زرع القلب في الماوس هو نموذج قيم لدراسة استجابة alloimmune هنا، ونحن نقدم تقنية جراحية جديدة لزرع قلب البطن النظائرية في الماوس. في زرع قلب الفأر التقليدي الشريان الأورطي المانحة والمتلقي الشريان الأورطي البطني هي anastomosed. الشريان الرئوي هو anastomosed إلى المتلقي السفلي الوريد كافا.
في هذا زرع قلب الفأر الجديد. الشريان الأورطي المانحة هو anastomosed إلى الشريان الأورطي البطن المتلقي والمتبرع داخل الصدر السفلي الوريد كافا هو anastomosed إلى المتلقي السفلي الوريد كافا. الآن نبدأ العرض التجريبي.
بعد وضع الماوس في مربع لاستنشاق isoflurane والتخدير، وزن الماوس. وفقا لوزن الماوس، لإعطاء الحقن داخل الصفاق من الكيتامين xylazine acepromacine لتخدير الماوس. إصلاح وتطهير الماوس على طاولة العملية عندما يكون التخدير قد أثر.
قطع الجلد من الرقبة إلى أسفل البطن. قطع عضلات جدار البطن وإزالة الأحشاء بلطف إلى اليسار. بعد ذلك، فضح الوريدا كافا أدنى.
حقن 0.4 ملليلتر من محلول الهيبارين ببطء في كافا فينا السفلى والانتظار لمدة دقيقة واحدة قبل سحب الإبرة. سحب الإبرة وقطع كل من كافا الوريد السفلي والبطن الأبهر مع مقص لتسريع exsanguination. فتح تجويف الصدر عن طريق إجراء قطع على شكل حرف u.
كشف تماما القلب والرئتين، وجميع الأوعية الدموية الصدر. فضح الشريان الأورطي الصدري. قطع نصف التجويف.
أدخل أنبوب الري في فتحة الشريان الأورطي الصدري. قطع الوريد الرئوي لتسهيل الري والصرف الصحي. حقن ما لا يقل عن ملليمترين من محلول HTK أربع درجات.
يتوقف القلب عن النبض تماما حتى يصبح تدفق الوريد الرئوي واضحا تماما. سحب أنبوب الري وفصل القص. إزالة الغدة الصعترية.
تجريد طفيفة الدهون حول القوس الأبهري. فضح وligate جذع النابض الشرياني مع خياطة صفر 10. فصل حقيقة والأنسجة الضامة تعلق على الوريد كافا السفلي intrathoracic فضح وligate كافا فينا متفوقة مع سبعة خياطة صفر وقطع عليه وراء الربط.
جعل سبعة خياطة صفر حول قاعدة القلب تحت القوس الأبهري. السفلي فينا كافا وauricle على حد سواء، ثم ligate فروع الشريان الرئوي وأوعية الرئة الوريدية. عبر القوس الأبهري قدر الإمكان ولكن تأكد من أن لديك واحد تجويف واضحة دون فتحات الفروع الجانبية.
الأوعية الرئة تحت الرباط وداخل الصدر السفلي الوريد كافا بالقرب من الحجاب الحاجز. الآن، أزل القلب من الصدر. ضع قلب المتبرع المخطط في محلول HDK بارد 4 درجات والحفاظ عليه مؤقتا.
تأكد من عدم تمديد وقت نقص التروية الباردة أطول من 60 دقيقة. الآن، نبدأ في إظهار عملية مستقبلات. تشبه خطوات العملية الأولية تلك التي سبق عرضها للفأر المانح، بما في ذلك التخدير والتعقيم.
قطع الجلد البطن بطريقة عرضية. بعد تشريح الأمعاء، قم بتغطية أعضاء البطن بالشاش الرطب باستخدام محلول ملحي. فضح كافا الوريد السفلي والبطن الشريان الأورطي وتحريرها من الأنسجة الدهنية المحيطة بها.
إذا لزم الأمر، ligate أو الكهربائية الأوعية فرع الجانب تحت الأوعية الكلوية. أدخل أول ملقط الهيموستاتيكي الدقيق من اليمين في الجزء العلوي من الدماغ والأحلج تحت الأوعية الكلوية. أدخل ملقط الهيموستاتيكي الدقيق الثاني من اليمين في الجزء السفلي من الدماغ والهرطا.
هناك أكثر من سنتيمتر واحد لكل من الشريان الأورطي ومساحة الوريد للتأق بين اثنين من ملقط الهيموستاتيكي. إجراء شق في الشريان الأورطي، أقرب قليلا إلى المشبك السفلي من المشبك العلوي. أيضا، يمكنك استخدام إبرة 30G لجعل حفرة صغيرة وفتحه مع مقص صغير.
ضع القلب في تجويف البطن. الشريان الأورطي في الرؤية وفينا كافا على الجانب الآخر وتغطيته مع وسادة صغيرة الشاش الرطب. تكييف وغرز الشريان الأورطي المانحة إلى الشريان الأورطي المتلقي، بدءا caudally.
جعل عقدة والمضي قدما مع خياطة تشغيل إلى الجزء العلوي من هذا الشق، حوالي أربع إلى خمس غرز. بعد ذلك، الوجه القلب إلى اليمين، وتغطيته مرة أخرى، ومواصلة خياطة على الجانب الأيسر حتى الوصول إلى نهاية caudal وعقدة ذلك. استخدام مقص صغير لقطع حفرة مستديرة على البطن السفلي الوريد كافا المتلقي، والتي ينبغي أن يكون لها نفس الحجم من الوريد الأجوف السفلي داخل الرحم المانحة.
يجب أن يكون الشق موجودا في الجمجمة إلى التخدير الأبهري المخطط له. جعل شق الوريد أكبر من شق الأبهر. المتبرع المتدفق داخل الصدر السفلي فينا كافا.
خياطة المانحة intrathoracic أدنى فينا كافا إلى المتلقي فينا كافا بدءا caudally. ربط عقدة وإجراء خياطة تشغيل حتى يتم التوصل إلى الجزء العلوي من الشق. استخدام خمس غرز ومواصلة خياطة على اليسار.
وأخيرا، ربط عقدة في زاوية الذيل وتشديد بعناية. كن حذرا حتى لا تسحب بقوة. وضع أجزاء صغيرة من الاسفنج الهيموستاتيكي حول الوريد والتأق الأبهري.
إزالة أولا المشابك الهيموستاتيكية الصغيرة العليا ثم شطف تجويف البطن مع كلوريد الصوديوم الدافئ 0.9٪. يسلب الإسفنج الهيموستاتيكي. مراقبة ضربات القلب المزروعة.
إذا كان كل شيء على ما يحوى به، سيبدأ القلب بالانقباش مجددا. وضع الأمعاء مرة أخرى في تجويف البطن وإغلاقه مع أربعة خياطة صفر. توفير بيئة دافئة وغنية بالأوكسجين للفئران المزروعة للتعافي.
في عملنا البحثي السابق، أبلغنا عن مقارنة بين إجمالي 40 حالة من الوريدا الكافا إلى الوريدا كافا مقابل 40 حالة من الشريان الرئوي التقليدي لإجراء تناهز الكافا. كان وقت العملية لتأق الأوعية في الوريدا الكافا إلى مجموعة الوريدا الكافا أقصر بكثير مقارنة بالشريان الرئوي التقليدي لمجموعة الوريدا الكافا. تمثل التقنية الجراحية لزرع قلب البطن غير النظائري في الفئران نموذجا قياسيا للأبحاث في علم المناعة في زراعة الأعضاء.
هذه التقنية الجديدة لإعادة بناء دائرة الدم المعروضة هنا تسهل زرع قلب البطن في الفئران. وهذا ما يسمى المصاحبة مع انخفاض نقص التروية الدافئة وتكريس الوقت من القلب المطعمة, وبالتالي تحسين معدل نجاح هذا النموذج.
