שליפת ביציות לפרוסקופיות ושימור בהקפאה במהלך וגינופלסטיקה לטיפול בתסמונת מאייר-רוקיטנסקי-קוסטר-האוזר

הגישה שלנו מאפשרת למזער את המחלה הפולשנית בטיפול בתסמונת מאייר-רוקיטנסקי-קוסטר-האוזר על ידי שילוב של וגינופלסטיקה לפרוסקופית ושאיבת ביציות לטיפולי פוריות עתידיים. היתרונות העיקריים של הגישה שלנו הם הדרישה להרדמה אחת והתגברות על חוסר ההיתכנות של שאיבת ביציות טרנסווגינלית בחולי רוקיטנסקי צעירים יותר. ההליך יודגם על ידי דיאנה דלפרטו, גינקולוגית בכירה ביחידת הפוריות שלנו ועל ידי אלסנדרה אלטרי וגרטה קרמיסוני, שתי אמבריולוגיות קליניות בכירות ממעבדת הרבייה בסיוע שלנו.

התחל גירוי שחלות מבוקר ביום 14 מיום הניתוח. עקוב אחר תגובת השחלות על ידי אולטרסאונד טרנסבדומינלי סדרתי ומדידות במקביל של אסטרדיול ופרוגסטרון. להקים פנאומופריטונאום עם טכניקה פתוחה.

מקם טרוקאר טבורי אחד בקוטר 10 מילימטרים להחדרת הלפרוסקופ ושלושה טרוקארים של חמישה מילימטרים ברביע התחתון המרכזי, הימני והשמאלי. תחת ראייה לפרוסקופית, השתמש במחט לומן יחיד בעלת 17 מדים המחוברת למשאבת שאיפה, כפי שנהוג להשתמש לשליפה טרנסווגינלית דרך המכנסיים המרכזיים והשמאליים לניקוב השחלה הימנית והשמאלית, בהתאמה. להרים ולהחזיק את השחלות עם מלקחיים לפרוסקופיים כדי להקל על החשיפה של הזקיקים.

כאשר שואפים זקיקים מרובים כי הם אחד קרוב למשנהו, לשמור על קצה המחט בשחלה כדי להפחית את מספר הפעמים כי קליפת השחלות הוא transfixed ואת הסיכון האינהרנטי של דימום. נתחו את הצפק על ידי הרמה וחתך של גדיל הצפק באופן רוחבי בין שתי קרני הרחם הבסיסיות, ולאחר מכן, הרחבת החתך לרוחב, קדמית ואחורית. חשוף את גומת הנרתיק בגישה הפרינאלית ובצע חתך בצורת H וצור חלל ניאו-נרתיקי על ידי דיסקציה חדה ובוטה של החלל הווסיקורקטלי.

לאחר מכן, משוך את שולי הצפק המנותקים לקצה הפרוזדור הנרתיקי. מקם תפרים מופרעים בפולידיוקסנון סינטטי נספג 3-0 עבור אנסטומוזיס שיווי המשקל הצפקי. התחל תפר חוט ארנק בפולידיוקסנון סינטטי נספג 2-0 מונופילמנט בכל ההמיפלוויס מהצפק המגויס מעל שלפוחית השתן עם טרנספיקסיון חיבור של הרצועה העגולה, איסתמוס החצוצרות, רצועת הרחם-שחלות, ועלה הצפק הצדדי.

לאחר מכן, לכלול בשני התפרים את ההיבט הצדדי של mesorectum ואת ההיבט הקדמי של סרוזה רקטלית מיד מתחת לצומת rectosigmoid. לבסוף, מניחים גזה מצופה פרפין בנאוווגינה המצופה פריטונאום. לאסוף את הזקיקים שפופרות 10 מ"מ תחתית עגולה נשמר חם באינקובטור נייד ומיד להעביר אותם למעבדה האמבריולוגיה עם זמן הובלה של כ 10 דקות.

כאשר כל קומפלקסי הביציות של קומולוס נאספים, הכניסו אותם לתוך צלחת ארבע הבארות המכילה את מדיום ההפריה ותייגו את המכסה והתחתון עם נתונים הנוגעים לזהות המטופלת. לדגום אותם בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספרה מבוקרת המכילה 6% פחמן דו חמצני ו-5% חמצן. ודא כי בדיקה כפולה של ההליך מבוצעת על ידי חבר שני של צוות המעבדה.

יש לבצע הסרת תאי קומולוס קורונה תוך 38 שעות לאחר טריגר הביוץ. מניחים קומפלקסים של ביציות קומולוס בבאר המרכזית המכילה את האנזים כדי לפזר את תאי הקומולוס עם פיפטה פסטר זכוכית, תוך פיפטציה עדינה של התמיסה המכילה קומפלקסים של ביציות קומולוס למעלה ולמטה למשך עד 30 שניות. מעבירים את הביציות לבאר המרכזית השנייה המכילה רק מדיום חצוב HEPES, תוך הקפדה על עקירת כמות מינימלית של האנזים.

הסר את תאי הקורונה הנותרים באמצעות פיפטות דנודיות עם קטרים פנימיים הולכים ופוחתים. להעריך את השלב של הבשלת ביציות, הפרדת metaphase II ביציות. מעבירים את הביציות מהמטאפאזה II בצלחת פטרי 60 מילימטר של תרבית IVF המכילה תשע טיפות של מדיום תרבית יחיד רציף המכוסה בשישה מילימטרים של שמן מינרלי.

לדגום אותם בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספרה מבוקרת המכילה 6% פחמן דו חמצני ו-5% חמצן. ממלאים קופסת קירור עד למעלה בחנקן נוזלי טרי ומכסים עד לשימוש כדי למזער את הפיזור והאידוי. השתמש פיפטה חשפנית עם קוטר פנימי של 170 מיקרומטר כדי למנוע נזק לביציות במהלך מניפולציה.

יש לנער בעדינות כל בקבוקון של תמיסת שיווי משקל, תמיסת ויטריפיקציה ותמיסת כביסה כדי לערבב את התכולה לפני השימוש. הכינו את המכסה של צלחת פטרי 60 מיליליטר עם טיפה אחת של 50 מיקרוליטר של תמיסת כביסה אחת. יש להניח טיפות ממש לפני השימוש כדי להגביל אידוי בינוני.

קח את צלחת הביציות מהאינקובטור והעבר את הביציות metaphase II עם נפח מינימלי של מדיום מצלחת התרבית לתוך 50 microliters של תמיסת כביסה. יש לטפטף 50-מיקרוליטר טיפות של תמיסת כביסה שתיים, תמיסת שיווי משקל אחת ותמיסת שיווי משקל שתיים בסמיכות ולהעביר ביציות מתמיסת שטיפת טיפות אחת לתמיסת שטיפת טיפות שתיים. מזגו את טיפת תמיסת שיווי המשקל אחת לתמיסת הכביסה שתיים והמתינו שתי דקות לערבוב הספונטני של שני התמיסות.

לאחר מכן, מזג את טיפת תמיסת שיווי המשקל שתיים לטיפות שמוזגו בעבר והשאר לשתי דקות נוספות. לבסוף, למזג טיפה חדשה של 100 מיקרוליטר של תמיסת שיווי משקל שלוש לטיפות שמוזגו בעבר ולהשאיר לדקה אחת נוספת. מכניסים את הביציות לתמיסת שיווי משקל של 100 מיקרוליטר למשך 10 דקות.

יש לטפטף שתי טיפות של 50 מיקרוליטר של תמיסת ויטריפיקציה ואחת של 100 מיקרוליטר של תמיסת ויטריפיקציה. מעבירים את הביציות ברצף לתוך שלוש טיפות של תמיסת ויטריפיקציה למשך 60 שניות, כך שהביציות נשארות בכל טיפה במשך כ-20 שניות. כאשר נותרות כ-10 שניות לפני תום 60 שניות הדגירה, מניחים את הקריומד מתחת למיקרוסקופ.

לשאת את הביציות בקצה פיפטה ומניחים אותם על cryodevice עם כמות מינימלית של תמיסת vitrification. שאפו את תמיסת הוויטריפיקציה העודפת, והותירו את הביציות מכוסות בשכבה דקה של תמיסת ויטריפיקציה. צללו את הקריומד ישירות לתוך חנקן נוזלי והזיזו אותו במהירות.

שמור את המכשיר בחנקן נוזלי וכסה אותו במכסה מגן. ההליכים הלפרוסקופיים במקביל של שאיבת ביציות ו vaginoplasty שולבו בהצלחה בכל החולים. בממוצע נלקחו 11.4 5.4 ביציות ו-9.6 4.3 ביציות M2 השתמרו בקריו.

הזמן הניתוחי הממוצע הכולל היה 114 17 דקות. איבוד דם תוך ניתוחי לא היה משמעותי בכל החולים ולא נצפו תופעות לוואי תוך ניתוחיות. ביום השלישי שלאחר הניתוח, המטופלים החלו בשימוש יומיומי במרחיבים ושוחררו ביום 6.0 1.0.

מומלץ לבצע שאיפה זהירה של זקיקים בתוך השחלה, תוך מתן תשומת לב ראויה לניוד האוטומטי של השחלות על מנת להבטיח גישה ושליפה אופטימליות.