ウィーン総合病院とウィーン医科大学は、ウィーン肝血球体研究所のインフラを提供しています。ウィーン肝血球体研究所の以前のメンバーと同僚は、私たちの機関でHVPG測定と経嚢肝生検の方法論を継続的に改善するのに役立った貴重なインプットに感謝すべきです。また、ウィーン血化力学研究所の不可欠な部分である消化器内科・肝学部門の看護師に感謝し、患者に優れたケアを継続的に提供しています。

ここで説明するプロトコルは、ウィーン医科大学の人間研究倫理委員会のガイドラインに準拠しています。
1. 準備
<ol><li>デジタルX線蛍光法システム(図1A)、モニターシステム(図1B)、プリンタまたは記録ソフトウェアに接続された圧力レコーダーとトランスデューサ(図1C)、および超音波装置(図1D)を搭載したX線を使用した手順専用/承認された専用の部屋を使用してください。また、患者ベンチの隣に無菌作業領域(図1E)のための十分なスペースがあることを確認してください。</li>
	<li>HVPGの測定によってCSPHのための疑いのある進行した慢性肝疾患(ACLD)の患者を評価する。特に、以下の特徴の1つを有する患者は、HVPG測定を受ける可能性がある:血小板減少症<150 G/L、断断面イメージングに関するポルトシステム的な担保、非選択的ベタブロッカー療法の開始前の胃食道静脈瘤、腹性、および切除が予定されている肝腫瘍。</li>
	<li>処置に対して以下の禁忌を使用する:(i)、頸静脈または騎静脈血栓症による血管アクセスの欠如、(ii)臨床的に明らかな出血障害(例えば血管内凝固の播種)、(iii)対側気胸、および(iv)重大な心不整脈。</li>
	<li>患者が締め付けられており、手順の目的と潜在的なリスクについて知らされた後、書面によるインフォームド・コンセントを与えたことを確認してください。</li>
	<li>この手順は全身麻酔なしで行わなければならないことを説明する。しかし、ミダゾラムの低用量(最大0.02mg / kg体重)は、不安な患者に提供される可能性があります。</li>
	<li>標準的なモニターシステムを使用して、非侵襲的な動脈血圧測定、パルスオキシメトリー、心電図により患者のバイタルサインを監視します。</li>
	<li>無菌生理液を用いて、圧力用トランスデューサセットを圧力袋に入れます。</li>
	<li>圧力トランスデューサを校正する(予め調整されていない場合は、測定を開始する前に外部圧力基準に対して較正します。例えば、13.6 cmH2Oが10mm Hgに等しい水柱を使用して)。</li>
	<li>患者の中間軸線を目指して、右心房のレベルにトランスデューサーを置きます。</li>
	<li>圧力計器/録音ソフトウェアを準備して、圧力トレースを記録する準備をします。</li>
	<li>必要なすべての無菌装置の準備ができていることを確認します ( 資料表を参照)。</li>
	<li>患者に患者のベンチで、患者の立場を取るように頼む。</li>
	<li>オペレータに彼女/彼の手と前腕を洗って消毒してもらいます。</li>
	<li>外科用キャップとフェイスマスク、無菌手袋、無菌コートを着用してください。</li>
	<li>滅菌テーブルカバーを使用し、中央静脈アクセスに必要な機器のための無菌作業領域を準備する(図2A)。</li>
</ol>2. 無菌条件下での中央静脈アクセス
<ol><li>患者に対して、頭を少し左側に回し、右前頸部と横頸部の領域を消毒液で消毒する。</li>
	<li>頸動脈三角形の周りの皮膚を覆う無菌タオルを置きます。</li>
	<li>適切な内部頸静脈と適切な穿刺部位を識別するために、超音波プローブ(無菌米国のプローブカバーシースで覆われている)を使用してください。</li>
	<li>21G針で後の血管アクセスの領域に浸潤し、局所麻酔薬(リドカイン2%、5 mL)を適用する。その後、その完全な効果のために1〜2分待ちます。</li>
	<li>中央静脈アクセスに必要なすべての材料を準備します( 材料表を参照)。</li>
	<li>7.5 Fカテーテル導入者シースセットの装置を使用して、超音波ガイダンスを使用して右の内側頸静脈に針を置き、セルディンガー技術を使用して針を通してガイドワイヤーを進める(図3A)。 注:経頸部生検をHVPG測定後に行う必要がある場合は、より大きな直径10 Fの肝臓生検導入者シースセット(余分な18 G針およびガイドワイヤー付き)を使用する必要があります。</li>
	<li>ブレード11メスを使用してガイドワイヤーに沿って2〜3mmの切開を行い、拡張器を装填した血管アクセスシースの導入を容易にする。</li>
	<li>拡張器を装填した血管アクセス経皮シースをガイドワイヤー上の内部頸静脈に挿入します。</li>
	<li>ガイドワイヤーと血管アクセスシースの拡張剤を取り外します。</li>
	<li>血管アクセスシースが安定した血管内位置に残っていることを確認し、血管アクセスシースの注入口を側側側に向けます(図3B)。 注: 縫合やテーピングは必要ありません。</li>
</ol>3. 肝静脈内のバルーンカテーテルの配置
<ol><li>バルーンカテーテルを肝静脈に配置するために必要なすべての材料を準備します(図2B)。</li>
	<li>バルーンカテーテルをコントラストメディア(色素)で洗い流し、サリン溶液に浸したカテーテル先端で反復的な省略/デフレによってバルーンの完全性を確認します。気泡は発生しません。 注:X線でのカテーテル自体の可視性に応じて、カテーテルの血管内腔を洗い流すために、単なる無菌生理食塩水または希釈染料を使用することもできます。</li>
	<li>バルーンカテーテルを血管アクセスシースに挿入する前に、滅菌生理液で外側に湿らせてください。</li>
	<li>蛍光ガイダンスの下でバルーンカテーテルを下のカバ静脈(IVC)に進めます。バルーンカテーテルの先端を患者の後方に位置合わせし、カテーテルのわずかな回転は、通常、右心房からIVCに進みます。患者に深く吸い込むのを指示することは、場合によっては役に立つかもしれません(図3B)。</li>
	<li>バルーンカテーテルをIVCから肝静脈に進めます。バルーンカテーテルの先端を右に向けて、肝静脈とIVCの接合部の疑わしい領域に向かって繰り返し動かすことによって、肝静脈へのアクセスを取得してみてください(図3C)。</li>
	<li>カテーテルが、開放からIVCまでの2〜4cmの距離で自由な肝静脈圧(FHVP)の繰り返し測定を可能にする安定した位置に進み、かつ、くさび状の肝静脈圧(WHVP)を記録するために、肝静脈の内腔の膨張した気球のための十分なスペースを確保する。</li>
	<li>膨らませたバルーンに遠位した肝静脈が可視化されるまで、バルーン(気管腔内に約2mLの空気)と造影剤の注入(血管内腔内に約5mL)を膨らませることによって、静脈の十分な閉塞(くさびの位置)を確認する(図3D)。</li>
	<li>造影剤のスタシスを観察し、バルーンによる静脈内腔の閉塞が不十分であるか、または静脈と静脈の通信の存在によるコントラスト媒体の洗い流しを除外する。顕著なコントラスト媒体の洗い流しが観察される場合は、バルーンカテーテルの位置を変更してみてください。</li>
	<li>バルーンを収縮させ、カテーテルの内腔を生理液で洗い流します。</li>
</ol>HVPGを評価するための血行力学測定値
<ol><li>注入ラインを使用して、バルーンカテーテルの血管管腔を圧力トランスデューサに接続します。</li>
	<li>IVCへの肝静脈の開口部からバルーン2-4 cmの先端でFHVPの記録を開始します。曲線の波形は、時間の経過に伴う変化なしに安定している必要があります。 注: 通常、安定した値は 15 s の後に取得されます。</li>
	<li>バルーンを膨らませ、時間の経過に伴う変動のない安定した水平線になるまでWHVPの記録を続けます。 注: 通常、ウェッジ圧力の安定したトレースは、>40 sの後に取得されます。</li>
	<li>FHVG (>15 s) と WHVP (>40 s) の測定を少なくとも 3 回繰り返して、高品質の測定値を三重に得る (図 3E)。 注: 単一の FHVP/WHVP 測定値の間に≥2 mm Hg の有意な不一致が見られる場合は、追加の測定値を得る必要があります。咳、移動、または血行力記録の各時点での話など、潜在的なアーティファクトの理由に注意してください。</li>
	<li>IVCの圧力を、正しい心房圧(RAP)と同様に肝静脈のオシウムのレベルで記録する。</li>
	<li>録音を停止します。</li>
	<li>バルーンカテーテルを取り外します。</li>
	<li>HVPG(WHVPから差し引いたFHVP)を3つの測定値の平均として計算します。 注:逐次的に得られたHVPG測定値の間に≥2mm Hgの有意差が指摘される場合は、追加の測定値を得る必要があります。</li>
	<li>経頸部生検(ステップ5.1)に進むか、またはカテーテル導入者の外装を内部頸静脈から取り出す。 注:硬いガイドワイヤーを挿入すると、その後の経頸部肝生検のために同じ肝内位置に達するのに役立ちます。</li>
	<li>滅菌ガーゼを用いて少なくとも5分間、内部頸静脈の血管挿入部位の上に圧力をかける。</li>
</ol>5. 経頸部肝生検の準備
注:2つの異なる生検方法論は、経二重症肝生検を得るために使用することができる:吸引(ステップ6)またはコア生検(ステップ7)。まず、使用するシステムを決定し、ステップ5.1から5.3に進む前に適切な生検針導入者シースを選択します。あるいは、コアTJBLXセットの針も吸引セットに挿入することができる(注:適切な直径を使用する)、より柔軟なコア生検システムが肝静脈に導入しやすくなる(注:このアプローチはここでは詳細に説明されていない)。
<ol><li>それぞれの経頸部肝生検(TJLBX)セット(吸引TJLBX:図4A-B;)コア TJLBX:図 4C;「資料の表」を参照してください。</li>
	<li>生検針導入者の鞘を無菌生理的な状態で洗い流すか、あるいは、肝臓生検を経術の場合、より良い視覚化のための造影剤で洗い流す。</li>
	<li>生検針導入者の鞘を肝静脈に進めるのは、3.4と同じ技術を用いて行う。</li>
	<li>使用する生検セットに応じて、吸引TJBXのステップ6.1またはコアTJBXのステップ7.1に進みます。</li>
</ol>6. 経頸部吸引肝生検
<ol><li>10 mLルアーロックシリンジを使用して、吸引TJLBX針を無菌生理食糸で洗い流しますが、吸引を容易にするために注射器に約3mLを残します。</li>
	<li>バイオプシー針を、針の先端が導入者の鞘の端に達するまで、生検針導入者の鞘を通して穏やかに進める。 注:針を進めながら、力や速い動きを避けてください。患者に深呼吸をするように頼むと、生検針の進行を容易にするために、IVCと肝静脈の間の角度が減少する。</li>
	<li>患者に息を止めてもらいます。</li>
	<li>10 mL ルアーロックシリンジを使用して吸引を施し、針を肝臓のパレンチマに進めます。</li>
	<li>吸引(負圧)を加えながら針を引っ込みます。</li>
	<li>患者に正常に呼吸を続けるようにアドバイスする。</li>
	<li>針を取り除き(針入れ者の鞘は除く)、肝臓サンプルを収穫する。 注:肝臓サンプルは通常、針ではなく注射器に保持されます(図4D)。</li>
	<li>十分な肝臓標本が得られるまで、追加の針の通路のためにステップ6.1から6.6を繰り返します。</li>
	<li>肝臓カプセルの穿張を排除するために、カテーテル導入者の鞘の上に5〜10 mLのコントラスト培地を注入する。</li>
	<li>生検針導入者の鞘を取り除きます。</li>
	<li>10 F肝臓生検セット導入者鞘を取り除き、滅菌ガーゼを使用して少なくとも5分間、内部頸静脈の血管挿入部位の上に圧力をかける。</li>
</ol>7. 経ジュージラーコア肝生検
<ol><li>撮影機構がロックされるまでグリップを引っ張って、コアTJLBX針をロードします。芯生検針を生検針導入者の鞘を通して、針の先端が導入者の鞘の端に近づくまで穏やかに進める。 注:針を進めながら、力や速い動きを避けてください。</li>
	<li>患者に息を止めてもらいます。</li>
	<li>肝臓のパレンチマに針を進めます。</li>
	<li>撮影機構の引き金を引いてコア生検を行います。</li>
	<li>患者に正常に呼吸を続けるようにアドバイスする。</li>
	<li>針を取り除き(針入れ者の鞘は除く)、肝臓サンプルを収穫する。小さな針は肝臓のサンプルを取り除くのに役立つかもしれません(図4D)。</li>
	<li>十分な肝臓標本が得られるまで、追加の針の通路のためにステップ7.1から7.6を繰り返します。</li>
	<li>5-10 mLのコントラストメディアをカテーテル導入者シースの側ポートに注入し、肝臓カプセルの穿穿を排除します。</li>
	<li>生検針導入者の鞘を取り除きます。</li>
	<li>10 F肝臓生検セット導入者鞘を取り外し、滅菌ガーゼを用いて約5分間、内部頸静脈の血管挿入部位の上に圧力をかける。</li>
</ol>

トーマス・ライバーガーは、W.L.ゴア&アソシエイツからの講義のための助成サポートと名誉付与だけでなく、クックメディカルによって助成金と材料支援を受けています。フィリップ・シュワブル、マルクス・ペック=ラドサヴリェビッチ、マイケル・トラウナーは、この原稿に関して開示するものは何もありません。マティアス・マドールファーはW.L.ゴア&アソシエイツから講演に対して名誉を受けました。

HVPG測定は、かなりのリソースを必要とし、圧力トレースの読み取りに介入スキルと専門知識を持つ個人的な訓練を受けましたが、予後を改善し、治療の決定を導く可能性があり、したがって、パーソナライズされた医療を容易にします。さらに、同じセッションで経頸路を介して肝臓生検標本を安全に入手する機会は、第三次ケアセンターで肝血球力学研究所を実施することに有利なもう一...

肝硬変の患者は、胃または食道静脈瘤1、2、3の腹水または出血など、主に門脈性高血圧(PHT)に関連する合併症を発症する危険性がある。肝代償不全のリスクはPHT2の程度に関連している。肝静脈圧勾配(HVPG)の測定は、肝硬変患者における門脈圧を推定する金本格、すなわち正弦門門高血圧症の重症度を評価する。HVPG は ≥6 mm Hg ~ 9 mm Hg で、高いポータル圧力(「下臨床ポータル高血圧症」)を示し、HVPG ≥10 mm Hg は CSPH を定義します。このプロトコルは、機器と手順の詳細な説明を提供し、潜在的な落とし穴を強調し、トラブルシューティングのためのアドバイスを提供します。
臨床的には、(i)の測定は、副鼻腸門高血圧症の診断を確立するために示され、(ii)CSPH(HVPG≥10mmHg)を診断することによって肝代償不全のリスクがある患者を特定し、(iii)は、ワニサール出血の一次または二次的な予防における薬理学的療法を導く、および(iv)後に肝不全のリスクを評価する。HVPGは、肝線維症/機能の改善および/または悪化のための確立された代理マーカーとして使用され、HVPGの減少は臨床的に有意義な利益5に変換するので、より高いHVPG値は増加したバリセアル出血リスク6に関連している。非選択的β遮断薬(NSBB)または病因療法の下での患者におけるHVPGの変化に関する観察に基づいて、10%のHVPGの減少は臨床的に関連する7,8であると考えられる。
現在までに、HVPGと同様の精度でポータル圧力の程度を反映する代替の非侵襲的なパラメータはありません。HVPGが実際にポータルの圧力を測定する「間接的な」方法であっても、肝硬変9の患者の「直接」測定されたポータル圧力を強く相関し、正確に反映します。重要なことに、HVPG測定は、肝パレンチマ10、11、12の評価量を最大化するためにバルーンカテーテルを使用して行われるべきである。HVPG測定は侵襲的で、資源集約的であり、圧力測定値の信頼性および妥当性を解釈する上での介入スキルおよび専門知識を必要とするが、この方法は、肝硬変13、14、15の患者における門脈性高血圧を診断およびモニタリングするための現在のゴールドスタンダードである。
血小板数などの単純な検査値は、CSPH の尤度を推定するのに役立つ場合があります。しかしながら、血小板数、または血小板数を含む非侵襲的スコアは、予測値16に限定的である。肝硬変患者における脾腫17 またはポルトシステム性の副次的な18 を示す画像のモダリティはCSPHの存在を示唆するが、実際の門脈性高血圧の程度を定量化するのに役立たない。肝臓19 および/または脾臓20 のエラストグラフィーのような新規非侵襲的イメージングツールは、CSPHの存在を支配または排除するのに有用である。それでも、使用可能な方法のどれも、ポータル圧力21の動的変化を直接測定することはできません。
HVPGの予後値はいくつかの画期的な研究によって下線が引かれていて、HVPG≥10mmHg(すなわちCSPH)が静脈瘤8の形成(および、門脈性高血圧22に関連する合併症の発症)について予測的であることを示し、一方でHVPGの(薬理学的誘導)減少は、ワニス成長23および脱代償のそれぞれのリスクを調節する。HVPG応答は、(再発)バリセザル出血を予防するNSBの有効性のための唯一の確立された代理である。HVPGがNSBB治療中に≤12mmHgの値に減少するか、または≥10〜20%減少した場合、患者は、24、25に増加し、生存率が増加し、バリセザル出血から保護される。同様に、HVPG応答はまた、補償肝硬変5、26を有する患者における腹水および関連合併症の発生率を減少させる。いくつかの研究は、HVPGガイド療法27、28、29、30、31、32の使用を支持する証拠を提供している。したがって、十分な経験を持つセンターでは、HVPG応答が治療の決定を導き、門脈高血圧症患者のためのパーソナライズされた医療を促進する可能性がある。
さらに、HVPGの測定は、肝硬変および/または気道高血圧がベンチからベッドサイドに翻訳される新しい治療法の有効性を評価する概念実証研究の代理エンドポイントとして役立つかもしれない。最終的に、HVPGの測定はまた、HCC39の発症および肝障害後肝切除40のリスクに関する重要な予後情報を提供することができる。
HVPGを測定するためのインフラストラクチャは、二次および第三次ケアセンターで容易に利用可能である必要があります。HVPG測定の技術は専門的な訓練と装置を必要とするため、学術センターや移植センターが肝血球力学実験室を設立し、門脈性高血圧の最先端の診断と管理を促進することは合理的であると考えられます。大容量センターは、年間数百のHVPG測定を行います。当社の経験に基づいて、正確なHVPG測定を行うのに十分な専門知識は、通常、50-100監督されたHVPG測定の後に得られます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1628px;" width="1627">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:315px;">10 mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:335px;">Braun</td>
			<td style="width:317px;">REF 4617100V, LOT 17G03C8</td>
			<td style="width:661px;">Luer-Lock Syringe for connection with the aspiration biopsy set</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 mL Syringe 2x</td>
			<td>Braun</td>
			<td style="width:317px;">REF 4606108V</td>
			<td>Snonpyrogenic, nontoxic 10 mL syringe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 F liver biopsy&#160; introducer sheath set</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF RCFW-10.0-38, REF G07600</td>
			<td>Percutaneous Sheath Introducer Set (TJBX), 10F Port, 13cm, Check-Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">18 G needle for biopsy introducer sheat</td>
			<td>Arrow International</td>
			<td style="width:317px;">REF AN-04318</td>
			<td>Introducer Needle for TJBX Set, 18 G, 6.35 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">21 G needle</td>
			<td>Henke Sass Wolf</td>
			<td style="width:317px;">REF 0086, Fine-Ject 21Gx2&#34;</td>
			<td>Sterile injeciton needle, 21 Gx2&#34;, 0.8 x 50 mm, for local anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3-way channels</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td style="width:317px;">BD Connecta Luer-Lok, REF 39402</td>
			<td>Three way channel with Luer-Lok connection system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7.5 F catheter introducer sheath set</td>
			<td>Arrow International</td>
			<td style="width:317px;">REF SI_09875-E</td>
			<td>Percutaneous Sheath Introducer Set, 7.5 F Port</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Aspiration TJLBX set</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF RMT-16-51.0-TJL, REF G20521</td>
			<td>TJ Liver Access and Biopsy Needle Set (Aspiration Set), 9 F-45 cm, 16 G-50.5 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Balloon catheter</td>
			<td>Gerhard Pejcl Medizintechnik Austria</td>
			<td style="width:317px;">REF 500765B</td>
			<td>Ferlitsch HVPG Catheter, 7F-65cm, Balloon:2.5mL, Pressure 50-90 kPa, GW: 0.032&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Blade 11 scalpel</td>
			<td>Medi-Safe Surgicals</td>
			<td style="width:317px;">MS Safety Scalpel REF /Batch 18012424</td>
			<td>11 blade safety scalpels, retractable, single use, 10 scalpels per package</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Blunt tip fill needle</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td style="width:317px;">REF 303129</td>
			<td>Sterile blunt tip fill needle, single use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Contrast media (dye)</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH, Bensheim, GER</td>
			<td style="width:317px;">ZNR 1-24112</td>
			<td>Peritrast 300 mg Iod/mL, 50 mL, contrastmedia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Core TJLBX set</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF RMT-14XT-50.5-LABS-100, REF G08285</td>
			<td>TJ Needle Introducer and Bx-Needle 7 F-53.5 cm, 14 G-53.5 cm/20 mm, 18 G-60 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Digital x-ray fluoroscope system</td>
			<td>Siemens</td>
			<td style="width:317px;">Model No 07721710</td>
			<td>ARCADIS Varic, mobile x-ray fluoroscope system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Disinfectant solution</td>
			<td>Gebro Pharma</td>
			<td style="width:317px;">1-20413</td>
			<td>Isozid-H</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Face mask</td>
			<td>MSP Medizintechnik GmbH</td>
			<td style="width:317px;">REF HSO36984</td>
			<td>Surgical face mask from double fleece, with tie, 50 pieces</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Guide wire for biopsy introducer sheat</td>
			<td>Arrow International</td>
			<td style="width:317px;">REF AW-14732</td>
			<td>Marked Spring-Wire Guide, TJBX Set, 0.032&#34;, 0.81 mm, 68 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Infusion line</td>
			<td>Rosstec Medical Products b Cardea GmbH &#38; Co</td>
			<td style="width:317px;">REF 220010, 100m</td>
			<td>Infusion line, Luer-Lok for connection of balloon catheter and pressure transducer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lidocaine 2%</td>
			<td>Gebro Pharma</td>
			<td style="width:317px;">Xylanaest, ZNR 17.792, 20mg/1mL (2%)</td>
			<td>Sterile vials Xylanest including 2% Lidocain hydrochloride for local anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Midazolame</td>
			<td>Roche</td>
			<td style="width:317px;">Dormicum, ZNr 1-18809, Midazolam 5mg/5mL</td>
			<td>Sterile vials Dormicum including Midazolam for sedation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Monitor system</td>
			<td>Datex-Ohmeda by GE</td>
			<td style="width:317px;">Type F-CMREC1</td>
			<td>Patient monitoring system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Patient bench</td>
			<td>Silerlen-MAQET</td>
			<td style="width:317px;">Model No 7474.00A</td>
			<td>Mobile patient bench for x-ray fluoroscopy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure bag</td>
			<td>Ethox Corp</td>
			<td style="width:317px;">REF 4005</td>
			<td>Pressure Infuser Bag 500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure recorder</td>
			<td>Edwards Lifesciences</td>
			<td style="width:317px;">Ref T001631A, Lot 61202039</td>
			<td>TruWave 3 cc/150 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pressure transducer</td>
			<td>Edwards Lifesciences TM</td>
			<td style="width:317px;">REF T001631A</td>
			<td>Pressure Monitoring Set (1x), 3 cc/150 cm, TruWave TM</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Recording software&#160;</td>
			<td>Datex Ohmeda by GE</td>
			<td style="width:317px;">Software S/5 is property of Instrumentarium Corp of Datex-Ohmeda TM</td>
			<td>Datex-Ohmeda S/5TM Collect - Software to record pressure tracings of the patient monitor system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile coat</td>
			<td>Lohmann &#38; Rauscher International GmbH &#38; Co</td>
			<td style="width:317px;">REF 19351</td>
			<td>Surgical Gown, Different sizes, e.g. L-130 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile gauze</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td style="width:317px;">REF 401798, 10x10cm gauze</td>
			<td>10 x 10 cm sterile gauze, 10 pieces per package</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile gloves</td>
			<td>Meditrade</td>
			<td style="width:317px;">REF 9021</td>
			<td>Gentle Skin sterile gloves, different sizes, e.g. 7.5</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile saline solution</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td style="width:317px;">NaCl 0.9%, B009827 REV 03</td>
			<td>Physiologic Saline Solution 0.9% NaCl, 309 mosmol/L, pH-Wert: 4.5-7.0</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile saline vessel</td>
			<td>KLS Martin</td>
			<td style="width:317px;">REF K8A,&#160; 18/10 Jonas</td>
			<td>Sterilizable Metal Vessel for sterile saline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile table cover</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td style="width:317px;">REF 2502208</td>
			<td>Table Cover, Foliodrape 150 x 100 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile towel</td>
			<td>BARRIER by M&#246;lnlycke Health Care</td>
			<td style="width:317px;">REF 706900</td>
			<td>Adhesive OP-Towel, 100 x 100 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile US probe cover sheath</td>
			<td>Websinger</td>
			<td style="width:317px;">REF 07014</td>
			<td>Sterile ultrasound probe cover, 20 x 60 cm, inluding two sterie adhesive tapes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stiff guidewire</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td style="width:317px;">REF TSMG-35-180-4-LES, G46729</td>
			<td>Lunderquist Extra Stiff Wire Guide, 0.035&#34;-.89 mm, 180 cm, 4 cm flexible tip</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical cap</td>
			<td>BARRIER by M&#246;lnlycke Health Care</td>
			<td style="width:317px;">REF 620500, PCS 100, Colour Green</td>
			<td>Surgical Cap</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ultrasound device</td>
			<td>FUJIFILM SonoSite</td>
			<td style="width:317px;">Model M-Turbo, REF P17000-17</td>
			<td>Mobile ultrasound system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of the hepatic venous pressure gradient and transjugular liver biopsy

ここでは、進行性慢性肝疾患患者における肝静脈圧勾配(HVPG)測定の臨床手順を説明する詳細なプロトコルを提供し、続いて経頸部生検の指示を提供する。局所麻酔および超音波指導の下で、カテーテル導入者の外装は右の内部頸静脈に置かれる。蛍光顕微鏡を用いて、バルーンカテーテルを下大静脈(IVC)に進め、大きな肝静脈に挿入する。カテーテルの正しく十分なウェッジ位置は、バルーンがカニュー化肝静脈の流出を遮断している間にコントラスト媒体を注入することによって保証される。外圧トランスデューサを校正した後、ウェッジされた肝静脈圧(WHVP)と遊離肝静脈圧(FHVP)の三重記録で連続的な圧力記録が得られる。FHVPとWHVPの差はHVPGと呼ばれ、臨床的に有意な門脈性高血圧(CSPH)を示す値≥10 mm Hgを有する。カテーテルを取り外す前に、IVCで得られた圧力測定値と同様に右心房圧が記録される。
最後に、経頸部肝生検は、同じ血管経路を介して得ることができる。さまざまなシステムが利用できます。しかし、コア生検針は、特に肝硬変の吸引針よりも好ましい。繰り返しますが、透視的指導の下で生検針導入者の鞘は、肝静脈に進む。次に、経頸部生検針は、導入者の鞘を介して穏やかに進行する:(i)吸引生術の場合には、針は吸引下で肝臓のパレンチマに進み、その後素早く除去される、または(ii)コア生検の場合には、切断機構がパレンチマの内部で引き起こされる。いくつかの別々の通路を安全に行い、経頸部生検を介して十分な肝臓標本を得ることができる。経験豊富な手では、これらの手順の組み合わせは約30〜45分かかります。

十分に保存された肝機能を有する補償患者(すなわち、腹水や外皮出血などの肝代償不全の既往がない)において、測定されたHVPG値は正常であるか、または非臨床的な門脈性高血圧(HVPG 6-9 mm Hg)の範囲である可能性がある。しかし、補償された患者は、静脈瘤または肝代償不全を発症するリスクの増加を示すCSPH(HVPG≥10mmHg)を発症する可能性がある。順番に、食道または胃静脈瘤を有する患者は?...

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Measurement of the Hepatic Venous Pressure Gradient and Transjugular Liver Biopsy

ここでは、臨床的に有意な門脈性高血圧症を診断するための金本位一体である肝静脈圧勾配(HVPG)の測定プロトコルを提示する。また、同じセッション内で経頸部肝生検を行う方法について述べた。

肝静脈圧勾配と経頸部肝生検の測定

Here we provide a detailed protocol describing the clinical procedure of hepatic venous pressure gradient (HVPG) measurement in patients with advanced ...

measurement-hepatic-venous-pressure-gradient-transjugular-liver

Research

JoVE Journal

Medicine

19.1K ビュー.  Medical University of Vienna. ここでは、臨床的に有意な門脈性高血圧症を診断するための金本位一体である肝静脈圧勾配(HVPG)の測定プロトコルを提示する。また、同じセッション内で経頸部肝生検を行う方法について述べた。

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Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and cardiac arrest. This elevation may result in further neurological injury, in the form of transtentorial herniation1,2,3,4, midbrain compression, neurological deficit or increased cerebral infarct2,4. Current therapies are often inadequate to control elevated ICP in the clinical setting5,6,7 . Thus there is a need for accurate methods of ICP measurement in animal models to further our understanding of the basic mechanisms and to develop new treatments for elevated ICP.
In both the clinical and experimental setting ICP cannot be estimated without direct measurement. Several methods of ICP catheter insertion currently exist. Of these the intraventricular catheter has become the clinical 'gold standard' of ICP measurement in humans8. This method involves the partial removal of skull and the instrumentation of the catheter through brain tissue. Consequently, intraventricular catheters have an infection rate of 6-11%9. For this reason, subdural and epidural cannulations have become the preferred methods in animal models of ischemic injury. 
Various ICP measurement techniques have been adapted for animal models, and of these, fluid-filled telemetry catheters10 and solid state catheters are the most frequently used11,12,13,14,15. The fluid-filled systems are prone to developing air bubbles in the line, resulting in false ICP readings. Solid state probes avoid this problem (Figure 1). An additional problem is fitting catheters under the skull or into the ventricles without causing any brain injury that might alter the experimental outcomes. Therefore, we have developed a method that places an ICP catheter contiguous with the epidural space, but avoids the need to insert it between skull and brain. 
An optic fibre pressure catheter (420LP, SAMBA Sensors, Sweden) was used to measure ICP at the epidural location because the location of the pressure sensor (at the very tip of the catheter) was found to produce a high fidelity ICP signal in this model. There are other manufacturers of similar optic fibre technologies13 that may be used with our methodology. Alternative solid state catheters, which have the pressure sensor located at the side of the catheter tip, would not be appropriate for this model as the signal would be dampened by the presence of the monitoring screw. 
Here, we present a relatively simple and accurate method to measure ICP. This method can be used across a wide range of ICP related animal models.

A novel technique to record the pressures within the skull is described. The minimally invasive method uses a fibre-optic pressure sensing system to accurately measure intracranial pressure (ICP) in anaesthetized rats without causing significant brain trauma. The technique may be used in a wide range of experimental models.

光ファイバ圧力トランスデューサを使用したラットの硬膜外頭蓋内圧測定

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

医学

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

肝動脈再建を用いた部分同所性肝移植のラットモデルのための外科的処置

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, murine pancreatic tumor model of hepatic metastases via a hemispleen injection of syngeneic murine pancreatic tumor cells is described. This model mimics many of the clinical conditions in patients with metastatic disease to the liver. Mice consistently develop metastases in the liver allowing for investigation of the metastatic process, experimental therapy testing, and tumor immunology research.

A preclinical, murine model of hepatic metastases performed via a hemispleen injection technique.

肝転移の前臨床マウスモデル

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. However, due to the small size of the mouse, technical details of the intraoperative monitoring procedure suitable for the mouse were rarely described. Previously we have reported a monitoring procedure to obtain hemodynamic parameters for rats. Now, we adapted the procedure to acquire systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice, a species ten-fold smaller than rats. This film demonstrates the instrumentation of the animals as well as the data acquisition process needed to assess systemic and hepatic hemodynamics in mice. Vital parameters, including body temperature, respiratory&#160;rate&#160;and heart&#160;rate were recorded throughout the whole procedure. Systemic hemodynamic parameters consist of carotid artery pressure (CAP) and central venous pressure (CVP). Hepatic perfusion parameters include portal vein pressure (PVP), portal flow rate as well as the flow rate of the common hepatic artery (table 1). Instrumentation and data acquisition to record the normal values was completed within 1.5 h. Systemic and hepatic hemodynamic parameters remained within normal ranges during this procedure.
This procedure is challenging but feasible. We have already applied this procedure to assess hepatic hemodynamics in normal mice as well as during 70% partial hepatectomy and in liver lobe clamping experiments. Mean PVP after resection (n= 20), was 11.41&#177;2.94 cmH2O which was significantly higher (P&#60;0.05) than before resection (6.87&#177;2.39 cmH2O). The results of liver lobe clamping experiment indicated that this monitoring procedure is sensitive and suitable for detecting small changes in portal pressure and portal flow rate. In conclusion, this procedure is reliable in the hands of an experienced micro-surgeon but should be limited to experiments where mice are absolutely needed.

This film demonstrates how to acquire systemic and hepatic hemodynamics in mice. The whole monitoring includes acquisition of vital parameters, systemic blood pressure, central venous pressure, common hepatic artery flow rate, and portal vein pressure as well as the portal flow rate in mice.

マウスにおける全身および肝血行動態パラメータの監視

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential phenotypic changes are best assessed by measurement of the changes in lung elasticity. To best understand specific mechanisms underlying such pathologies in mice, it is essential to make functional measurements that can reflect the developing pathology. Although there are many ways to measure elasticity, the classical method is that of the total lung pressure-volume (PV) curve done over the whole range of lung volumes. This measurement has been made on adult lungs from nearly all mammalian species dating back almost 100 years, and such PV curves also played a major role in the discovery and understanding of the function of pulmonary surfactant in fetal lung development. Unfortunately, such total PV curves have not been widely reported in the mouse, despite the fact that they can provide useful information on the macroscopic effects of structural changes in the lung. Although partial PV curves measuring just the changes in lung volume are sometimes reported, without a measure of absolute volume, the nonlinear nature of the total PV curve makes these partial ones very difficult to interpret. In the present study, we describe a standardized way to measure the total PV curve. We have then tested the ability of these curves to detect changes in mouse lung structure in two common lung pathologies, emphysema and fibrosis. Results showed significant changes in several variables consistent with expected structural changes with these pathologies. This measurement of the lung PV curve in mice thus provides a straightforward means to monitor the progression of the pathophysiologic changes over time and the potential effect of therapeutic procedures.

Here we present a protocol to simply and reliably measure the lung pressure-volume curve in mice, showing that it is sufficiently sensitive to detect phenotypic parenchymal changes in two common lung pathologies, pulmonary fibrosis and emphysema. This metric provides a means to quantify the lung&#8217;s structural changes with developing pathology.

マウス肺における圧力 - 容積曲線の測定

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic agent melphalan. Briefly, the procedure starts with the setup of a percutaneous veno-venous bypass from the femoral vein to the external jugular vein. Via a laparotomy, catheters are then inserted into the proper hepatic artery and the caval vein. The portal vein and the caval vein, both supra- and infrahepatically, are then clamped. The arterial and venous catheters are connected to a heart lung machine and the liver is perfused with melphalan (1 mg/kg body weight) for 60 min. This way it is possible to locally perfuse the liver with a high dose of a chemotherapeutic agent, without leakage to the systemic circulation.
In previous studies including patients with isolated liver metastases of uveal melanoma, an overall response rate of 33-100% and a median survival between 9 and 13 months, have been reported. The aim of this protocol is to give a clear description of how to perform the procedure and to discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

Here, we present a protocol how to perform an isolated liver perfusion (IHP) with melphalan and we also discuss IHP as a treatment option for liver metastases of uveal melanoma.

ブドウ膜黒色腫の肝転移の治療として単離した肝灌流

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Generation of a Humanized Mouse Liver Using Human Hepatic Stem Cells

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in which the liver has been repopulated with functional human hepatocytes, could serve as a useful tool for investigating human hepatic cell biology, drug metabolism, and other preclinical applications. One of the key factors required for successful transplantation of human hepatocytes into mice is the elimination of the endogenous hepatocytes to prevent competition with the human cells and provide a suitable space and microenvironment for promoting human donor cell expansion and differentiation. To date, two major liver injury mouse models utilizing fumarylacetoacetate hydrolase (Fah) and uroplasminogen activator (uPA) mice have been established. However, Fah mice are used mainly with mature hepatocytes and the application of the uPA model is limited by decreased breeding. To overcome these limitations, Alb-toxin receptor mediated cell knockout (TRECK)/SCID mice were used for in vivo differentiation of immature human hepatocytes and humanized liver generation. Human hepatic stem cells (HpSCs) successfully repopulated the livers of Alb-TRECK/SCID mice that had developed lethal fulminant hepatic failure following diphtheria toxin (DT) treatment. This model of a humanized liver in Alb-TRECK/SCID mice will have functional applications in studies involving drug metabolism and drug-drug interactions and will promote other in vivo and in vitro studies.

Here, we present a novel humanized mouse liver model generated in Alb-toxin receptor mediated cell knockout (TRECK)/SCID mice following the transplantation of immature and expandable human hepatic stem cells.

ヒト肝幹細胞を用いたヒト化マウス肝臓の生成

A novel animal model involving chimeric mice with humanized livers established via human hepatocyte transplantation has been developed. These mice, in ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ischemia/reperfusion (I/R) injury with myriad negative consequences. Potential I/R injury in marginal organs destined for liver transplantation contributes to the current donor shortage secondary to a decreased organ utilization rate. A significant need exists to explore hepatic I/R injury in order to mediate its impact on graft function in transplantation. Rat liver hilar clamp models are used to investigate the impact of different molecules on hepatic I/R injury. Depending on the model, these molecules have been delivered using inhalation, epidural infusion, intraperitoneal injection, intravenous administration or injection into the peripheral superior mesenteric vein. A rat liver hilar clamp model has been developed for use in studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating I/R injury. The described model for rat liver hilar clamp includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic hepatic segment via a side branch of the portal vein, allowing for direct segmental hepatic delivery. Our approach is to induce ischemia in the left lateral and median lobes for 60 min, during which time the substance under study is infused. In this case, pegylated-superoxide dismutase (PEG-SOD), a free radical scavenger, is infused directly into the ischemic segment. This series of experiments demonstrates that infusion of PEG-SOD is protective against hepatic I/R injury. Advantages of this approach include direct injection of the molecule into the ischemic segment with consequent decrease in volume of distribution and reduction in systemic side effects.

A unique rat liver hilar clamp model was developed for studying the impact of pharmacologic molecules in ameliorating ischemia-reperfusion injury. This model includes direct cannulation of the portal supply to the ischemic liver segment via a branch of the portal vein, allowing for direct hepatic delivery.

ラット肝臓肝門部クランプモデルを用いたダイレクトセグメント別肝臓内送達方法

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. Research focusing on cardiovascular disease models, potential cardiovascular therapeutic targets or pharmaceutical agents requires assessment of systemic arterial pressure and heart rhythm changes. In situations where radio telemetry systems are not available or affordable, the technique of femoral artery cannulation is an alternative way to obtain intra-arterial pressure waveform recordings and systemic BP measurements. This technique is economical and can be performed with standard equipment in animal facilities. However, invasive arterial pressure recording requires cannulation of small arteries, which can be a challenging surgical skill. Here, we present step-by-step protocols for femoral artery cannulation procedures. Key procedures include the calibration of the data acquisition system, tissue dissection and femoral artery cannulation, and setup of the arterial cannulation system for pressure recording. Surface electrocardiography recording procedures are also included. We also present examples of BP recordings from normotensive and hypertensive rats. This protocol allows reliable direct recordings of systemic BP with simultaneous electrocardiography.

Here, we describe a setup for simultaneous recording of electrocardiography and intra-arterial blood pressure (BP) in experimental rats, which can be done with standard equipment in animal facilities and can be applied to physiological or pharmacological studies to investigate pathogenic or therapeutic mechanisms in cardiovascular medicine.

心電図の同時記録と侵襲的血圧ラットにおける測定

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Measurement of Natural Killer Cell-Mediated Cytotoxicity and Migration in the Context of Hepatic Tumor Cells

Natural killer (NK) cells are a subset of the cytotoxic lymphocyte population of the innate immune system and participate as a first line of defense by clearing pathogen-infected, malignant, and stressed cells. The ability of NK cells to eradicate cancer cells makes them an important tool in the fight against cancer. Several new immune-based therapies are under investigation for cancer treatment which rely either on enhancing NK cell activity or increasing the sensitivity of cancer cells to NK cell-mediated eradication. However, to effectively develop these therapeutic approaches, cost-effective in vitro assays to monitor NK cell-mediated cytotoxicity and migration are also needed. Here, we present two in vitro protocols that can reliably and reproducibly monitor the effect of NK-cell cytotoxicity on cancer cells (or other target cells). These protocols are non-radioactivity-based, simple to set up, and can be scaled up for high-throughput screening. We also present a flow cytometry-based protocol to quantitatively monitor NK cell migration, which can also be scaled up for high-throughput screening. Collectively, these three protocols can be used to monitor key aspects of NK cell activity that are necessary for the cells&#39; ability to eradicate dysfunctional target cells.

Evasion of natural killer (NK) cell-mediated eradication by cancer cells is important for cancer initiation and progression. Here, we present two non-radioactivity-based protocols to evaluate NK cell-mediated cytotoxicity toward hepatic tumor cells. Additionally, a third protocol is presented to analyze NK cell migration.

肝腫瘍細胞の文脈における自然キラー細胞媒介性細胞毒性と遊性の測定

Natural killer (NK) cells are a subset of the cytotoxic lymphocyte population of the innate immune system and participate as a first line of defense by ...