בעבר, השיטה העיקרית לבחון את ההשפעה של כימיקלים על התכווצות העורקים הייתה על ידי מיוגרפיה של חוטי ex vivo באמבטיות איברים. המשמעות של טכניקה זו היא שניתן לבחון את ההשפעות של כימיקלים ומניפולציה גנטית על מקטע in vivo של כלי שיט. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לבצע חשיפה כרונית והערכה ארוכת טווח של השפעת התרופות על התכווצות העורקים וזרימת הדם.
זה לא אפשרי בכלי מבודד באמבטיות איברים. כדי להתחיל להוציא את העובר החוצה, יש להקפיד על עומק הרדמה נאות ב-ewe. בצע חתך לפרוטומי סטנדרטי של 10 ס"מ באמצעות להב אזמל מספר 20 מעל האלבה הליניארית מהטבור לחלק הגולגולתי של העטין.
לאחר מכן יש לבצע חתך קטן דרך קו האמצע של דופן הגוף מתחת לחתך העור, ולפתוח את חלל הבטן באמצעות מספריים של מצנבאום. יש להוציא את הרחם המכיל את העובר דרך דופן הבטן, תוך הנחת מגבות כירורגיות סטריליות מתחת בין בטן האם לרחם. לאחר מכן מישוש הרחם כדי לקבוע את מיקום העובר ואת העופרת הקאודלית.
באמצעות צריבה, לבצע חתך 10 ס"מ דרך קיר הרחם עם עקמומיות גדולה מעל גבי הראש, הימנעות כל כלי דם גלויים שליות. לאחר מכן, בעזרת ארבעה מהדקי בבקוק, אבטחו את הרחם וקרומי השליה, ומשכו את מהדקי הבאבקוק בארבע הפינות המנוגדות כדי להפוך את ראש העובר לגלוי. יש להוציא את חצי הגולגולת של העובר דרך חתך זה, ולכסות את הראש בכפפה סטרילית ללא לטקס מלאה במי מלח סטריליים חמים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס כדי למנוע את התחלת הנשימה.
כדי לבצע מכשור של קטטר perivascular עורק התרדמה, עם הצוואר של העובר חשוף, לעשות חתך עור אלכסוני שלושה עד 3.5 ס"מ לאורך הגבול הקדמי של שריר sternocleidomastoid או SCM בצד אחד של הצוואר באזור האמצעי. לאחר מכן הפרידו את הפאשיה בעזרת מלקחיים נגד יתושים. מחלקים את הפלטיזמה, ומנתחים לאורך הגבול המדיאלי של שריר ה-SCM מהגיד שלו בצורה עליונה, ועד לרמת שריר האומוהיואיד בנחיתות.
הסירו את העור בעזרת מהדקים של Babcock. בצע דיסקציה קהה כדי לשחרר את עורק התרדמה מהרקמה שמסביב ומיריעת התרדמה. לאחר מכן, קחו בדיקת זרימה של שלושה מילימטרים מהחבילה הסטרילית, פתחו את לוח הגב והחליקו אותו כדי לחשוף את תושבת L.
באמצעות מלקחיים, סגור את תושבת בדיקת הזרימה על ידי החלקת לוחית הגב בעדינות למצב סגור. לאחר מכן אבטח את תושבת בדיקת הזרימה על ידי הידוק בורג הגיבוי של בדיקת הזרימה. יש להניח צנתר פריווסקולרי סמוק ליד עורק התרדמה פרוקסימלי לבדיקת הזרימה עם תפר משי 3.0 שאינו נספג.
אבטח את האורכים הפרוקסימליים והדיסטליים של המערכת הפרי-וסקולרית ואת בדיקת הזרימה לרקמה הבין-תאית הסמוכה. באמצעות תפר רציף, סוגרים את אזור החתך ואת עור העובר בתפר 3.0 שאינו נספג. הצמידו את הצנתרים לעור על ידי כריכת התפר סביב הצנתר שלוש פעמים.
לאחר הסרת הכפפה, הניחו את ראש העובר בחזרה לרחם. כדי לבצע צנתור גפיים עובריות, יש למרוח את הרגל האחורית של העובר, להחזיק את הרגל ולסובב אותה הצידה כדי לדמיין את אזור הירך הפנימי. לאחר ניקוי האזור עם גזה סטרילית, לבצע חתך של שני סנטימטרים ולחשוף את עורק הירך.
מניחים ומאבטחים את בדיקת הזרימה כפי שהודגם קודם לכן עבור התרדמה, וסוגרים את החתך. לאחר מכן, בצע חתך של שני סנטימטרים לאורך האספקט המדיאלי של השוקה, כ -0.5 ס"מ דיסטלי לברך. חשוף את העורק הטיביאלי האחורי בעל הדפנות העבות ואת הווריד הספנוס בעל הדפנות הדקות.
כדי להחדיר קטטרים פוליוויניל, באמצעות טכניקת חיתוך סטנדרטית, לשחרר את הכלי של עניין עם דיסקציה קהה. לאחר מכן מניחים את החלק הדיסטלי של הכלי בתפר משי 3.0, וללא מחט, באמצעות קשר מרובע עם שלוש זריקות. החליפו עניבת משי שנייה באספקט הפרוקסימלי של הכלי, אך השאירו את הרצועה לא קשורה.
באמצעות מספריים Castroviejo, לעשות חתך רוחבי קטן בכלי שני מילימטרים פרוקסימלי ליגטורה דיסטלית. להגביל את זרימת הדם בכלי הדם על ידי משיכה עדינה על התפר הפרוקסימלי untied. לאחר מכן ממלאים את הצנתר במי מלח סטריליים הפריניזציה.
הכניסו את הקצה המשופע של הצנתר, והקדמו את הקצה 20 סנטימטרים לתוך כלי הדם של העובר. החזק את הצנתר במקומו באמצעות מלקחיים בזמן שעוזר קושר את תפר הקשירה החופשי ממשי פרוקסימלי כדי לאבטח את כלי הדם לצנתר. יש לסובב את כלי הדם לחלוטין סביב הצנתר המוחדר באמצעות קשרים מרובעים במרחק של שני מילימטרים מאתר ההחדרה בשלוש זריקות.
לאחר מכן לקשור את הליגטורה הדיסטלית פרוקסימלית לקשר הפרוקסימלי, לאבטח את כלי הדם לקטטר. סגור את חתך העור באמצעות תפר 3.0 שאינו נספג, באמצעות תבנית רציפה. ודא שהתפרים קשורים סביב הצנתרים כדי למנוע הגבלת זרימת הדם אם הם נמשכים.
מניחים צנתר סמוק ברחם, ומחברים אותו לעובר על ידי תפר באמצעות תפר 3.0 שאינו נספג. החזירו את העובר לרחם. תפרו את קרומי העובר באמצעות תפרים 3.0 שאינם נספגים עם דפוס נעילה רציף, ולאחר מכן סגרו את שכבת שרירי הרחם באמצעות תפר 3.0 שאינו נספג.
הכנס מוט ניתוח נירוסטה 18 אינץ 'תת עורית לאורך דופן הבטן עד לאזור הפרקוסטלי. חבר את הצנתרים לקצה הדיסטלי של מוט הניתוח, לאחר שעוזר מזין את הצנתרים ומזרום כבל בדיקה דרך אתר היציאה הפרקוסטלי על ידי דחיפת המוט במלואו דרך הפתח הפרקוסטלי. לאחר מכן, אבטחו את כל הצנתרים וכבלי בדיקת הזרימה באתר החתך הפרקוסטלי.
לאחר הנחת הסרט העמיד למים, תפרו את הצנתרים לעור ה-ewe. תפרו נרתיק רשת מפלסטיק לחלק החיצוני של ה-ewe מעל הצנתרים ובדקו כדי לאחסן את הצנתרים. באמצעות חומר תפר סינתטי נספג מונופילמנט 1.0, לאבטח את linea alba עם דפוס רציף, ולאבטח את שכבת העור עם סיכות כירורגיות.
כדי למדוד את זרימת הדם, חבר את בדיקות הזרימה המוחדרות לעובר באמצעות מודול הזרימה הפריווסקולרית ל-PowerLab ולמחשב מחובר. חבר את הצנתרים העורקיים ומי השפיר למגבר הגשר המחובר לממיר אנלוגי לדיגיטלי. יש לתת בולוס של מיליליטר אחד של 10 פנילפרין מיקרומולרי לעובר תוך ורידי, ולמדוד את זרימת התרדמה והירך במשך 15 דקות.
לאחר מכן המתן 30 דקות, או עד שזרימת הדם תחזור לקו הבסיס. לאחר מכן, להחדיר מיליליטר אחד של 10 phenylephrine micromolar לתוך קטטר perivascular, ולמדוד את זרימת הדם במשך 15 דקות. לשטוף את phenylephrine על ידי מתן חמישה מיליליטר של מלוחים חמים דרך קטטר perivascular.
לאחר מכן המתן 30 דקות, או עד שזרימת הדם תחזור לקו הבסיס. מחקר זה בחן את ההשפעות המקומיות של מניפולציה בזרימת הדם בעוברים וכבשים בטווח הקרוב ובפגים. עם מתן מיליליטר אחד של 10 פנילפרין מיקרומולרי, אגוניסט אלפא-1 AR, לחלל הפריווסקולרי של עורק התרדמה, נצפתה ירידה משמעותית בזרימת הדם התרדמה הן בכבשים עובריות בטווח הקרוב והן בעובר בטרם עת ללא כל השפעה על לחץ הדם המערכתי.
לעומת זאת, מתן פנילפרין לווריד גרם לעלייה משמעותית בזרימת הדם המערכתית הן בכבשים עובריות קצרות טווח והן בעובר הפג מבלי להשפיע על זרימת הדם התרדמה. התוצאות הראו כי עוברים מוקדמים אינם מגיבים לוויסות זרימת הדם של התרדמה בתיווך פנילפרין, אולם התגובה בוגרת בעוברים בטווח הקרוב. יש לציין כי מתן תוך ורידי של פנילפרין הגביר את זרימת הדם התרדמה רק בעוברים מוקדמים, ללא השפעה משמעותית בעוברים בטווח הקרוב.
עם זאת, מתן תוך ורידי של phenylephrine העלה את לחץ הדם המערכתי הן בעוברים מוקדמים והן בעוברים לטווח הקרוב. התוצאות מראות גם כי ההתקנה perivascular של phenylephrine לא השפיע על לחץ הדם המערכתי. יש לנקוט משנה זהירות בעת ביצוע דיסקציה קהה לזיהוי כלי הדם וניקובם להחדרת הקצה המשופע של הצנתר.
הניק צריך להיות קטן ולהימנע מחיתוך הכלי כולו. שיטה זו יכולה למדוד את התכווצות כלי הדם ואת זרימת הדם של כל כלי שיט. כמו כן ניתן להשתמש בו כדי להעביר כימיקלים וקטורים בקרבת האיבר או הרקמה שיש למקד.
ניתן להשתמש בטכניקה זו כדי לקבוע את השינויים בוויסות העצמי של זרימת הדם במוח ברחם בעובר מתפתח, ולמקד כל גן כדי לווסת או להשתיק את השעתוק.
