פרוטוקול זה מתאר שיטה למדידת לחץ תוך גולגולתי, לחץ עורקי ממוצע ולחץ זלוף מוחי בעקבות דימום תוך-חדרי לא טראומטי במכרסמים. ניתן למדוד לחצים תוך גולגולתיים וממוצעים של העורקים בצורה מדויקת ואמינה באמצעות חיישן סיב אופטי המוחדר לקליפת המוח ולעורק הירך של החולדה בהתאמה. הטכניקות המתוארות כאן מתורגמות לסביבה הקלינית כאשר חולים עם דימום תוך חדרי דורשים ניטור לחץ תוך גולגולתי פולשני.
מטרות מחקר זה היו לבסס מודל של חיות IVH עם ניטור אובייקטיבי של ICPs, MAPs ו- CCPs לאחר IVH תוך-חדרי, כך שהמחברים יוכלו ליישם זאת עוד יותר בניסויים עתידיים שיתמקדו בהשפעות של ICPs המושרים על ידי IVH על תפקוד לקוי של הזיכרון לאחר מכן. מאבקים גדולים עשויים לכלול דיוק, שכן חיישני סיבים אופטיים הם קטנים. כריתת עורק הירך יכולה גם להוות אתגר עבור חלקם, במיוחד אלה שאינם משמשים במיומנויות מיקרו-כירורגיות.
לאחר הרדמת החולדה, הכנס מדחום רקטלי כדי לפקח על הטמפרטורה ברציפות. גזרו את השיער על הראש ועל אזור הירך, והכינו את העור עם שלושה קרצוף לסירוגין של בטאדין ו-70% אלכוהול לפני הניתוח. שאפו כל הפרשות נשימתיות שהצטברו על ידי הסרה זמנית של החולדה ממכונת ההנשמה ושאיפת ההפרשות באמצעות צינורות PE-50 המחוברים למזרק של 10 מיליליטר.
הגן על העיניים עם משחת עיניים דמעות מלאכותית סטרילית. לפני החתך בקרקפת, יש להזריק בופיווקאין מקומי לעור ולרקמות התת עוריות. הניחו את החולדה בתנוחה נוטה על מסגרת סטריאוטקטית והניחו לה את האוזן.
בצע חתך קרקפת באורך 1.5 ס"מ לאורך קו האמצע עם אזמל 15 להבים. החל לחץ מתון עם גזה עבור hemostasis. באמצעות אפליקטור קצה כותנה סטרילי, להפריד את periosteum מן הגולגולת עד ציון הדרך bregma גלוי.
אתר וסמן את bregma באמצעות סטריאוטקסיס, וסמן את מיקומם של שני חורי בור דו-צדדיים 1.4 מילימטרים לרוחב ושליליים 0.9 מילימטרים אחוריים לברגמה. באמצעות מקדחה ידנית, צור את שני חורי הגולגולת הקטנים האלה בחצי הכדור הימני והשמאלי. להשקות כל שבבי עצם עודפים עם תמיסה סטרילית של רינגר מלקט.
בחצי הכדור הימני, מקם צינורית מנחה בעלת 22 מדים בגובה חור הבור כדי להחדיר את מחט 28 המדים דרך הצינורית לעומק החדר הלטרלי הימני כדי ליצור דימום תוך חדרי. חבר את חיישן הלחץ של הסיב האופטי ליחידת הקריאה. הפעל את יחידת הקריאה, וודא שהיחידות שנבחרו נמצאות במילימטרים של כספית.
לאחר מכן הגדילו את החיישן על ידי טבילת הקצה שלו בכוס קטנה עם תמיסה של רינגר מונקה עד שיחידת הקריאה תקרא אפס ותהיה מוכנה לשימוש. בחצי הכדור השמאלי, הכנס בעדינות את חיישן הלחץ לעומק של שניים עד שלושה מילימטרים לתוך קליפת המוח לצורך ניטור בזמן אמת של ICP. לאחר החדרת צג ה- ICP, סובב את הגזע התחתון של החולדה לגישה נוחה לאזור הירך השמאלית והמפשעה.
לאחר הכנה סטרילית ומתן בופיווקאין מקומי, יש לבצע חתך עור באורך 1.5 ס"מ מעל החלק האחורי עם אזמל בעל 15 להבים. לנתח את עורק הירך השמאלי באופן שטחי עם hemostat ולאחר מכן שכבות עמוקות יותר באמצעות מלקחיים עם קצוות עדינים תחת מיקרוסקופ. זהה את וריד הירך הכחול העמוק כדי לסייע באיתור העורק הסמוך.
קושרים את עורק הירך הדיסטלי באמצעות תפר משי 3-0 ומניחים תפס מתכת זמני על החלק הפרוקסימלי של עורק הירך. יש חיישן לחץ סיב אופטי שני המחובר ליחידת הקריאה שכבר הוכנה. הכנס את חיישן הלחץ לתוך צינור PE-50, אשר מוכנס לתוך Tuohy Borst כי הוא סגור לאחר מכן.
חבר את ה- Tuohy Borst ל- stopcock תלת-כיווני המחובר למזרק של מילימטר אחד בקצה אחד ולמחט של 22 מדים עם צינורות PE-50 בקצה השני. תחת המיקרוסקופ, בצע כריתת עצם הירך בגודל שני מילימטרים עם מספריים זעירים, ובצע אותה עם צינורות PE-50 המחוברים לשאר המערך. שאפו 500 מיקרוליטרים של דם באמצעות מזרק של מילימטר אחד, וסובבו את הפקק התלת-כיווני כדי שחיישן הלחץ יקרא MAP.
פריים את המחט התוך-חדרית בעלת 28 המדים המחוברת לצינורות PE-50 עם הדם השואף עבור חיות IVH ו-Ringer's המניקים עבור חיות בקרת הרכב. לאחר מכן הכנס מחט זו לתוך צינורית המדריך לעומק החדר הצדדי הימני. באמצעות קצב של 100 מיקרוליטר לדקה, להזריק את הדם, או 200 מיקרוליטרים סטריליים את התמיסה של רינגר לתוך החדר הצדדי הימני על ידי שאיבת המזרק של מילימטר אחד עם האגודל.
נטר והקלט ICP, לחץ דם עורקי וטמפרטורה רקטלית. נטר והקלט את ערכי ICP ו- MAP שלאחר ההזרקה. לאחר השלמת ההזרקה התוך-חדרית, יש למשוך את צינור PE-50 המכיל את חיישן הלחץ המוחדר לעורק הירך, ולהחיל את התפס הזמני על עורק הירך כדי למנוע דימום.
קושרים את החלק הפרוקסימלי של עורק הירך באמצעות תפר המשי 3-0 וסוגרים את חתך הירך באופן מופרע באמצעות משי 3-0. הסר את צינורית המדריך עם המחט התוך-חדרית בצג ICP. אטמו את חורי הבור בשעוות עצם.
ולסגור את חתך הגולגולת עם 3-0 תפר משי מופרע. יש למרוח בופיווקאין מקומי על החתך, ולהזריק 0.5 מיליגרם לק"ג קרפרופן. אין להשאיר בעלי חיים ללא השגחה עד שהם חזרו להכרה מספקת כדי לשמור על משענת החזה.
אפשרו לחולדות להתאושש באופן מלא לאחר ניתוח תחת השגחה והחזירו אותן לכלובים הביתיים שלהן עם גישה חופשית למזון ולמים לאחר ההחלמה. למעט קבוצת ה-sham, ה-ICPs עלו באופן משמעותי במהלך הזרקה תוך-חדרית ב-IVH ובקבוצות בקרת רכב. ICPs היו גבוהים יותר בקבוצת IVH בהשוואה לבקרת רכב.
לאחר מכן, ה-ICPs פחתו במהירות ונורמלו תוך חמש דקות לאחר ההזרקה התוך-חדרית באותן קבוצות בעלי חיים. נצפה כי MAPs נשארו דומים לאורך כל ההליך, בעוד CPPs ירדו במהלך הזרקה תוך חדרית של דם, או תמיסת רינגר הנקה. שלבים חיוניים של הניתוח כוללים מיקום נכון וקידוח של חורי בור וכריתת עצם הירך.
יש לעקוב מקרוב אחר השלבים שהוזכרו לעיל כדי להבטיח שהחיישנים יבצעו את עבודתם בקריאת שינויי הלחץ בצורה מדויקת.
