המטרה הכוללת של פרדיגמה זו היא להעריך את האפקטיביות של תרופה פוטנציאלית נגד אלכוהול באמצעות מודלים מכרסמים של הפרעת שימוש באלכוהול. הפרעת שימוש באלכוהול מייצגת משבר גדול בבריאות הציבור. הטיפולים הנוכחיים אינם יעילים ונחוץ מחקר פרה-קליני מתמשך.
הפרוטוקול שלנו מאפשר לנו להעריך את הבטיחות והתועלת של טיפול פוטנציאלי, כמו גם להעיף מבט על הנוירוביולוגיה הבסיסית של ההפרעה עצמה. התחל את ההליך על ידי חימום סכין שירות על מבער Bunsen. באמצעות סכין זו, לחתוך בערך סנטימטר מהקצה העליון והתחתון של פלסטיק 18 מיליליטר פיפטה סרולוגית.
לאחר מכן לחמם את פיפטה תחת אקדח חום. הכנס את צינור מסבי הכדור לתוך הקצה התחתון של פיפטה. ואז באמצעות אקדח עטיפת כיווץ זמין מסחרית, לאטום את צינור לגימות במקום עם לעטוף כיווץ.
קאפ את הפתח השני עם פקק סיליקון. למגורי בעלי חיים, עם ההגעה, בית יחיד כל עכבר בכלוב פוליקרבונט פוליסולפון סטנדרטי עם מצעים, מזון ומים וטופ כלוב רשת מתכת. החל מהיום הרביעי של שבוע אחד התאקלמות דיור יחיד, למדוד ולתרשם את הגוף היומי של העכבר משקולות מזון.
למדוד את צריכת המים באמצעות תחריטים לצד הבקבוק ההפוך, כדי לתעד את הנקודה הגבוהה ביותר של המניסקוס. לאחר צריכת המים התייצב פלוס או מינוס 10% שונות מן הממוצע של שלושת הימים האחרונים, להתחיל גישה אתנול עם TBC או עשה. כדי לנהל TBS, להכין 10%פתרון אתנול ב 1, 000 מיליליטר על ידי הוספת 105.3 מיליליטר של 190 אתנול תבואה הוכחה 894.7 מיליליטר של מים, ולאחר מכן לנער אותו ביסודיות.
בהתחשב בכך שאתנול מתאדה במהירות, החלף את הפתרון פעמיים בשבוע. ביום הראשון של TBC, בכל כלוב, רוקנו את אחד משני בקבוקי המים ומלאו אותו עד אפס מקום בתסכול האתנול הטרי שהוכן. בהתחשב בכך אתנול ומים קשה להבדיל חזותית, בבירור לתייג את הבקבוקים עם התוכן המתאים שלהם.
הוסיפו עוד פתרון לבקבוק המים לפי הצורך. ואז למקם את הבקבוק בחזרה בכלוב, לוודא כי הכובע סגור בבטחה נטול כל בועות אוויר או דליפות מן זרבובית. הסר את כל בועות האוויר פשוט על ידי הקשה על הבקבוק, כך האוויר יכול לברוח הבקבוק.
לסירוגין את המיקום של הבקבוק כל יומיים כדי לתקן עבור העדפת מקום מותנה השפעות הקשורות בפעילות שתייה. רשום את רמת צריכת אתנול ולנתח את צריכת אתנול 10% יחס העדפה. ברגע צריכת אתנול הפך יציב, לנהל זריקה תוך-ניתוחית שליטה אחת לכל עכבר במהלך שגרת המדידה היומית, להרגיל את העכבר להזרקה.
לאחר שקו בסיס אתנול עם שונות נמוכה התבהר מחדש, חלק את העכברים לקבוצות בקרה וניסויים באמצעות ערכי צריכת האתנול כך שלכול הקבוצות יש ערכי צריכת אתנול ממוצעים דומים בערך. התחל מנון סמים יומי, או למשך זמן חריף או רב יומי. כדי לנהל DID, בכל יום של גישה אתנול מתוזמן, להקליט את המדידות עבור נפח המים, צריכת המזון ומשקל הגוף ולבצע מינה סמים.
בצע זאת במהלך זמן שנבחר מראש במהלך מחזור האור שנבחר בהתאם לפרמקוקינטיקה של התרופה, כך שהתרכובת מתקרבת לריכוז המוח המרבי במהלך תקופת השתייה. לאחר מכן, הכן תסכול אתנול של 20% ב- 1,000 מיליליטר על-ידי הוספת 210.5 מיליליטר של 190 אתנול תבואה הוכחה ל-789.5 מיליליטר מים. אז לנער אותו ביסודיות.
מלאו את בקבוק האתנול לפני תחילת מפגש השתייה, כך שברגע ש-DID מתחיל, ניתן פשוט להחליף את בקבוק המים בבקבוק האלכוהול. במהלך כל הפגישה עשה, להשתמש פנס אור אדום כדי לא להפריע את החיה. בתחילת הפגישה שתייה DID, אשר מתוכנן להתחיל שלוש שעות לתוך המחזור החשוך לפני מחזור האור, להקליט את נפח המים עבור כל עכבר.
לאחר מכן החלף כל בקבוק מים בבקבוק של 20% פתרון אתנול והקליט את נפח האתנול ההתחלתי. קרא והקליט את כרך האתנול הסופי שעתיים לאחר מכן בתום מפגש השתייה בימים 1 עד 3 ו-4 שעות מאוחר יותר ביום הרביעי. לאחר מכן לנתח את צריכת 20%אתנול.
לאחר מכן, להחליף את בקבוק אתנול עם בקבוק מים ולתקליט נפח המים. נתון זה מראה את הערכת ההשפעות של מנה חריפה של moxidectin בחמישה מיליגרם לקילוגרם על צריכת אתנול והעדפה. מנה אחת של moxidectin הפחיתה באופן משמעותי את צריכת האלכוהול מעל 45%בהשוואה לזריקות טרום תחמוצת והעדפה העולה על 30%10%צריכת אתנול והעדפה שניהם נשארים נמוכים משמעותית מלוחים ביום מיד לאחר טיפול MOX.
כאן, שתייה מוגזמת הייתה מודל באמצעות הליך DID. עכברים ניתנו מלוחים בימים אחד עד ארבעה עם בסיסי 20% אתנול הוקמה ביום הרביעי. בימים 1 עד 3 של המחזור השבועי השני, כל העכברים קיבלו עוד הזרקת מלוחים יומית.
ערכי צריכת האתנול מהיום השלישי שימשו לאחר מכן לפצל את העכברים לשתי קבוצות שקיבלו לאחר מכן או זריקה אחת של moxidectin בחמישה מיליגרם לקילוגרם או מלוחים ביום הרביעי. בשבוע שלאחר מכן, כל העכברים קיבלו זריקות מלוחים יומיות בימים 1 עד 4 וצריכת אתנול נמדדה שוב ביום הרביעי. ניהול חריף של MOX נותח ומצא להפחית באופן משמעותי את צריכת האלכוהול מעל 54% בהשוואה לזריקות לפני סמים.
זכור כי ניסויים עתידיים באמצעות פרוטוקול זה חייב להיעשות כדי להעריך את המנגנון, מנון ורעילות של תרופה פוטנציאלית, כמו גם כדי להעריך את האפקטיביות שלה ביחס לאפשרויות הטיפול הנוכחיות.
