הדמיה תוך ניתוחית של הזרקה תת-רשתית והיפרדות רשתית בחולדות

אני חוקר מנגנונים של מוות תאים בניתוק רשתית, והמטרה שלי היא להבטיח מעקב אחר נתונים במבחנה לניסויים in vivo. בצוות שלנו, הדגמנו את מעורבותם של מנגנוני מוות תאים שונים במהלך ניוון קולטני האור. ישנן דרכים רבות שתוארו לגרום להיפרדות רשתית במכרסמים.

פרוטוקול זה תוכנן לענות על שני אתגרים, שחזור ובטיחות. מתן פרוטוקול בטוח וניתן לשחזור בהיפרדות רשתית יבטיח יעילות במחקר מסוג זה. כדי להתחיל, הרכיב קצה מתכת צינורית לא משופע בגודל 10 מילימטר בגודל 30 המודבק על מזרק של 25 מיקרוליטר על מזרק מיקרו.

כדי לגרום להיפרדות רשתית לטווח ארוך, השתמש ב-2% הידרוקסיפרופיל מתיל צלולוז או 1% עד 5% נתרן היאלורונאט. טען את התמיסה המוכנה למזרק. לאחר מכן, מרחו טיפה אחת של 0.5% טרופיקמיד על עין אחת של חולדה מורדמת כדי לקבל מידריאזיס.

יש למרוח טיפה אחת של אוקסיבופרוקאין בעין לניתוח. השתמש במיקרוסקופ עיניים המחובר למתג כף הרגל כדי לבצע את הניתוח. כדי לחשוף את הסקלרה, יש לעגן שני תפרים מושכי עפעפיים ברבע החיצוני של שולי הפלפברל בעפעפיים העליונים והתחתונים.

יש למשוך את התפרים כדי להשיג בליטה עדינה של העין. בעזרת מחט בגודל 30, צור תעלה סקלרלית דרך הלחמית הבולברית הטמפורלית כמילימטר עד שני מילימטרים מלימבוס הקרנית. מרחו ג'ל דמעות כממשק עיניים לעדשה לאורך כל ההליך.

כדי לדמיין את לוחית הרשתית, הניחו עדשת מגע שטוחה בקוטר שמונה מילימטר על פני העין. השתמש במתג כף הרגל של המיקרוסקופ כדי להתמקד במישור הרשתית. כעת, הכנס את הצינורית אנכית דרך התעלה הסקלרית שנוצרה מראש.

התקרב לאט לרשתית ולחץ עליה בעדינות עד להבחנה בהלבנת הרשתית. שמור על יציבות הקצה תוך כדי הזרקה דרך הרטינוטומיה שנוצרה על ידי זרימת ההזרקה לאחר ההזרקה, הסר את הקצה מהרטינוטומיה. לאחר מכן, משוך בעדינות את כל הצינורית מחלל הזגוגית, וודא שלא נוגעים בעדשה.

ודא שהרפלקס האדום של האישון משתנה על ידי היפרדות הרשתית מבלי להבחין בזרימת הדם בתוך חלל הזגוגית. הסר את תפרי העפעפיים ולאחר מכן ספוג בזהירות את כל הדימום. הערך בקצרה את הלחץ התוך עיני באופן ידני.

לטיפול לאחר הניתוח, יש למרוח משחת עיניים כלורמפניקול רטינול על העין המנותחת. לאחר מכן, יש לתת מיליליטר אחד של 5% גלוקוז מונוהידרט תוך צפק. הזרקו 0.9 מיליגרם לק"ג אטיפמזול תת עורית.

לבסוף, העבירו את החיה לתא מבוקר טמפרטורה ועקבו אחריה עד שהיא מתעוררת. הזרקה תת-רשתית מוצלחת אומתה על ידי נוזל תת-רשתית שקוף בטומוגרפיה קוהרנטית אופטית, והיעדר דימום תת-רשתית בצילום פונדוס. והיפרדות רשתית מובהקת נצפתה בשני האופנים.

מדי פעם נצפו דימומים תוך-זגוגיים קלים, בעיקר ליד מקום ההזרקה, אך לא התפשטו לחלל התת-רשתית.