בידוד של גלגל שלם כדי להשיג רקמת פני השטח העינית אינטגרלי לבדיקה היסטולוגית ואימונוהיסטוכימיה

המעבדה שלנו מתמקדת בהתפתחות העין והמחלות. פרוטוקול זה מתאר שיטה להסרת הגולגולת ועצמות המסלול ברצף מראש עכבר נותק. השארת עפעפיים, משטח העין, עדשה, ואת הרשתית כולם יחד בחתיכה אחת. הפרוטוקול יועיל רופאי עיניים המעוניינים דידקטיקה פני השטח העין. אני דיאנל גואו, לספר את הטכניקה עם מאבק סביר כאשר מנסים למנוע את נזקי גלגל העין, תוך ניתוח עצמות הפנים. היתרון העיקרי של חומר ניתוח זה הוא כי השלמות של גיליון אפיתל פני העין נשמר היטב ואת החלקים השונים של פני השטח העין ניתן לבחון על ידי היסטולוגיה או immunostaining בחלק אחד בודד. הקפד לחתוך את כל העצמות הקטנות ופסולת של הרקמות הרכות. הסיבה, זה יגרום סימני צלקת על סעיף רקמות אחרת. לאחר המתת חיטוי העכבר, השתמש בזוג מספריים ישרים כדי לחתוך את הראש וחצה אותו לאורך קו האמצע הסגיטלי החל מעצם תוך-לידתית לעצם האף. מניחים כל חצי מהראש החוצה לתוך צלחת פטרי נקייה ולהשתמש במספריים חדים כדי לחתוך את הלסת והלשון. לשחרר את עצב הראייה על ידי חיתוך אותו מהמוח לפני מיקום chiasm אופטי. ולהסיר את כל רקמות המוח כולל נורת הריח, אשר מחובר לקיר הגולגולת. עכשיו לכל הרקמות הנותרות יהיו את כל עצמות הגולגולת והמסלול הקשורות לעין. לשטוף את החלקים הנותרים עם PBS כדי לנקות את כל פסולת דם ושיער. תקן מראש את הרקמות על ידי הצבתן בצינור של 50 מיליליטר המכיל 4% paraformaldehyde ומסובב אותן בטמפרטורת החדר. לאחר השלמת הקידומת, שטפו במהירות את הראש המנותח ב- PBS שלוש פעמים כדי לחסל עוד יותר את השערות השבורות ואת התיקונים. מניחים את הרקמה לתוך צלחת פטרי 10 ס"מ וחותכים את הגולגולת לשלושה חלקים לאורך המטוסים המצוין דמות אחת של פרוטוקול הטקסט. גלגל העין והשקע מוסתרים בחלק האמצעי של הגולגולת תחת עצמות אתמואידיות, חזיתיות ומקסיליות. השתמש בשני זוגות של מטלות מספר ארבע רצופות כדי לקלף את עצם האתמואיד ולחשוף באופן מלא את העצמות הקדמיות והמקסינריות. לאחר מכן, גיאוגרפית לחלק את פני השטח של הגולגולת לארבעה אזורים. הכנס את קצה המדפים המעוקלים אופקית לכל אזור כדי להסיר את העצמות המקסילינריות והחזיתיות ברצף. לאחר מכן, העצמות הארגמן והמג'יגאל הבסיסיות ייחשפו. הסר את שתי העצמות ואת השרירים התת עוריים הקשורים ושומנים המקיפים את גלגל העין. חותכים את גלגל העין עם עפעפיים מחוברים ועור לתוך בלוק קטן, בצורת ריבוע כדי להפחית את נפח הרקמה להקל על התמצאות הרקמה בעת הטבעה. הנח את גלגל העין ואת הרקמות הקשורות בחזרה לתוך 4%paraformaldehyde ולהמשיך לתקן לילה ב 4