בית החולים הכללי של וינה והאוניברסיטה הרפואית של וינה מספקים בחביבות את התשתית למעבדה המודינמית הכבד בווינה. חברים קודמים במעבדה המודינמית הכבד בווינה ועמיתים לעבודה צריכים להיות מוכרים על הקלט החשוב שלהם שעזר לשפר ללא הרף את המתודולוגיה של מדידת HVPG וביופסיה של כבד transjugular במוסד שלנו. בנוסף, אנו מודים לאחיות האגף לגסטרואנטרולוגיה והפטולוגיה שהן חלק חיוני מהמעבדה המודינמית של וינה ומספקות ללא הרף למטופלים טיפול מצוין.

הפרוטוקול המתואר כאן תואם את ההנחיות של ועדת האתיקה של המחקר האנושי של האוניברסיטה הרפואית של וינה.
1. הכנות
<ol><li>השתמשו בחדר ייעודי/מאושר להליכים באמצעות צילום רנטגן המצויד במערכת פלואורוסקופיה דיגיטלית לרנטגן (איור 1A),מערכת צגים (איור 1B), מקליט לחץ ומתמר (איור 1C)המחוברים למדפסת או לתוכנת הקלטה, ומכשיר אולטרסאונד (איור 1D). כמו כן, ודאו שיש מספיק מקום לאזור עבודה סטרילי (איור 1E)ליד ספסל המטופל.</li>
	<li>להעריך חולים עם חשד למחלת כבד כרונית מתקדמת (ACLD) עבור CSPH על ידי מדידה של HVPG. בפרט, חולים עם אחת מהתכונות הבאות עשויים לעבור מדידת HVPG: תרומבוציטופניה <150 G/L, בטחונות portosystemic על הדמיה חתך, דליות gastroesophageal לפני תחילת טיפול בטאבלוקר לא סלקטיבי, מיימת, וגידולים בכבד המתוכננים כריתה.</li>
	<li>השתמש בהתוויות נגד ההליך הבאות: (i), היעדר גישה לכלי הדם עקב פקקת ורידים הצוואריים או הפרשים, (ii) הפרעות דימום קליניות (למשל קרישה תוך וסקולרית מופצת), (iii) דלקת חזה נגדית, ו-(iv) הפרעות קצב לב משמעותיות.</li>
	<li>ודא כי המטופל מהודק ונתן הסכמה מדעת בכתב לאחר שנודע לו על המטרה והסיכונים הפוטנציאליים של ההליך.</li>
	<li>הסבר כי ההליך חייב להתבצע ללא הרדמה כללית. עם זאת, מינונים נמוכים של midazolam (עד 0.02 מ"ג /ק"ג bodyweight) עשוי להיות מוצע לחולים חרדים.</li>
	<li>נטר את הסימנים החיוניים של המטופל על ידי מדידת לחץ דם עורקי לא פולשני, אוקסימטריית דופק ואלקטרוקרדיוגרפיה באמצעות מערכת צג סטנדרטית.</li>
	<li>לשטוף את מתמר הלחץ להגדיר באמצעות תמיסת מלח סטרילית בשקית לחץ.</li>
	<li>כייל את מתמר הלחץ (אם לא מכויל מראש, כייל כנגד הפניה ללחץ חיצוני לפני התחלת המדידות, למשל באמצעות עמוד מים שבו 13.6 ס"מ H2O שווה 10 מ"מ Hg).</li>
	<li>מניחים את המתמר ברמה של האטריום הנכון על ידי כיוון לקו midaxillary של המטופל.</li>
	<li>הכן את מקליט הלחץ / תוכנת הקלטה כדי להיות מוכן להקלטת מעקבי לחץ.</li>
	<li>ודא שכל הציוד הסטרילי הדרוש מוכן (ראה טבלת חומרים).</li>
	<li>בקש מהמטופל לקחת תנוחת על-חוש על ספסל המטופל.</li>
	<li>יש למפעיל לשטוף ולחטא אותה / ידיו ואמותיו.</li>
	<li>חבוש כובע כירורגי ומסכת פנים, כפפות סטריליות ומעיל סטרילי.</li>
	<li>השתמש בכיסוי טבלה סטרילי והכן אזור עבודה סטרילי עבור הציוד הדרוש לגישה הוורידית המרכזית (איור 2A).</li>
</ol>2. גישה ורידית מרכזית בתנאים סטריליים
<ol><li>הורו למטופל לסובב מעט את ראשו לצד שמאל, ולאחר מכן לחטא את אזור הצוואר הימני והצוואר הצדדי בתמיסת חיטוי.</li>
	<li>מניחים מגבות סטריליות המכסות את העור סביב משולש העורק.</li>
	<li>השתמש בבדיקת אולטרסאונד (מכוסה על ידי נדן כיסוי בדיקה אמריקאי סטרילי) כדי לזהות את הווריד הצווארי הפנימי הנכון ואתר הניקוב המתאים.</li>
	<li>לחדור את האזור של גישה כלי דם הבאים עם מחט 21 G ולהחיל הרדמה מקומית (לידוקאין 2%, 5 מ"ל). לאחר מכן, המתן 1-2 דקות להשפעתו המלאה.</li>
	<li>הכינו את כל החומרים הדרושים לגישה ורידית מרכזית (ראו טבלת חומרים).</li>
	<li>באמצעות הציוד של 7.5 F קטטר נדן מבוא להגדיר, למקם את המחט בווריד הצוואר הפנימי הנכון באמצעות הדרכה אולטרסאונד ולקדם את המדריך דרך המחט באמצעות טכניקת סלדינגר (איור 3A). הערה: אם יש לבצע ביופסיה transjugular לאחר מדידת HVPG, יש להשתמש בסט נדן מבוא לביופסיה של כבד בקוטר 10 F (עם מחט נוספת של 18 G וחוט מדריך) יש להשתמש.</li>
	<li>הפוך חתך 2-3 מ"מ לאורך המדריך באמצעות אזמל להב 11 כדי להקל על המבוא של נדן גישה לכלי הדם טעון עם dilatator.</li>
	<li>הכנס את הגישה לכלי הדם נדן מלעורית טעון עם dilatator לתוך הווריד הצווארי הפנימי על חוט ההנחיה.</li>
	<li>הסר את המדריך ואת החלוקה של נדן הגישה לכלי הדם.</li>
	<li>ודאו שמעטפת הגישה לכלי הדם נשארת במצב תוך-וסקולרי יציב וכוונו את יציאת ההזרקה של נדן הגישה לכלי הדם לכיוון הצד הצדדי (איור 3B). הערה: אין צורך בתפירה או בהקלטה.</li>
</ol>3. מיקום קטטר הבלון בווריד הכבד
<ol><li>הכינו את כל החומרים הדרושים להצבת קטטר הבלון בווריד הכבד(איור 2B).</li>
	<li>לשטוף את קטטר בלון עם מדיה ניגודית (צבע) ולבדוק את שלמות הבלון על ידי אי ספיקה חוזרת ונשנית / דפלציה עם קצה קטטר שקוע תמיסת מלח. אין בועות אוויר צריך להתרחש. הערה: בהתאם לנראות של הקטטר עצמו ברנטגן, אתה יכול גם להשתמש רק מלוחים סטריליים או צבע מדולל לשטוף את לומן כלי הדם של הקטטר.</li>
	<li>להרטיב את קטטר הבלון מבחוץ עם תמיסת מלח סטרילית לפני החדרתו לתוך נדן גישה לכלי הדם.</li>
	<li>לקדם את קטטר הבלון תחת הדרכה פלואורוסקופית לתוך וריד קאווה נחות (IVC). יישור קצה קטטר הבלון לכיוון החלק האחורי של המטופל וסיבובים קלים של הקטטר בדרך כלל מאפשר להתקדם מהאטריום הימני ל- IVC. הנחיית המטופל לשאוף עמוק עשויה לסייע במקרים מסוימים (איור 3B).</li>
	<li>קדם את קטטר הבלון מה- IVC לווריד הכבד. נסו לקבל גישה לוורידים הכבדיים על ידי תנועה חוזרת ונשנית עם קצה קטטר הבלון הפונה ימינה לכיוון האזור החשוד בצומת הוורידים הכבדיים וה- IVC(איור 3C).</li>
	<li>ודא כי הקטטר מתקדם למצב יציב המאפשר מדידה חוזרת ונשנית של לחץ ורידי כבד חינם (FHVP) במרחק של 2-4 ס"מ מפתיחתו לתוך IVC ומרחב הולם עבור הבלון המנופח בלון לומן של וריד הכבד על מנת להקליט את הלחץ הוורידי הכבד תקוע (WHVP).</li>
	<li>בדוק אם יש חסימה נאותה של הווריד (תנוחת טריז) על ידי ניפוח הבלון (כ-2 מ"ל אוויר לתוך לומן הבלון) והזרקת חומר ניגודיות (כ-5 מ"ל לתוך לומן כלי הדם) עד שהווריד הכבדי מתפורר לבלון המנופח (איור 3D).</li>
	<li>שימו לב לקיפאון של אמצעי הניגוד והוציאו את המדיה המנוגדת עקב חסימה לא מספקת של לומן ורידי על ידי הבלון או בשל נוכחות של תקשורת ורידים. אם נצפתה סחף משמעותי של מדיה עם ניגודיות, נסו למקם מחדש את קטטר הבלון.</li>
	<li>לנפח את הבלון ולשטוף את לומן של קטטר עם מלוחים.</li>
</ol>4. קריאות המודינמיות להערכת HVPG
<ol><li>חבר את לומן כלי הדם של קטטר הבלון אל מתמר הלחץ באמצעות קו עירוי.</li>
	<li>התחל להקליט את FHVP עם קצה הבלון 2-4 ס"מ מפתיחת וריד הכבד ל- IVC. צורת הגל של העקומה חייבת להיות יציבה ללא שינויים לאורך זמן. הערה: ערכים יציבים מתקבלים בדרך כלל לאחר 15 שניות.</li>
	<li>לנפח את הבלון ולהמשיך להקליט את WHVP עד המדידה הופכת קו אופקי יציב ללא וריאציות לאורך זמן. הערה: מעקבים יציבים של הלחץ תקוע מתקבלים בדרך כלל לאחר >40 s.</li>
	<li>חזור על המדידה של FHVG (>15 s) ו- WHVP (>40 s) לפחות שלוש פעמים כדי לקבל קריאות משולשות באיכות גבוהה (איור 3E). הערה: אם נצפו פערים משמעותיים של ≥2 מ"מ Hg בין קריאות FHVP/WHVP הבודדות, יש לבצע מדידות נוספות. שים לב לסיבות לחפצים פוטנציאליים, כגון שיעול, הזזה או דיבור בנקודות הזמן המתאימות של הקלטה המודינמית.</li>
	<li>לחץ שיא IVC ברמה של אוסטיום של וריד הכבד, כמו גם את הלחץ התוך הדרך הנכון (ראפ).</li>
	<li>תפסיק את ההקלטות.</li>
	<li>הסר את קטטר הבלון.</li>
	<li>חשב HVPG (FHVP מופחת מ WHVP) כ ממוצע של 3 מדידות. הערה: אם נרשמים הבדלים משמעותיים ≥2 מ"מ Hg בין קריאות HVPG שהתקבלו ברצף, יש לבצע מדידות נוספות.</li>
	<li>המשך לביופסיה transjugular (שלב 5.1) או להסיר את נדן מבוא קטטר מן הווריד הצוואר הפנימי. הערה: הוספת חוט מנחה נוקשה עשויה לעזור להגיע לאותה תנוחה תוך-הפטית לביופסיה הבאה של הכבד הטרנסג'וגולרי.</li>
	<li>יש להפעיל לחץ על גבי אתר החדרת כלי הדם של הווריד הצווארי הפנימי למשך 5 דקות לפחות באמצעות גזה סטרילית.</li>
</ol>5. הכנה לביופסיה של כבד transjugular
הערה: שתי מתודולוגיות ביופסיה שונות עשויות לשמש להשגת ביופסיה של כבד transjugular: שאיפה (שלב 6) או ביופסיה הליבה (שלב 7). תחילה להחליט באיזו מערכת להשתמש ולאחר מכן לבחור את נדן מבוא מחט ביופסיה המתאים לפני שתמשיך עם שלבים 5.1 כדי 5.3). לחלופין, המחט של ערכת הליבה TJBLX ניתן גם להכניס לתוך ערכת השאיפה (הערה: להשתמש בקוטרים המתאימים), אשר תוצאות מערכת ביופסיה ליבה גמישה יותר שעשוי להיות קל יותר להכניס לתוך וריד הכבד (הערה: גישה זו אינה מתוארת בפירוט כאן).
<ol><li>הכינו את ערכת הביופסיה של הכבד הטרנסג'וגולרי בהתאמה (TJLBX) (שאיפה TJLBX: איור 4A-B; ליבת TJLBX: איור 4C; ראה טבלת חומרים).</li>
	<li>לשטוף את נדן מבוא מחט ביופסיה עם מלוחים סטריליים או, במקרה של ביופסיה כבד שאיפה transjugular, עם סוכן ניגוד להדמיה טובה יותר.</li>
	<li>לקדם את נדן מבוא מחט ביופסיה לתוך וריד הכבד באמצעות אותה טכניקה כמתואר ב 3.4.</li>
	<li>בהתאם לסט הביופסיה המשמש, המשך לשלב 6.1 עבור שאיפה TJBX או לשלב 7.1 עבור TJBX הליבה.</li>
</ol>6. ביופסיה כבד שאיפה Transjugular
<ol><li>השתמש מזרק 10 מ"ל לואר-נעילה כדי לשטוף את השאיפה TJLBX מחט עם מלוחים סטריליים, עם זאת, להשאיר על 3 מ"ל במזרק כדי להקל על השאיפה.</li>
	<li>לקדם את מחט הביופסיה בעדינות דרך נדן מבוא מחט ביופסיה עד קצה המחט מגיע לסוף נדן המבוא. הערה: הימנע מכל כוח או תנועות מהירות תוך קידום המחט. לבקש מהמטופל לקחת נשימה עמוקה יקטין את הזווית בין ה- IVC לוורידים הכבדיים לקידום קל יותר של מחט הביופסיה.</li>
	<li>תבקש מהמטופל לעצור את נשימתו.</li>
	<li>החל יניקה באמצעות מזרק 10 מ"ל Luer-lock ולקדם את המחט לתוך parenchyma הכבד.</li>
	<li>לבטל את המחט תוך עדיין החלת יניקה (לחץ שלילי).</li>
	<li>עצה החולה להמשיך לנשום כרגיל.</li>
	<li>הסר את המחט (אבל לא את נדן מבוא המחט) ולקצור את דגימת הכבד. הערה: דגימת הכבד נשמרת בדרך כלל במזרק, לא במחט (איור 4D).</li>
	<li>חזור על שלבים 6.1 כדי 6.6 עבור מעברי מחט נוספים עד דגימות כבד מספיק מתקבלים.</li>
	<li>להזריק 5-10 מ"ל של מדיה ניגודית על נדן מבוא קטטר לשלול ניקוב של כמוסת הכבד.</li>
	<li>הסר את נדן המבוא של מחט הביופסיה.</li>
	<li>הסר את 10 F ביופסיה הכבד להגדיר נדן מבוא ולהפעיל לחץ על גבי אתר החדרת כלי הדם של הווריד הצווארי הפנימי לפחות 5 דקות באמצעות גזות סטריליות.</li>
</ol>7. ביופסיה כבד ליבה TRANSJUGULAR
<ol><li>לטעון את המחט TJLBX הליבה על ידי משיכת האחיזה עד מנגנון הירי נעול. לקדם את מחט ביופסיה הליבה בעדינות דרך נדן מבוא מחט ביופסיה עד קצה המחט מתקרב לסוף נדן המבוא. הערה: הימנע מכל כוח או תנועות מהירות תוך קידום המחט.</li>
	<li>בקש מהמטופל לעצור את נשימתו.</li>
	<li>לקדם את המחט לתוך parenchyma הכבד.</li>
	<li>בצע את הביופסיה הליבה על ידי לחיצה על ההדק של מנגנון הירי.</li>
	<li>עצה החולה להמשיך לנשום כרגיל.</li>
	<li>הסר את המחט (אבל לא את נדן מבוא המחט) ולקצור את דגימת הכבד. מחט קטנה עשויה לסייע בהסרת דגימת הכבד (איור 4D).</li>
	<li>חזור על שלבים 7.1 כדי 7.6 עבור מעברי מחט נוספים עד דגימות כבד מספיק מתקבלים.</li>
	<li>להזריק 5-10 מ"ל של מדיה ניגודית מעל היציאה הצדדית של נדן מבוא קטטר לשלול ניקוב של כמוסת הכבד.</li>
	<li>הסר את נדן המבוא של מחט הביופסיה.</li>
	<li>הסר את 10 F ביופסיה כבד להגדיר נדן מבוא ולהפעיל לחץ על גבי אתר החדרת כלי הדם של הווריד הצווארי הפנימי במשך כ 5 דקות באמצעות גזות סטריליות.</li>
</ol>

תומאס רייברגר קיבל מענק ותמיכה חומרית על ידי קוק מדיקל, כמו גם להעניק תמיכה וכבוד להרצאות של W.L. Gore & Associates. לפיליפ שוואבל, מרקוס פק-רדוסבלייביץ' ומייקל טראונר אין מה לחשוף בנוגע לכתב היד הזה. מתיאס מנדורפר קיבל אות הוקרה על הרצאות מ-W.L. Gore ושות'.

בעוד מדידות HVPG דורשות משאבים ניכרים ואישיות מיומנת עם מיומנויות התערבותיות ומומחיות בקריאת מעקבי לחץ, היא משפרת את הפרוגנוזה ועשויה להנחות החלטות טיפול, ובכך להקל על רפואה מותאמת אישית. בנוסף, ההזדמנות להשיג בבטחה דגימות ביופסיה בכבד דרך המסלול transjugular באותו מושב הוא טיעון נוסף לטובת ייש?...

חולים עם שחמת נמצאים בסיכון לפתח סיבוכים הקשורים בעיקר ליתר לחץ דם פורטל (PHT), כגון מיימת או דימום דליות קיבה או ושט1,2,3. הסיכון לפיצוי בכבד קשור למידת PHT2. מדידה של שיפוע הלחץ הורידי בכבד (HVPG) הוא תקן הזהב להערכת לחץ ורידי פורטל בחולה עם שחמת הכבד, כלומר הערכת חומרת יתר לחץ דם פורטל סינוסואידי4. HVPG של ≥6 מ"מ ל-9 מ"מ מהג מציין לחץ פורטל גבוה ('יתר לחץ דם תת-קוליני בפורטל'), ואילו HVPG ≥10 מ"מ HG מגדיר CSPH. פרוטוקול זה מספק תיאור מפורט של הציוד וההליך וגם מדגיש מכשולים פוטנציאליים ומציע עצות לפתרון בעיות.
מבחינה קלינית, מדידה של HVPG מצוין (i) כדי להקים את האבחנה של יתר לחץ דם פורטל סינוסואידי, (ii) כדי לזהות חולים בסיכון לפירוק הכבד על ידי אבחון CSPH (HVPG ≥10 מ"מ Hg), (iii) כדי להנחות טיפול תרופתי בומניעה ראשונית או משנית של דימום ודלי, ו (iv) כדי להעריך את הסיכון לכשל בכבד לאחר כריתת כבד חלקית2,4. HVPG משמש כסמן פונדקאי מבוסס לשיפור ו/או החמרה של פיברוזיס/תפקוד בכבד, שכן ירידה ב- HVPG מתורגמת לתועלת משמעותית קלינית5, ואילו ערכי HVPG גבוהים יותר קשורים לסיכון מוגבר לדימום בדלייה6. בהתבסס על תצפיות על שינויים ב- HVPG בחולים תחת חוסם בטא לא סלקטיבי (NSBB) או טיפולים אטיולוגיים, ירידה ב- HVPG של 10% נחשבת רלוונטית קלינית7,8.
נכון להיום, אין פרמטרים חלופיים ולא פולשניים המשקפים את מידת הלחץ בפורטל בדיוק דומה לזה של HVPG. גם אם HVPG היא למעשה דרך 'עקיפה' למדוד לחץ פורטל, זה מאוד בקורלציה ובכך משקף במדויק 'ישירות' נמדד לחץ פורטל בחולים עם שחמתהכבד 9. חשוב לציין, מדידות HVPG צריך להתבצע באמצעות קטטר בלון כדי למקסם את הכמות המוערכת של parenchyma הכבד10,11,12. למרות מדידות HVPG הם פולשניים, עתירי משאבים, ודורשים מיומנויות התערבות ומומחיות בפרשנות האמינות והסבירות של קריאות לחץ, שיטה זו היא תקן הזהב הנוכחי לאבחון וניטור יתר לחץ דם פורטל בחולים עם שחמתהכבד 13,14,15.
ערכי מעבדה פשוטים, כגון ספירת טסיות הדם, עשויים לסייע בהערכת הסבירות עבור CSPH. עם זאת, ספירת טסיות הדם, או ציונים לא פולשניים הכוללים ספירת טסיות הדם, יש ערך חיזוי מוגבל16. הדמיה אופנים המראים splenomegaly17 או בטחונות portosystemic18 בחולים עם שחמת מציע נוכחות של CSPH, אבל אינם מועילים לכימות מידת יתר לחץ דם הפורטל בפועל. כלי הדמיה חדשניים ולא פולשניים, כגון אלסטוגרפיה של הכבד19 ו /או של הטחול20 שימושיים עבור פסיקה או שלילת נוכחות של CSPH. עדיין, אף אחת מהשיטות הזמינות אינה מסוגלת למדוד ישירות שינויים דינמיים בלחץ הפורטל21.
הערך הפרוגנוסטי של HVPG הודגם על ידי מספר מחקרים חשובים, מראה כי HVPG ≥10 מ"מ Hg (כלומר CSPH) הוא חזוי להיווצרות של varices8 (ועל התפתחות סיבוכים הקשורים ליתר לחץ דם פורטל22, בעוד (פרמקולוגית המושרה) ירידה של HVPG מווסת את הסיכון המתאים של צמיחה 23 ופירוק7. תגובת HVPG היא הפונדקאית המבוססת היחידה ליעילות של NSBB במניעת דימום דליות (חוזר) . אם HVPG יורד לערך של ≤12 מ"מ Hg או מופחת על ידי ≥10-20% במהלך טיפול NSBB, חולים מוגנים מפני דימום דליות והישרדות מוגברת24,25. באופן דומה, תגובת HVPG גם מקטין את השכיחות של מיימת וסיבוכים הקשורים בחולים עם שחמת מפוצה5,26. מספר מחקרים סיפקו ראיות התומכות בשימוש בטיפול מונחה HVPG27,28,29,30,31,32. לכן, במרכזים עם ניסיון מספיק, HVPG-המענה עשוי להנחות החלטות טיפול, להקל על רפואה מותאמת אישית עבור חולים עם יתר לחץ דם פורטל.
יתר על כן, מדידה של HVPG עשוי לשמש נקודת קצה פונדקאית עבור הוכחת הרעיון מחקרים להעריך את האפקטיביות של טיפולים חדשניים שחמת ו / או יתר לחץ דם פורטל מתורגם מספסל למיטה, כגון sorafenib33,34, simvastatin35,36, טאורין37, או אמריסאן38. בסופו של דבר, מדידות של HVPG יכול גם לספק מידע פרוגנוסטי חשוב על הסיכון להתפתחות של HCC39 ועל אי ספיקת כבד לאחר כריתת הכבד40.
התשתית למדידת HVPG צריכה להיות זמינה במרכזי טיפול משניים ושלישוניים. מאז הטכניקה של מדידת HVPG דורש הכשרה וציוד מיוחדים, זה נראה רציונלי עבור מרכזים אקדמיים והשתלות להקים מעבדה hemodynamic הכבד, להקל על אבחון המדינה-of-the-art וניהול של יתר לחץ דם פורטל. מרכזי נפח גדולים מבצעים כמה מאות מדידות HVPG בשנה. על סמך הניסיון שלנו, מומחיות מספקת לביצוע מדידות HVPG מדויקות מתקבלת בדרך כלל לאחר מדידות HVPG בפיקוח של 50-100.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1628px;" width="1627">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:315px;">10 mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:335px;">Braun</td>
			<td style="width:317px;">REF 4617100V, LOT 17G03C8</td>
			<td style="width:661px;">Luer-Lock Syringe for connection with the aspiration biopsy set</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 mL Syringe 2x</td>
			<td>Braun</td>
			<td style="width:317px;">REF 4606108V</td>
			<td>Snonpyrogenic, nontoxic 10 mL syringe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 F liver biopsy&#160; introducer sheath set</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF RCFW-10.0-38, REF G07600</td>
			<td>Percutaneous Sheath Introducer Set (TJBX), 10F Port, 13cm, Check-Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">18 G needle for biopsy introducer sheat</td>
			<td>Arrow International</td>
			<td style="width:317px;">REF AN-04318</td>
			<td>Introducer Needle for TJBX Set, 18 G, 6.35 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">21 G needle</td>
			<td>Henke Sass Wolf</td>
			<td style="width:317px;">REF 0086, Fine-Ject 21Gx2&#34;</td>
			<td>Sterile injeciton needle, 21 Gx2&#34;, 0.8 x 50 mm, for local anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3-way channels</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td style="width:317px;">BD Connecta Luer-Lok, REF 39402</td>
			<td>Three way channel with Luer-Lok connection system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7.5 F catheter introducer sheath set</td>
			<td>Arrow International</td>
			<td style="width:317px;">REF SI_09875-E</td>
			<td>Percutaneous Sheath Introducer Set, 7.5 F Port</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Aspiration TJLBX set</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF RMT-16-51.0-TJL, REF G20521</td>
			<td>TJ Liver Access and Biopsy Needle Set (Aspiration Set), 9 F-45 cm, 16 G-50.5 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Balloon catheter</td>
			<td>Gerhard Pejcl Medizintechnik Austria</td>
			<td style="width:317px;">REF 500765B</td>
			<td>Ferlitsch HVPG Catheter, 7F-65cm, Balloon:2.5mL, Pressure 50-90 kPa, GW: 0.032&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Blade 11 scalpel</td>
			<td>Medi-Safe Surgicals</td>
			<td style="width:317px;">MS Safety Scalpel REF /Batch 18012424</td>
			<td>11 blade safety scalpels, retractable, single use, 10 scalpels per package</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Blunt tip fill needle</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td style="width:317px;">REF 303129</td>
			<td>Sterile blunt tip fill needle, single use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Contrast media (dye)</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH, Bensheim, GER</td>
			<td style="width:317px;">ZNR 1-24112</td>
			<td>Peritrast 300 mg Iod/mL, 50 mL, contrastmedia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Core TJLBX set</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF RMT-14XT-50.5-LABS-100, REF G08285</td>
			<td>TJ Needle Introducer and Bx-Needle 7 F-53.5 cm, 14 G-53.5 cm/20 mm, 18 G-60 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Digital x-ray fluoroscope system</td>
			<td>Siemens</td>
			<td style="width:317px;">Model No 07721710</td>
			<td>ARCADIS Varic, mobile x-ray fluoroscope system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Disinfectant solution</td>
			<td>Gebro Pharma</td>
			<td style="width:317px;">1-20413</td>
			<td>Isozid-H</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Face mask</td>
			<td>MSP Medizintechnik GmbH</td>
			<td style="width:317px;">REF HSO36984</td>
			<td>Surgical face mask from double fleece, with tie, 50 pieces</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Guide wire for biopsy introducer sheat</td>
			<td>Arrow International</td>
			<td style="width:317px;">REF AW-14732</td>
			<td>Marked Spring-Wire Guide, TJBX Set, 0.032&#34;, 0.81 mm, 68 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Infusion line</td>
			<td>Rosstec Medical Products b Cardea GmbH &#38; Co</td>
			<td style="width:317px;">REF 220010, 100m</td>
			<td>Infusion line, Luer-Lok for connection of balloon catheter and pressure transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lidocaine 2%</td>
			<td>Gebro Pharma</td>
			<td style="width:317px;">Xylanaest, ZNR 17.792, 20mg/1mL (2%)</td>
			<td>Sterile vials Xylanest including 2% Lidocain hydrochloride for local anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Midazolame</td>
			<td>Roche</td>
			<td style="width:317px;">Dormicum, ZNr 1-18809, Midazolam 5mg/5mL</td>
			<td>Sterile vials Dormicum including Midazolam for sedation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Monitor system</td>
			<td>Datex-Ohmeda by GE</td>
			<td style="width:317px;">Type F-CMREC1</td>
			<td>Patient monitoring system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Patient bench</td>
			<td>Silerlen-MAQET</td>
			<td style="width:317px;">Model No 7474.00A</td>
			<td>Mobile patient bench for x-ray fluoroscopy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure bag</td>
			<td>Ethox Corp</td>
			<td style="width:317px;">REF 4005</td>
			<td>Pressure Infuser Bag 500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure recorder</td>
			<td>Edwards Lifesciences</td>
			<td style="width:317px;">Ref T001631A, Lot 61202039</td>
			<td>TruWave 3 cc/150 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure transducer</td>
			<td>Edwards Lifesciences TM</td>
			<td style="width:317px;">REF T001631A</td>
			<td>Pressure Monitoring Set (1x), 3 cc/150 cm, TruWave TM</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Recording software&#160;</td>
			<td>Datex Ohmeda by GE</td>
			<td style="width:317px;">Software S/5 is property of Instrumentarium Corp of Datex-Ohmeda TM</td>
			<td>Datex-Ohmeda S/5TM Collect - Software to record pressure tracings of the patient monitor system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile coat</td>
			<td>Lohmann &#38; Rauscher International GmbH &#38; Co</td>
			<td style="width:317px;">REF 19351</td>
			<td>Surgical Gown, Different sizes, e.g. L-130 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile gauze</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td style="width:317px;">REF 401798, 10x10cm gauze</td>
			<td>10 x 10 cm sterile gauze, 10 pieces per package</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile gloves</td>
			<td>Meditrade</td>
			<td style="width:317px;">REF 9021</td>
			<td>Gentle Skin sterile gloves, different sizes, e.g. 7.5</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile saline solution</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td style="width:317px;">NaCl 0.9%, B009827 REV 03</td>
			<td>Physiologic Saline Solution 0.9% NaCl, 309 mosmol/L, pH-Wert: 4.5-7.0</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile saline vessel</td>
			<td>KLS Martin</td>
			<td style="width:317px;">REF K8A,&#160; 18/10 Jonas</td>
			<td>Sterilizable Metal Vessel for sterile saline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile table cover</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td style="width:317px;">REF 2502208</td>
			<td>Table Cover, Foliodrape 150 x 100 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile towel</td>
			<td>BARRIER by M&#246;lnlycke Health Care</td>
			<td style="width:317px;">REF 706900</td>
			<td>Adhesive OP-Towel, 100 x 100 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile US probe cover sheath</td>
			<td>Websinger</td>
			<td style="width:317px;">REF 07014</td>
			<td>Sterile ultrasound probe cover, 20 x 60 cm, inluding two sterie adhesive tapes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stiff guidewire</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF TSMG-35-180-4-LES, G46729</td>
			<td>Lunderquist Extra Stiff Wire Guide, 0.035&#34;-.89 mm, 180 cm, 4 cm flexible tip</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical cap</td>
			<td>BARRIER by M&#246;lnlycke Health Care</td>
			<td style="width:317px;">REF 620500, PCS 100, Colour Green</td>
			<td>Surgical Cap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ultrasound device</td>
			<td>FUJIFILM SonoSite</td>
			<td style="width:317px;">Model M-Turbo, REF P17000-17</td>
			<td>Mobile ultrasound system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of the hepatic venous pressure gradient and transjugular liver biopsy

כאן אנו מספקים פרוטוקול מפורט המתאר את ההליך הקליני של מדידת שיפוע לחץ ורידי בכבד (HVPG) בחולים עם מחלת כבד כרונית מתקדמת ואחריו הוראה לביופסיה transjugular. תחת הרדמה מקומית והדרכה אולטרסאונד, נדן מבוא קטטר ממוקם בווריד הצוואר הפנימי הנכון. באמצעות הדרכה פלואורוסקופית, קטטר בלון מתקדם לתוך הווריד הווריד הנחות (IVC) ומוכנס לתוך וריד גדול בכבד. מיקום טריז נכון ומספיק של קטטר מובטחת על ידי הזרקת מדיה ניגודית בעוד הבלון חוסם את הזרימה של וריד הכבד cannulated. לאחר כיול מתמר הלחץ החיצוני, מתקבלות הקלטות לחץ רציף עם הקלטות משולשות של לחץ ורידי כבד תקוע (WHVP) ולחץ ורידי כבד חינם (FHVP). ההבדל בין FHVP ל-WHVP מכונה HVPG, עם ערכים ≥10 מ"מ Hg המצביעים על יתר לחץ דם משמעותי קלינית בפורטל (CSPH). לפני הסרת הקטטר, קריאות לחץ המתקבלות IVC באותה רמה, כמו גם את הלחץ הפטרוני הנכון נרשמים.
לבסוף, ביופסיה של כבד transjugular ניתן להשיג דרך אותו מסלול כלי דם. מערכות שונות זמינות; עם זאת, מחטי ביופסיה הליבה עדיפים על מחטי שאיפה, במיוחד עבור כבדים cirrhotic. שוב, תחת הדרכה פלואורוסקופית נדן מבוא מחט ביופסיה מתקדם לתוך וריד הכבד. לאחר מכן, מחט ביופסיה transjugular מתקדם בעדינות דרך נדן המבוא: (i) במקרה של ביופסיה שאיפה, המחט מתקדמת לתוך parenchyma הכבד תחת שאיפה ולאחר מכן הוסר במהירות, או (ii) במקרה של ביופסיה הליבה, מנגנון החיתוך מופעל בתוך parenchyma. מספר מעברים נפרדים ניתן לבצע בבטחה כדי להשיג דגימות כבד מספיק באמצעות ביופסיה transjugular. בידיים מנוסות, השילוב של הליכים אלה לוקח בערך 30-45 דקות.

בחולים עם תפקוד כבד שמור היטב (כלומר ללא כל היסטוריה של פיצוי בכבד, כגון מיימת או דימום דליות) ערכי HVPG הנמדדים עשויים להיות נורמליים או בטווח של יתר לחץ דם פורטל תת-קוליני (HVPG 6-9 מ"מ Hg). עם זאת, חולים מתוגמלים עלולים לפתח CSPH (HVPG ≥10 מ"מ Hg) אשר מציין סיכון מוגבר לפתח דליות או פיצוי בכבד. בתורו, חולי?...

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of the Hepatic Venous Pressure Gradient and Transjugular Liver Biopsy at JoVE.com

Measurement of the Hepatic Venous Pressure Gradient and Transjugular Liver Biopsy

כאן, אנו מציגים פרוטוקול למדידת שיפוע לחץ ורידי בכבד (HVPG), תקן הזהב לאבחון יתר לחץ דם פורטל משמעותי קלינית. יתר על כן, אנו מתארים כיצד לבצע ביופסיה כבד transjugular בתוך אותה הפעלה.

מדידה של שיפוע לחץ ורידי בכבד וביופסיה של כבד Transjugular

Here we provide a detailed protocol describing the clinical procedure of hepatic venous pressure gradient (HVPG) measurement in patients with advanced ...

measurement-hepatic-venous-pressure-gradient-transjugular-liver

Research

JoVE Journal

Medicine

19.2K Views.  Medical University of Vienna. כאן, אנו מציגים פרוטוקול למדידת שיפוע לחץ ורידי בכבד (HVPG), תקן הזהב לאבחון יתר לחץ דם פורטל משמעותי קלינית. יתר על כן, אנו מתארים כיצד לבצע ביופסיה כבד transjugular בתוך אותה הפעלה.

Video: Measurement of the Hepatic Venous Pressure Gradient and Transjugular Liver Biopsy

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and cardiac arrest. This elevation may result in further neurological injury, in the form of transtentorial herniation1,2,3,4, midbrain compression, neurological deficit or increased cerebral infarct2,4. Current therapies are often inadequate to control elevated ICP in the clinical setting5,6,7 . Thus there is a need for accurate methods of ICP measurement in animal models to further our understanding of the basic mechanisms and to develop new treatments for elevated ICP.
In both the clinical and experimental setting ICP cannot be estimated without direct measurement. Several methods of ICP catheter insertion currently exist. Of these the intraventricular catheter has become the clinical 'gold standard' of ICP measurement in humans8. This method involves the partial removal of skull and the instrumentation of the catheter through brain tissue. Consequently, intraventricular catheters have an infection rate of 6-11%9. For this reason, subdural and epidural cannulations have become the preferred methods in animal models of ischemic injury. 
Various ICP measurement techniques have been adapted for animal models, and of these, fluid-filled telemetry catheters10 and solid state catheters are the most frequently used11,12,13,14,15. The fluid-filled systems are prone to developing air bubbles in the line, resulting in false ICP readings. Solid state probes avoid this problem (Figure 1). An additional problem is fitting catheters under the skull or into the ventricles without causing any brain injury that might alter the experimental outcomes. Therefore, we have developed a method that places an ICP catheter contiguous with the epidural space, but avoids the need to insert it between skull and brain. 
An optic fibre pressure catheter (420LP, SAMBA Sensors, Sweden) was used to measure ICP at the epidural location because the location of the pressure sensor (at the very tip of the catheter) was found to produce a high fidelity ICP signal in this model. There are other manufacturers of similar optic fibre technologies13 that may be used with our methodology. Alternative solid state catheters, which have the pressure sensor located at the side of the catheter tip, would not be appropriate for this model as the signal would be dampened by the presence of the monitoring screw. 
Here, we present a relatively simple and accurate method to measure ICP. This method can be used across a wide range of ICP related animal models.

A novel technique to record the pressures within the skull is described. The minimally invasive method uses a fibre-optic pressure sensing system to accurately measure intracranial pressure (ICP) in anaesthetized rats without causing significant brain trauma. The technique may be used in a wide range of experimental models.

מדידת לחץ תוך גולגולתי אפידורל בחולדות באמצעות מתמר סיבים אופטיים לחץ

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, murine pancreatic tumor model of hepatic metastases via a hemispleen injection of syngeneic murine pancreatic tumor cells is described. This model mimics many of the clinical conditions in patients with metastatic disease to the liver. Mice consistently develop metastases in the liver allowing for investigation of the metastatic process, experimental therapy testing, and tumor immunology research.

A preclinical, murine model of hepatic metastases performed via a hemispleen injection technique.

דגם Murine פרה של גרורות כבדית

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. However, due to the small size of the mouse, technical details of the intraoperative monitoring procedure suitable for the mouse were rarely described. Previously we have reported a monitoring procedure to obtain hemodynamic parameters for rats. Now, we adapted the procedure to acquire systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice, a species ten-fold smaller than rats. This film demonstrates the instrumentation of the animals as well as the data acquisition process needed to assess systemic and hepatic hemodynamics in mice. Vital parameters, including body temperature, respiratory&#160;rate&#160;and heart&#160;rate were recorded throughout the whole procedure. Systemic hemodynamic parameters consist of carotid artery pressure (CAP) and central venous pressure (CVP). Hepatic perfusion parameters include portal vein pressure (PVP), portal flow rate as well as the flow rate of the common hepatic artery (table 1). Instrumentation and data acquisition to record the normal values was completed within 1.5 h. Systemic and hepatic hemodynamic parameters remained within normal ranges during this procedure.
This procedure is challenging but feasible. We have already applied this procedure to assess hepatic hemodynamics in normal mice as well as during 70% partial hepatectomy and in liver lobe clamping experiments. Mean PVP after resection (n= 20), was 11.41&#177;2.94 cmH2O which was significantly higher (P&#60;0.05) than before resection (6.87&#177;2.39 cmH2O). The results of liver lobe clamping experiment indicated that this monitoring procedure is sensitive and suitable for detecting small changes in portal pressure and portal flow rate. In conclusion, this procedure is reliable in the hands of an experienced micro-surgeon but should be limited to experiments where mice are absolutely needed.

This film demonstrates how to acquire systemic and hepatic hemodynamics in mice. The whole monitoring includes acquisition of vital parameters, systemic blood pressure, central venous pressure, common hepatic artery flow rate, and portal vein pressure as well as the portal flow rate in mice.

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential phenotypic changes are best assessed by measurement of the changes in lung elasticity. To best understand specific mechanisms underlying such pathologies in mice, it is essential to make functional measurements that can reflect the developing pathology. Although there are many ways to measure elasticity, the classical method is that of the total lung pressure-volume (PV) curve done over the whole range of lung volumes. This measurement has been made on adult lungs from nearly all mammalian species dating back almost 100 years, and such PV curves also played a major role in the discovery and understanding of the function of pulmonary surfactant in fetal lung development. Unfortunately, such total PV curves have not been widely reported in the mouse, despite the fact that they can provide useful information on the macroscopic effects of structural changes in the lung. Although partial PV curves measuring just the changes in lung volume are sometimes reported, without a measure of absolute volume, the nonlinear nature of the total PV curve makes these partial ones very difficult to interpret. In the present study, we describe a standardized way to measure the total PV curve. We have then tested the ability of these curves to detect changes in mouse lung structure in two common lung pathologies, emphysema and fibrosis. Results showed significant changes in several variables consistent with expected structural changes with these pathologies. This measurement of the lung PV curve in mice thus provides a straightforward means to monitor the progression of the pathophysiologic changes over time and the potential effect of therapeutic procedures.

Here we present a protocol to simply and reliably measure the lung pressure-volume curve in mice, showing that it is sufficiently sensitive to detect phenotypic parenchymal changes in two common lung pathologies, pulmonary fibrosis and emphysema. This metric provides a means to quantify the lung&#8217;s structural changes with developing pathology.

מדידה של עקומת לחץ-נפח ריאות עכבר

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic agent melphalan. Briefly, the procedure starts with the setup of a percutaneous veno-venous bypass from the femoral vein to the external jugular vein. Via a laparotomy, catheters are then inserted into the proper hepatic artery and the caval vein. The portal vein and the caval vein, both supra- and infrahepatically, are then clamped. The arterial and venous catheters are connected to a heart lung machine and the liver is perfused with melphalan (1 mg/kg body weight) for 60 min. This way it is possible to locally perfuse the liver with a high dose of a chemotherapeutic agent, without leakage to the systemic circulation.
In previous studies including patients with isolated liver metastases of uveal melanoma, an overall response rate of 33-100% and a median survival between 9 and 13 months, have been reported. The aim of this protocol is to give a clear description of how to perform the procedure and to discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

Here, we present a protocol how to perform an isolated liver perfusion (IHP) with melphalan and we also discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

כבדית זלוף המבודד לטיפול בכבד גרורות של מלנומה של הענביה

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in which the liver has been repopulated with functional human hepatocytes, could serve as a useful tool for investigating human hepatic cell biology, drug metabolism, and other preclinical applications. One of the key factors required for successful transplantation of human hepatocytes into mice is the elimination of the endogenous hepatocytes to prevent competition with the human cells and provide a suitable space and microenvironment for promoting human donor cell expansion and differentiation. To date, two major liver injury mouse models utilizing fumarylacetoacetate hydrolase (Fah) and uroplasminogen activator (uPA) mice have been established. However, Fah mice are used mainly with mature hepatocytes and the application of the uPA model is limited by decreased breeding. To overcome these limitations, Alb-toxin receptor mediated cell knockout (TRECK)/SCID mice were used for in vivo differentiation of immature human hepatocytes and humanized liver generation. Human hepatic stem cells (HpSCs) successfully repopulated the livers of Alb-TRECK/SCID mice that had developed lethal fulminant hepatic failure following diphtheria toxin (DT) treatment. This model of a humanized liver in Alb-TRECK/SCID mice will have functional applications in studies involving drug metabolism and drug-drug interactions and will promote other in vivo and in vitro studies.

Here, we present a novel humanized mouse liver model generated in Alb-toxin receptor mediated cell knockout (TRECK)/SCID mice following the transplantation of immature and expandable human hepatic stem cells.

דור של כבד עכבר אנושי באמצעות תאי גזע אנושי כבדיה

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ischemia/reperfusion (I/R) injury with myriad negative consequences. Potential I/R injury in marginal organs destined for liver transplantation contributes to the current donor shortage secondary to a decreased organ utilization rate. A significant need exists to explore hepatic I/R injury in order to mediate its impact on graft function in transplantation. Rat liver hilar clamp models are used to investigate the impact of different molecules on hepatic I/R injury. Depending on the model, these molecules have been delivered using inhalation, epidural infusion, intraperitoneal injection, intravenous administration or injection into the peripheral superior mesenteric vein. A rat liver hilar clamp model has been developed for use in studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating I/R injury. The described model for rat liver hilar clamp includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic hepatic segment via a side branch of the portal vein, allowing for direct segmental hepatic delivery. Our approach is to induce ischemia in the left lateral and median lobes for 60 min, during which time the substance under study is infused. In this case, pegylated-superoxide dismutase (PEG-SOD), a free radical scavenger, is infused directly into the ischemic segment. This series of experiments demonstrates that infusion of PEG-SOD is protective against hepatic I/R injury. Advantages of this approach include direct injection of the molecule into the ischemic segment with consequent decrease in volume of distribution and reduction in systemic side effects.

A unique rat liver hilar clamp model was developed for studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating ischemia-reperfusion injury. This model includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic liver segment via a branch of the portal vein, allowing for direct hepatic delivery.

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. Research focusing on cardiovascular disease models, potential cardiovascular therapeutic targets or pharmaceutical agents requires assessment of systemic arterial pressure and heart rhythm changes. In situations where radio telemetry systems are not available or affordable, the technique of femoral artery cannulation is an alternative way to obtain intra-arterial pressure waveform recordings and systemic BP measurements. This technique is economical and can be performed with standard equipment in animal facilities. However, invasive arterial pressure recording requires cannulation of small arteries, which can be a challenging surgical skill. Here, we present step-by-step protocols for femoral artery cannulation procedures. Key procedures include the calibration of the data acquisition system, tissue dissection and femoral artery cannulation, and setup of the arterial cannulation system for pressure recording. Surface electrocardiography recording procedures are also included. We also present examples of BP recordings from normotensive and hypertensive rats. This protocol allows reliable direct recordings of systemic BP with simultaneous electrocardiography.

Here, we describe a setup for simultaneous recording of electrocardiography and intra-arterial blood pressure (BP) in experimental rats, which can be done with standard equipment in animal facilities and can be applied to physiological or pharmacological studies to investigate pathogenic or therapeutic mechanisms in cardiovascular medicine.

ההקלטה סימולטני אלקטרוקרדיוגרם ודם פולשנית בלחץ מדידה בחולדות

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Measurement of Natural Killer Cell-Mediated Cytotoxicity and Migration in the Context of Hepatic Tumor Cells

Natural killer (NK) cells are a subset of the cytotoxic lymphocyte population of the innate immune system and participate as a first line of defense by clearing pathogen-infected, malignant, and stressed cells. The ability of NK cells to eradicate cancer cells makes them an important tool in the fight against cancer. Several new immune-based therapies are under investigation for cancer treatment which rely either on enhancing NK cell activity or increasing the sensitivity of cancer cells to NK cell-mediated eradication. However, to effectively develop these therapeutic approaches, cost-effective in vitro assays to monitor NK cell-mediated cytotoxicity and migration are also needed. Here, we present two in vitro protocols that can reliably and reproducibly monitor the effect of NK-cell cytotoxicity on cancer cells (or other target cells). These protocols are non-radioactivity-based, simple to set up, and can be scaled up for high-throughput screening. We also present a flow cytometry-based protocol to quantitatively monitor NK cell migration, which can also be scaled up for high-throughput screening. Collectively, these three protocols can be used to monitor key aspects of NK cell activity that are necessary for the cells&#39; ability to eradicate dysfunctional target cells.

Evasion of natural killer (NK) cell-mediated eradication by cancer cells is important for cancer initiation and progression. Here, we present two non-radioactivity-based protocols to evaluate NK cell-mediated cytotoxicity toward hepatic tumor cells. Additionally, a third protocol is presented to analyze NK cell migration.

מדידה של הרוצח הטבעי Cell-בתיווך ציטורעילות והגירה בהקשר של תאים סרטניים בכבד

Natural killer (NK) cells are a subset of the cytotoxic lymphocyte population of the innate immune system and participate as a first line of defense by ...

מדידה של שיפוע לחץ ורידי בכבד וביופסיה של כבד Transjugular

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

מדידת לחץ תוך גולגולתי אפידורל בחולדות באמצעות מתמר סיבים אופטיים לחץ

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

דגם Murine פרה של גרורות כבדית

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

מדידה של עקומת לחץ-נפח ריאות עכבר

כבדית זלוף המבודד לטיפול בכבד גרורות של מלנומה של הענביה

דור של כבד עכבר אנושי באמצעות תאי גזע אנושי כבדיה

שיטה של המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

ההקלטה סימולטני אלקטרוקרדיוגרם ודם פולשנית בלחץ מדידה בחולדות

מדידה של הרוצח הטבעי Cell-בתיווך ציטורעילות והגירה בהקשר של תאים סרטניים בכבד

מדידה של שיפוע לחץ ורידי בכבד וביופסיה של כבד Transjugular

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

מדידת לחץ תוך גולגולתי אפידורל בחולדות באמצעות מתמר סיבים אופטיים לחץ

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

דגם Murine פרה של גרורות כבדית

ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים

מדידה של עקומת לחץ-נפח ריאות עכבר

כבדית זלוף המבודד לטיפול בכבד גרורות של מלנומה של הענביה

דור של כבד עכבר אנושי באמצעות תאי גזע אנושי כבדיה

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

ההקלטה סימולטני אלקטרוקרדיוגרם ודם פולשנית בלחץ מדידה בחולדות

מדידה של הרוצח הטבעי Cell-בתיווך ציטורעילות והגירה בהקשר של תאים סרטניים בכבד

שיטה של המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar