The experiments were supported by a grant from the Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada to CMSP. We thank Koppert Canada for their bumblebee colony donations. Portions of this manuscript, including some figures and tables have been published in Naturwissenschaften11, and reproduced here with permission from Springer.

<ol>
	<li>Plowright, C. M. S., Evans, S. A., Leung, J. C., Collin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preference+for+symmetry+in+flower-na&#239;ve+and+not-so-na&#239;ve+bumblebees.">The preference for symmetry in flower-na&#239;ve and not-so-na&#239;ve bumblebees.</a> Learn. Motiv. 42 (1), 76-83 (2011).</li><li>Streit, S., Bock, F., Pirk, C. W. W., Tautz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+life-long+monitoring+of+individual+insect+behaviour+now+possible.">Automatic life-long monitoring of individual insect behaviour now possible.</a> Zool. 106, 169-171 (2003).</li><li>Chittka, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+human+are+insects,+and+does+it+matter.">How human are insects, and does it matter.</a> Formosan Entomol. 31, 85-99 (2011).</li><li>Lihoreau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radar+tracking+and+motion-sensitive+cameras+on+flowers+reveal+the+development+of+pollinator+multi-destination+routes+over+large+spatial+scales.">Radar tracking and motion-sensitive cameras on flowers reveal the development of pollinator multi-destination routes over large spatial scales.</a> PLoS Biol. 10 (9), e1001392 (2012).</li><li>Brodbeck, D. R., Shettleworth, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matching+location+and+color+of+a+compound+stimulus:+Comparison+of+a+food-storing+and+a+nonstoring+bird+species.">Matching location and color of a compound stimulus: Comparison of a food-storing and a nonstoring bird species.</a> J. Exp. Psychol. Anim. Behav. 21 (1), 64-77 (1995).</li><li>Srinivasan, M., Lehrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+resolution+of+colour+vision+in+the+honeybee.">Temporal resolution of colour vision in the honeybee.</a> J. Comp. Physiol. A. 157 (5), 579-586 (1985).</li><li>Sokal, R. R., Rohlf, F. J., Freeman, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (2011).</li><li>Lunau, K., Fieselmann, G., Heuschen, B., van de Loo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+targeting+of+components+of+floral+colour+patterns+in+flower-na&#239;ve+bumblebees+(Bombus+terrestris;+Apidae).+.">Visual targeting of components of floral colour patterns in flower-na&#239;ve bumblebees (Bombus terrestris; Apidae). .</a> Naturwissenschaften. 93 (7), 325-328 (2006).</li><li>Lehrer, M., Horridge, G. A., Zhang, S. W., Gadagkar, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shape+vision+in+bees:+Innate+preference+for+flower-like+patterns.">Shape vision in bees: Innate preference for flower-like patterns.</a> Phil. Trans. R. Soc. B. 347 (1320), 123-137 (1995).</li><li>Thompson, E. L., Plowright, C. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+images+may+or+may+not+represent+flowers:+picture-object+correspondence+in+bumblebees+(Bombus+impatiens).">How images may or may not represent flowers: picture-object correspondence in bumblebees (Bombus impatiens).</a> Anim. Cognit. , (2014).</li><li>Orb&#225;n, L. L., Plowright, C. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+flower-like+and+non-flower-like+visual+properties+on+choice+of+unrewarding+patterns+by+bumblebees.">The effect of flower-like and non-flower-like visual properties on choice of unrewarding patterns by bumblebees.</a> Naturwissenschaften. 100 (7), 621-631 (2013).</li><li>Leonard, A. S., Papaj, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X&#8221;+marks+the+spot:+The+possible+benefits+of+nectar+guides+to+bees+and+plants.">X&#8221; marks the spot: The possible benefits of nectar guides to bees and plants.</a> Funct. Ecol. 25 (6), 1293-1301 (2011).</li></ol>

The authors have no competing financial interests.

تكنولوجيا RFID تمكن دراسة مئات العمال الفردية بكل سهولة ودقة عالية، ولكن خصائص السلوك سجلت مختلفة من الملاحظات من قبل البشر وتسجيلات الفيديو. يمكن وصف سلوك خيار سجلتها RFID كما استكشاف الأزهار. هذا هو معيار صارم جدا لتفضيل مقارنة المعايير المستخدمة في دراسات أخرى، مثل النهج 8، الدخول في متاهات الذراع 9،10، رد فعل antennal 8، أو الهبوط على نمط 11،12. من أجل مقارنة مدى صحة التعاريف السلوك الاختيار، والتحقق من صحة طريقة RFID جديد للسلوك غير مكافأة، لوحظت تسجيلات الفيديو من الهبوط في تجربة 2. جميع التدابير الاختيار ليست متساوية: معيار RFID مقاسا دخول الأزهار، أشار إلى أن ممتلكات البصرية من نمط تحديد المواقع هو أكثر أهمية لاختيار النحل، في حين أشارت بيانات الفيديو أن الخاصية البصرية من نوع النمط هو أكثر أهمية لاختيار النحل. أحد التحديات العامة في دراسة سلوك خيار أمي هو أنه من الصعب جدا لجذب زهرة ساذجة والنحل غير مدربين على الزهور الصناعية التي لا تقدم أي حبوب اللقاح أو الرحيق. في الواقع، فإن العديد من التجارب السابقة لجأت إلى تدريب النحل في بيئة الاختبار على المحفزات التي يعتقد أن يكون غير ذي صلة إلى سلوك خيار في المحفزات الاختبار. RFID وتسجيلات الفيديو الحركة الحساسة التغلب على هذه العقبة من خلال السماح تسجيل مستمر، 24 ساعة في اليوم، ودون إشراف مستمر من الباحث، وذلك بزيادة حجم العينة 15-20 النحل لعدة مئات من النحل. في حين الخيارات خائبة من قبل النحل غير مدربين لا تزال نادرة الحدوث، هذه المعايير الجديدة تصميم التجريبية جعل الملاحظة ممكن. التحسينات الأخرى التي تقدمها هذه التقنيات اثنين تشمل القضاء على التحيز عينة، وتحسين صحة الخارجية، وتتبع الفروق الفردية. Samplيمكن إدخال البريد التحيز عند دراسة فقط اثنتي عشرة أو حتى النحل في المستعمرة. هناك اختلافات كبيرة في الخصوصيات السلوكية عبر العمال الفردية حتى داخل نفس مستعمرة المرجح أن يتم تفويتها بسبب ما لوحظ فقط أولئك العمال أن يحدث ب &quot;التعاون&quot; مع الباحث في وقت معين. دراسة 15-20 النحل في مستعمرة النحل 300 أو أكثر، تمثل اقل من 5٪ من إجمالي مستعمرة، في حالة أخذ العينات التحيز التي قد تكون كبيرة. علامات ومراقبة سلوك جميع العاملين يحل هذه القضية تماما. كما يمكن التلاعب بها عدد من الخيارات المحفزات في وقت واحد. قدمنا ​​الخيارات الثنائية في تجربتنا لأسباب فنية، ولكن اختيار واحد أو عدة تصاميم الاختيار أيضا ممكنا. من حيث الصلاحية الخارجية، ودراسة النحل في بيئة معملية تقليديا الاصطناعي للغاية، الأمر الذي أعاق تعميم النتائج. على سبيل المثال، كان الباحثون أن العلاقات العامةESENT لجمع البيانات، كان النحل لالعلف في بيئة اختبار واحدا تلو الآخر، وقيدت اختبار لنافذة زمنية صغيرة. تقنيات جديدة وصفها في هذه الورقة إزالة هذه القيود المصطنعة عن طريق الملاحظة دون رقيب ودون قيود. أخيرا، يمكن توثيق الفروق الفردية في السلوك لأننا لا نستطيع التأكد مما إذا تكررت هذه الخيارات من قبل نحلة واحدة أو عدة النحل. حساسية الحركة وكاميرات الفيديو عالية المكانية قرار ديها ميزة على تقنيات RFID من حيث مرونة التصاميم المحفزات: مظهر التحفيز البصري يمكن أن يكون أي شكل تقريبا أو تشكيل طالما تحديد موضوع يمكن أن يتم القبض على ما لا يقل عن قليل من الإطارات. تجهيز الفيديو هو أكثر قليلا تستغرق وقتا طويلا من معالجة البيانات وتتفاعل لتحديد يحتاج إلى أن يقرأ من قبل الباحث، الأمر الذي يتطلب التفتيش اليدوي لكل مقطع فيديو. إذا كان التصميم التحفيز البصري يمكن أن تلبي قيود Rالقارئ ااا (أي تتفاعل به على النحل يجب أن يأتي إلى 3-4 مم على الأقل من قارئ RFID)، ثم تكنولوجيا RFID لديها ميزة على آلية جمع البيانات على نطاق واسع. من المرجح أن يستمر البحث النوعي إلى أن يفضلها تحليل الفيديو. كما هو مبين في هذه التجربة، يمكن للقراء RFID تكديس مجموعات البيانات الكبيرة جدا التي لا تتطلب الترميز اليدوي. مزايا مختلفة قليلا المرتبطة بكل تقنية وتشير إلى أنه في المستقبل يمكن استخدامها بطريقة تكاملية. مستقبل كل من التكنولوجيا قد تقع في القياس الكمي الدقيق للسلوك نادرا ما تحدث. على سبيل المثال، إمكانية واضحة واحدة للتطبيقات المستقبلية لتوظيف هذه التقنيات في البيوت المحمية والبيئات أكثر طبيعية أخرى. إن الجمع بين المذهب الطبيعي والتحكم التجريبية تسمح بمعالجة المسائل التي لم تكن ممكنة قبل أن يجيب. بشكل عام، هذه التقنيات اثنين توفر وسائل جديدة لمراقبة السلوك في وصارمبكفاءة الثانية. RFID والفيديو الحركة حساسة هي خطوة هامة إلى الأمام وليس فقط للباحثين الذين يدرسون أو الحشرات الملقحة، ولكن هذه التقنيات قد يلجأون أيضا إلى علماء السلوك الأخرى.

والمشكلة الرئيسية في دراسة السلوك اختيار أمي من قبل النحل والنحل هي أن الزهور ساذجة، عمال غير مدربين لا تدخل بسهولة في مساحة الاختبار، حيث يمكن قياس تفضيلات. ونتيجة لذلك، يعتمد العديد من الباحثين على أقل من تقنية مثالية: عمال ما قبل التدريب لإطعام داخل الفضاء اختبار من المحفزات محايدة ظاهريا أن يراها الباحثون في أن تكون مختلفة من المحفزات التجريبية. ومع ذلك، فقد أظهرت تجارب حديثة أن المحفزات التي كان يعتقد أن تكون محايدة (أي المثيرات التي لا تؤثر على سلوك الخيار لاحق في جلسة اختبار) قد أثرت تفضيلات بطرق غير متوقعة 1. النظم الآلية التي تشمل تحديد الهوية بترددات الراديو (RFID) 2 وتسجيلات الفيديو الحركة الحساسة قد تتيح فرصة لحل هذه المشكلة. كان الهدف من هذه الدراسة ذات شقين: (1) في المقام الأول إلى المساهمة في الأدب على تفضيلات الأزهار امي من قبل النحل، (2) وثانيا لEValuate اثنين من أنظمة قياس الاختيار، كما هو مسجل من قبل اثنين من مختلف أجهزة التسجيل الآلي. اثنين من النظم الآلية تم تنفيذ 3 في الدراسة الحالية لمراقبة سلوك خيار أمي: RFID وتسجيلات الفيديو الحركة الحساسة. اثنين من العناصر الحاسمة لكلا النظامين هي أن الخيارات لا يكافأ، وعرض الإشارات البصرية المختلفة يمكن التلاعب بها. فيديو حساسة الحركة (عالية الوضوح، وتسجيل في قرار النائب 1) لا يسمح للمراقبة المستمرة للعمال استكشاف بحرية في غرفة رحلة، ولكن أمر بالغ الأهمية لمراقبة فعالة من الأحداث النادرة نسبيا 4. سؤال البحث في التجربة 1 ويتعلق بكيفية مختلفة تتفاعل الخصائص البصرية عند عرضها معا. وتسعى هذه الدراسة إلى استكشاف الأهمية النسبية للنمط المواقع فيما يتعلق نوع النمط. باستخدام تصميم 2 × 2، شعاعي (أي أمة الله) ومتحدة المركز (أي البريد الثورأيها) توضع أنواع نمط إما مركزيا أو محيطيا على زهرة اصطناعية (انظر الشكل 1 للحصول على أمثلة من المحفزات). وتبنى القراء تتفاعل في هذه المحفزات زهرة اصطناعية مصممة خصيصا، والنحل يحصل تمكين وتتفاعل العلامات التي تسمح لنا لتسجيل كل عامل الموسومة الذي يدخل التحفيز الاصطناعي زهرة. الملاحظة RFID يعمل عن طريق آلية القارئ (صلب الزهور الاصطناعية) إرسال إشارات بترددات الراديو (13.56 ميغاهيرتز في هذه الحالة)، والتي يتم عن طريق التضمين وجود علامات سلبية. يمكن للقارئ أن يكتشف ويسجل هذه التحويرات إشارة، والتي تختلف قليلا عبر علامات تمكين علامة تعريف فريد. الأسئلة للتجربة 2 هي ثلاثة أضعاف. أولا، هي زهرة الدخول، مقاسا RFID، والهبوط، مقاسا تسجيلات الفيديو معايير اختيار تعادل؟ يتم قياس الاختيار في نقاط مختلفة (الهبوط للفيديو، ودخول زهرة لRFID)، والتي قد تترجم إلى إجراءات مختلفةتفضيل. ثانيا، ما هو تأثير المركزي مقابل المواقع الطرفية؟ ومن غير المعروف ما إذا كان أو لم يكن العمال من شأنه أن تختار نمط المركزي إذا قدمت مجموعة تتكون من اثنين من أنماط الشعاعية في مواقف مختلفة (انظر الشكل 4B). ثالثا، ما هي الأهمية النسبية للموقف مقابل نمط نوع نمط؟ وبعبارة أخرى، فإن النحل الطنان الأرض على أنماط من نوع النمط المفضل، أو موقف النمط المفضل؟ النحل قد يفضلون المركزي شعاعي لنمط الطرفية-متحدة المركز، ولكن يمكن أن يكون التفضيل يرجع إلى نوع أو نمط المواقع المركزي. في هذه التجربة، وقد حرض متغيرين ضد كل 5 (انظر الشكل 4C، د) آخرين. في تجربة 2، استخدمنا تسجيلات الفيديو الحركة الحساسة على المنبهات مثل زهرة. وضعت الزهور الاصطناعية داخل قفص الطيران، وكان أشار كاميرات الفيديو عالية الوضوح الحركة حساسة في هذه الزهور من آلة القطعر وأعلى. وبشكل أكثر تحديدا، تم وضع اثنين من كاميرات الفيديو الرقمية وذلك لالتقاط منظر أمامي كل من المحفزات اثنين في الفضاء الاختبار. تم وضع كاميرا الفيديو إضافية بين المحفزات لتسجيل تحوم السلوك من فوق، وأسروا السلوك من كل من الزهور الاصطناعية. وقد تم تحديد النحل باستخدام بطاقات الرقم الذي يمكن أن تقرأ على عالي الوضوح فيديو كليب. تحوم، لوحظت antennation والهبوط السلوكيات.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="708">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:143px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:231px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Miniaturized mic3 tags</td>
			<td style="width:143px;">Microsensys</td>
			<td style="width:119px;">mic3 TAG 64 bit RO</td>
			<td>RFID tags to glue to bee</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">RFID reader 2k6 head</td>
			<td style="width:143px;">Microsensys</td>
			<td style="width:119px;">2k6</td>
			<td>RFID readers built into artificial flowers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">IP camcorders</td>
			<td style="width:143px;">Vivotek</td>
			<td style="width:119px;">IP8161</td>
			<td>Motion-sensitive video recorders</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Opalith Plattchen number tags and non-toxic glue</td>
			<td style="width:143px;">Beeworks.com</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Number tags to glue to bees</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bumblebee Colony for Research</td>
			<td style="width:143px;">Koppert Canada</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Artificial flowers</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Developed by campus biology shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Artificial flower stand</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Developed by campus biology shop</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Flight room</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Developed by campus biology shop</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Laptop with Windows</td>
			<td style="width:143px;">Generic hardware / Microsoft software</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to download RFID data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">RS 232 to USB converter</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Connect RFID reader to computer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Desktop</td>
			<td style="width:143px;">IBM</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to transmit video data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Second NIC</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;">10/100M NIC PCI</td>
			<td>Used to transmit video data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Network hub</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;">4-port</td>
			<td>Used to transmit video data</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">High precision tweezer</td>
			<td style="width:143px;">SPI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to glue number and RFID tags to bees</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sugar</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to mix with water to create sugar-water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pollen</td>
			<td style="width:143px;">Any local apiarist</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Fed to bumblebees</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Marking cage with plunger</td>
			<td style="width:143px;">Beeworks.com</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Aids tagging process</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Honey</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used to mix with water ot create pollen paste</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bake clay</td>
			<td style="width:143px;">Sculpey</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for RFID</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Clay shaping tools</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for RFID</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">White paper</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for Video</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Laser printer</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for Video</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Wood</td>
			<td style="width:143px;">Generic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Stimulus for Video -- attachment clip</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radio frequency identification and motion-sensitive video efficiently automate recording of unrewarded choice behavior by bumblebees

نقدم طريقتين لمراقبة سلوك خيار نحلة في الفضاء اختبار المغلقة. ويتكون الأسلوب الأول لتحديد الهوية بترددات الراديو (RFID) القراء في صلب الزهور الصناعية التي تعرض مختلف الإشارات البصرية، وتتفاعل به (أي الترددات السلبية) لصقها على الصدر من العمال نحلة. الجدة في التنفيذ لدينا هي أن القراء RFID مبنية مباشرة في الزهور الاصطناعية التي هي قادرة على عرض العديد من الخصائص البصرية المميزة مثل اللون، نوع نمط، تردد المكاني (أي &quot;الانشغال&quot; من نمط)، والتماثل (التردد المكاني و لم يتلاعب التماثل في هذه التجربة). بالإضافة إلى ذلك، فإن هذه العروض البصرية بالتعاون مع النظم الآلية قادرة على تسجيل سلوك الاختيار دون مردود وغير مدربين. ويتكون الأسلوب الثاني من سلوك خيار التسجيل في الزهور الاصطناعية باستخدام كاميرات الفيديو عالية الوضوح الحركة الحساسة. Bumblebees تحمل نفس الكلمات عدد صقها على thoraces من أجل تحديد هوية فريدة من نوعها. ميزة في هذا التنفيذ خلال RFID هو أنه بالإضافة إلى مراقبة سلوك الهبوط، ويمكن أيضا أن يلاحظ تدابير بديلة للتفضيل مثل تحوم وantennation. كلا أساليب الأتمتة زيادة السيطرة التجريبية، وصلاحية الداخلية من خلال السماح دراسات على نطاق أوسع أن تأخذ في الاعتبار الاختلافات الفردية. صحة الخارجية هي أيضا تحسين لأن النحل يمكن أن تدخل بحرية والخروج من بيئة الاختبار دون قيود مثل توافر مساعد البحث في الموقع. مقارنة الملاحظة الإنسان في الوقت الحقيقي، وأساليب الآلي هي أكثر فعالية من حيث التكلفة وربما أقل عرضة للخطأ.

<html> التجربة 1: RFID البيانات كل 375 عامل في المستعمرة كانت تتفاعل الموسومة، و 318 من هؤلاء العمال (85٪) دخلت الطائرة في قفص في مرحلة ما أثناء الدراسة. زار ما مجموعه 197 (62٪ من النحل الذي غادر مستعمرة) واحد على الأقل من أربعة مؤثرات الزهور الاصطناعية. تعريف الاختيار وقد تم تعريف خيار كعامل الدخول في زهرة اصطناعية (انظر الشكل 1). نحن صفت هذا السلوك بأنه &quot;استكشاف الأزهار&quot;. هذا التعريف للاختيار هو أكثر صرامة من تلك التي استخدمت في الأدب، والتي، حسب الدراسة، استخدم مزيج من تحوم، antennation أو الهبوط. استكشاف الأزهار هو تعريف أكثر صرامة للاختيار لأنها تتطلب أن يحضر النحل ليس فقط لحافز من قبل تحوم، antennating، والهبوط عليه، ولكن أيضا من خلال استكشاف ذلك. إدارة البيانات &gt; تقنيات RFID لديها القدرة على جمع كمية هائلة من البيانات بالنسبة لطرق أخرى. أنتجت هذه التجربة 310221 السجلات. برنامج قاعدة بيانات مثل MySQL هو أداة لا غنى عنها لتخزين هذه الكمية من البيانات والاستعلامات SQL نفس القدر من الأهمية تستخدم لاستخلاص الأجوبة على الأسئلة البحثية. على سبيل المثال، قضية واحدة هي تعريف خيار. تم تكوين قارئ RFID لتسجيل وجود علامة كل 1 ميللي ثانية، والتي، في حالة النحل التي بقيت داخل الزهور الاصطناعية لدقائق أو حتى ساعات، يمكن أن تترجم إلى عدة آلاف من التسجيلات. كان لدينا تعريف خيارا زيارة دامت لا يقل عن 1 ميللي ثانية، ولكن الزيارة الجديدة لن تحسب حتى تم كسر سلسلة من التسجيلات الحالية على الأقل استراحة 1 دقيقة. ملخص التجربة وأجريت الخير منسوخة أربعة من الاختبارات يصلح لجميع الخيارات من &quot;جلسة ساذجة&quot; &quot;والنحل للمقارنة خيار عroportions إلى قيمة نظرية الصدفة 7. يشير جلسة ساذجة نحلة لأول حالة اختبار فيه النحل &quot;شارك&quot;. تكشف مجموعة اختبارات تفضيل المواقع المركزية (انظر الجدول 1) ونوع نمط شعاعي الشكل 4B يظهر عكس ذلك تفضيل نمط عندما يتم وضع نمط متحدة المركز مركزيا ويتم وضع نمط شعاعي محيطيا. ومع ذلك، إذا تم عقد المواقع ثابت كما في الشكل 4A و د، وتفضيل نمط هو نحو نمط شعاعي الشكل 4 يوضح أن النسب النسبية من الخيارات الأولى لكل نمط لكل مجموعة كانت تضاهي النسب الموضحة لجميع الخيارات. <img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/52033/52033fig4highres.jpg"/> الرقم 4. RFID النتائج التجريبية. ترددات في اختيار رانه أربع مجموعات زهرة مختلفة في تجربة 1. البني الداكن شريط الرسوم البيانية تظهر جميع الخيارات من جلسة ساذجة النحلة (الجانب الأيسر المحور ص)، وقضبان البني الفاتح يشير الخيار الأول لكل عامل (الجانب الأيمن المحور الصادي ). &quot;جميع الخيارات&quot; تظهر أنماط مماثلة إلى &quot;الخيار الأول&quot;، ولكن مع زيادة القوة الإحصائية. تظهر الرسوم البيانية شريط أن المواقع من أنماط أكثر أهمية من نوع نمط. وقد يفضل وضع نمط مركزيا حتى إذا كان نوع نمط عرض نمط مركزية خلاف ذلك أقل من الأفضل. النجمة تشير إلى وجود نسبة الاختيار الذي يختلف كثيرا عن فرصة. ملاحظة. * P &lt;0.05، ** P &lt;0.01، *** P &lt;0.001. تم تعديل هذا الرقم من اوربان وآخرون 11. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td rowspan="2"> الشروط </td><td colspan="3"> Pooled </td><td colspan="3"> عدم التجانس </td><td></td></tr><tr><td> GP </td><td> DF </td><td> ص </td><td> غ </td><td> DF </td><td> ص </td><td></td></tr><tr><td> المركزي شعاعي مقابل الوسطى المركزة </td><td> 3.96 </td><td> 1 </td><td> 0.047 </td><td> 197.55 </td><td> 41 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr><tr><td> الطرفية-شعاعي مقابل الوسطى المركزة </td><td> 33.77 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 210.81 </td><td> 42 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr><tr><td> المركزي شعاعي مقابل الطرفية-المركزة </td><td> 508.31 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 345.78 </td><td> 30 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr><tr><td> الطرفية-شعاعي مقابل الطرفية-المركزة </td><td> 7.42 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 84.06 </td><td> 24 </td><td> 0.000 </td><td></td></tr></tbody></table> الجدول 1. </sترونج&gt; الاحصاء الاستدلالي للبيانات RFID. تجربة 1. تم تعديل هذا الجدول من اوربان وآخرون (2013) 11. ص G يشير إلى انحراف كبير في نسبة مجموعة من فرصة، وG ح يشير إلى الاختبارات للفروق الفردية ( أي عدم التجانس). يرجى الرجوع إلى مخطوطة للحصول على تفاصيل كاملة عن الاختبارات الإحصائية. التجربة 2: بيانات فيديو تم تسجيل ما مجموعه 264 الخيارات عبر الشروط الأربعة على مدى ثلاث جلسات الاختبار. ويبين الجدول (2) وعدد العمال وخيارات أسهم من كل مستعمرة. تعريف الاختيار يسمح بيانات الفيديو تسجيل ثلاثة أنواع من السلوك خيار: تحوم، antennation والهبوط. في حين أن جميع الأنواع الثلاثة من السلوكيات يمكن ملاحظتها، وتحوم antennation هم difficuLT لربط مع عدد الوسم بسبب حركات سريعة أن كاميرات الفيديو مع الفقراء القرار، أو سرعة منخفضة لا يمكن تسجيل. لا بد من استخدام كاميرا الفيديو عالية الوضوح (رغم أن هذا لم يكن متاحا لنا، من الناحية المثالية معدل كاميرا الفيديو عالية الإطار ينبغي أن تستخدم لتقليل طمس) للتأكد من الأرقام التي قد تظهر علامة فقط على عدد صغير من الإطارات يمكن قراءة . وقد استخدم هذا الأسلوب أيضا لمقارنة أنماط الاختيار مع تقنية RFID، الذي يكتشف استكشاف الأزهار. اعتبارات حساسية الحركة واحدة من القضايا الرئيسية في إنتاج تجربة ناجحة هو التكوين من كاميرات الفيديو الحركة الحساسة. وهناك كاميرا الفيديو التي تعتبر حساسة للغاية بتسجيل الكثير من البيانات التي هي غير عملية ويمكن أن تصبح مكلفة جدا لمعالجة. على سبيل المثال، في البداية كان لدينا أثار كاميرا الفيديو العادية من خلال الاهتزازات في المبنى (على سبيل المثال، الناس يمرون على الرواق، وتكييف الهواء، وغيرها)، مما أدى إلى 1R11؛ 2 نقاط بيانات صالحة لكل 150-200 تسجيل مقاطع الفيديو. من ناحية أخرى، خطأ أكثر خطورة هو تكوين حساسية منخفضة، والتي يمكن أن تفوت البيانات الرئيسية. لا بد من تكوين كل كاميرات الفيديو في نفس الطريق، وعلى خلاف ذلك، يمكن أخذ العينات أخطاء تحرف النتائج. ملخص التجربة أربعة الخير منسوخة من الاختبارات تناسب العثور على ثلاث أبعاد المجموعة التي انحرفت كثيرا عن فرصة، والنسبة الإجمالية غير مهمة واحدة (انظر الجدول 3 والشكل 5). (1) نمط مهم: تم العثور على تفضيل كبير لشعاعي مركزي على النمط المركزي متحدة المركز (انظر الجدول 3). (2) موقف نمط شعاعي أقل أهمية: أظهر عرض مجموعة شعاعي شعاعي المركزي والمحيطي لا يوجد فرق كبير من فرصة. (3) أدى شعاعي المركزي ومجموعة هامشية، متحدة في تفضيل قوي نحوليالي نمط شعاعي مركزي. أثار مزيج المركزي مركزية وهامشية، شعاعي تفضيل كبير نحو نمط الطرفية-شعاعي. نمط تغلبت الموقع. وكانت الفروق الفردية غير الهامة في كافة تركيبات أربعة (انظر الجدول 3). <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/52033/52033fig5highres.jpg"/> . الرقم 5. الحركة الحساسة نتائج الفيديو الترددات الاختيار على أربعة مجموعات زهرة مختلفة في تجربة 2. أظهرت النتائج أهمية نوع نمط نمط عبر المواقع: وقد فضل أنماط شعاعي حتى لو تم وضع أنماط محيطيا. القيم تشير إلى عدد من الخيارات من نمط عرض. النجمة تشير إلى وجود نسبة الاختيار الذي يختلف كثيرا عن فرصة. ملاحظة. ** P &lt;0.01، *** P &lt;0.001. تم تعديل هذا الرقم من 11 اوربان. <tablالبريد الحدود = &quot;0&quot; بطانة الخلايا = &quot;0&quot; هوامش الخلية = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td rowspan="2"> الشروط </td><td> جلسة 1 </td><td colspan="2"> جلسة 2 </td><td colspan="2"> جلسة 3 </td></tr><tr><td> مستعمرة 1 </td><td> مستعمرة 2 </td><td> مستعمرة 3 </td><td> مستعمرة 4 </td><td> مستعمرة 5 </td></tr><tr><td> عدد العمال </td><td> 45 </td><td> 7 </td><td> 2 </td><td> 8 </td><td> 23 </td></tr><tr><td> عدد الخيارات </td><td> 151 </td><td> 25 </td><td> 2 </td><td> 20 </td><td> 65 </td></tr></tbody></table> الجدول 2. صفي إحصاءات بيانات الفيديو الحركة تراعي. إجمالي عدد من الخيارات المسجلة في الزهور الاصطناعية في تجربة 2 لكل مستعمرة، وعدد من العمال مما يجعل هذه الخيارات. تم تعديل هذا الجدول من اوربان وآخرون 11. يرجى الرجوع إلى مخطوطةللحصول على التفاصيل الكاملة. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td rowspan="2"> الشروط </td><td colspan="3"> المجمعة </td><td colspan="3"> عدم التجانس </td></tr><tr><td> GP </td><td> DF </td><td> ص </td><td> غ </td><td> DF </td><td> ص </td></tr><tr><td> المركزي شعاعي مقابل الوسطى المركزة </td><td> 17.98 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 40.72 </td><td> 29 </td><td> 0.073 </td></tr><tr><td> المركزي شعاعي شعاعي مقابل الطرفية </td><td> 1.85 </td><td> 1 </td><td> 0،173 </td><td> 53.63 </td><td> 39 </td><td> 0.060 </td></tr><tr><td> الطرفية شعاعي مقابل الوسطى المركزة </td><td> 6.57 </td><td> 1 </td><td> 0.010 </td><td> 26.31 </td><td> 27 </td><td> 0.500 </td></tr><tr><td> وسط شعاعي مقابل الطرفية المركزة </td><td> 18.18 </td><td> 1 </td><td> 0.000 </td><td> 41.92 </td><td> 37 </td><td>0.256 </td></tr></tbody></table> وقد بيانات الفيديو الجدول 3. استنتاجي الاحصائيات الحركة تراعي. 2. تجربة تعديل هذا الجدول من اوربان وآخرون 11. ويشير G p لانحراف كبير في نسبة مجموعة من فرصة، وG ح يشير إلى الاختبارات للفروق الفردية ( أي عدم التجانس). يرجى الرجوع إلى مخطوطة للحصول على تفاصيل كاملة عن الاختبارات الإحصائية.

Watch this Scientific Journal Video about Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees at JoVE.com

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees.

تحديد الهوية بترددات الراديو والفيديو الحركة تراعي بكفاءة أتمتة تسجيل السلوك غير مكافأة الاختيار من النحل

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

radio-frequency-identification-motion-sensitive-video-efficiently

Research

JoVE Journal

Neuroscience

10.8K Views.  University of Ottawa. This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees. 

Video: Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly enriched neuronal cultures. For this protocol the freezing medium used is 10% dimethyl sulfoxide (DMSO) diluted in Hank's Buffered Salt Solution (HBSS). Blocks of cortical tissue are transferred to cryovials containing the freezing medium and slowly frozen at -1&deg;C/min in a rate-controlled freezing container. Post-thaw processing and dissociation of frozen tissue blocks consistently produced neuronal-enriched cultures which exhibited rapid neuritic growth during the first 5 days in culture and significant expansion of the neuronal network within 10 days. Immunocytochemical staining with the astrocytic marker glial fibrillary acidic protein (GFAP) and the neuronal marker beta-tubulin class III, revealed high numbers of neurons and astrocytes in the cultures. Generation of neural precursor cell cultures after tissue block dissociation resulted in rapidly expanding neurospheres, which produced large numbers of neurons and astrocytes under differentiating conditions. This simple cryopreservation protocol allows for the rapid, efficient, and inexpensive preservation of cortical brain tissue blocks, which grants increased flexibility for later generation of neuronal, astrocyte, and neuronal precursor cell cultures.

Here, we describe a method for efficient cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly enriched neuronal cultures. This simple protocol provides flexibility for later generation of neuronal, astrocyte, and neuronal precursor cell cultures.

الحفظ بالتبريد من كتل الأنسجة القشرية للجيل الثقافات متعلق بالخلايا العصبية التخصيب

In this study, we outline a standardized protocol for the successful cryopreservation and thawing of cortical brain tissue blocks to generate highly ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of neurons and circuits requires methods with the spatial selectivity and temporal resolution appropriate for mechanistic analysis of neural ensembles in the behaving animal, i.e. recording of representatively large samples of isolated single neurons. Ensemble monitoring of neuronal activity has progressed remarkably in the past decade in both small and large-brained animals, including human subjects1-11. Multiple-site recording with silicon-based devices are particularly effective because of their scalability, small volume and geometric design.
Here, we describe methods for recording multiple single neurons and local field potential in behaving rodents, using commercially available micro-machined silicon probes with custom-made accessory components. There are two basic options for interfacing silicon probes to preamplifiers: printed circuit boards and flexible cables. Probe supplying companies (<a href="http://www.neuronexustech.com/" >http://www.neuronexustech.com/</a>; <a href="http://www.sbmicrosystems.com/">http://www.sbmicrosystems.com/</a>; <a href="http://www.acreo.se/">http://www.acreo.se/</a>) usually provide the bonding service and deliver probes bonded to printed circuit boards or flexible cables. Here, we describe the implantation of a 4-shank, 32-site probe attached to flexible polyimide cable, and mounted on a movable microdrive. Each step of the probe preparation, microdrive construction and surgery is illustrated so that the end user can easily replicate the process.

We describe methods for large-scale recording of multiple single units and local field potential in behaving rodents with silicon probes. Drive fabrication, probe attachment to the drive and probe implantation processes are illustrated in sufficient details for easy replication.

على نطاق واسع التسجيل من الخلايا العصبية بواسطة مجسات سيليكون المنقول في يتصرفون القوارض

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated. Thus, simultaneous recordings of neuronal activity and behavior are essential to correlate brain activity to behavior. For such behavioral analyses, the fruit fly, Drosophila melanogaster, allows us to incorporate genetically encoded calcium indicators such as GCaMP1, to monitor neuronal activity, and to use sophisticated genetic manipulations for optogenetic or thermogenetic techniques to specifically activate identified neurons2-5. Use of a thermogenetic technique has led us to find critical neurons for feeding behavior (Flood et al., under revision). As a main part of feeding behavior, a Drosophila adult extends its proboscis for feeding6 (proboscis extension response; PER), responding to a sweet stimulus from sensory cells on its proboscis or tarsi. Combining the protocol for PER7 with a calcium imaging technique8 using GCaMP3.01, 9, I have established an experimental system, where we can monitor activity of neurons in the feeding center &#x2013; the suboesophageal ganglion (SOG), simultaneously with behavioral observation of the proboscis. I have designed an apparatus ("Fly brain Live Imaging and Electrophysiology Stage": "FLIES") to accommodate a Drosophila adult, allowing its proboscis to freely move while its brain is exposed to the bath for Ca2+ imaging through a water immersion lens. The FLIES is also appropriate for many types of live experiments on fly brains such as electrophysiological recording or time lapse imaging of synaptic morphology. Because the results from live imaging can be directly correlated with the simultaneous PER behavior, this methodology can provide an excellent experimental system to study information processing of neuronal networks, and how this cellular activity is coupled to plastic processes and memory.

Simultaneous Recording of Calcium Signals from Identified Neurons and Feeding Behavior of Drosophila melanogaster

The fruit fly, Drosophila melanogaster, extends its proboscis for feeding, responding to a sugar stimulus from its proboscis or tarsus. I have combined observations of the proboscis extension response (PER) with a calcium imaging technique, allowing us to monitor the activity of neurons in the brain, simultaneously with behavioral observation.

في وقت واحد من تسجيل إشارات الكالسيوم من الخلايا العصبية التي تم تحديدها وسلوك التغذية من ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

To study neuronal networks in terms of their function in behavior, we must analyze how neurons operate when each behavioral pattern is generated.  Thus, ...

Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, various technologies are being developed as control tools. A subset of these tools focuses on modifying the behavior of arthropods by attraction or repulsion. Therefore, arthropods are often the focus of behavioral investigations. Various tools have been developed to measure arthropod behavior, including wind tunnels, flight mills, servospheres, and various types of olfactometers. The purpose of these tools is to measure insect or arachnid response to visual or more often olfactory cues. The vertical T-maze oflactometer described here measures choices performed by insects in response to attractants or repellents. It is a high throughput assay device that takes advantage of the positive phototaxis (attraction to light) and negative geotaxis (tendency to walk or fly upward) exhibited by many arthropods. The olfactometer consists of a 30 cm glass tube that is divided in half with a Teflon strip forming a T-maze. Each half serves as an arm of the olfactometer enabling the test subjects to make a choice between two potential odor fields in assays involving attractants. In assays involving repellents, lack of normal response to known attractants can also be measured as a third variable.

A vertical, T-maze olfactometer is described for assaying the behavioral response of arthropods. The olfactometer allows the experimenter to measure choices performed by test subjects when subjected to two potential odor fields. Both attraction to and repulsion from odorants can be measured with this device.

الفحص العمودي اختيار T-متاهة للاستجابة لالمفصلي Odorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, ...

Selective Tracing of Auditory Fibers in the Avian Embryonic Vestibulocochlear Nerve

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling of auditory axons within the VIIIth cranial nerve would enhance the study of central auditory circuit development. This approach is challenging because multiple sensory organs of the inner ear contribute to the VIIIth nerve 1. Moreover, markers that reliably distinguish auditory versus vestibular groups of axons within the avian VIIIth nerve have yet to be identified. Auditory and vestibular pathways cannot be distinguished functionally in early embryos, as sensory-evoked responses are not present before the circuits are formed. Centrally projecting VIIIth nerve axons have been traced in some studies, but auditory axon labeling was accompanied by labeling from other VIIIth nerve components 2,3. Here, we describe a method for anterograde tracing from the acoustic ganglion to selectively label auditory axons within the developing VIIIth nerve. First, after partial dissection of the anterior cephalic region of an 8-day chick embryo immersed in oxygenated artificial cerebrospinal fluid, the cochlear duct is identified by anatomical landmarks. Next, a fine pulled glass micropipette is positioned to inject a small amount of rhodamine dextran amine into the duct and adjacent deep region where the acoustic ganglion cells are located. Within thirty minutes following the injection, auditory axons are traced centrally into the hindbrain and can later be visualized following histologic preparation. This method provides a useful tool for developmental studies of peripheral to central auditory circuit formation.

Here we describe a microdissection technique followed by fluorescent dye injection into the acoustic ganglion of early chick embryos for selective tracing of auditory axon fibers in the nerve and hindbrain.

انتقائية للبحث عن المفقودين من ألياف العصب السمعي في الطيور الدهليزي القوقعي الجنينية

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of primary afferent fibers mediated by GABAergic axo-axonal synapses (primary afferent depolarization). The strength of primary afferent depolarization can be measured by recording of volume-conducted potentials at the dorsal root (dorsal root potentials, DRP). Pathological changes of presynaptic inhibition are crucial in the abnormal central processing of certain pain conditions and in some disorders of motor hyperexcitability. Here, we describe a method of recording DRP in vivo in mice. The preparation of spinal cord dorsal roots in the anesthetized animal and the recording procedure using suction electrodes are explained. This method allows measuring GABAergic DRP and thereby estimating spinal presynaptic inhibition in the living mouse. In combination with transgenic mouse models, DRP recording may serve as a powerful tool to investigate disease-associated spinal pathophysiology. In vivo recording has several advantages compared to ex vivo isolated spinal cord preparations, e.g. the possibility of simultaneous recording or manipulation of supraspinal networks and induction of DRP by stimulation of peripheral nerves.

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

GABAergic presynaptic inhibition is a powerful inhibitory mechanism in the spinal cord important for motor and sensory signal integration in spinal cord networks. Underlying primary afferent depolarization can be measured by recording of dorsal root potentials (DRP). Here we demonstrate a method of in vivo recording of DRP in mice.

قياس العمود الفقري قبل المشبكي في الفئران عن طريق تثبيط الظهرية جذر تسجيل المحتملة<em&gt; في فيفو</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by repeated, time-lapse in vivo imaging in live rodents. These studies were made possible by straightforward surgical procedures, which enabled optical access for a prolonged period of time without repeat surgical procedures. In contrast, analogous studies of the spinal cord have been previously limited to only a few imaging sessions, each of which required an invasive surgery. As previously described, we have developed a spinal chamber that enables continuous optical access for upwards of 8 weeks, preserves mechanical stability of the spinal column, is easily stabilized externally during imaging, and requires only a single surgery. Here, the design of the spinal chamber with its associated surgical implements is reviewed and the surgical procedure is demonstrated in detail. Briefly, this video will demonstrate the preparation of the surgical area and mouse for surgery, exposure of the spinal vertebra and appropriate tissue debridement, the delivery of the implant and vertebral clamping, the completion of the chamber, the removal of the delivery system, sealing of the skin, and finally, post-operative care. The procedure for chronic in vivo imaging using nonlinear microscopy will also be demonstrated. Finally, outcomes, limitations, typical variability, and a guide for troubleshooting are discussed.

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

In this video, we describe a procedure for implanting a chronic optical imaging chamber over the dorsal spinal cord of a live mouse. The chamber, surgical procedure, and chronic imaging are reviewed and demonstrated.

إجراء لغرس الدائرة العمود الفقري للالطولية<em&gt; في فيفو</em&gt; التصوير من الحبل الشوكي ماوس

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by ...

Quantifying Fish Swimming Behavior in Response to Acute Exposure of Aqueous Copper Using Computer Assisted Video and Digital Image Analysis

Behavioral responses of aquatic organisms to environmental contaminants can be precursors of other effects such as survival, growth, or reproduction. However, these responses may be subtle, and measurement can be challenging. Using juvenile white sturgeon (Acipenser transmontanus) with copper exposures, this paper illustrates techniques used for quantifying behavioral responses using computer assisted video and digital image analysis. In previous studies severe impairments in swimming behavior were observed among early life stage white sturgeon during acute and chronic exposures to copper. Sturgeon behavior was rapidly impaired and to the extent that survival in the field would be jeopardized, as fish would be swept downstream, or readily captured by predators. The objectives of this investigation were to illustrate protocols to quantify swimming activity during a series of acute copper exposures to determine time to effect during early lifestage development, and to understand the significance of these responses relative to survival of these vulnerable early lifestage fish. With mortality being on a time continuum, determining when copper first affects swimming ability helps us to understand the implications for population level effects. The techniques used are readily adaptable to experimental designs with other organisms and stressors.

Measuring the impacts of environmental contaminants on fish behavior is often subjective and challenging particularly when dealing with sublethal endpoints. We describe methods including video technology to quantify swimming behavior of early life stage white sturgeon (Acipenser transmontanus) during and after 96 hr acute exposures to various concentrations of copper.

قياس سلوك الأسماك سباحة ردا على التعرض الحاد للمائي النحاس عن طريق الكمبيوتر بمساعدة الفيديو الرقمية وتحليل الصور

Behavioral responses of aquatic organisms to environmental contaminants can be precursors of other effects such as survival, growth, or reproduction.  ...

Insect-machine Hybrid System: Remote Radio Control of a Freely Flying Beetle (Mercynorrhina torquata)

The rise of radio-enabled digital electronic devices has prompted the use of small wireless neuromuscular recorders and stimulators for studying in-flight insect behavior. This technology enables the development of an insect-machine hybrid system using a living insect platform described in this protocol. Moreover, this protocol presents the system configuration and free flight experimental procedures for evaluating the function of the flight muscles in an untethered insect. For demonstration, we targeted the third axillary sclerite (3Ax) muscle to control and achieve left or right turning of a flying beetle. A thin silver wire electrode was implanted on the 3Ax muscle on each side of the beetle. These were connected to the outputs of a wireless backpack (i.e., a neuromuscular electrical stimulator) mounted on the pronotum of the beetle. The muscle was stimulated in free flight by alternating the stimulation side (left or right) or varying the stimulation frequency. The beetle turned to the ipsilateral side when the muscle was stimulated and exhibited a graded response to an increasing frequency. The implantation process and volume calibration of the 3 dimensional motion capture camera system need to be carried out with care to avoid damaging the muscle and losing track of the marker, respectively. This method is highly beneficial to study insect flight, as it helps to reveal the functions of the flight muscle of interest in free flight.

Insect-machine Hybrid System: Remote Radio Control of a Freely Flying Beetle Mercynorrhina torquata

This protocol describes the process of constructing an insect-machine hybrid system and carrying out wireless electrical stimulation of the flight muscles required to control the turning motion of a flying insect.

الحشرات آلة النظام الهجين: التحكم عن بعد راديو سيارة بيتل الطائر بحرية (<em&gt; Mercynorrhina torquata</em&gt;)

The rise of radio-enabled digital electronic devices has prompted the use of small wireless neuromuscular recorders and stimulators for studying in-flight ...

Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

Many organisms use cues and signals beyond human sensitivity during social interactions. It is important to take into account how organisms perceive their worlds when trying to understand their behavior and ecology. Sensitivity to the ultraviolet spectrum (UV; 300 - 400 nm) is found across multiple genera of birds, fish, reptiles, amphibians, and even mammals. This protocol describes a technique for examining organisms for the presence of UV-reflecting structures and a method for testing whether these cues are used as social signals in the context of mate choice. A spectrophotometer is used to detect the presence of UV reflectance and variation in reflective intensity between individuals and sexes. An example of this technique is presented in which a dichotomous mate choice test exposes sexually receptive individuals to opposite sex individuals whose visual appearance can be manipulated by filters that either transmit full spectrum or block UV wavelengths. This system allowed for the determination that female, but not male, sailfin mollies (Poecilia latipinna) were using UV markings as part of their mating decisions. These types of studies serve to expand our knowledge of the range of organisms that utilize UV and provide insight into how UV plays a role in their lives.

Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

This protocol outlines the use of spectrophotometry to detect ultraviolet-reflecting structures on organisms (in this example, the sailfin molly Poecilia latipinna) and describes dichotomous choice tests for fish that allow inferences to be made on the role of ultraviolet cues during mate selection.

فحوصات لكشف الهياكل التي تعكس الأشعة فوق البنفسجية، وتحديد أهميتها في تفضيل ماتي باستخدام مولي شراعية الزعانف<em&gt; البكيللية latipinna</em

Many organisms use cues and signals beyond human sensitivity during social interactions. It is important to take into account how organisms perceive their ...