dissociation resulted in rapidly expanding neurospheres, which produced large numbers of neurons and astrocytes under differentiating conditions. This simple cryopreservation protocol allows for the rapid, efficient, and inexpensive preservation of cortical brain tissue blocks, which grants increased flexibility for later generation of neuronal, astrocyte, and neuronal precursor cell cultures.

Here, we describe a method for efficient cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly enriched neuronal cultures. This simple protocol provides flexibility for later generation of neuronal, astrocyte, and neuronal precursor cell cultures.

Cryopreservation של בלוקים רקמות קליפתיים לדור תרבויות העצבית מועשר

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of neurons and circuits requires methods with the spatial selectivity and temporal resolution appropriate for mechanistic analysis of neural ensembles in the behaving animal, i.e. recording of representatively large samples of isolated single neurons. Ensemble monitoring of neuronal activity has progressed remarkably in the past decade in both small and large-brained animals, including human subjects1-11. Multiple-site recording with silicon-based devices are particularly effective because of their scalability, small volume and geometric design.
Here, we describe methods for recording multiple single neurons and local field potential in behaving rodents, using commercially available micro-machined silicon probes with custom-made accessory components. There are two basic options for interfacing silicon probes to preamplifiers: printed circuit boards and flexible cables. Probe supplying companies (<a href="http://www.neuronexustech.com/" >http://www.neuronexustech.com/</a>; <a href="http://www.sbmicrosystems.com/">http://www.sbmicrosystems.com/</a>; <a href="http://www.acreo.se/">http://www.acreo.se/</a>) usually provide the bonding service and deliver probes bonded to printed circuit boards or flexible cables. Here, we describe the implantation of a 4-shank, 32-site probe attached to flexible polyimide cable, and mounted on a movable microdrive. Each step of the probe preparation, microdrive construction and surgery is illustrated so that the end user can easily replicate the process.

We describe methods for large-scale recording of multiple single units and local field potential in behaving rodents with silicon probes. Drive fabrication, probe attachment to the drive and probe implantation processes are illustrated in sufficient details for easy replication.

בקנה מידה גדול הקלטה של ​​הנוירונים על ידי בדיקות מטלטלין סיליקון מתנהג מכרסמים

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated. Thus, simultaneous recordings of neuronal activity and behavior are essential to correlate brain activity to behavior. For such behavioral analyses, the fruit fly, Drosophila melanogaster, allows us to incorporate genetically encoded calcium indicators such as GCaMP1, to monitor neuronal activity, and to use sophisticated genetic manipulations for optogenetic or thermogenetic techniques to specifically activate identified neurons2-5. Use of a thermogenetic technique has led us to find critical neurons for feeding behavior (Flood et al., under revision). As a main part of feeding behavior, a Drosophila adult extends its proboscis for feeding6 (proboscis extension response; PER), responding to a sweet stimulus from sensory cells on its proboscis or tarsi. Combining the protocol for PER7 with a calcium imaging technique8 using GCaMP3.01, 9, I have established an experimental system, where we can monitor activity of neurons in the feeding center &#x2013; the suboesophageal ganglion (SOG), simultaneously with behavioral observation of the proboscis. I have designed an apparatus ("Fly brain Live Imaging and Electrophysiology Stage": "FLIES") to accommodate a Drosophila adult, allowing its proboscis to freely move while its brain is exposed to the bath for Ca2+ imaging through a water immersion lens. The FLIES is also appropriate for many types of live experiments on fly brains such as electrophysiological recording or time lapse imaging of synaptic morphology. Because the results from live imaging can be directly correlated with the simultaneous PER behavior, this methodology can provide an excellent experimental system to study information processing of neuronal networks, and how this cellular activity is coupled to plastic processes and memory.

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

The fruit fly, Drosophila melanogaster, extends its proboscis for feeding, responding to a sugar stimulus from its proboscis or tarsus. I have combined observations of the proboscis extension response (PER) with a calcium imaging technique, allowing us to monitor the activity of neurons in the brain, simultaneously with behavioral observation.

הקלטה בו זמנית של אותות סידן מתא עצב לזהות התנהגות האכלה של תסיסנית melanogaster</em

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated.  Thus, ...

Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, various technologies are being developed as control tools. A subset of these tools focuses on modifying the behavior of arthropods by attraction or repulsion. Therefore, arthropods are often the focus of behavioral investigations. Various tools have been developed to measure arthropod behavior, including wind tunnels, flight mills, servospheres, and various types of olfactometers. The purpose of these tools is to measure insect or arachnid response to visual or more often olfactory cues. The vertical T-maze oflactometer described here measures choices performed by insects in response to attractants or repellents. It is a high throughput assay device that takes advantage of the positive phototaxis (attraction to light) and negative geotaxis (tendency to walk or fly upward) exhibited by many arthropods. The olfactometer consists of a 30 cm glass tube that is divided in half with a Teflon strip forming a T-maze. Each half serves as an arm of the olfactometer enabling the test subjects to make a choice between two potential odor fields in assays involving attractants. In assays involving repellents, lack of normal response to known attractants can also be measured as a third variable.

A vertical, T-maze olfactometer is described for assaying the behavioral response of arthropods. The olfactometer allows the experimenter to measure choices performed by test subjects when subjected to two potential odor fields. Both attraction to and repulsion from odorants can be measured with this device.

Assay בחירה האנכי T-מבוך לתגובת פרוקי רגליים לodorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, ...

Selective Tracing of Auditory Fibers in the Avian Embryonic Vestibulocochlear Nerve

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling of auditory axons within the VIIIth cranial nerve would enhance the study of central auditory circuit development. This approach is challenging because multiple sensory organs of the inner ear contribute to the VIIIth nerve 1. Moreover, markers that reliably distinguish auditory versus vestibular groups of axons within the avian VIIIth nerve have yet to be identified. Auditory and vestibular pathways cannot be distinguished functionally in early embryos, as sensory-evoked responses are not present before the circuits are formed. Centrally projecting VIIIth nerve axons have been traced in some studies, but auditory axon labeling was accompanied by labeling from other VIIIth nerve components 2,3. Here, we describe a method for anterograde tracing from the acoustic ganglion to selectively label auditory axons within the developing VIIIth nerve. First, after partial dissection of the anterior cephalic region of an 8-day chick embryo immersed in oxygenated artificial cerebrospinal fluid, the cochlear duct is identified by anatomical landmarks. Next, a fine pulled glass micropipette is positioned to inject a small amount of rhodamine dextran amine into the duct and adjacent deep region where the acoustic ganglion cells are located. Within thirty minutes following the injection, auditory axons are traced centrally into the hindbrain and can later be visualized following histologic preparation. This method provides a useful tool for developmental studies of peripheral to central auditory circuit formation.

Here we describe a microdissection technique followed by fluorescent dye injection into the acoustic ganglion of early chick embryos for selective tracing of auditory axon fibers in the nerve and hindbrain.

איתור סלקטיבי של סיבי עצב שמיעה בVestibulocochlear העוברי העופות

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of primary afferent fibers mediated by GABAergic axo-axonal synapses (primary afferent depolarization). The strength of primary afferent depolarization can be measured by recording of volume-conducted potentials at the dorsal root (dorsal root potentials, DRP). Pathological changes of presynaptic inhibition are crucial in the abnormal central processing of certain pain conditions and in some disorders of motor hyperexcitability. Here, we describe a method of recording DRP in vivo in mice. The preparation of spinal cord dorsal roots in the anesthetized animal and the recording procedure using suction electrodes are explained. This method allows measuring GABAergic DRP and thereby estimating spinal presynaptic inhibition in the living mouse. In combination with transgenic mouse models, DRP recording may serve as a powerful tool to investigate disease-associated spinal pathophysiology. In vivo recording has several advantages compared to ex vivo isolated spinal cord preparations, e.g. the possibility of simultaneous recording or manipulation of supraspinal networks and induction of DRP by stimulation of peripheral nerves.

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

GABAergic presynaptic inhibition is a powerful inhibitory mechanism in the spinal cord important for motor and sensory signal integration in spinal cord networks. Underlying primary afferent depolarization can be measured by recording of dorsal root potentials (DRP). Here we demonstrate a method of in vivo recording of DRP in mice.

מדידת השדרה Presynaptic עיכוב בעכברים על ידי הקלטה פוטנציאלית הגבי רוט<em&gt; בVivo</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by repeated, time-lapse in vivo imaging in live rodents. These studies were made possible by straightforward surgical procedures, which enabled optical access for a prolonged period of time without repeat surgical procedures. In contrast, analogous studies of the spinal cord have been previously limited to only a few imaging sessions, each of which required an invasive surgery. As previously described, we have developed a spinal chamber that enables continuous optical access for upwards of 8 weeks, preserves mechanical stability of the spinal column, is easily stabilized externally during imaging, and requires only a single surgery. Here, the design of the spinal chamber with its associated surgical implements is reviewed and the surgical procedure is demonstrated in detail. Briefly, this video will demonstrate the preparation of the surgical area and mouse for surgery, exposure of the spinal vertebra and appropriate tissue debridement, the delivery of the implant and vertebral clamping, the completion of the chamber, the removal of the delivery system, sealing of the skin, and finally, post-operative care. The procedure for chronic in vivo imaging using nonlinear microscopy will also be demonstrated. Finally, outcomes, limitations, typical variability, and a guide for troubleshooting are discussed.

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

In this video, we describe a procedure for implanting a chronic optical imaging chamber over the dorsal spinal cord of a live mouse. The chamber, surgical procedure, and chronic imaging are reviewed and demonstrated.

נוהל השתלה קאמרי בעמוד השדרה לאורך<em&gt; In vivo</em&gt; הדמיה של כבל עכבר השדרה

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by ...

Quantifying Fish Swimming Behavior in Response to Acute Exposure of Aqueous Copper Using Computer Assisted Video and Digital Image Analysis

Behavioral responses of aquatic organisms to environmental contaminants can be precursors of other effects such as survival, growth, or reproduction. However, these responses may be subtle, and measurement can be challenging. Using juvenile white sturgeon (Acipenser transmontanus) with copper exposures, this paper illustrates techniques used for quantifying behavioral responses using computer assisted video and digital image analysis. In previous studies severe impairments in swimming behavior were observed among early life stage white sturgeon during acute and chronic exposures to copper. Sturgeon behavior was rapidly impaired and to the extent that survival in the field would be jeopardized, as fish would be swept downstream, or readily captured by predators. The objectives of this investigation were to illustrate protocols to quantify swimming activity during a series of acute copper exposures to determine time to effect during early lifestage development, and to understand the significance of these responses relative to survival of these vulnerable early lifestage fish. With mortality being on a time continuum, determining when copper first affects swimming ability helps us to understand the implications for population level effects. The techniques used are readily adaptable to experimental designs with other organisms and stressors.

Measuring the impacts of environmental contaminants on fish behavior is often subjective and challenging particularly when dealing with sublethal endpoints. We describe methods including video technology to quantify swimming behavior of early life stage white sturgeon (Acipenser transmontanus) during and after 96 hr acute exposures to various concentrations of copper.

כימות התנהגות שחי דגים בתגובה לחשיפה אקוטית של נחושת מהימית באמצעות וידאו בסיוע מחשב דיגיטלי ניתוח תמונה

Behavioral responses of aquatic organisms to environmental contaminants can be precursors of other effects such as survival, growth, or reproduction.  ...

Insect-machine Hybrid System: Remote Radio Control of a Freely Flying Beetle (Mercynorrhina torquata)

The rise of radio-enabled digital electronic devices has prompted the use of small wireless neuromuscular recorders and stimulators for studying in-flight insect behavior. This technology enables the development of an insect-machine hybrid system using a living insect platform described in this protocol. Moreover, this protocol presents the system configuration and free flight experimental procedures for evaluating the function of the flight muscles in an untethered insect. For demonstration, we targeted the third axillary sclerite (3Ax) muscle to control and achieve left or right turning of a flying beetle. A thin silver wire electrode was implanted on the 3Ax muscle on each side of the beetle. These were connected to the outputs of a wireless backpack (i.e., a neuromuscular electrical stimulator) mounted on the pronotum of the beetle. The muscle was stimulated in free flight by alternating the stimulation side (left or right) or varying the stimulation frequency. The beetle turned to the ipsilateral side when the muscle was stimulated and exhibited a graded response to an increasing frequency. The implantation process and volume calibration of the 3 dimensional motion capture camera system need to be carried out with care to avoid damaging the muscle and losing track of the marker, respectively. This method is highly beneficial to study insect flight, as it helps to reveal the functions of the flight muscle of interest in free flight.

Insect-machine Hybrid System: Remote Radio Control of a Freely Flying Beetle Mercynorrhina torquata

This protocol describes the process of constructing an insect-machine hybrid system and carrying out wireless electrical stimulation of the flight muscles required to control the turning motion of a flying insect.

מערכת היברידית חרקים-מכונה: רדיו שליטה מרחוק של חיפושית עפה חופשי (<em&gt; Mercynorrhina torquata</em&gt;)

The rise of radio-enabled digital electronic devices has prompted the use of small wireless neuromuscular recorders and stimulators for studying in-flight ...

Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

Many organisms use cues and signals beyond human sensitivity during social interactions. It is important to take into account how organisms perceive their worlds when trying to understand their behavior and ecology. Sensitivity to the ultraviolet spectrum (UV; 300 - 400 nm) is found across multiple genera of birds, fish, reptiles, amphibians, and even mammals. This protocol describes a technique for examining organisms for the presence of UV-reflecting structures and a method for testing whether these cues are used as social signals in the context of mate choice. A spectrophotometer is used to detect the presence of UV reflectance and variation in reflective intensity between individuals and sexes. An example of this technique is presented in which a dichotomous mate choice test exposes sexually receptive individuals to opposite sex individuals whose visual appearance can be manipulated by filters that either transmit full spectrum or block UV wavelengths. This system allowed for the determination that female, but not male, sailfin mollies (Poecilia latipinna) were using UV markings as part of their mating decisions. These types of studies serve to expand our knowledge of the range of organisms that utilize UV and provide insight into how UV plays a role in their lives.

Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

This protocol outlines the use of spectrophotometry to detect ultraviolet-reflecting structures on organisms (in this example, the sailfin molly Poecilia latipinna) and describes dichotomous choice tests for fish that allow inferences to be made on the role of ultraviolet cues during mate selection.

מבחנים כדי זיהוי מבנים המשקף-UV ו לקבוע וחשיבותם העדפות Mate באמצעות מולי המפרש<em&gt; Poecilia latipinna</em

Many organisms use cues and signals beyond human sensitivity during social interactions. It is important to take into account how organisms perceive their ...

זיהוי תדר רדיו ווידאו Motion רגיש ביעילות אוטומציה של ההקלטה של ​​התנהגות unrewarded בחירה על ידי צרעות

זיהוי תדר רדיו ווידאו Motion רגיש ביעילות אוטומציה של ההקלטה של התנהגות unrewarded בחירה על ידי צרעות