מחקר זה מומן על ידי הקרן המחוזית למדעי הטבע של ג'ה-ג'יאנג של סין (מענק מספר: LY17H270016), הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס': 81774331, 81873049 ו-81673997), ופרויקט המדע והטכנולוגיה של מחוז ג'ג'יאנג לרפואה סינית מסורתית של סין (מענק מס': 2013ZQ007 ו-2016ZZ011).

נהלים המערבים נושאי בעלי חיים אושרו על ידי ועדת הנורמות הרפואיות והאתיקה של האוניברסיטה לרפואה סינית בג'ג'יאנג והם בהתאם לחקיקה הסינית בנושא שימוש וטיפול בחיות מעבדה.
1. הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בברך
<ol><li>לאחר שבוע של התאקלמות, מחלקים באופן אקראי ושווה 40 חולדות ספראג-דאולי זכרים במשקל 180-200 גרם (בני 4−5 שבועות) לארבע קבוצות (n = 10 חולדות/קבוצה). הערה: חולדות בקבוצת הביקורת יוזרקו באופן תוך-מפרקי עם 50 μL של מי מלח, ואילו חולדות בקבוצות הניסוי יטופלו ב-0.5, 1.5 או 3 מ"ג של MIA מומס ב-50 μL של מי מלח, בהתאמה.</li>
	<li>ביום ההזרקה, הכינו טרי את התמיסה של MIA במי מלח סטריליים (0.9% NaCl) בריכוז 15, 30 ו-60 מ"ג/מ"ל ותמיסת פנטוברביטל 10% בתמיסת מלח סטרילית (0.9% NaCl). אזהרה: ל-MIA יש השפעה הרסנית ביותר על הקרום הרירי, דרכי הנשימה העליונות, העין, העור ורקמות אחרות. לכן, מסכה וכפפות מומלץ בעת הכנת פתרון.</li>
	<li>הרדמת חולדות על ידי הזרקה תוך-צפקית של קטמין ב-60 מ"ג/ק"ג וקסילזין ב-5 מ"ג/ק"ג (שניהם מוכנים במי מלח). מהדקים בעדינות את בהונות החולדה בפינצטה כדי לאשר הרדמה.</li>
	<li>הניחו את החולדה כשגבה פונה כלפי מטה. לגלח את הברך ולנגב את האזור המקיף את מפרק הברך באלכוהול.</li>
	<li>שמרו על הברך בזווית של 90° וחשפו את גיד הפטלר הלבן מתחת לפטלה. לחץ על גיד הפטלר עם קצה האצבע כדי למצוא את הרווח מתחת לפטלה.</li>
	<li>בחר את צומת הפער ואת הגיד הפטלרי הלטרלי כאתר ההזרקה. לאחר מכן, הכנס את מחט 26 G אנכית לתוך האתר על 5 מ"מ. אין להרגיש התנגדות כאשר המחט נמצאת בחלל המפרק. הערה: חשוב לשמור את המחט בניצב למקום ההזרקה.</li>
	<li>להזריק 50 μL של תמיסת מלח או MIA לתוך חלל המפרק. שלפו באיטיות את המחט ועטפו חתיכת גזה סביב אתר ההזרקה כדי למזער רפלוקס ודליפה. לאחר התאוששות הרדמה, להסיר את גזה.</li>
	<li>בדוק התנהגות הקשורה לכאב ב 1, 7, 14, 21, 28 ו 35 ימים לאחר זריקות כמתואר בסעיף 2.</li>
</ol>2. הערכות התנהגותיות
<ol><li>סף משיכה מכני (MWT) הערה: ה- MWT נמדד על ידי מבחן פון פריי13 והצופה היה עיוור לזריקות שהחיות קיבלו.<ol><li>מניחים חולדה בכלוב פלסטיק מוגבה (17 ס"מ על 11 ס"מ על 13 ס"מ) עם בסיס רשת תיל תלוי 50 ס"מ מעל שולחן. ודאו שסביבת הבדיקה שקטה ותנו לחולדה 30 דקות להסתגל לסביבה.</li>
		<li>לחצו את מחט פון פריי בניצב על פני השטח הכפיים של כף ידה האחורית של כל חולדה. הגבירו את הלחץ בהדרגה (כ-20 גרם לשנייה) ובאופן ליניארי עד להתרחשות הרמת כפות הרגליים או ליקוק הכפות.</li>
		<li>השתמש בכוח נמוך מהסף הקודם כדי להבטיח שהסף הוא כוח הנסיגה המינימלי. בדקו כל חולדה יותר משלוש פעמים, בהפרש של 3-5 דקות לפחות.</li>
		<li>רשום את הכוח המינימלי המעורר רפלקס משיכת כפות. ממוצע הנתונים כ- MWT של חולדות.</li>
	</ol></li>
	<li>חביון נסיגה תרמית (TWL) הערה: ה- TWL נמדד באמצעות מנגנון הבדיקה הכפית (טבלת חומרים) והצופה היה עיוור לזריקות שהחיות קיבלו.<ol><li>הניחו קופסת פרספקס (60 ס"מ על 20 ס"מ x 14 ס"מ, מחולקת ל-6 תאים) על לוח זכוכית בעובי 3 מ"מ, והכניסו חולדות לקופסה (אחת בכל תא). ודאו שהסביבה שקטה וטמפרטורת החדר קבועה.</li>
		<li>תנו לחולדות 30 דקות להסתגל לסביבת הבדיקה.</li>
		<li>כייל את הגירוי התרמי באמצעות רדיומטר אינפרא אדום. הגדר את עוצמת האינפרא אדום הרצויה על 70 יחידות.</li>
		<li>הניחו את פולט/גלאי האינפרא אדום על המיכל ישירות מתחת למרכז הכפה הנבדקת.</li>
		<li>לחיצה על לחצן START . הטיימר יופעל באופן אוטומטי. הבקר יכבה באופן אוטומטי את אור האינפרא אדום ויפסיק את הטיימר לחלוטין ברגע שמתרחשת תנועת הכפה.</li>
		<li>הקלט את זמן התגובה כאשר המראה של משיכת כפות וליקוק כפות. הערה: תגובה חיובית לבדיקה נחשבת למשיכת כפות וליקוק כפות. אם מתרחשת רק נסיגת כפות, יש להתייחס אליה כאל תנועה רצונית של החולדה ולא כאל תגובה חיובית.</li>
		<li>חזור על הבדיקה יותר משלוש פעמים. ממוצע הנתונים כ- TWL של חולדות. הערה: כל חשיפה של חום קורן לא תעלה על 20 שניות. גירויי אינפרא אדום על אותה כפה אחורית צריכים להיות במרחק של לפחות 3−5 דקות זה מזה.</li>
	</ol></li>
	<li>ניתוחי תבניות הליכה הערה: ניתוחי תבניות ההליכה נמדדו באמצעות מערכת הדמיה (Table of Materials) והצופה היה עיוור לזריקות שהחיות קיבלו.<ol><li>התאימו את אורך תא ההליכה באמצעות הידיות בשני הקצוות של תא ההליכה לאורך המתאים לחולדות (למשל, 61 ס"מ).</li>
		<li>הכניסו חולדה לתא ההליכה ואימנו חולדות לבצע ריצות רצופות במשך 5 מחזורי צעדים לפחות במהירות של 18 ס"מ לשנייה לפני הניסוי הפורמלי. הערה: כאשר חולדה ממוקמת לראשונה בתא ההליכה, ניתן להגדיר את המהירות לכ-20 ס"מ לשנייה ולכבות אותה כאשר היא רצה סביב 2 שניות. לאחר מכן הגדר את המהירות ל-18 ס"מ לשנייה. טפחו בעדינות על גב החולדה עם המחיצה, אם החולדה משתהה או נסוגה במהלך הליכה. נסו להפחית את המהירות בהדרגה מ-18 ס"מ לשנייה ל-10 ס"מ לשנייה. אם החולדה בסופו של דבר לא מצליחה לבצע את הבדיקה, מקובל לבחור חולדה אחרת לבדיקה.</li>
		<li>הגבירו באיטיות את מהירות ההליכון עד שהוא מגיע למהירות היעד (18 ס"מ לשנייה). צלם לפחות 5 שניות וידאו של תנועה מתמשכת של החולדה באמצעות מצלמת הווידאו הדיגיטלית המהירה המותקנת מתחת לחגורת ההליכון השקופה.</li>
		<li>בדקו כל חולדה במרחק של לפחות 5 דקות זו מזו כדי להשיג לפחות שלוש ריצות רצופות.</li>
		<li>ציירו "תיבה תוחמת" כדי להגדיר את הגבול של תמונת הליכה של בעלי חיים בתוכנת ההדמיה והזינו את מהירות הריצה עבור כל סרטון. בחר סרטונים כקבוצה ועבד סרטונים באופן אוטומטי על-ידי התוכנה. לאחר עיבוד סרטונים, התוכנה תפיק מספר גיליונות אלקטרוניים לדיווח על מדדי הליכה, כולל עמידה, נדנדה, בלימה, הנעה, קצב, רצף צעדים וכו '.</li>
		<li>חישוב שטח הכפה הכולל (ס"מ2), אורך צעד ממוצע (ס"מ) ואיחוד אורך צעד. הערה: שטח הכפות הכולל הוא הממוצע של השטח הכולל של ארבע כפות של כל קבוצת חולדות ושטח הכפות מוגדר כשטח הכפות המרבי במגע עם ההליכון במהלך שלב העמידה של מחזור הצעדים. אורך צעד הוא המרחק בין מגעים ראשוניים של אותה כפה בצעד שלם אחד. אורך צעד יחידה = אורך צעד ממוצע (ס"מ)/אורך גוף (ס"מ).</li>
	</ol></li>
</ol>3. ניתוחים היסטופתולוגיים ואימונוהיסטוכימיים
<ol><li>המתת חולדות על ידי הזרקה תוך-צפקית של נתרן פנטוברביטל במינון של 150 מ"ג/ק"ג (מוכן במי מלח). כריתת מפרקי הברך באופן מיידי לצורך הניתוחים ההיסטולוגיים.</li>
	<li>לתקן את המפרקים ב 10% פורמלין במשך 24 שעות, decalcify עם 10% EDTA במלח מאוגר פוספט (PBS) במשך 8 שבועות, ולאחר מכן להטמיע את המפרקים פרפין. אזהרה: פורמלין עלול לגרום לגירוי בעיניים, בעור ובדרכי הנשימה. זה צריך להיות מטופל במכסה המנוע.</li>
	<li>חותכים את המפרקים המשובצים בפרפין בעובי 3 מ"מ עם מיקרוטום וצפים באמבט מים בטמפרטורה של 40 מעלות צלזיוס המכיל מים מזוקקים.</li>
	<li>העבר חלקים למגלשות זכוכית. יש לייבש את המגלשות למשך הלילה ולאחסן את המגלשות בטמפרטורת החדר (RT) להמשך הכתמים הבאים.</li>
	<li>מניחים את המגלשות בתנור של 60 מעלות צלזיוס למשך 4 שעות כדי לנטרל את השקופיות.</li>
	<li>טבל את השקופיות ברצף בקסילן, קסילן, 100% אתנול, 100% אתנול, 95% אתנול, 80% אתנול ו-75% אתנול למשך 5 דקות, בהתאמה, ב-RT.</li>
	<li>מקטעי כתמים עם המטוקסילין ואאוזין (H&E), ספרנין-O (SO) והמטוקסילין כחול אלקסיאני (ABH) וכן נוגדנים נגד קולגן מסוג II של חולדות (Col2), קולגן מסוג X (Col10) ומטריצה מטאלופרוטאינאז 13 (MMP13), כמתואר בשלבים 3.8−3.12.</li>
	<li>צביעת H&E<ol><li>יש לשטוף את המגלשות עם H2O שעבר דה-יוניזציה למשך 3 דקות. כתם מחליק עם המטוקסילין במשך 3−5 דקות.</li>
		<li>יש לשטוף את החלקות עםH2O 3x, דקה אחת כל אחת, עד שלא נשאר המטוקסילין על המשטח.</li>
		<li>כתם מחליק עם eosin במשך 30 שניות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x שעבר דה-יוניזציה, דקה אחת כל אחת, עד שלא יישאר אוזין על פני השטח.</li>
		<li>לטבול מגלשות באמוניה של 0.1% למשך 10−20 שניות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x, דקה אחת כל אחת.</li>
		<li>יש לטבול ברצף ב-95% אתנול, 100% אתנול, קסילן, קסילן וקסילן למשך דקה אחת, בהתאמה.</li>
		<li>עטיפת השקופיות בשרף נייטרלי.</li>
	</ol></li>
	<li>כל כך מכתים<ol><li>יש לשטוף את המגלשות עם H2O שעבר דה-יוניזציה למשך 3 דקות. כתם מחליק עם המטוקסילין במשך 3−5 דקות.</li>
		<li>להבדיל במהירות 1% אלכוהול חומצה (כ 3 שניות). לאחר מכן, יש לשטוף עםH2O 3x שעבר דה-יוניזציה, דקה אחת כל אחד, עד שלא יישאר המטוקסילין על פני השטח.</li>
		<li>מחליק כתמים עם פתרון ירוק מהיר (FCF) למשך 5 דקות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x, דקה אחת כל אחת.</li>
		<li>כתם מחליק עם SO במשך 1−2 דקות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x, דקה אחת כל אחת.</li>
		<li>יש לשטוף עם 1% חומצה אצטית למשך 1-2 דקות כדי להסיר את שאריות ה-FCF. יש לשטוף את המגלשות עם H2O שעבר דה-יוניזציה למשך דקה אחת.</li>
		<li>יש לטבול ברצף ב-95% אתנול, 100% אתנול, קסילן, קסילן וקסילן למשך דקה אחת, בהתאמה.</li>
		<li>עטיפת השקופיות בשרף נייטרלי.</li>
	</ol></li>
	<li>מכתים ABH<ol><li>יש לשטוף את המגלשות עם H2O שעבר דה-יוניזציה למשך 3 דקות. יש לטבול ב-1% אלכוהול חומצי למשך 30 שניות ולנקז לזמן קצר על מגבת נייר (אין לשטוף).</li>
		<li>לטבול מגלשות ב- ABH למשך שעה אחת. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x שעבר דה-יוניזציה, דקה אחת כל אחת, עד שלא יישאר ABH על פני השטח.</li>
		<li>להבדיל במהירות 1% אלכוהול חומצה (כ 3 שניות). יש לשטוף את המגלשות עם H2O 3x, דקה אחת כל אחת.</li>
		<li>יש לטבול במי אמוניום ב-0.5% למשך 15 שניות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x, דקה אחת כל אחת.</li>
		<li>לטבול ב-95% אתנול למשך דקה אחת. היסחפו לתוך תמיסת eosin/orange G למשך דקה וחצי.</li>
		<li>יש לטבול ברצף ב-95% אתנול, 100% אתנול, קסילן, קסילן וקסילן למשך דקה אחת, בהתאמה.</li>
		<li>עטיפת השקופיות בשרף נייטרלי.</li>
	</ol></li>
	<li>בחנו את כל השקופיות תחת מיקרוסקופ וקיבלו ציון סטטיסטי בסולם של 0-13 על ידי תצפית כפולת סמיות, על פי שיטת הניקוד של מנקין14.</li>
	<li>אימונוהיסטוכימיה<ol><li>יש לשטוף את המגלשות עם H2O שעבר דה-יוניזציה למשך 3 דקות.</li>
		<li>יש לטבול את השקופיות ב-0.1 M נתרן ציטראט ולהניח את השקופיות בתנור של 60 מעלות צלזיוס למשך 4 שעות כדי לאחזר את האנטיגן.</li>
		<li>היסחפו לתוך 0.3% Triton X-100 ב-PBS למשך 10 דקות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם PBS 2x, 3 דקות כל אחת.</li>
		<li>הדגירה של מקטעים בתמיסתH 2 O2 3% במתנול ב-RT למשך 10 דקות כדי לחסום פעילות פרוקסידאז אנדוגנית. יש לשטוף את השקופיות עם PBS 2x, 3 דקות כל אחת.</li>
		<li>הדגירה של חלקים עם סרום עזים של 5% ב-PBS למשך 30 דקות ב-RT כדי לחסום כל כריכה לא ספציפית. יש לשטוף את השקופיות עם PBS 2x, 3 דקות כל אחת.</li>
		<li>יש לדגום מקטעי לילה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס עם 100 μL של נוגדנים ראשוניים מדולל PBS (1:1,000) נגד קולגן מסוג II של חולדות (Col2), קולגן מסוג X (Col10) ומטריצה מטאלופרוטאינאז 13 (MMP13). יש לשטוף את השקופיות עם PBS 2x, 3 דקות כל אחת.</li>
		<li>מקטעי דגירה עם 100 μL של נוגדן משני מדולל PBS (1:1,000) (עז נגד עכבר משני או עז נגד עכבר משני) במשך 20 דקות ב- RT. יש לשטוף את השקופיות עם PBS 2x, 3 דקות כל אחת.</li>
		<li>מקטעי דגירה עם 100 μL של 3,3′-diaminobenzidine (DAB) פתרון עבודה. עקוב אחר התגובה כאשר התגובה הכרומוגנית הופכת את אתרי האפיטופ לחום. אזהרה: DAB הוא חומר מסרטן. תמיד ללבוש כפפות ולעבוד עם מכסה המנוע בעת עבודה עם DAB. הערה: זמן התפתחות הצבע עשוי להשתנות בין מספר שניות ל-10 דקות.</li>
		<li>ברגע שמתפתח צבע חום על החלקים, יש לשטוף את השקופיות עםH2O 2x שעבר דה-יוניזציה, 3 דקות כל אחת.</li>
		<li>יש לטבול את השקופיות בהמטוקסילין למשך 1-2 דקות כדי לנטרל שקופיות. לאחר מכן, יש לשטוף את החלקות עם H2O 3x, דקה אחת כל אחת.</li>
		<li>יש לטבול ברצף ב-95% אתנול, 100% אתנול, קסילן, קסילן וקסילן למשך דקה אחת, בהתאמה.</li>
		<li>עטיפת השקופיות בשרף נייטרלי.</li>
		<li>שימו לב לצבע הנוגדנים המכתימים בקטעים תחת מיקרוסקופ.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol>
	<li>Hunter, D. J., Schofield, D., Callander, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+individual+and+socioeconomic+impact+of+osteoarthritis.">The individual and socioeconomic impact of osteoarthritis.</a> Nature Reviews Rheumatology. 10 (7), 437-441 (2014).</li><li>Neogi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epidemiology+and+impact+of+pain+in+osteoarthritis.">The epidemiology and impact of pain in osteoarthritis.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 21 (9), 1145-1153 (2013).</li><li>Teeple, E., Jay, G. D., Elsaid, K. A., Fleming, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+osteoarthritis:+challenges+of+model+selection+and+analysis.">Animal models of osteoarthritis: challenges of model selection and analysis.</a> AAPS Journal. 15 (2), 438-446 (2013).</li><li>Woolf, A. D., Pfleger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burden+of+major+musculoskeletal+conditions.">Burden of major musculoskeletal conditions.</a> Bulletin of the World Health Organization. 81 (9), 646-656 (2003).</li><li>Bijlsma, J. W., Berenbaum, F., Lafeber, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis:+an+update+with+relevance+for+clinical+practice.">Osteoarthritis: an update with relevance for clinical practice.</a> Lancet. 377 (9783), 2115-2126 (2011).</li><li>McCoy, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Osteoarthritis:+Comparisons+and+Key+Considerations.">Animal Models of Osteoarthritis: Comparisons and Key Considerations.</a> Veterinary Pathology. 52 (5), 803-818 (2015).</li><li>O'Neill, T. W., Felson, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Osteoarthritis+(OA)+Pain.">Mechanisms of Osteoarthritis (OA) Pain.</a> Current Osteoporosis Reports. 16 (5), 611-616 (2018).</li><li>Kuyinu, E. L., Narayanan, G., Nair, L. S., Laurencin, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+osteoarthritis:+classification,+update,+and+measurement+of+outcomes.">Animal models of osteoarthritis: classification, update, and measurement of outcomes.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 11, 19 (2016).</li><li>Takahashi, I., Matsuzaki, T., Hoso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+histopathological+developments+in+knee-joint+components+in+a+rat+model+of+osteoarthritis+induced+by+monosodium+iodoacetate.">Long-term histopathological developments in knee-joint components in a rat model of osteoarthritis induced by monosodium iodoacetate.</a> Journal of Physical Therapy Science. 29 (4), 590-597 (2017).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ongoing+pain+in+the+MIA+model+of+osteoarthritis.">Ongoing pain in the MIA model of osteoarthritis.</a> Neuroscience Letters. 493 (3), 72-75 (2011).</li><li>Combe, R., Bramwell, S., Field, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monosodium+iodoacetate+model+of+osteoarthritis:+a+model+of+chronic+nociceptive+pain+in+rats.">The monosodium iodoacetate model of osteoarthritis: a model of chronic nociceptive pain in rats.</a> Neuroscience Letters. 370 (2-3), 236-240 (2004).</li><li>Pomonis, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+pharmacological+characterization+of+a+rat+model+of+osteoarthritis+pain.">Development and pharmacological characterization of a rat model of osteoarthritis pain.</a> Pain. 114 (3), 339-346 (2005).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Mankin, H. J., Dorfman, H., Lippiello, L., Zarins, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemical+and+metabolic+abnormalities+in+articular+cartilage+from+osteo-arthritic+human+hips.+II.+Correlation+of+morphology+with+biochemical+and+metabolic+data.">Biochemical and metabolic abnormalities in articular cartilage from osteo-arthritic human hips. II. Correlation of morphology with biochemical and metabolic data.</a> Journal of Bone and Joint Surgery. 53 (3), 523-537 (1971).</li><li>Yan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroprotective+effects+of+platelet+lysate+towards+monoiodoacetate-induced+arthritis+by+suppression+of+TNF-&#945;-induced+activation+of+NF-&#312;B+pathway+in+chondrocytes.">Chondroprotective effects of platelet lysate towards monoiodoacetate-induced arthritis by suppression of TNF-&#945;-induced activation of NF-&#312;B pathway in chondrocytes.</a> Aging. 11 (9), 2797-2811 (2019).</li><li>Yan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-Articular+Injection+of+Extract+Attenuates+Pain+Behavior+and+Cartilage+Degeneration+in+Mono-Iodoacetate+Induced+Osteoarthritic+Rats.">Intra-Articular Injection of Extract Attenuates Pain Behavior and Cartilage Degeneration in Mono-Iodoacetate Induced Osteoarthritic Rats.</a> Frontiers in Pharmacology. 9, 1360 (2018).</li><li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agkistrodon+ameliorates+pain+response+and+prevents+cartilage+degradation+in+monosodium+iodoacetate-induced+osteoarthritic+rats+by+inhibiting+chondrocyte+hypertrophy+and+apoptosis.">Agkistrodon ameliorates pain response and prevents cartilage degradation in monosodium iodoacetate-induced osteoarthritic rats by inhibiting chondrocyte hypertrophy and apoptosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 231, 545-554 (2019).</li><li>Yamada, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+monosodium+iodoacetate+dosage+to+induce+knee+osteoarthritis:+Relation+with+oxidative+stress+and+pain.">Evaluation of monosodium iodoacetate dosage to induce knee osteoarthritis: Relation with oxidative stress and pain.</a> International Journal of Rheumatic Diseases. 22 (3), 399-410 (2019).</li><li>Schuelert, N., McDougall, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+evidence+that+the+vasoactive+intestinal+peptide+receptor+antagonist+VIP6-28+reduces+nociception+in+an+animal+model+of+osteoarthritis.">Electrophysiological evidence that the vasoactive intestinal peptide receptor antagonist VIP6-28 reduces nociception in an animal model of osteoarthritis.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 14 (11), 1155-1162 (2006).</li><li>Lee, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choline,+an+alpha7+nicotinic+acetylcholine+receptor+agonist,+alleviates+hyperalgesia+in+a+rat+osteoarthritis+model.">Choline, an alpha7 nicotinic acetylcholine receptor agonist, alleviates hyperalgesia in a rat osteoarthritis model.</a> Neuroscience Letters. 548, 291-295 (2013).</li><li>Piesla, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+gait,+due+to+inflammation+but+not+nerve+injury,+reflects+enhanced+nociception+in+preclinical+pain+models.">Abnormal gait, due to inflammation but not nerve injury, reflects enhanced nociception in preclinical pain models.</a> Brain Research. 1295, 89-98 (2009).</li><li>Udo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoiodoacetic+acid+induces+arthritis+and+synovitis+in+rats+in+a+dose-+and+time-dependent+manner:+proposed+model-specific+scoring+systems.">Monoiodoacetic acid induces arthritis and synovitis in rats in a dose- and time-dependent manner: proposed model-specific scoring systems.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 24 (7), 1284-1291 (2016).</li><li>Guingamp, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mono-iodoacetate-induced+experimental+osteoarthritis:+a+dose-response+study+of+loss+of+mobility,+morphology,+and+biochemistry.">Mono-iodoacetate-induced experimental osteoarthritis: a dose-response study of loss of mobility, morphology, and biochemistry.</a> Arthritis &amp; Rheumatism. 40 (9), 1670-1679 (1997).</li><li>Jeong, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eupatilin+Exerts+Antinociceptive+and+Chondroprotective+Properties+in+a+Rat+Model+of+Osteoarthritis+by+Downregulating+Oxidative+Damage+and+Catabolic+Activity+in+Chondrocytes.">Eupatilin Exerts Antinociceptive and Chondroprotective Properties in a Rat Model of Osteoarthritis by Downregulating Oxidative Damage and Catabolic Activity in Chondrocytes.</a> PLoS ONE. 10 (6), 0130882 (2015).</li><li>Cook, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cartilage+repair.">Animal models of cartilage repair.</a> Bone &amp; Joint Research. 3 (4), 89-94 (2014).</li><li>Little, C. B., Zaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+constitutes+an+"animal+model+of+osteoarthritis"--the+need+for+consensus.">What constitutes an "animal model of osteoarthritis"--the need for consensus.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 20 (4), 261-267 (2012).</li></ol>

למחברים אין מה לחשוף.

מודל החולדות של OA המושרה על ידי MIA הוא מודל מבוסס היטב, בשימוש נרחב. הזרקה תוך-מפרקית של MIA גורמת בתחילה לדלקת חמורה וחריפה, מה שמוליד את השלב הארוך והניווני של OA17,18. במחקר זה מדדנו את הרגישות הנוסיספטיבית של MWT ו-TWL, והערכנו שינויים בהליכה באמצעות מערכת הדמיה. ד...

אוסטאוארתריטיס (OA) היא מחלת המפרקים הנפוצה ביותר בעולם, הפוגעת בכ-10-12% מאוכלוסיית המבוגרים1. המפרק המעורב ביותר הוא הברך, ול-OA יש שכיחות גבוהה יותר בקרב מבוגרים, במיוחד נשים2. כמחלה כרונית, OA מתפתחת בהדרגה במשך עשרות שנים לכשל במפרקים עם תסמינים כגון אובדן סחוס, דלקת סינוביאלית, אוסטאופיטוזה, ירידה בתפקוד וכאב כרוני3. על פי ארגון הבריאות העולמי (WHO), OA היא המחלה הרביעית בשכיחותה אצל נקבות והמחלה השמינית בשכיחותה אצל גברים. עד 2020, OA עשויה להפוך למחלה הרביעית הכי משביתה בבני אדם4. עם זאת, הטיפולים הזמינים כיום של OA מטפלים רק בסימפטומים ומאריכים את הזמן עד לניתוח החלפת מפרקים5.
OA ספונטני בחולים אנושיים לעתים קרובות לוקח זמן רב כדי לייצר סימפטומים קליניים כגון כאב הקשור למפרקים6. בשלבים המוקדמים של OA, הכאב הוא בדרך כלל לסירוגין והופך תכופים וחמורים יותר ככל שהמחלה מתקדמת, מה שהופך אותו לתלונה השלטת של חולים7. לכן, מודלים נרחבים של בעלי חיים לכאבי OA פותחו בחצי המאה האחרונה כדי לקדם טיפול לשיכוך כאבים. מודלים OA חולקו באופן קלאסי מודלים ספונטניים המושרה. מודלים ספונטניים כוללים מודלים טבעיים ומודלים מהונדסים גנטית, שיכולים לדמות בצורה קרובה יותר את מהלך ה- OA הראשוני בבני אדם8. בדרך כלל ניתן לחלק מודלים מושרים לשתי קטגוריות: 1) OA פוסט טראומטי המושרה על ידי ניתוח או טראומה אחרת; או 2) הזרקה תוך-מפרקית של חומרים כונדרוטוקסיים או מעודדי דלקת3. מודלים אלה מניחים בסיס למחקר הפתופיזיולוגי של OA ותורמים רבות לפיתוח תרופות להפחתת הכאב ולהגברת התפקוד.
לאחרונה, הגורם הנפוץ ביותר עבור מודלים OA הוא מונו-יודואצטט (MIA). MIA, מעכב של גליצרלדהיד-3-פוספט דהידרוגנאז, יכול לגרום לשינויים במטריצת הסחוס, השפלה, אובדן סחוס, סינוביטיס ושינויים אחרים, הדומים לשינויים הפתולוגיים של דלקת מפרקים ניוונית אנושית9. צוין כי הזרקה תוך-מפרקית של MIA גרמה לכאב מתמשך 28 יום לאחר מתן MIA, מה שמצביע על כך שמודל MIA עשוי להיות שימושי לחקר כאב נוסיצפטיבי כרוני10,11,12. במחקר זה, חולדות ספראג-דאולי זכרים קיבלו זריקות תוך-מפרקיות עם 0.5, 1.5 או 3 מ"ג של MIA במפרקי הברך. חומרת כאבי המפרקים הנגרמים על ידי MIA נמדדה על ידי הערכת רגישות מכנית ותרמית ב 1, 7, 14, 21, 28 ו -35 ימים לאחר הזריקות. על בסיס זה, 1.5 מ"ג של MIA נבחר כריכוז הסופי להערכת דפוסי הליכה ושינויים היסטולוגיים ב 28 ימים לאחר הזריקות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:783px;" width="781">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:223px;">Anti-Collagen II antibody</td>
			<td style="width:255px;">Abcam(UK)</td>
			<td style="width:115px;">34712</td>
			<td style="width:191px;">Primary antibody for immunohistochemistry (IHC)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Anti-Collagen X (Col10) antibody</td>
			<td style="width:255px;">Abcam(UK)</td>
			<td style="width:115px;">49945</td>
			<td style="width:191px;">Primary antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">DigiGait Imaging System</td>
			<td style="width:255px;">Mouse Specifics (Boston, MA, USA)</td>
			<td style="width:115px;"></td>
			<td style="width:191px;">Equipment for gait patterns analyses</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Eosin</td>
			<td style="width:255px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:115px;">861006</td>
			<td style="width:191px;">The dye for HE staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fast Green FCF</td>
			<td style="width:255px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:115px;">F7252</td>
			<td style="width:191px;">The dye for SO staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Goat anti-mouse antibody</td>
			<td style="width:255px;">ZSGQ-BIO (Beijing, China)</td>
			<td style="width:115px;">PV-9002</td>
			<td style="width:191px;">Secondary antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Goat anti-rabbit antibody</td>
			<td style="width:255px;">ZSGQ-BIO (Beijing, China)</td>
			<td style="width:115px;">PV-9001</td>
			<td style="width:191px;">Secondary antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Hematoxylin</td>
			<td style="width:255px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:115px;">H3163</td>
			<td style="width:191px;">The dye for HE staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">MIA</td>
			<td style="width:255px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:115px;">I4386-10G</td>
			<td style="width:191px;">powder</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">MMP13</td>
			<td style="width:255px;">Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, USA)</td>
			<td style="width:115px;">69926</td>
			<td style="width:191px;">Primary antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Modular tissue embedding center</td>
			<td style="width:255px;">Thermo Fisher Scientific (USA)</td>
			<td style="width:115px;">EC 350</td>
			<td style="width:191px;">Produce paraffin blocks.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Plantar Test apparatus</td>
			<td style="width:255px;">UgoBasile (Italy)</td>
			<td style="width:115px;">37370</td>
			<td style="width:191px;">Equipment for TWL assay</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)</td>
			<td style="width:255px;">TaKaRa Biotechnology Co. Ltd. (Dalian, China)</td>
			<td style="width:115px;">RR037A</td>
			<td style="width:191px;">Extracte total RNA from cultured cells</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Rotary and Sliding Microtomes</td>
			<td style="width:255px;">Thermo Fisher Scientific (USA)</td>
			<td style="width:115px;">HM325</td>
			<td style="width:191px;">Precise paraffin sections.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Safranin-O</td>
			<td style="width:255px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:115px;">S2255</td>
			<td style="width:191px;">The dye for SO staining</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Tissue-Tek VIP 5 Jr</td>
			<td style="width:255px;">Sakura (Japan)</td>
			<td style="width:115px;"></td>
			<td style="width:191px;">Vacuum Infiltration Processor</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

osteoarthritis pain model induced by intra-articular injection of mono-iodoacetate in rats

ניתן לחלק את המודלים החייתיים הנוכחיים של דלקת מפרקים ניוונית (OA) למודלים ספונטניים ומודלים מושרים, שמטרתם לדמות את השינויים הפתופיזיולוגיים של OA אנושי. עם זאת, כתסמין העיקרי בשלב מאוחר של OA, הכאב משפיע על חיי היומיום של החולים, ואין הרבה מודלים זמינים. המודל המושרה על ידי מונו-יודואצטט (MIA) הוא מודל הכאב OA הנפוץ ביותר, המשמש בעיקר במכרסמים. MIA הוא מעכב של גליצרלדהיד-3-פוספט דהידרוגנאז, הגורם למוות של כונדרוציטים, ניוון סחוס, אוסטאופיט ושינויים מדידים בהתנהגות בעלי חיים. חוץ מזה, ניתן לזהות שינויי ביטוי של מטריקס מטאלופרוטינאז (MMP) וציטוקינים מעודדי דלקת (IL1 β ו- TNF α) במודל המושרה על ידי MIA. שינויים אלה עולים בקנה אחד עם תנאים פתופיזיולוגיים של OA בבני אדם, מה שמצביע על כך ש-MIA יכול לגרום למודל כאב OA מדיד ומוצלח. מחקר זה נועד לתאר את המתודולוגיה של הזרקה תוך-מפרקית של MIA בחולדות ולדון בהתנהגויות הקשורות לכאב ובשינויים היסטופתולוגיים הנובעים מכך.

בעזרת מתודולוגיה זו, הקמנו מודל כאב OA בחולדה וזיהינו את השינויים שנוצרו. MWT ו- TWL שיקפו אלודיניה מכנית והיפראלגיה תרמית, בהתאמה. כפי שניתן לראות באיור 1, MIA גרם לאלודיניה מכנית ולהיפראלגזיה תרמית באופן תלוי מינון. למרבה הפלא, הירידה של MWT הגיעה לשיא מ 21 ימים ל 28 ימים, ולאחר מכן ה...

Watch this Scientific Journal Video about Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats at JoVE.com

Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

מחקר זה מתאר את השיטה של הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בחולדות ודן בהתנהגויות הקשורות לכאב כתוצאה מכך ובשינויים היסטופתולוגיים, המספקים סימוכין ליישומים עתידיים.

מודל כאב אוסטאוארתריטיס המושרה על ידי הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בחולדות

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the ...

osteoarthritis-pain-model-induced-intra-articular-injection-mono

Research

JoVE Journal

Medicine

7.9K Views.  Zhejiang Chinese Medical University. מחקר זה מתאר את השיטה של הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בחולדות ודן בהתנהגויות הקשורות לכאב כתוצאה מכך ובשינויים היסטופתולוגיים, המספקים סימוכין ליישומים עתידיים.

Video: Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the occurrence of subretinal hemorrhage can affect photoreceptor cell death in the detached retina. Hence, it is advantageous to create reproducible RDs without subretinal hemorrhage for evaluating photoreceptor cell death. We modified a previously reported method to create bullous and persistent RDs in a reproducible location with rare occurrence of subretinal hemorrhage. The critical step of this modified method is the creation of a self-sealing scleral incision, which can prevent leakage of sodium hyaluronate after injection into the subretinal space. To make the self-sealing scleral incision, a scleral tunnel is created, followed by scleral penetration into the choroid with a 30 G needle. Although choroidal hemorrhage may occur during this step, astriction with a surgical spear reduces the rate of choroidal hemorrhage. This method allows a more reproducible and reliable model of photoreceptor death in diseases that involve RD such as rhegmatogenous RD, retinopathy of prematurity, diabetic retinopathy, central serous chorioretinopathy, and age-related macular degeneration (AMD).

Creating experimental retinal detachments with a reproducible and sustained height of detachment, and without subretinal hemorrhage, is important for studying the pathophysiology of photoreceptor cell loss in retinal disease and evaluating potential therapeutic interventions. Here, we report such a method in detail.

רשתית דגם ניתוק במכרסמים על ידי הזרקת subretinal של נתרן Hyaluronate

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present here a protocol for elevating intraocular pressure (IOP) in the rat, by injecting magnetic microspheres into the anterior chamber of the eye. The use of magnetic particles allows the user to manipulate the beads into the iridocorneal angle, thus providing a very effective blockade of fluid outflow from the trabecular meshwork. This leads to long-lasting IOP rises, and eventually neuronal death in the ganglion cell layer (GCL) as well as optic nerve pathology, as seen in patients with the disease. This method is simple to perform, as it does not require machinery, specialist surgical skills, or many hours of practice to perfect. Furthermore, the pressure elevations are very robust, and reinjection of the magnetic microspheres is not usually required unlike in some other models using plastic beads. Additionally, we believe this method is suitable for adaptation for the mouse eye.

We present a method for inducing elevated intraocular pressure (IOP), by injecting magnetic microspheres into the rat eye, to model glaucoma. This leads to strong pressure rises, and extensive neuronal death. This protocol is easy to perform, does not require repeat injections, and produces stable long-lasting IOP rises.

ניסוי הגלאוקומה נגרמת על ידי הזרקת Ocular של מיקרוסכמות מגנטית

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The current treatments for OA pain such as NSAIDS or opiates are neither sufficiently effective nor devoid of detrimental side effects. Animal models of OA are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms and define novel pharmacological targets for therapy. Currently available models of OA in rodents include surgical and chemical interventions into one knee joint. The monoiodoacetate (MIA) model has become a standard for modelling joint disruption in OA in both rats and mice. The model, which is easier to perform in the rat, involves injection of MIA into a knee joint that induces rapid pain-like responses in the ipsilateral limb, the level of which can be controlled by injection of different doses. Intra-articular injection of MIA disrupts chondrocyte glycolysis by inhibiting glyceraldehyde-3-phosphatase dehydrogenase and results in chondrocyte death, neovascularization, subchondral bone necrosis and collapse, as well as inflammation. The morphological changes of the articular cartilage and bone disruption are reflective of some aspects of patient pathology. Along with joint damage, MIA injection induces referred mechanical sensitivity in the ipsilateral hind paw and weight bearing deficits that are measurable and quantifiable. These behavioral changes resemble some of the symptoms reported by the patient population, thereby validating the MIA injection in the knee as a useful and relevant pre-clinical model of OA pain.
The aim of this article is to describe the methodology of intra-articular injections of MIA and the behavioral recordings of the associated development of hypersensitivity with a mind to highlight the necessary steps to give consistent and reliable recordings.

Osteoarthritis (OA), or degenerative joint disease, is a debilitating condition associated with pain that remains only partially controlled by available analgesics. Animal models are being developed to improve our understanding of OA-related pain mechanisms. Here we describe the methodology for the monoiodoacetate model of OA pain in the mouse.

מודל Monoiodoacetate של אוסטיאוארתריטיס כאב העכבר

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known risk factor for glaucoma. This protocol demonstrates a step-by-step guide on this technique in Long Evans rats and C57BL/6 mice. Under general anesthesia, a "purse-string" suture is applied on the conjunctiva, around the equator and behind the limbus of the eye. The fellow eye serves as an untreated control. Over the duration of our study, which was a period of 8 weeks for rats and 12 weeks for mice, IOP remained elevated, as measured regularly by rebound tonometry in conscious animals without topical anesthesia. In both species, the sutured eyes showed electroretinogram features consistent with preferential inner retinal dysfunction. Optical coherence tomography showed selective thinning of the retinal nerve fiber layer. Histology of the rat retina in cross-section found reduced cell density in the ganglion cell layer, but no change in other cellular layers. Staining of flat-mounted mouse retinae with a ganglion cell specific marker (RBPMS) confirmed ganglion cell loss. The circumlimbal suture is a simple, minimally invasive and cost-effective way to induce ocular hypertension that leads to ganglion cell injury in both rats and mice.

Chronic ocular hypertension is induced by applying a circumlimbal suture in rats and mice, leading to functional and structural deterioration of the retinal ganglion cells consistent with glaucoma.

דגם של גלאוקומה המושרה על ידי תפרים Circumlimbal אצל חולדות ועכברים

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

The Lower Body Positive Pressure Treadmill for Knee Osteoarthritis Rehabilitation

Here, based on a clinician&rsquo;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in addition to a clinical, functional assessment methodology, including details for further encouragement of the development of non-drug surgical intervention strategies in knee osteoarthritis patients. However, we only present the effect of LBPP training in improvement of pain and knee function in one patient through three-dimensional gait analysis. The exact, long-term effects of this approach should be explored in future studies.

Here, based on a clinician&#8217;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in addition to a clinical, functional assessment methodology, including details for further encouragement of the development of non-drug surgical intervention strategies in knee osteoarthritis patients. However, we only present the effect of LBPP training in improvement of pain and knee function in one patient through three-dimensional gait analysis. The exact, long-term effects of this approach should be explored in future studies.

הגוף התחתון חיובי לחץ הליכון עבור שיקום אוסטיאוארתריטיס ברך

Here, based on a clinician&rsquo;s point-of-view, we propose a two-model lower body positive pressure (LBPP) protocol (walking and squatting models) in ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

שיטה לא פולשנית ליצירת מודל סחוס תוך מפרקי הנגרם על ידי העמסה מחזורית של ברך החולדה

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. Osteoanabolic drugs have the potential to augment the repair of fractures but have constraints like high costs or undesirable side effects. The bone healing potential of a drug can initially be determined by in vitro studies, but in vivo studies are needed for the final proof of concept. Our objective was to develop a femur osteotomy rodent model that could help researchers understand the development of callus formation following fracture of the shaft of the femur and that could help establish whether a potential drug has bone healing properties. Adult male Wistar albino rats were used after Institutional Animal Ethics Committee clearance. The rodents were anesthetized, and under aseptic conditions, complete transverse fractures at the middle one-third of the shafts of the femurs were created using open osteotomy. The fractures were reduced and internally fixed using intramedullary K-wires, and secondary fracture healing was allowed to take place. After surgery, intraperitoneal analgesics and antibiotics were given for 5 days. Sequential weekly x-rays assessed callus formation. The rats were sacrificed based on radiologically pre-determined time points, and the development of the fracture callus was analyzed radiologically and using immunohistochemistry.

Here, we present a protocol to iatrogenically fracture the shaft of the femur of Wistar albino rats and follow up on the development of the callus. This femur osteotomy model can help researchers evaluate the process of fracture healing and to study how a drug could influence fracture healing.

פרוטוקול לפיתוח מודל אוסטאוטומיה של עצם הירך בחולדות ויסטאר אלבינו

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. ...

טיפול FSN לטיפול בכאב אוסטאוארתריטיס בברך

Fu's Subcutaneous Needling for Knee Osteoarthritis Pain

Fu's subcutaneous needling (FSN) is a new acupuncture and dry needling technique based on traditional Chinese medicine. It rapidly produces long-lasting effects in soft tissue injuries, particularly in painful musculoskeletal conditions, by providing stimulation primarily in the subcutaneous area. Osteoarthritis (OA) is the most common joint disease in adults worldwide and is often accompanied by a painful syndrome of structural changes in the peripheral joints of the knee. However, the etiology of OA pain is not fully understood, though myofascial trigger points (MTrPs) are commonly found in the lower limb muscles (so-called "tightened muscles") of patients with knee OA. 
FSN has been used in many fields for the treatment of acute pain problems and can relieve muscle contraction from MTrPs, thereby improving the local circulation. This study recruited patients with pain from knee OA into an FSN group or a transcutaneous electrical nerve stimulation (TENS) group with three treatment sessions and a follow-up over the course of 2 weeks. The results showed that FSN was effective in treating soft tissue pain around the knee with OA. This study aimed to establish and visualize three key technical indicators during FSN therapy, including the FSN needle insertion point and layer; the frequency and duration of the swaying movement; and the manipulation of the reperfusion approach. These findings have great potential for future applications in myofascial pain treatment, especially for pain management. Following this protocol could enhance FSN skills.

מחבר זרקור: המחט התת עורית של פו לכאבי אוסטאוארתריטיס בברך  

We present a protocol for using Fu's subcutaneous needling for knee osteoarthritis pain, which combines swaying movement and reperfusion approach techniques. This protocol has great potential for future applications in myofascial pain treatment and could enhance Fu's subcutaneous needling (FSN) manipulation skills.

המחט התת עורית של פו לכאבי דלקת מפרקים ניוונית בברך

Fu's subcutaneous needling (FSN) is a new acupuncture and dry needling technique based on traditional Chinese medicine. It rapidly produces long-lasting ...