ניתוח איסכמיה-רפרפוזיה של ריאות מונשם יכול לשמש כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה הספציפית לריאה של תהליכים מרובים, כולל השתלת ריאות, תסחיף ריאתי ופגיעה בריאות בעקבות טראומה דימומית עם החייאה. מודל זה ממזער את התרומות הדלקתיות של אטלקטזיס, אוורור מכני והיפוקסיה. הוא שומר על מערכת חיסונית שלמה במחזור הדם in vivo ומאפשר את המחקרים ארוכי הטווח.
מודל זה יכול לספק תובנה כיצד דלקת סטרילית נשלטת ומווסתת בתוך הריאה. הטכניקה המיקרו-כירורגית דורשת תחילה שעות של תרגול. ארגון ותכנון זהירים חשובים לפני שמתחילים.
כמו כן, זה יכול להיות מתורגל בתחילה על ידי העכבר המתת חסד ללא הסחת דעת של פעילות הלב ואת התנועה שהיא גורמת. קיפאון הדם ברשות הפלסטינית השמאלית מאפשר לדמיין אותו בקלות רבה יותר ולתמרן. כדי להתחיל, הניחו בעדינות את האור הגמיש של הסיב האופטי על קנה הנשימה של עכבר מורדם, מעט מתחת למיתרי הקול.
כוונן את רמות התאורה כך שרק שדה כהה נראה לעין בעת התבוננות לתוך הלוע האוראלי של העכבר, למעט אור אדום הבוקע מתחת למיתרי הקול. לצורך אינטובציה, החזיקו את הפינצטה ביד הדומיננטית והשתמשו בהן כדי לאחוז בעדינות ולמשוך את הלשון אל מחוץ לחלל הפה. פתח את הלסת התחתונה באמצעות מלקחיים המוחזקים על ידי היד הלא דומיננטית ודחף את המלקחיים לתוך הגרון כדי להרים את האפיגלוטיס.
בשלב זה, לשחרר את הלשון מן הפינצטה. שימו לב למיתרי הקול. הם צריכים להיפתח ולהיסגר בהתאם לכל נשימה.
מחזיקים את הצינורית עם חוט ההנחיה טעון מראש, מכניסים את קצה החוט דרך מיתרי הקול. לאחר מכן, נזהר מאוד לא להזיז את החוט על ידי החזקת חלק ממנו שנמצא מחוץ לצינורית אלא ממש מעל מיתרי הקול, למשוך את הצינורית, ולהשאיר רק את החוט במקום עם הקצה הדיסטלי שלה בתוך קנה הנשימה. בשלב זה, בצע הדמיה שנייה של מיתרי הקול כדי לאשר כי קצה הדיסטלי של החוט נשאר מועבר דרך מיתרי הקול המוארים אל קנה הנשימה, ואינו נמצא בוושט הלא מואר.
לאחר מכן, החזיקו את החוט מחוץ לפה כשהמלקחיים המעוקלים ביד שמאל מיוצבים על משטח קשה, וקדמו בזהירות את קטטר 20 המדים עם כנפי סרט מעל החוט. ברגע שהקצה הדיסטלי של החוט יוצא מהקצה האחורי של הקטטר או הצינור האנדוטרכאלי מחזיקים את הקצה הזה עם המלקחיים המעוקלים ומקדמים בצורה חלקה את הקטטר לקנה הנשימה. לאחר מכן, להסיר בזהירות את החוט מן הקצה הדיסטלי של קטטר עם מלקחיים מעוקלים מבלי לעקור את המיקום של קטטר.
לאחר מכן, חבר לזמן קצר את הקטטר למכונת ההנשמה לפני אבטחתו כדי לאשר מיקום נכון לקנה הנשימה ולא לוושט. אשר את מיקום קנה הנשימה על ידי תצפית על אוורור מכני תלוי תנועות דופן החזה דו צדדית והעדר אינפלציה של הבטן. לאחר אינטובציה, חבר את הקטטר למכונת ההנשמה שנקבעה בנפח כותרת של 0.2 עד 0.225 מיליליטר, וקצב נשימה של 120 עד 150 נשימות לדקה כדי לאשר את המיקום הנכון של קנה הנשימה של צינור האורוטרכאל.
לאחר מכן להתנתק עם העכבר נושם באופן ספונטני דרך צינור orotracheal. לגלח את שיער העכבר מעל אזור בית החזה השמאלי עד עצם השכמה השמאלית. הסר שיער מגולח עודף באמצעות ספוגיות אלכוהול וחטא את אזור הניתוח.
לאחר מכן הנח את העכבר על כרית חימום במצב צדדי שמאלי או שלושה רבעים מסתובבים. חבר את צינור קנה הנשימה למכונת ההנשמה. לאחר ביצוע החתך בעור יש להחדיר שלושה רטרקטורים מעוקרים מתחת לשכבת השרירים.
לאחר מכן, זהה את החלל האינטרקוסטלי השני והחזק את הצלע השנייה עם המלקחיים העדינים הנוספים. לאחר מכן, משיכת הצלע כלפי מעלה, השתמש בלהב אזמל מעוקל מספר 12 סטרילי כדי להיכנס למרחב הרבים על ידי הפרדה וחיתוך על פני החללים השני עד השלישי השרירים הבין-קוסטליים. שקול להשהות את האוורור כדי להפחית את הפגיעה בריאה השמאלית.
השתמש בצפלד הקטן והצר ביותר לאורך כיוון הצלעות, ובמחזיר בגודל בינוני שמאלה לאורך הצלע השלישית, ובמשענת הגדולה ביותר מימין לאורך פני הצלע השנייה. פתח את החזה עם נסיגה איטית ומתקדמת באמצעות מיתרי retractor אלסטי. חשוף וזהה את עורק הריאה השמאלי, או PA על ידי הזזת קצה הריאה השמאלית משם באמצעות צמר גפן סטרילי או ספוג כירורגי.
השתמש במלקחיים זעירים עדינים במיוחד ביד ימין ובמלקחיים מתרחבים של PA או כלי דם ביד שמאל כדי לחשוף בעדינות וליצור את השדה שבו ניתן לראות את ה- PA השמאלי ואת הברונכוס. באמצעות מלקחיים של PA, הרימו את הרשות השמאלית ומשכו בעדינות אך בחוזקה כלפי מעלה וצפלאד כדי לדמיין את הברונכוס השקוף למטה. הגדל את ההגדלה במיקרוסקופ הדיסקציה לארבעה X.תוך כדי נסיגת הרשות מהברונכוס, העבר בזהירות את המלקחיים הסגורים האולטרה עדינים דרך החלל שבין הרשות השמאלית לברונכוס.
לאחר מכן השתמש במלקחיים אלה כדי להחזיק ולמשוך 7-0 או 8-0 תפר פרולן דרך החלל שבין עורק הריאה השמאלי למעלה לבין הברונכוס שמתחת. לאחר מכן, הקף את הרשות השמאלית על ידי קשירת קשר החלקה כדי ליצור חסימה ברשות. הפרעה בזרימת הדם ניתנת להדמיה בקלות בנקודה זו, המסמנת את תחילת התקופה האיסכמית. להחצין את הקצה החופשי של הקשר דרך נקודת כניסה אחרת בבית החזה השמאלי הקדמי באמצעות מחט מד 24 עד 28 ולאבטח את קצה התפר עם חתיכת סרט קטנה לזיהוי קל יותר מאוחר יותר.
לאחר מכן, באמצעות שסתום לחץ חיובי פקיעת תוקף או צינורות על מאוורר מכרסמים, לנפח מחדש את הריאה כדי להוציא כמה שיותר אוויר מתוך חלל החזה ככל האפשר. לאחר מכן, סגור את הצלעות עם שני תפרים ניילון 4-0 מופרעים, ולאחר מכן סגירת השריר ושכבת העור, והחלת הרדמה מקומית. נתק את העכבר ממכונת ההנשמה והנח אותו בזהירות על כרית החימום לטיפול לאחר הניתוח כדי לשמור על טמפרטורת הגוף במהלך ההתאוששות.
ודא כי קשר ההחלקה המוחצן נשלט ומודגם בבירור במהלך תנועת העכבר. משוך את קשר ההחלקה המוחצן בעדינות בסוף התקופה האיסכמית. ההיסטולוגיה של מקטעי ריאות בעכברים מסוג בר של זנים C3H ו- C57 שחור שש מוצגת כאן.
לאחר איסכמיה של שעה ושלוש שעות רפרפוזיה, נצפתה חדירה נויטרופילית אינטנסיבית בתוך רקמת הריאה השמאלית בשני הזנים. עם זאת, זן C3H הראה רמות גבוהות יותר באופן ניכר של דלקת בהשוואה ל-C57 שחור שש. טעויות במהלך המעבר של monofilament בין הרשות השמאלית לבין ברונכוס שמאל יכול להוביל לניתוח unsalvaged עם דימום קטסטרופלי של PA שמאל או פגיעה בלתי הפיכה ברונכוס שמאל.
זהו השלב המאתגר ביותר מבחינה טכנית ודורש תרגול חוזר בעת לימוד הליך זה לראשונה. לאחר התאוששות עכבר מניתוח איסכמיה-רפרפוזיה של הריאות כשעה או פחות לאחר רפרפוזיה, החדרה תוך-רחמית של חיידקים חיים יכולה להינתן בשלוש שעות או 24 עד 48 שעות מאוחר יותר כדי לדמות זיהום בעקבות פגיעה ריאתית סטרילית הנגרמת על ידי איסכמיה-רפרפוזיה. התקנה תוך רחמית של סוכנים אחרים שיכולים לווסת את הדלקת הסטרילית יכולה להיעשות גם לאחר איסכמיה-reperfusion באופן דומה.
טכניקה זו סייעה לגלות ולאשר את הסחר וההפעלה של נויטרופילים בתגובה לפציעה סטרילית וזיהום בריאה.