עבודה זו נתמכה על-ידי התוכנית Exchange מחקר של 2013 שנות כספים בין JSPS ו CNRS, JSPS KAKENHI גרנט מספר 26860858 קרן מחקר מדעי המוח Narishige. אנו מודים ד"ר מריקו Harada-שיבא, קיוקו Shioya על דיונים מועילים. אנו מודים מארי Furuta, Mutsumi סאקאמוטו, Ritsuko Maki, ד ר טנקה Emi לסיוע טכני מעולה.

כל הניסויים בוצעו על פי פרוטוקולים אושרה על ידי טיפול ניסיוני חיה שימוש הוועד הלאומי מוחין ו קרדיו סנטר, -סוויטה, יפן.
1. מכינים את הבאים חיות וחומרים לניתוח MIUH
<ol><li>להכין מתוזמן חולדות ספראג-Dawley בהריון הריונית יום 17, קרי, עובריים יום 17 (E17). משקלי גוף ממוצע של הסכרים הם 307.0 ± 40.7 g (זאת אומרת ± SD, n = 9).</li>
	<li>להכין מפוליויניל מתכת; הקוטר הפנימי 0.24 מ מ, עשוי פלדה מצופה זהב.</li>
	<li>להכין את כל החומרים לפי הטבלה של החומרים.</li>
</ol>2. מכינים לניתוח MIUH
<ol><li>לחמם כרית החימום ב 37 ° C עבור מיקום עכברוש</li>
	<li>מניחים חיתול סטרילי על כרית החימום</li>
	<li>מלחית סטרילי ב 37 מעלות צלזיוס בתוך אמבט מים</li>
</ol>3. לבצע ניתוח MIUH
<ol><li>לבצע ניתוחים בתנאי סטרילי. לעקר את סלילי, מלקחיים, מחט עם 70% אתנול לפני השימוש. להשתמש בכפפות סטריליות, ולחטא מעת לעת על-ידי החלת ספריי אתנול.</li>
	<li>מקם את החולדה בתיבת אינדוקציה הרדמה. מציגים 4% איזופלוריין לתוך התיבה (כ- 5 דקות).</li>
	<li>במקום העכברוש על גבי חיתול סטרילי על כרית החימום במצב פרקדן לאחר החיה ביסודיות. הוא מורדם בתיבת אינדוקציה. לבדוק לעומק של הרדמה לתחושה של חוסר תגובה קמצוץ הבוהן. לשמור על 1.5-2.0% איזופלוריין עם קונוס האף.</li>
	<li>החל depilatory קצף על גבי הבטן מהטבור עד לאזור של הקשת האגן. לאחר מספר דקות, תנגבי את הקצף depilatory עם מגבת נייר. גילוח עשוי לשמש כתחליף הקצף depilatory.</li>
	<li>החל גזה ספוגה תמיסת חיטוי יוד באזור depilated של העור.</li>
	<li>במקום תלוי כירורגית עם חור עגול כדי לכסות את הבטן זולת האזור. של החתך כירורגי. כמה חתיכות של גזה עשוי לשמש כתחליף הכיסוי ותאבטחי.</li>
	<li>באמצעות אזמל כירורגי, לבצע את החתך כ 2.5 ס"מ long בבבטן התחתונה מהקצה העליון של עצם הערווה ישר לכיוון הטבור. ואז, לעשות חתך דרך השכבה שריר מתחת.</li>
	<li>במקום מספר חתיכות של גזה סטרילית ליד הפתח של הכיסוי ותאבטחי, להרטיב את הגזה בתמיסת ומחוממת.</li>
	<li>לדחוף משני צדי הבטן בעדינות, כך חלק קרן הרחם מגיח החתך.</li>
	<li>לחטא את הידיים של המנתח עם 70% אתנול.</li>
	<li>משוך בעדינות את הצופר הרחם כולו של חלל הבטן באופן ידני ללא שימוש מלקחיים. בעזרת מלקחיים כירורגיים אינה מומלצת, היות שהם עלולים בקלות לפגום את הרחם שביר, העוברים ו כלי דם על-ידי דחיסתן חזק וכל לצר.</li>
	<li>מניחים את הצופר הרחם על פד רטוב.</li>
	<li>לבצע את ההליך עבור הקרן הרחם אחרים.</li>
	<li>לספור את מספר העוברים.</li>
	<li>החל תמיסת מלח ומחוממת לעתים קרובות כדי לשמור על הרחם חם ורטוב לאורך כל הניתוח.<ol>
<li>לשנות את החיתול כאשר זה ספג יותר מדי מלח. כדי לשמור על יציבות, חזור על חיטוי כפפות עם 70% אתנול וביו -טיפים של המכשיר עם יוד. להשאיר את האצבעות שאינו סטרילי העצות סטרילי של המכשיר היא קריטית.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לזהות את החלק הפרוקסימלית של ארקייד הראשי של העורקים השחלות ואת הרחם תחת stereomicroscope. הערה: חשוב להבחין ארקייד הראשי מן הענפים כדי מאחד לשני. שימו לב כי בפעולה כירורגית עשוי להיות קל יותר כאשר הקרן הרחם הוא התחרפן. לעיתים, החלת סליל בחלק מקורב מאוד של הקשתות היא קשה, כי הוא ממוקם עמוק בתוך חלל הבטן, העורקים טבור קרובים מאוד החלק הפרוקסימלית של הקשתות. במקרה זה, סליל ניתן ליישם חלק ארקייד לאחר ונדיצל הסניף הראשון מחוץ.</li>
	<li>להפריד את העורק הווריד פועל במקביל אליו עם מלקחיים ולעשות רווח ביניהם.</li>
	<li>מניחים חתיכת בד (משי תפר 4.0, 5 ס מ) מתחת העורק.</li>
	<li>הרם את שני הקצוות של המחרוזת עם מלקחיים כך העורק וזריחה הופרדו את הווריד שביר.</li>
	<li>שהחזיק בשולי microcoil עם מלקחיים בסדר וביד השנייה, במקום של microcoil ליד עורק והרימה אותה (איור 2.1).</li>
	<li>לסובב את העורק והרימה אותה באמצעות המחרוזת סביב microcoil לעטוף את microcoil סביב העורק. קל לסובב את העורק מסביב הגליל יותר כדי לסובב את הגליל סביב העורק (איור 2.2).</li>
	<li>אחרי סיבוב העורק 3 או 4 פניות (סלילי יש תורות 5), לשנות את האתר שבו מתקיים את הגליל ועד לקצה השני. להחזיק את הקצה של הסליל זה נעטף סביב העורק עם מלקחיים. לשנות את האתר שבו המחרוזת מרימה את העורק לצד השני של סליל. לסובב את העורק מסביב הגליל כך הסליל לגמרי (5 תורות) עוטפת את העורק (איור 2.3, 2.4).</li>
	<li>הסר את המחרוזת.</li>
	<li>לבצע את ההליך של העורקים שלושה אחרים.</li>
	<li>הערה כי לעתים קרובות החלת חימם תמיסת מלח אל הרחם היא קריטית; אחרת, מגביר את שיעור התמותה של העוברים, היפותרמיה עלולה להיות neuroprotective.</li>
	<li>בעדינות להחזיר את הקרן הרחם לתוך חלל הבטן. הרמת קצה של החתך דופן הבטן עם מלקחיים יכול להקל על הליך זה.</li>
	<li>Stich שריר הבטן ולאחר מכן stich בעור בטן עם תפר (משי תפר 4.0). לקשור את התפר לאחר כל stich, כלומר קטע אחד התפרים.</li>
	<li>החל גזה ספוגה תמיסת חיטוי יוד סביב הניתוח החתך.</li>
	<li>לנהל את meloxicam להרגעה-0.5 מ"ג/ק"ג משקל גוף subcutaneously.</li>
	<li>לאפשר למשך 30 דקות של התאוששות בכלוב ומחוממת. בדיקת חיות אם ער לחלוטין ומרגש לכלוב, לחזור הביתה כלוב.</li>
</ol>

<ol><li>Ohshima, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+intrauterine+hypoperfusion+reproduces+neurodevelopmental+disorders+observed+in+prematurity%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity.</a> Sci Rep. 6, 39377(2016).</li>
<li>Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html">http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html</a> (2010).</li>
<li>Anderson, P., Doyle, L. W., Victorian Infant Collaborative Study, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobehavioral+outcomes+of+school-age+children+born+extremely+low+birth+weight+or+very+preterm+in+the+1990s%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Neurobehavioral outcomes of school-age children born extremely low birth weight or very preterm in the 1990s.</a> JAMA. 289 (24), 3264-3272 (2003).</li>
<li>Levine, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+childhood+neurodevelopment+after+intrauterine+growth+restriction%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Early childhood neurodevelopment after intrauterine growth restriction: a systematic review.</a> Pediatrics. 135 (1), 126-141 (2015).</li>
<li>Sucksdorff, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preterm+Birth+and+Poor+Fetal+Growth+as+Risk+Factors+of+Attention-Deficit%2F+Hyperactivity+Disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Preterm Birth and Poor Fetal Growth as Risk Factors of Attention-Deficit/ Hyperactivity Disorder.</a> Pediatrics. 136 (3), e599-e608 (2015).</li>
<li>Volpe, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+injury+in+premature+infants%3A+a+complex+amalgam+of+destructive+and+developmental+disturbances%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Brain injury in premature infants: a complex amalgam of destructive and developmental disturbances.</a> Lancet Neurol. 8 (1), 110-124 (2009).</li>
<li>Nardozza, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+growth+restriction%3A+current+knowledge%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Gynecol+Obstet%22%5BJournal%5D)">Fetal growth restriction: current knowledge.</a> Arch Gynecol Obstet. 295 (5), 1061-1077 (2017).</li>
<li>Chang, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preterm+birth+and+the+role+of+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Bmj%22%5BJournal%5D)">Preterm birth and the role of neuroprotection.</a> Bmj. 350, g6661(2015).</li>
<li>Coq, J. O., Delcour, M., Massicotte, V. S., Baud, O., Barbe, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+ischemia+deteriorates+white+matter%2C+brain+organization%2C+and+function%3A+implications+for+prematurity+and+cerebral+palsy%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Prenatal ischemia deteriorates white matter, brain organization, and function: implications for prematurity and cerebral palsy.</a> Dev Med Child Neurol. 58, Suppl 4. 7-11 (2016).</li>
<li>Jantzie, L. L., Corbett, C. J., Firl, D. J., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+Erythropoietin+Mitigates+Impaired+Cerebral+Cortical+Development+Following+Subplate+Loss+from+Prenatal+Hypoxia-Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">Postnatal Erythropoietin Mitigates Impaired Cerebral Cortical Development Following Subplate Loss from Prenatal Hypoxia-Ischemia.</a> Cereb Cortex. 25 (9), 2683-2695 (2015).</li>
<li>Kubo, K. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+impaired+neuronal+migration+with+cognitive+deficits+in+extremely+preterm+infants%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Association of impaired neuronal migration with cognitive deficits in extremely preterm infants.</a> JCI Insight. 2 (10), (2017).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+musculoskeletal+and+locomotor+alterations+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Dev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mild musculoskeletal and locomotor alterations in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Int J Dev Neurosci. 29 (6), 593-607 (2011).</li>
<li>Gilbert, J. S., Babcock, S. A., Granger, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension+produced+by+reduced+uterine+perfusion+in+pregnant+rats+is+associated+with+increased+soluble+fms-like+tyrosine+kinase-1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Hypertension produced by reduced uterine perfusion in pregnant rats is associated with increased soluble fms-like tyrosine kinase-1 expression.</a> Hypertension. 50 (6), 1142-1147 (2007).</li>
<li>Granger, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+uterine+perfusion+pressure+%28RUPP%29+model+for+studying+cardiovascular-renal+dysfunction+in+response+to+placental+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Reduced uterine perfusion pressure (RUPP) model for studying cardiovascular-renal dysfunction in response to placental ischemia.</a> Methods Mol Med. 122, 383-392 (2006).</li>
<li>Mazur, M., Miller, R. H., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+erythropoietin+treatment+mitigates+neural+cell+loss+after+systemic+prenatal+hypoxic-ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Postnatal erythropoietin treatment mitigates neural cell loss after systemic prenatal hypoxic-ischemic injury.</a> J Neurosurg Pediatr. 6 (3), 206-221 (2010).</li>
<li>Olivier, P., Baud, O., Evrard, P., Gressens, P., Verney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+ischemia+and+white+matter+damage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuropathol+Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Prenatal ischemia and white matter damage in rats.</a> J Neuropathol Exp Neurol. 64 (11), 998-1006 (2005).</li>
<li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+changes+induced+by+graded+prenatal+systemic+hypoxic-ischemic+insults+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Developmental changes induced by graded prenatal systemic hypoxic-ischemic insults in rats.</a> Neurobiol Dis. 18 (3), 568-581 (2005).</li>
<li>Rice, D., Barone, S. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+periods+of+vulnerability+for+the+developing+nervous+system%3A+evidence+from+humans+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Critical periods of vulnerability for the developing nervous system: evidence from humans and animal models.</a> Environ Health Perspect. 108, Suppl 3. 511-533 (2000).</li>
<li>Basilious, A., Yager, J., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+outcomes+of+animal+models+of+uterine+artery+ligation+and+relevance+to+human+intrauterine+growth+restriction%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Neurological outcomes of animal models of uterine artery ligation and relevance to human intrauterine growth restriction: a systematic review.</a> Dev Med Child Neurol. 57 (5), 420-430 (2015).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroanatomical%2C+sensorimotor+and+cognitive+deficits+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neuroanatomical, sensorimotor and cognitive deficits in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Brain Pathol. 22 (1), 1-16 (2012).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

Microcoil היצרות של העורקים השחלות ואת הרחם שני קרניים הרחם מייצר זילוח תוך רחמי עקבית ומותאמת לשחזור כל מאחד לשני, העוברים. ניתן לשנות את רמת זילוח באמצעות מפוליויניל עם קטרים שונים הפנימי. עכברוש הגורים נולדים מן סכר שבו בוצעה היצרות עורק עם מפוליויניל 0.24 מ מ קוטר פנימי מדגימים IUGR, לידה מוקדמ...

תינוקות עם פיגור גדילה תוך רחמי ההגבלה (IUGR) (המכונה גם הגבלת צמיחה עוברית) (משקל לידה < אחוזון 10בתאנון לגיל ההיריון), לידה לידה מוקדמת (נולד ב- < בשבוע ה-37 של ההיריון), ו/או נמוך הלידה משקל (< 2500 גרם) חשבון עבור כמעט 10% של ילודים כל 2,3. הרבה תינוקות אלה להציג בעיות נוירולוגיות כגון שיתוק מוחין, הפרעות התפתחותיות (כגון: הפרעת תשומת לב-קשב/היפראקטיביות (ADHD) והפרעות למידה) 3,4,5. תנאים אלה יש קווי דמיון והבדלים שלהם אטיולוגיה, תוצאות. האטיולוגיה של IUGR multifactorial, אי ספיקה היפרדות המשויך זילוח תוך רחמי נחשבת הגורם השכיח ביותר ב העוברים שאינו חריג 7. האטיולוגיה של לידה מוקדמת multifactorial גם כן, chorioamnionitis הוא הגורם השכיח ביותר 8.
השפעת זילוח מתון תוך רחמי (MIUH) על המוח המתפתח לא ברור. כיום זמינים מודלים חייתיים של זילוח תוך רחמי/איסכמיה כרוך בעיקר זילוח חמורה או מעבר צבע מידת זילוח עם או בלי פגיעה reperfusion 9,10,11. הגדרות קליני, עם זאת, מקרים של MIUH נחשבים להיות תכופים יותר מאשר אלה מעורבים בתנאים קשים. כל דגמי MIUH זמין כעת הם מודל מכרסמים הכרוכים בתפר מצדו או את הרחם העורק השחלות, או דוגמנית מכרסמים מעורבים מסיכה העורקים השחלות דו צדדיים של אבי העורקים נתקל patency 12,13, 14,15,16,17. אחד החסרונות של מודלים אלה הוא ההשתנות העובר בין נרחב, החל עוברים עם זילוח עמוקה עוברים עם זלוף כמעט שלם, בהתאם התנוחה של העובר בתוך עורקי ארקייד של הרחם ואת העורקים השחלות. חיסרון נוסף של מודלים אלה הוא היכולת שלהם להבחין בין המיקום של כל העובר לאחר הלידה; לפיכך, חוקרים לא יכול להבחין בין חומרת זילוח תוך רחמי מנוסים על ידי הגור בודדים לאחר הלידה שלה.
פיתחנו מודל עכברוש של MIUH מעורבים היצרות עורק מספר 1. גלישת מיקרו-סלילי מתכת בקוטר הפנימי 0.24 מ מ סביב השחלות ואת הרחם העורקים גורמת היצרות, אבל לא חסימה, של כלי הדם (איור 1). החלת אלה מפוליויניל על החלקים הפרוקסימלית של כל העורקים ויישם את הרחם, קרי, העורקים הרחם ואת השחלות דו צדדיים, ביום עובריים 17 (שקול ל- 20-25 שבועות עובריים בני 18) מעניקה ירידה משמעותית אך מתון זרימת הדם מאחד לשני, העוברים. ירידות זרימת הדם לאחר סלילי יוחלו על כל העורקים לארבעה האכלה הרחם זהים במידה רבה על פני כל השליה לעובר. שיעור התמותה העובר הוא פחות מ- 20%. הגורים נולדים דרך העבודה ספונטני 1-2 ימים מוקדם יותר (היום עובריים 21-22) יותר מהרגיל. כמעט כל הגורים נולדים מפגין משקל לידה נמוך באופן משמעותי 1. אמצעי אחסון חומר אפור ולבן הם ירד בלי ברור רקמת נזק 1. הגורים להציג עם רכישת מושהית של היילוד רפלקסים, חולשת שרירים, פעילות ספונטנית שינו 1. מודל זה מחקה את הסימנים הקליניים ואת הסימפטומים של ילדים שנולדו פגים או עם IUGR; התערוכה לידה מוקדמת נולד ילדים מופחתת אפור, חומר לבן עם או בלי חומר לבן פציעה 6, נוכח מושהית אבני דרך של התפתחות נוירולוגית, ונפח עשוי להציג בעיות התנהגותיות כגון ADHD 3,5; ילדים עם IUGR התערוכה שינויים neuroanatomical מינימלי, יש סיכון מוגבר להתפתחות נוירולוגית לקוי כגון עיכוב מוטוריות קוגניטיביות 4,7. לידה לידה מוקדמת ו IUGR מצבים שונים, אך שני תנאים חולק המנגנון הבסיסי, כלומר עלבונות על מוח ילדותי לפני גיל הריון מלא לטווח.

<table><tbody><tr><td>Stereomicroscope</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane anesthesia machine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia induction box</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heating pad</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diaper 30x40 cm</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Depilatory foam or shaver</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Iodine disinfectant solution</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gauze 10x20 cm&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgical drape 45x45 cm with a round opening 5 cm in diameter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spray bottle with ethanol for disinfection</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cotton swab</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forceps with large blunt tips</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forceps with angled fine tips</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scissors</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgical scalpel, blade size is 27mm long (no.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japan)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgical suture needle</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metal microcoils; inner diameter 0.24 mm, made from gold-coated steel (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japan)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Silk suture 4-0</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterile saline (0.9% sodium chloride)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heating water bath</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plastic syringes (50ml) and needles (18G)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a rat model of mild intrauterine hypoperfusion with microcoil stenosis

זילוח תוך רחמי/איסכמיה הוא אחד הגורמים העיקריים של פיגור גדילה תוך רחמי/העובר, לידה לידה מוקדמת, משקל לידה נמוך. רוב המחקרים של תופעה זו בוצעו גם דגמים עם איסכמיה תוך רחמי חמורה או מודלים בדרגת ההדרגתיות זילוח תוך רחמי. אף מחקר בוצעה בדוגמנית על זילוח תוך רחמי קלה אחיד (MIUH). שני דגמים שימשו מחקרים של MIUH: מודל המבוסס על התפר מצדו של צדי ארקייד עורקי הקים עם העורקים הרחם ואת השחלות, ולפי מודל ארעי מסיכה העורקים השחלות דו צדדיים של אבי העורקים שיש patency. אלה שני מודלים מכרסם של MIUH יש כמה מגבלות, למשל, לא כל העוברים נחשפים אל MIUH, בהתאם למיקום שלהם בהקרן הרחם. במודל שלנו MIUH ', כל העוברים נחשפים לרמה המקבילה של זילוח תוך רחמי. MIUH הושגה על ידי היצרות קלה של כל ארבעה עורקים האכלה הרחם, קרי, העורקים הרחם ואת השחלות הדו-צדדיים.
היצרות העורקים הסחרור הושפע מפוליויניל מתכת העוטפת את העורקים האכלה. הפקת היצרות עורקים עם מפוליויניל מאפשרת לנו לשלוט, לייעל, להתרבות לירידה בזרימת הדם עם השתנות בין בעלי חיים מעט מאוד ושיעור התמותה נמוכה, ובכך מאפשר הערכה מדויקת. כאשר מפוליויניל עם הקוטר הפנימי של 0.24 מ שימשו, זרימת הדם בתוך השליה והן העובר היה בלשון המעטה ירד (כ-30% מרמת היצרות מראש את השליה). הצאצא של המודל MIUH שלנו מדגים בבירור שינויים לטווח ארוך תוצאות בדיקות נוירולוגיות, neuroanatomical והתנהגותיים.

לאחר החלת כל העורקים האכלה הרחם, קרי, העורקים הרחם ואת השחלות דו צדדיים, מפוליויניל ותוחלת העוברים כל רמות דומות זילוח. היישום של מפוליויניל עם הקוטר הפנימי של 0.24 מ גורם מתון היצרות של העורקים האלה, ובכך לגרום לירידה קלה זרימת הדם מאחד לשני, העוברים (איור 3; ...

Watch this Scientific Journal Video about A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis at JoVE.com

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

זילוח תוך רחמי קלה הופק על ידי היצרות עורק עם מפוליויניל מתכת העוטפת את העורקים הרחם ואת השחלות אצל חולדות עובריים ביום 17. הליך זה מיוצר זילוח טרום לידתי, פיגור גדילה תוך רחמי.

מודל עכברוש של זילוח תוך רחמי קלה עם היצרות Microcoil

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

a-rat-model-of-mild-intrauterine-hypoperfusion-with-microcoil-stenosis

Research

JoVE Journal

Neuroscience

10.3K Views.  National Cerebral and Cardiovascular Center. זילוח תוך רחמי קלה הופק על ידי היצרות עורק עם מפוליויניל מתכת העוטפת את העורקים הרחם ואת השחלות אצל חולדות עובריים ביום 17. הליך זה מיוצר זילוח טרום לידתי, פיגור גדילה תוך רחמי.

Video: A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

The Hypoxic Ischemic Encephalopathy Model of Perinatal Ischemia

Hypoxic-Ischemic Encephalopathy (HIE) is the consequence of systemic asphyxia occurring at birth. Twenty five percent of neonates with HIE develop severe and permanent neuropsychological sequelae, including mental retardation, cerebral palsy, and epilepsy. The outcomes of HIE are devastating and permanent, making it critical to identify and develop therapeutic strategies to reduce brain injury in newborns with HIE. To that end, the neonatal rat model for hypoxic-ischemic brain injury has been developed to model this human condition. The HIE model was first validated by Vannucci et al 1 and has since been extensively used to identify mechanisms of brain injury resulting from perinatal hypoxia-ischemia 2 and to test potential therapeutic interventions 3,4. The HIE model is a two step process and involves the ligation of the left common carotid artery followed by exposure to a hypoxic environment. Cerebral blood flow (CBF) in the hemisphere ipsilateral to the ligated carotid artery does not decrease because of the collateral blood flow via the circle of Willis; however with lower oxygen tension, the CBF in the ipsilateral hemisphere decreases significantly and results in unilateral ischemic injury. The use of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to stain and identify ischemic brain tissue was originally developed for adult models of rodent cerebral ischemia 5, and is used to evaluate the extent of cerebral infarctin at early time points up to 72 hours after the ischemic event 6. In this video, we demonstrate the hypoxic-ischemic injury model in postnatal rat brain and the evaluation of the infarct size using TTC staining.

The postnatal rat model for hypoxic-ischemic brain injury is a well-established model of human neonatal hypoxic ischemic encephalopathy (HIE). In this article, we describe the model of HIE in post-natal rat pups.

מודל hypoxic אנצפלופתיה איסכמי של איסכמיה הלידה

Hypoxic-Ischemic Encephalopathy (HIE) is the consequence of systemic asphyxia occurring at birth. Twenty five percent of neonates with HIE develop severe ...

Biology

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ultrasound and fetal echocardiography. Increasingly, these imaging modalities are being employed clinically to examine cardiac function and assess wellbeing in utero, thereby guiding timing of birth decisions. Here, we used a rabbit model of IUGR that allows analysis of cardiac function in a clinically relevant way. Using isoflurane induced anesthesia, IUGR is surgically created at gestational age day 25 by performing a laparotomy, exposing the bicornuate uterus and then ligating 40-50% of uteroplacental vessels supplying each gestational sac in a single uterine horn. The other horn in the rabbit bicornuate uterus serves as internal control fetuses. Then, after recovery at gestational age day 30 (full term), the same rabbit undergoes examination of fetal cardiac function. Anesthesia is induced with ketamine and xylazine intramuscularly, then maintained by a continuous intravenous infusion of ketamine and xylazine to minimize iatrogenic effects on fetal cardiac function. A repeat laparotomy is performed to expose each gestational sac and a microultrasound examination (VisualSonics VEVO 2100) of fetal cardiac function is performed. Placental insufficiency is evident by a raised pulsatility index or an absent or reversed end diastolic flow of the umbilical artery Doppler waveform. The ductus venosus and middle cerebral artery Doppler is then examined. Fetal echocardiography is performed by recording B mode, M mode and flow velocity waveforms in lateral and apical views. Offline calculations determine standard M-mode cardiac variables, tricuspid and mitral annular plane systolic excursion, speckle tracking and strain analysis, modified myocardial performance index and vascular flow velocity waveforms of interest. This small animal model of IUGR therefore affords examination of in utero cardiac function that is consistent with current clinical practice and is therefore useful in a translational research setting.

We describe examination of fetal cardiac function with contemporary functional fetal echocardiography and fetoplacental Doppler ultrasound using the VisualSonics VEVO 2100 microultrasound in a surgically induced model of intrauterine fetal growth restriction in a rabbit.

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Medicine

Transuterine Fetal Tracheal Occlusion Model in Mice

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). Following TO, retention of the secreted epithelial fluid increases luminal pressure and induces lung growth. Various animal models have been defined to understand the pathophysiology of CDH and TO. All have their own advantages and disadvantages such as the difficulty of the technique, the size of the animal, cost, high mortality rates, and the availability of genetic tools. Herein, a novel transuterine model of murine fetal TO is described. Pregnant mice were anesthetized, and the uterus exposed via a midline laparotomy. The trachea of selected fetuses were ligated with a single transuterine suture placed behind the trachea, one carotid artery, and one jugular vein. The dam was closed and allowed to recover. Fetuses were collected just before parturition. Lung to body weight ratio in TO fetuses was higher than that in control fetuses. This model provides researchers with a new tool to study the impact of both TO and increased luminal pressure on lung development.

Various animal models of congenital diaphragmatic hernia and fetal tracheal occlusion present advantages and disadvantages regarding ethical issues, cost, surgical difficulty, size, survival rates, and availability of genetic tools. This model provides a new tool to study the impact of both tracheal occlusion and increased luminal pressure on lung development.

מודל חסימת קנה הנשימה העוברי הטרנס-רחמי בעכברים

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). ...

Developmental Biology

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA thrombolysis) rarely produces benefits in mechanical occlusion-based experimental models, which dominate preclinical stroke research. This split between the bench and bedside suggests the need to employ tPA-responsive models in preclinical stroke research. To this end, a simple and tPA-reactive thrombotic stroke model is invented and described here. This model consists of transient occlusion of the unilateral common carotid artery and delivery of 7.5% oxygen through a face mask in adult mice for 30 min, while maintaining the animal rectal temperature at 37.5 &#177; 0.5 &#176;C. Although reversible ligation of the unilateral carotid artery or hypoxia each suppressed cerebral blood flow only transiently, the combination of both insults caused lasting reperfusion deficits, fibrin and platelet deposition, and large infarct in the middle cerebral artery-supplied territory. Importantly, tail-vein injection of recombinant tPA at 0.5, 1, or 4 hr post-tHI (10 mg/kg) provided time-dependent reduction of the mortality rate and infarct size. This new stroke model is simple and can be standardized across laboratories to compare experimental results. Further, it induces thrombosis without craniectomy or introducing pre-formed emboli. Given these unique merits, the tHI model is a useful addition to the repertoire of preclinical stroke research.

Thromboembolic stroke models are vital tools for optimizing the recanalization therapy. Here we report a murine thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxic-ischemic (tHI) insult, which triggers thrombosis and infarction, and responds favorably to tissue plasminogen activator (tPA)-mediated fibrinolysis in a therapeutic window similar to those in stroke patients.

דגם שבץ טרומבוטיים בהתבסס על היפוקסיה-איסכמיה מוחית חולפת

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature and mature brain. Stroke occurs commonly in the perinatal period in humans, and transient ischemia-reperfusion is the most common form of stroke in neonates. The reperfusion phase is a critical component of injury progression, which occurs over a period of days to weeks, and of the endogenous response to injury. This postnatal day 10 (p10) rat model of transient middle cerebral artery occlusion (tMCAO) creates a unilateral, non-hemorrhagic focal ischemia-reperfusion injury that can be utilized to study the mechanisms of focal injury and repair in the full-term-equivalent brain. The injury pattern that is produced by tMCAO is consistent and highly reproducible and can be confirmed with MRI or histological analyses. The severity of injury can be manipulated through changes in occlusion time and other methods that will be discussed.

Neonatal stroke is a significant cause of early brain injury requiring a translational model with consistent focal injury patterns and high reproducibility in order to enable study. This study describes the detailed surgical procedure for creating a non-hemorrhagic, unilateral focal ischemia-reperfusion injury in full-term-equivalent rodents.

עורקי חלוף דגם ספיג תיכון שיתוק של שבץ ילודים אצל חולדות P10

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Real-Time Assessment of Spinal Cord Microperfusion in a Porcine Model of Ischemia/Reperfusion

Spinal cord injury is a devastating complication of aortic repair. Despite developments for the prevention and treatment of spinal cord injury, its incidence is still considerably high and therefore, influences patient outcome. Microcirculation plays a key role in tissue perfusion and oxygen supply and is often dissociated from macrohemodynamics. Thus, direct evaluation of spinal cord microcirculation is essential for the development of microcirculation-targeted therapies and the evaluation of existing approaches in regard to spinal cord microcirculation. However, most of the methods do not provide real-time assessment of spinal cord microcirculation. The aim of this study is to describe a standardized protocol for real-time spinal cord microcirculatory evaluation using laser-Doppler needle probes directly inserted in the spinal cord. We used a porcine model of ischemia/reperfusion to induce deterioration of the spinal cord microcirculation. In addition, a fluorescent microsphere injection technique was used. Initially, animals were anesthetized and mechanically ventilated. Thereafter, laser-Doppler needle probe insertion was performed, followed by the placement of cerebrospinal fluid drainage. A median sternotomy was performed for exposure of the descending aorta to perform aortic cross-clamping. Ischemia/reperfusion was induced by supra-celiac aortic cross-clamping for a total of 48 min, followed by reperfusion and hemodynamic stabilization. Laser-Doppler Flux was performed in parallel with macrohemodynamic evaluation. In addition, automated cerebrospinal fluid drainage was used to maintain a stable cerebrospinal pressure. After completion of the protocol, animals were sacrificed, and the spinal cord was harvested for histopathological and microsphere analysis. The protocol reveals the feasibility of spinal cord microperfusion measurements using laser-Doppler probes and shows a marked decrease during ischemia as well as recovery after reperfusion. Results showed comparable behavior to fluorescent microsphere evaluation. In conclusion, this new protocol might provide a useful large animal model for future studies using real-time spinal cord microperfusion assessment in ischemia/reperfusion conditions.

Spinal cord microcirculation plays a pivotal role in spinal cord injury. Most methods do not allow real-time assessment of spinal cord microcirculation, which is essential for the development of microcirculation-targeted therapies. Here, we propose a protocol using Laser-Doppler-Flow Needle probes in a large animal model of ischemia/reperfusion.

הערכה בזמן אמת של מיקרופרפוזיה בחוט השדרה במודל חזירי של איסכמיה/רפרפוזיה

Spinal cord injury is a devastating complication of aortic repair. Despite developments for the prevention and treatment of spinal cord injury, its ...

Myocardial Infarction by Percutaneous Embolization Coil Deployment in a Swine Model

Myocardial infarction (MI) is the leading cause of mortality worldwide. Despite the use of evidence-based treatments, including coronary revascularization and cardiovascular drugs, a significant proportion of patients develop pathological left-ventricular remodeling and progressive heart failure following MI. Therefore, new therapeutic options, such as cellular and gene therapies, among others, have been developed to repair and regenerate injured myocardium. In this context, animal models of MI are crucial in exploring the safety and efficacy of these experimental therapies before clinical translation. Large animal models such as swine are preferred over smaller ones due to the high similarity of swine and human hearts in terms of coronary artery anatomy, cardiac kinetics, and the post-MI healing process. Here, we aimed to describe an MI model in pig by permanent coil deployment. Briefly, it comprises a percutaneous selective coronary artery cannulation through retrograde femoral access. Following coronary angiography, the coil is deployed at the target branch under fluoroscopic guidance. Finally, complete occlusion is confirmed by repeated coronary angiography. This approach is feasible, highly reproducible, and emulates the pathogenesis of human non-revascularized MI, avoiding the traditional open-chest surgery and the subsequent postoperative inflammation. Depending on the time of follow-up, the technique is suitable for acute, sub-acute, or chronic MI models.

Myocardial infarction (MI) animal models that emulate the natural process of the disease in humans are crucial to understanding pathophysiological mechanisms and testing the safety and efficacy of new emergent therapies. Here, we describe an MI swine model created by deploying a percutaneous embolization coil.

אוטם שריר הלב על ידי פריסת סליל אמבוליזציה מלעורית במודל חזירים

Myocardial infarction (MI) is the leading cause of mortality worldwide. Despite the use of evidence-based treatments, including coronary revascularization ...

Early Pathological and Magnetic Resonance Detection of Cerebral Injury Using a Rat Model of Neonatal Hypoxic Ischemic Encephalopathy

Perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) is an acute disease that may afflict newborns, resulting in variable long- and short-term neurodevelopmental outcomes. Early diagnosis is critical to identifying infants who may benefit from intervention; however, early diagnosis relies heavily on clinical criteria. No molecular or radiological tests have shown promise in detecting early cerebral injury. Studies have shown that magnetic resonance imaging (MRI) can show changes in both blood flow/ischemia and metabolic disruption. However, they have all been used to evaluate the secondary phase of the disease (&gt;12 h) after the onset of the injury. Early diagnosis is critical to rapidly starting therapeutic hypothermia in eligible infants, which is currently recommended to be initiated within 6 h of birth. The rat model of hypoxic-ischemic injury was developed in 1981 and has been validated and used extensively to study changes in brain perfusion, cerebral injury markers, and morphology. However, it has primarily been used as a "late model", evaluating injury several days after the initial ischemic insult. The model has been known to have poor sensitivity in evaluating reliable and reproducible early cerebral changes. The objective of this study was to develop a reliable model to study early gross morphological and radiological markers of HIE using pathological staining and cerebral magnetic resonance imaging/magnetic resonance spectroscopy.

<meta charset="utf8"></head><body>זיהוי פתולוגי ותהודה מגנטית מוקדמת של פגיעה מוחית באמצעות מודל חולדה של אנצפלופתיה איסכמית היפוקסית בילודים

The present protocol describes a rodent model of newborn hypoxic-ischemic injury for identifying early changes in cerebral tissue by gross morphology and magnetic resonance imaging. This has benefits over existing models, which can be used to study late injury but do not allow the evaluation of reproducible early changes.