השתלת לב בעכבר הוא מודל בעל ערך לחקר תגובת alloimmune כאן, אנו מציגים טכניקה כירורגית חדשה של השתלת לב בטן הטרוטופית בעכבר. בהשתלת לב עכבר מסורתית, העורקים התורמים וגורם הבטן של המטופל הם anastomosed. עורק הריאה הוא anastomosed למטופל ורידים נחותים.
בהשתלת לב עכבר חדשה זו. העורקים התורם הוא anastomosed למקבל בטן aorta ואת התורם intrathoracic נחות vena קאווה הוא anastomosed למקבל ורידים נחותים. עכשיו אנחנו מתחילים את ההדגמה הניסיונית.
לאחר לשים את העכבר בתיבה עבור שאיפת isoflurane והרדמה, לשקול את העכבר. על פי משקל העכבר, לתת הזרקה תוך-אישית של קטמין xylazine acepromacine כדי להרדים את העכבר. תיקון וחיטוי העכבר על שולחן הפעולה כאשר הרדמה השפיעו.
חותכים את העור מהצוואר לבטן התחתונה. חותכים את שרירי דופן הבטן ומוציאים בעדינות את הקרביים שמאלה. לאחר מכן, לחשוף את הווריד הנבוב הנחות.
להזריק 0.4 מיליליטר של תמיסת הפרין לאט לתוך קאווה הווריד התחתון ולחכות דקה אחת לפני מושך את המחט. מוציאים את המחט וחותכים גם את הווריד הנבוב הנחות וגם את אגם הבטן במספריים כדי להאיץ את ההאצה. פתח את חלל החזה על ידי ביצוע חתך בצורת u.
לחשוף לחלוטין את הלב, הריאות, ואת כל כלי הדם בחזה. חשוף את אצופת בית החזה. תחתוך חצי מהלומן.
הכנס את צינור ההשקיה לתוך הפתיחה של אציקת בית החזה. חותכים את וריד הריאות כדי להקל על השקיה וניקוז. להזריק לפחות שני מילימטר של פתרון HTK ארבע מעלות.
הלב מפסיק לפעום לחלוטין עד שזרימת וריד הריאות ברורה לחלוטין. מוציאים את צינור ההשקיה ומנתקים את עצם החזה. הסר את התימוס.
מפשיטים קלות את השומן סביב קשת העורקים. לחשוף ולחשוף את תא המטען של pulmonalis עורקים עם תפר 10 אפס. הפרד את העובדה ואת רקמת החיבור המצורפת על vena cava נחות intrathoracic לחשוף וללהיב את קאווה vena מעולה עם שבעה אפס תפר לחתוך אותו מאחורי הקשירה.
לעשות תפר שבע אפס סביב הבסיס של הלב מתחת לקשת העורקים. ורידים נחותים ואת שני auricle, ואז ligate את ענפי עורק הריאה וכלי ריאות ורידיים. החצו את קשת העורקים באופן דיסטלי ככל האפשר, אך ודאו שיש לכם לומן אחד ברור ללא פתחי ענפים צדדיים.
כלי הריאה מתחת לקשירה וורידים נחותים תוך-אצ'ורקי ליד הסרעפת. עכשיו, תוציא את הלב מהחזה. מניחים את לבו של התורם הממושכת בתמיסת HDK קרה ב-4 מעלות ולשמר באופן זמני.
הקפד לא להאריך זמן איסכמיה קר יותר מ 60 דקות. עכשיו, אנחנו מתחילים להדגים פעולת קולטן. שלבי הפעולה הראשוניים דומים לאלה שהוצגו בעבר עבור עכבר התורם, כולל הרדמה ועיקור.
עור בטן חתוך בצורה רוחבית. לאחר ניתוח המעי, לכסות את איברי הבטן עם גזה רטובה באמצעות תמיסת מלח. לחשוף את הווריד הנבוב הנחות ואת בטן העורקים ולשחרר אותם מרקמת השומן שמסביב.
במידת הצורך, ligate או electrocauterize כלי ענף בצד מתחת לכלי הכליה. הכנס את המלקחיים המיקרו-מיוסטטיים הראשונים מימין לחלק העליון של המוח וגור העורקים מתחת לכלי הכליה. הכנס את המלקחיים המיקרו-המוסטטיים השניים מימין לחלק התחתון של המוח וגור העורקים.
ישנם יותר מסנטימטר אחד הן עבור חלל העורקים והן עבור ורידים עבור anastomosis בין שתי מלקחיים hemostatic. לעשות חתך לתוך העורקים, קצת יותר קרוב להדק התחתון מאשר לתוך המהדק העליון. כמו כן, אתה יכול להשתמש במחט 30G לעשות חור קטן ולפתוח אותו עם מספריים מיקרו.
מניחים את הלב לתוך חלל הבטן. העורקים בראייה ואת הווריד הווריד בצד השני ומכסים אותו עם כרית גזה רטובה קטנה. להתאים ולתפור את העורקים התורם לאבי העורקים הנמען, החל caudally.
לעשות קשר ולהמשיך עם תפר ריצה לחלק העליון של חתך זה, כארבעה עד חמישה תפרים. לאחר מכן, הופכים את הלב ימינה, מכסים אותו שוב, וממשיכים את התפר בצד שמאל עד להגעה לקצה הקאודל וקושרים אותו. השתמש מספריים מיקרו לחתוך חור עגול על הבטן נחותה vena קאווה של המטופל, אשר צריך להיות באותו גודל של לומן vena נחות intrathoracic של התורם.
החתך צריך להיות ממוקם גולגולתי לאנסטומוזיס של העורקים המתוכנן. הפוך את חתך הוורידים לגדול יותר מהחתך בגור העורקים. תאווה ורידים נחותים תוך-תורם של פלאש.
לתפור את התורם ורידים נחותים intrathoracic כדי vena קאווה הנמען מתחיל caudally. לקשור קשר ולבצע תפר ריצה עד החלק העליון של החתך הוא הגיע. השתמש חמישה תפרים ולהמשיך את התפר בצד שמאל.
לבסוף, לקשור קשר בפינת זנב בזהירות להדק. תיזהר לא למשוך חזק מדי. להניח חלקים קטנים של ספוג hemostatic סביב הווריד ואת anastomosis באבא.
הסר תחילה את התחתון ולאחר מכן את המהדקים hemostatic מיקרו העליון ולשטוף את חלל הבטן עם חם 0.9% נתרן כלורי. קח את הספוג המוסטטי. שימו לב לפעימות הלב המושתלות.
אם הכל נכון, הלב יתחיל להידבק שוב. מחזירים את המעיים לחלל הבטן וסוגרים אותו עם ארבעה אפס תפרים. לספק סביבה חמה ועשירה בחמצן לעכברים המושתלים להתאושש.
בעבודת המחקר הקודמת שלנו, דיווחנו על השוואה של הכולל 40 מקרים של vena cava כדי vena cava לעומת 40 מקרים של עורק הריאה המסורתי כדי vena קאווה הליך אנסטומוזיס. זמן הפעולה של anastomosis כלי בקבוצת ורידים vena cava היה קצר משמעותית בהשוואה לעורק הריאה הקונבנציונלי לקבוצת ורידים. הטכניקה הכירורגית של השתלת לב בטן הטרוטופית בעכברים מייצגת מודל סטנדרטי למחקר באימונולוגיה של השתלות.
טכניקה חדשנית זו לשחזור מעגל הדם המוצגת כאן מקלה על השתלת לב בטן בעכברים. וזה נקרא במקביל עם איסכמיה חמה מופחתת זמן rebeating של הלב המושתל, ובכך לשפר את שיעור ההצלחה של מודל זה.