Using the Gene Pulser MXcell Electroporation System to Transfect Primary Cells with High Efficiency

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

The use of siRNA mediated gene knockdown is continuing to be an important tool in studies of gene expression.  siRNA studies are being conducted not only ...

Bio-Rad Laboratories, Inc.

Bio-Rad Laboratories

&#x4E0E;&#x759F;&#x75BE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; &#xFF08;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6746;&#x83CC;) &#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x5176;&#x4ED6;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x533B;&#x5B66;&#x548C;&#x517D;&#x533B;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x5176;&#x6807;&#x5FD7;&#x6027;&#x7684;&#x4EE3;&#x8868;&#x3001; Apicomplexa &#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x88AB;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x4E00;&#x7EC4;&#x5B8C;&#x5168;&#x7531;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x548C;&#x75C5;&#x83CC;&#x7684; protistan &#x52A8;&#x7269;&#x95E8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5EA7;&#x7684;&#x6709;&#x76CA;&#x7684; apicomplexan &#x7684;&#x4E00;&#x4EFD;&#x62A5;&#x544A;&#xFF1A; &#x4E92;&#x60E0;&#x6D77;&#x6D0B; endosymbiont Nephromyces&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x591A;&#x4E16;&#x7EAA;&#x3001; Nephromyces&#x3001; &#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7279;&#x70B9;&#x548C;&#x5176;&#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684;&#x751F;&#x5883;&#xFF0C;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x8868;&#x5F81;&#x7684;&#x672C;&#x771F;&#x6838;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E0A;&#x7684;&#x5BC6;&#x5207;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x8BC6;&#x7531;&#x8367;&#x5149;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F; (FISH) &#x786E;&#x8BA4;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5173;&#x952E;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x77ED;&#x4E9A;&#x57FA;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53; DNA &#xFF08;SSU rDNA&#xFF09; &#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; Nephromyces&#xFF0C;&#x539F;&#x6765;&#x5217;&#x4E3A; hunter &#x662F;&#x5176;&#x5B9E; apicomplexan&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; apicomplexan &#x7684; Nephromyces&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5F3A;&#x70C8;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#xFF0C;Nephromyces &#x5230; apicomplexan &#x866B;&#x5B50;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x9636;&#x6BB5;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x6784;&#x529F;&#x80FD;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x652F;&#x6301; rDNA &#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x63A8;&#x65AD;&#x3002;&#x4ECE;&#x5178;&#x578B;&#x5BC4;&#x751F;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x4E92;&#x60E0; Nephromyces &#x7684;&#x60CA;&#x4EBA;&#x51FA;&#x73B0;&#x52A0;&#x5267;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5171;&#x751F;&#x3001; &#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x548C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6F14;&#x53D8;&#x7684;&#x6839;&#x672C;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4F19;&#x4F34;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x3002;

Nephromyces&#xFF0C;&#x5728;&#x6D77;&#x6D0B;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x76CA; apicomplexan &#x5171;&#x751F;&#x3002;

With malaria parasites (Plasmodium spp.), Toxoplasma, and many other species of medical and veterinary importance its iconic representatives, the protistan phylum Apicomplexa has long been defined as a group composed entirely of parasites and pathogens. We present here a report of a beneficial apicomplexan: the mutualistic marine endosymbiont Nephromyces. For more than a century, the peculiar structural and developmental features of Nephromyces, and its unusual habitat, have thwarted characterization of the phylogenetic affinities of this eukaryotic microbe. Using short-subunit ribosomal DNA (SSU rDNA) sequences as key evidence, with sequence identity confirmed by fluorescence in situ hybridization (FISH), we show that Nephromyces, originally classified as a chytrid fungus, is actually an apicomplexan. Inferences from rDNA data are further supported by the several apicomplexan-like structural features in Nephromyces, including especially the strong resemblance of Nephromyces infective stages to apicomplexan sporozoites. The striking emergence of the mutualistic Nephromyces from a quintessentially parasitic clade accentuates the promise of this organism, and the three-partner symbiosis of which it is a part, as a model for probing the factors underlying the evolution of mutualism, pathogenicity, and infectious disease.

Nephromyces, a beneficial apicomplexan symbiont in marine animals.

Avec des parasites du paludisme (Plasmodium spp.), Toxoplasma et nombreuses autres esp&egrave;ces d&#39;importance m&eacute;dicale et v&eacute;t&eacute;rinaire ses repr&eacute;sentants embl&eacute;matiques, protistes phylum Apicomplexa a longtemps &eacute;t&eacute; d&eacute;fini car un groupe compos&eacute; uniquement de pathog&egrave;nes et de parasites. Nous pr&eacute;sentons ici un rapport d&#39;un APICOMPLEXES b&eacute;n&eacute;fiques : l&#39;endosymbiote marine mutualiste Nephromyces. Pour plus d&#39;un si&egrave;cle, les particularit&eacute;s structurales et du d&eacute;veloppement de Nephromyces et son habitat inhabituel, ont d&eacute;jou&eacute; characterization of les affinit&eacute;s phylog&eacute;n&eacute;tiques de ce microbe eucaryote. &Agrave; l&#39;aide de court-sous-unit&eacute; ribosomiques (SSU ADNr) s&eacute;quences comme principaux &eacute;l&eacute;ments de preuve, avec une identit&eacute; de s&eacute;quence confirm&eacute;e par hybridation in situ fluorescence (FISH), nous montrons que Nephromyces, initialement class&eacute; comme un champignon chytride, est en fait un permis. Inf&eacute;rences de l&#39;ADNr donn&eacute;es sont &eacute;tay&eacute;es par plusieurs caract&eacute;ristiques structurales APICOMPLEXES-comme dans Nephromyces, y compris en particulier la forte ressemblance des stades infectieux Nephromyces &agrave; APICOMPLEXES sporozo&iuml;tes. L&#39;&eacute;mergence frappante de la Nephromyces mutualistes d&#39;un clade essentiellement parasitaire accentue la promesse de cet organisme et la symbiose de trois partenaires dont il fait partie, comme un mod&egrave;le pour sonder les facteurs qui sous-tendent l&#39;&eacute;volution du mutualisme, pathog&eacute;nicit&eacute; et maladies infectieuses.

Nephromyces, un symbiote APICOMPLEXES b&eacute;n&eacute;fiques chez les animaux marins.

Mit Malaria-Parasiten (Plasmodium spp.) Toxoplasma und viele andere Arten von medizinische und veterin&auml;rmedizinische Bedeutung seiner legend&auml;ren Vertreter, der Protistan Stamm Sporentierchen lange definiert wurde als eine Gruppe v&ouml;llig von Parasiten und Krankheitserregern besteht. Wir stellen Ihnen hier einen Bericht &uuml;ber eine vorteilhafte Apicomplexan: die mutualistischen marine Endosymbionten Nephromyces. F&uuml;r mehr als ein Jahrhundert, die eigent&uuml;mliche Struktur- und Entwicklungsprobleme Features von Nephromyces und seinen ungew&ouml;hnlichen Lebensraum haben die Charakterisierung der phylogenetischen Verwandtschaften dieser eukaryotischen Mikrobe vereitelt. Anhand kurzer-Untereinheit ribosomale DNA (SSU rDNA)-Sequenzen als wichtige Beweismittel, mit Sequenz-Identit&auml;t best&auml;tigt durch Fluoreszenz-in Situ-Hybridisierung (FISH) zeigen wir, dass Nephromyces, urspr&uuml;nglich als ein Pilz Kaulquappen eingestuft eigentlich ein Apicomplexan ist. R&uuml;ckschl&uuml;sse aus rDNA-Daten werden durch mehrere Apicomplexan-&auml;hnliche strukturellen Eigenschaften in Nephromyces, darunter vor allem die starke &Auml;hnlichkeit Nephromyces infekti&ouml;se Stadien zu Apicomplexan Sporozoites weiter unterst&uuml;tzt. Das markante entstehen die mutualistischen Nephromyces aus einer typisch parasit&auml;re Klade akzentuiert das Versprechen dieser Organismus, und die drei-Partner-Symbiose, von der es, als Modell f&uuml;r die Sondierung der Faktoren die Entwicklung der Mutualismus, Pathogenit&auml;t und Infektionskrankheiten geh&ouml;rt.

Nephromyces, eine vorteilhafte Apicomplexan Symbiont in Meerestiere.

Con parassiti della malaria (Plasmodium spp.), Toxoplasma e molte altre specie di importanza medica e veterinaria suoi rappresentanti iconici, al protistan phylum Apicomplexa lungamente &egrave; stata definita come un gruppo composto interamente da parassiti e patogeni. Vi presentiamo qui una relazione di un Apicomplexa benefico: il mutualistiche endosimbionti marino Nephromyces. Per pi&ugrave; di un secolo, le caratteristiche strutturali e di sviluppo peculiari di Nephromyces e il suo habitat insolito, hanno ostacolato la caratterizzazione dell&#39;affinit&agrave; filogenetica di questo microbo negli eucarioti. Utilizzando sequenze di DNA (SSU rDNA) ribosomiale breve-subunit&agrave; come prove chiave, con identit&agrave; di sequenza ha confermato per l&#39;ibridazione in situ (FISH), mostriamo che Nephromyces, inizialmente classificato come un fungo chytrid, &egrave; in realt&agrave; un Apicomplexa. Inferenze da dati rDNA sono ulteriormente supportate dalle diverse caratteristiche strutturali Apicomplexa-come in Nephromyces, tra cui soprattutto la forte somiglianza delle Nephromyces stadi infettivi di sporozoiti Apicomplexa. Il sorprendente emergere del Nephromyces mutualistiche da un clade tipicamente parassitaria accentua la promessa di questo organismo e la simbiosi di tre partner di cui fa parte, come un modello per sondare i fattori sottostanti l&#39;evoluzione del mutualismo, patogenicit&agrave; e malattie infettive.

Nephromyces, un simbionte Apicomplexa benefico in animali marini.

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Nephromyces&#x3001;&#x6D77;&#x6D0B;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306E;&#x6709;&#x76CA;&#x306A; apicomplexan &#x5171;&#x751F;&#x3002;

&#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; (Plasmodium &#xC885;)&#xC640; Toxoplasma, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC758;&#xB8CC; &#xBC0F; &#xC218;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885; &#xC544;&#xC774;&#xCF54; &#xB2C9; &#xB300;&#xD45C;, Apicomplexa &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC758; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xAE34; protistan &#xBB38;. &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; apicomplexan&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;: mutualistic &#xD574;&#xC591; endosymbiont Nephromyces. &#xC138;&#xAE30; &#xC774;&#xC0C1;, Nephromyces, &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xADF8; &#xD2B9;&#xC774; &#xD55C; &#xC11C;&#xC2DD; &#xC9C0;&#xAC00;&#xC774; &#xC9C4; &#xD575; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; phylogenetic &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131;&#xC758; &#xC800;&#xC9C0;. &#xC6B0;&#xB9AC; Nephromyces, &#xC6D0;&#xB798; chytrid &#xADE0; &#xB958;&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; &#xB418;&#xB294; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; apicomplexan &#xD45C;&#xC2DC; &#xC8FC;&#xC694; &#xC99D;&#xAC70;&#xB85C; &#xC9E7;&#xC740; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; ribosomal DNA (SSU rDNA) &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; id &#xD615;&#xAD11; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; (&#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xC218;. RDNA &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xB860;&#xC740; Nephromyces, apicomplexan sporozoites Nephromyces infective &#xB2E8;&#xACC4;&#xC758; &#xD2B9;&#xD788; &#xAC15;&#xD55C; &#xB2EE; &#xC558;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; apicomplexan&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xCD94;&#xAC00;. &#xC804;&#xD615; &#xAE30;&#xC0DD; clade&#xC5D0;&#xC11C; mutualistic Nephromyces&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xCD9C;&#xD604; accentuates &#xC57D;&#xC18D;&#xC774; &#xC720;&#xAE30;&#xC774; &#xCCB4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 3 &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108; &#xACF5;&#xC0DD;&#xC758; mutualism, pathogenicity, &#xBC0F; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD504;&#xB85C; &#xBE59;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; &#xD55C; &#xBD80;&#xBD84; &#xC774;&#xB2E4;.

Nephromyces, &#xD574;&#xC591; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; apicomplexan symbiont.

Con par&aacute;sitos de la malaria (Plasmodium spp.), Toxoplasma y muchas otras especies de importancia m&eacute;dica y Veterinaria sus representantes ic&oacute;nicos, Protista phylum Apicomplexa durante mucho tiempo se ha definido como un grupo compuesto enteramente de par&aacute;sitos y pat&oacute;genos. Aqu&iacute; presentamos un informe de un apicomplejo beneficioso: la mutualista endosymbiont Marina Nephromyces. Para m&aacute;s de un siglo, las particularidades estructurales y de desarrollo de Nephromyces y su h&aacute;bitat inusual, han frustrado la caracterizaci&oacute;n de las afinidades filogen&eacute;ticas de este microbio eucariota. Utilizando secuencias de ADN (SSU rDNA) ribosomales subunidad corto como pruebas clave, con identidad de secuencia confirmada por hibridaci&oacute;n fluorescente in situ (FISH), demostramos que Nephromyces, originalmente clasificado como un hongo quitridio, es realmente un apicomplejo. Inferencias de ADNr datos m&aacute;s son compatibles con las caracter&iacute;sticas estructurales de varias apicomplejo-como en Nephromyces, incluyendo especialmente el gran parecido de etapas infecciosas Nephromyces a apicomplejo esporozoitos. La sorprendente aparici&oacute;n de la Nephromyces mutualistas de un clado esencialmente parasitario acent&uacute;a la promesa de este organismo y la simbiosis de tres socios que forma parte, como un modelo para sondear los factores subyacentes a la evoluci&oacute;n del mutualismo, patogenicidad y enfermedades infecciosas.

Adam M. McCoy

Gene Expression Division

Bio-Rad Laboratories, Inc.

Using the Gene Pulser MXcell Electroporation System to Transfect Primary Cells with High Efficiency

Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

Adam M. McCoy

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Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

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