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Isolation and Culture of Mouse Cortical Astrocytes

Astrocytes  are an abundant cell type in the mammalian brain, yet much remains to be  learned about their molecular and functional characteristics. In ...

University of Freiburg 

300 &#x82AF;&#x7247;&#x7B49;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5171;&#x5145;&#x5F53;&#x771F;&#x6838;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5404;&#x79CD;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x62DB;&#x52DF;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5230;&#x540E;&#x6765;&#x6539;&#x9020;&#x5176;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E; C/EBPbeta &#x62DB;&#x52DF; 300 &#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0E; E1A &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5171;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A; C/EBPbeta &#x4E0D;&#x4EC5;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; 300 &#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x8FD8;&#x89E6;&#x53D1;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; C/EBPbeta &#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; E1A &#x7ED1;&#x5B9A;&#x533A;&#x57DF;&#x7684; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x4EE5;&#x53CA;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5B50;&#x57DF;&#x7684; C/EBPbeta&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x53C2;&#x4E0E; 300 &#x82AF;&#x7247;-C/EBPbeta &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x7684; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x5185; C/EBPbeta-&#x8BF1;&#x5BFC;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5927;&#x5927;&#x635F;&#x5BB3; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F85;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50; pgc-1 C/EBPbeta &#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x4E5F;&#x89E6;&#x53D1;&#x7531;&#x5176;&#x4ED6; C/EBP &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5404;&#x79CD;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EA4;&#x4E92; 300 &#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x5177;&#x6709;&#x666E;&#x904D;&#x610F;&#x4E49;&#x7684; E1A &#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;

300 &#x82AF;&#x7247;&#x7531; C/EBPbeta &#x62DB;&#x8058;&#x89E6;&#x53D1;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x5171;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

Transcriptional coactivators such as p300 act as crucial elements in the eukaryotic gene regulation network. These proteins bind to various transcription factors which recruit them to specific gene regions whose chromatin structure subsequently is remodeled. Previously, we have shown that C/EBPbeta recruits p300 by interacting with the E1A-binding site of the coactivator. We now show that C/EBPbeta not only binds to p300 but also triggers massive phosphorylation of p300. This novel activity of C/EBPbeta is dependent on the E1A-binding region of p300 as well as on several subdomains of C/EBPbeta, all of which are involved in the p300-C/EBPbeta interaction. We have identified several sites of C/EBPbeta-inducible phosphorylation within the C-terminal domain of p300. Mutation of these sites substantially impairs the activity of p300 as a coactivator of C/EBPbeta. Interestingly, phosphorylation of p300 is also triggered by other C/EBP family members as well as by various other transcription factors that interact with the E1A-binding domain of p300, suggesting that this novel phosphorylation mechanism may be of general relevance.

Recruitment of p300 by C/EBPbeta triggers phosphorylation of p300 and modulates coactivator activity.

Des coactivateurs transcriptionnels tels que p300 agissent comme des &eacute;l&eacute;ments cruciaux dans le r&eacute;seau de r&eacute;gulation des g&egrave;nes eucaryotes. Ces prot&eacute;ines se lient &agrave; divers facteurs de transcription qui recrutent &agrave; des r&eacute;gions sp&eacute;cifiques de g&egrave;nes dont structure chromatinienne est ensuite remodel&eacute;e. Auparavant, nous avons montr&eacute; que C/EBPbeta recrute p300 en interagissant avec le site de liaison E1A de le coactivateur. Maintenant, nous montrons que les C/EBPbeta non seulement se lie &agrave; p300, mais d&eacute;clenche &eacute;galement la phosphorylation massive du p300. Cette nouvelle activit&eacute; de C/EBPbeta est d&eacute;pendante sur la r&eacute;gion de E1A-liaison du p300 ainsi que sur plusieurs sous-domaines de C/EBPbeta, qui sont impliqu&eacute;s dans l&#39;interaction p300-C/EBPbeta. Nous avons identifi&eacute; plusieurs sites de phosphorylation C/EBPbeta-inductible dans le domaine C-terminal de p300. Mutation de ces sites entrave consid&eacute;rablement l&#39;activit&eacute; du p300 comme un co-activateur de C/EBPbeta. Fait int&eacute;ressant, la phosphorylation de p300 est &eacute;galement d&eacute;clench&eacute;e par les autres membres de la famille C/EBP, ainsi que de divers autres facteurs de transcription qui interagissent avec le domaine de liaison &agrave; E1A de p300, sugg&eacute;rant que ce m&eacute;canisme de phosphorylation roman pourrait &ecirc;tre d&#39;int&eacute;r&ecirc;t g&eacute;n&eacute;ral.

Recrutement de p300 de C/EBPbeta d&eacute;clenche la phosphorylation de p300 et module l&#39;activit&eacute; coactivateur.

Transcriptional Coactivators wie p300 fungieren als zentrale Elemente in der eukaryotischen Gens-Verordnung-Netzwerk. Diese Proteine binden an verschiedenen Transkriptionsfaktoren, die sie zu bestimmten Gen Regionen rekrutieren deren Chromatin-Struktur sp&auml;ter umgebaut wird. Zuvor haben wir gezeigt, dass C/EBPbeta p300 Rekruten durch die Interaktion mit den E1A-Bindungsstelle der Coaktivator. Wir zeigen nun, dass C/EBPbeta nicht nur an p300 bindet sondern auch massive Phosphorylierung der p300 ausl&ouml;st. Diese neuartige Aktivit&auml;t von C/EBPbeta richtet sich auf den Raum E1A-Bindung der p300 sowie mehrere Subdomains von C/EBPbeta, die in der p300-C/EBPbeta-Wechselwirkung beteiligt sind. Wir haben mehrere Standorte von C/EBPbeta-inducible Phosphorylierung innerhalb der C-terminalen Dom&auml;ne von p300 identifiziert. Mutation dieser Sites beeintr&auml;chtigt erheblich die T&auml;tigkeit des p300 als ein Coaktivator von C/EBPbeta. Interessanterweise wird Phosphorylierung der p300 auch ausgel&ouml;st durch andere Familienmitglieder C/EBP sowie durch verschiedene andere Transkriptionsfaktoren, die interagieren mit der E1A bindende Dom&auml;ne des p300, was darauf hindeutet, dass diese neuartige Phosphorylierung-Mechanismus allgemeine relevant sein kann.

Rekrutierung von p300 von C/EBPbeta l&ouml;st die Phosphorylierung von p300 und moduliert Coaktivator Aktivit&auml;t.

Coattivatori trascrizionali come p300 agiscono come elementi cruciali nella rete di regolazione genica eucariotica. Queste proteine si legano ai diversi fattori di trascrizione che li reclutano a regioni del gene specifico cui la struttura della cromatina &egrave; successivamente ristrutturata. In precedenza, abbiamo dimostrato che il C/EBPbeta reclute p300 interagendo con il sito E1A-associazione del coactivator. Mostriamo ora che C/EBPbeta non solo si lega a p300 ma attiva anche massiccia fosforilazione della p300. Questa romanzo attivit&agrave; di C/EBPbeta &egrave; dipendente alla regione E1A-associazione di p300, nonch&eacute; su diversi sottodomini del C/EBPbeta, i quali sono coinvolti nell&#39;interazione p300-C/EBPbeta. Abbiamo individuato diversi siti di fosforilazione C/EBPbeta-inducible all&#39;interno del dominio C-terminale della p300. Mutazione di questi siti sostanzialmente altera l&#39;attivit&agrave; del p300 come un coactivator di C/EBPbeta. &Egrave; interessante notare che, la fosforilazione di p300 &egrave; attivata anche da altri membri della famiglia C/EBP nonch&eacute; da vari altri fattori di trascrizione che interagiscono con il dominio E1A-associazione di p300, suggerendo che questo meccanismo di fosforilazione romanzo potrebbe essere di rilevanza generale.

Assunzione di p300 da C/EBPbeta attiva la fosforilazione di p300 e modula l&#39;attivit&agrave; coactivator.

&#x8EE2;&#x5199;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; p300 &#x306A;&#x3069;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3078;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x6539;&#x9020;&#x3067;&#x3059;&#x52DF;&#x96C6;&#x5404;&#x7A2E;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; E1A &#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; C/ebp &#x306E; p300 &#x65B0;&#x5175;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ECA; C/ebp &#x3060;&#x3051; p300 &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x307E;&#x305F; p300 &#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3053;&#x3068;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x6D3B;&#x6027; C/ebp &#x306E; p300 &#x306E; E1A &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x9818;&#x57DF;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x304C; p300 C/ebp &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; C/ebp &#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P300 &#x306E; C/EBPbeta &#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066; C/ebp &#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; p300 &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;p300 &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x5168;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;, p300 &#x306E; E1A &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x5404;&#x7A2E;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6; C/EBP &#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

C/ebp &#x306B;&#x3088;&#x308B; p300 &#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306F;&#x3001;p300 &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P300 &#xB4F1; transcriptional coactivators &#xC9C4; &#xD575; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xC5ED;&#xD560;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; chromatin &#xAD6C;&#xC870; &#xC774;&#xD6C4; &#xAC1C;&#xC870;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; C/Ebpbeta&#xB294; coactivator E1A &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; p300&#xC744; &#xC2E0;&#xBCD1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; C/EBPbeta p300 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB610;&#xD55C; p300&#xC758; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. C/Ebpbeta&#xC758; &#xC18C;&#xC124;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9; p300 E1A &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xBAA8;&#xB450;&#xC758; p300-C/EBPbeta &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; C/Ebpbeta&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; p300&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB0B4;&#xC758; C/EBPbeta-&#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; C/Ebpbeta&#xC758; coactivator&#xB85C; p300 &#xD65C;&#xB3D9; &#xC190;&#xC0C1;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, p300&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xB610;&#xD55C;&#xC774; &#xC18C;&#xC124; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC77C;&#xBC18; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; E1A &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; p300, &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB978; C/EBP &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xC791; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C/Ebpbeta&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; p300 &#xBAA8;&#xC9D1; p300&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870; coactivator &#xD65C;&#xB3D9;.

Activaci&oacute;n transcripcional como p300 act&uacute;a como elementos cruciales en la red de regulaci&oacute;n de genes eucari&oacute;ticos. Estas prote&iacute;nas se unen a diversos factores de transcripci&oacute;n que reclutan a regiones del gen espec&iacute;fico cuya estructura de la cromatina es remodelado posteriormente. Previamente, hemos demostrado que C/EBPbeta reclutas p300 interactuando con el sitio de la coactivator E1A-Uni&oacute;n. Ahora mostramos que C/EBPbeta no s&oacute;lo se une a p300, sino que tambi&eacute;n provoca la fosforilaci&oacute;n masiva de p300. Esta novedosa actividad de C/EBPbeta es dependiente en la regi&oacute;n de uni&oacute;n a E1A de p300, as&iacute; como en varios subdominios de C/EBPbeta, todos los cuales est&aacute;n implicados en la interacci&oacute;n de p300-C/EBPbeta. Hemos identificado varios sitios de fosforilaci&oacute;n C/EBPbeta-inducible dentro del dominio c-terminal de p300. Mutaci&oacute;n de estos sitios deteriora considerablemente la actividad de p300 como un coactivador de C/EBPbeta. Curiosamente, fosforilaci&oacute;n de p300 tambi&eacute;n se desencadena por otros miembros de la familia C/EBP, as&iacute; como por varios otros factores de transcripci&oacute;n que interact&uacute;an con el dominio de uni&oacute;n a E1A de p300, sugiriendo que este mecanismo de fosforilaci&oacute;n novela puede ser de relevancia general.

Reclutamiento de p300 por C/EBPbeta provoca la fosforilaci&oacute;n de p300 y modula la actividad de coactivator.

E2A &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3001; E12 &#x548C; E47&#xFF0C;&#x662F; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x96BE;&#x4EE5;&#x6349;&#x6478;&#x662F;&#x5426;&#x4ECD;&#x5728; B &#x9AA8;&#x91CF; E12 &#x548C; E47 &#x6709;&#x91CD;&#x53E0;&#x548C;/&#x6216;&#x4E0D;&#x540C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x4E3A; E12 &#x6216; E47 &#x751F;&#x6210;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; E47 &#x524D; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x800C; E12 &#x662F;&#x65E9;&#x671F;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x627F;&#x8BFA;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x524D;&#x63D0;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;E12 &#x548C; E47 &#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728; pre-B &#x548C;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; lambda (Ig lambda&#xFF09; &#x751F;&#x6B96;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4EE5;&#x53CA; Ig lambda VJ &#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; E12 &#x4EE5;&#x53CA; E47 &#x9700;&#x8981;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x56E0;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x81EA;&#x6211;&#x6297;&#x539F;&#x53D7;&#x4F53;&#x7F16;&#x8F91;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E0D;&#x65AD;&#x63D0;&#x9AD8; E12 &#x53CA; E47 &#x7EA7;&#x522B;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x4F7F; Ig lambda &#x751F;&#x6B96;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3001; J lambda &#x5730;&#x533A;&#x4EE5;&#x53CA; H3 &#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x4FC3;&#x8FDB; trimethylated &#x8D56;&#x6C28;&#x9178; 4 &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; 3 (H3) &#x4E0A;&#x7684;&#x5E76;&#x6FC0;&#x6D3B; Ig lambda VJ &#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5728; pre-B &#x548C;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6E10;&#x53D8; E12 &#x548C; E47 &#x6D3B;&#x52A8;&#x8BBE;&#x7ACB;&#x4EE5;&#x673A;&#x68B0;&#x5316;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x987A;&#x5E8F;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;

E12 &#x548C; E47 &#x4E2D; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x89C4;&#x8303;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7B;&#x94FE;&#x57FA;&#x56E0;&#x5EA7;&#x7684;&#x987A;&#x5E8F;&#x91CD;&#x6392;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

The E2A gene products, E12 and E47, are critical regulators of B cell development. However, it remains elusive whether E12 and E47 have overlapping and/or distinct functions during B lymphopoiesis. We have generated mice deficient for either E12 or E47 and examined their roles in B cell maturation. We show that E47 is essential for developmental progression at the prepro-B cell stage, whereas E12 is dispensable for early B cell development, commitment, and maintenance. In contrast, both E12 and E47 play critical roles in pre-B and immature B cells to promote immunoglobulin lambda (Ig lambda) germline transcription as well as Ig lambda VJ gene rearrangement. Furthermore, we show that E12 as well as E47 is required to promote receptor editing upon exposure to self-antigen. We demonstrate that increasing levels of E12 and E47 act to induce Ig lambda germline transcription, promote trimethylated lysine 4 on histone 3 (H3) as well as H3 acetylation across the J lambda region, and activate Ig lambda VJ gene rearrangement. We propose that in the pre-B and immature B cell compartments, gradients of E12 and E47 activities are established to mechanistically regulate the sequential rearrangement of the Ig light chain genes.

Distinct roles for E12 and E47 in B cell specification and the sequential rearrangement of immunoglobulin light chain loci.

Les produits des g&egrave;nes E2A, E12 et E47, sont des r&eacute;gulateurs critiques du d&eacute;veloppement des cellules B. Cependant, il reste insaisissable, si E12 et E47 ont des fonctions qui se chevauchent ou distinctes au cours de la lymphopo&iuml;&egrave;se B. Nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des souris d&eacute;ficientes pour E12 ou E47 et examiner leur r&ocirc;le dans la maturation des lymphocytes B. Nous montrons que E47 est essentielle &agrave; la progression du d&eacute;veloppement au stade de cellules pr&eacute;pro-B, tandis que E12 n&#39;est pas indispensable pour l&#39;entretien, l&#39;engagement et du d&eacute;veloppement de la cellule B. En revanche, les E12 et E47 jouent un r&ocirc;le crucial dans la pr&eacute;-B et les cellules B immatures pour promouvoir l&#39;immunoglobuline lambda (lambda Ig) dans les cellules germinales transcription ainsi que lambda Ig r&eacute;arrangement g&eacute;nique VJ. De plus, nous montrons que E12 ainsi que E47 est n&eacute;cessaire pour promouvoir le r&eacute;cepteur &eacute;dition au contact de l&#39;antig&egrave;ne-auto. Nous d&eacute;montrons que les niveaux croissants de E12 et E47 agissent pour induire la transcription de germline Ig lambda, promouvoir trim&eacute;thyl&eacute;e lysine 4 sur l&#39;histone 3 (H3) ainsi que de l&#39;ac&eacute;tylation H3 dans toute la r&eacute;gion de lambda J et activez le r&eacute;arrangement g&eacute;nique de Ig lambda VJ. Nous proposons que dans le pr&eacute;-B et les lymphocytes B immatures compartiments, d&eacute;grad&eacute;s d&#39;activit&eacute;s E12 et E47 sont &eacute;tablis de fa&ccedil;on m&eacute;caniste r&eacute;glementer le r&eacute;arrangement s&eacute;quentiels des g&egrave;nes Ig cha&icirc;ne l&eacute;g&egrave;re.

R&ocirc;les distincts pour E12 et E47 dans la sp&eacute;cification des cellules B et le r&eacute;arrangement s&eacute;quentiels des loci de cha&icirc;nes l&eacute;g&egrave;res des immunoglobulines.

E2A-Genprodukte, E12 und E47, sind wichtige Regulatoren der B-Zell-Entwicklung. Es bleibt jedoch tr&uuml;gerisch, ob E12 und E47 w&auml;hrend B Lymphopoiesis &uuml;berlappende und/oder unterschiedliche Funktionen haben. Wir haben M&auml;use mangelhaft f&uuml;r E12 oder E47 generiert und ihre Rollen in B-Zell-Reifung untersucht. Wir zeigen, dass E47 f&uuml;r Entwicklungsbiologie Fortschreiten im Prepro-B-Zell-Stadium, E12 f&uuml;r fr&uuml;he B-Zell-Entwicklung, Einsatz und Wartung entbehrlich ist. Im Gegensatz dazu spielen E12 und E47 wichtige Rollen in Pre-B und unreifen B-Zellen, Immunoglobulin Lambda (Ig Lambda) Keimbahn Transkription sowie Ig Lambda-VJ-gen-Umlagerung zu f&ouml;rdern. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass E12 sowie E47 wird ben&ouml;tigt, um die F&ouml;rderung der Rezeptor Bearbeitung nach Exposition gegen&uuml;ber selbst-Antigen. Wir zeigen, dass h&ouml;here Ebenen E12 und E47 handeln um induzieren Ig Lambda-Germline Transkription, Trimethylated Lysin 4 auf Histon 3 (H3) sowie H3 Acetylierung der J-Lambda-Region zu f&ouml;rdern und Ig Lambda-VJ-gen-Umlagerung zu aktivieren. Wir schlagen vor, da&szlig; in der Pre-B und unreifen B-Zelle F&auml;cher, Farbverl&auml;ufe E12 und E47 Aktivit&auml;ten festgelegt werden, mechanistisch die sequenzielle Umlagerung der Ig-Leichtketten-Gene regulieren.

Unterschiedliche Rollen f&uuml;r E12 und E47 in B-Zell-Spezifikation und die sequenzielle Neuordnung der Immunglobulin Leichtketten Loci.

I prodotti del gene E2A, E12 ed E47, sono regolatori critici dello sviluppo delle cellule di B. Tuttavia, resta sfuggente se E12 ed E47 hanno funzioni sovrapposte e/o distinte durante linfopoiesi B. Abbiamo generato topi carenti per E12 o E47 ed esaminato i loro ruoli nella maturazione delle cellule B. Mostriamo che E47 &egrave; essenziale per la progressione dello sviluppo in fase di prepro-B cella mentre E12 &egrave; superfluo per la manutenzione, impegno e sviluppo precoce delle cellule B. Al contrario, sia E12 ed E47 svolgono un ruolo critico nel pre-B e le cellule B immature per promuovere la trascrizione di germline immunoglobulina lambda (Ig lambda) cos&igrave; come Ig lambda riarrangiamento genico VJ. Inoltre, mostriamo che E12, come pure la E47 &egrave; necessaria per promuovere il recettore modifica all&#39;esposizione auto-antigene. Dimostriamo che livelli crescenti di E12 ed E47 agiscano per indurre la trascrizione di Ig lambda germinale, promuovere trimetilato lisina 4 su istone 3 (H3) cos&igrave; come H3 acetilazione in tutta la regione di lambda J e attivare il riarrangiamento genico Ig lambda VJ. Proponiamo che nel pre-B e compartimenti delle cellule B immature, gradienti di attivit&agrave; E12 ed E47 sono stabiliti a meccanicistico regolano il riarrangiamento sequenza dei geni Ig catena leggera.

Ruoli distinti per E12 ed E47 nella specifica delle cellule di B e il riarrangiamento sequenza dei loci di immunoglobulina catena leggera.

E2A &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;E12 &#x3068; E47, B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;E12 &#x3068; E47 B &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x7523;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x91CD;&#x8907;&#x3084;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;E12 &#x307E;&#x305F;&#x306F; E47 &#x306E;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;.&#x6211;&#x3005; E12 &#x521D;&#x671F; B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x30FB;&#x4FDD;&#x5B88;&#x30FB; &#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; E47 &#x304C;&#x767A;&#x9054;&#x9032;&#x884C;&#x30D7;&#x30EC;&#x30D7;&#x30ED; B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;E12 &#x3068; E47 &#x30D7;&#x30EC; B &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3; &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0; &#xFF08;Ig &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;&#xFF09; &#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Ig &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0; VJ &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x672A;&#x719F; B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;, &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x81EA;&#x5DF1;&#x6297;&#x539F;&#x3078;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x306B;&#x7DE8;&#x96C6;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B; E12 &#x3068;&#x3057;&#x3066; E47 &#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E; E12&#x3001;E47 Ig &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; 3 (H3) &#x3067;&#x30C8;&#x30EA;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; 4 H3 &#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;J &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;&#x5730;&#x57DF;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057; Ig &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0; VJ &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30EC; B &#x3068;&#x672A;&#x719F; B &#x7D30;&#x80DE;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x68B0;&#x8AD6;&#x7684;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B; E12 &#x304A;&#x3088;&#x3073; E47 &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x52FE;&#x914D;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

E12 &#x304A;&#x3088;&#x3073; E47 &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; B &#x30BB;&#x30EB;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x8EFD;&#x9396;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x3002;

E12 &#xBC0F; E47, E2A &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; B &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB294;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, E12 &#xBC0F; E47 B lymphopoiesis &#xC911; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xB610;&#xB294; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC560;&#xB9E4; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; E12 &#xB610;&#xB294; E47 &#xACB0;&#xD54D; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; e12&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; B &#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xD5CC;&#xC2E0;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; E47 prepro B &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, E12 &#xBC0F; E47 pre-B &#xACE0; &#xBBF8; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; B &#xC138;&#xD3EC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; &#xB78C;&#xB2E4; (Ig &#xB78C;&#xB2E4;) &#xBC88;&#xC9F8; &#xC804;&#xC0AC; Ig &#xB78C;&#xB2E4; VJ &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xD64D;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC73C;&#xB85C; E12 E47 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC790;&#xAE30; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xBA74; &#xD3B8;&#xC9D1; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD544;&#xC694; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. E12 e47&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC218;&#xC900;&#xC744; Ig &#xB78C;&#xB2E4; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC804;&#xC0AC; &#xC720;&#xB3C4;, J &#xB78C;&#xB2E4; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC804;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; H3 acetylation &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; (H3) 3&#xC5D0; trimethylated lysine 4 &#xD64D;&#xBCF4; &#xBC0F; Ig &#xB78C;&#xB2E4; VJ &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58;&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD589;&#xB3D9; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; pre-B &#xBBF8; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; B &#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; E12 E47 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; mechanistically Ig &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC21C;&#xCC28; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58;&#xB97C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC124;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

B &#xC140; &#xC0AC;&#xC591; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAE00;&#xB85C;&#xBD88;&#xB9B0; &#xBE5B; &#xCCB4;&#xC778; loci&#xC758; &#xC21C;&#xCC28; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58;&#xC5D0; E12 &#xBC0F; E47 &#xACE0;&#xC720; &#xC5ED;&#xD560;.

Los productos del gen E2A E12 y E47, son reguladores cr&iacute;ticos de desarrollo de las c&eacute;lulas B. Sin embargo, sigue siendo esquiva si E12 y E47 tienen funciones superpuestas o distintas durante la linfopoyesis B. Hemos generado ratones deficientes para E12 o E47 y examinar su papel en la maduraci&oacute;n de c&eacute;lulas B. Mostramos que E47 es esencial para la progresi&oacute;n del desarrollo en la etapa de c&eacute;lulas prepro-B, mientras que E12 es prescindible para mantenimiento, compromiso y desarrollo temprano de la c&eacute;lula de B. Por el contrario, tanto E12 y E47 un papel cr&iacute;tico en la pre-B y c&eacute;lulas B inmaduras para promover la transcripci&oacute;n de germline inmunoglobulina lambda (lambda de Ig) as&iacute; como lambda de Ig reordenamiento g&eacute;nico de VJ. Adem&aacute;s, mostramos que E12 como E47 es necesaria para promover la edici&oacute;n de receptor con la exposici&oacute;n al mismo ant&iacute;geno. Demostramos que los niveles crecientes de E12 y E47 act&uacute;an para inducir la transcripci&oacute;n de l&iacute;nea germinal de lambda de Ig, promover trimetilada lisina 4 en histona 3 (H3) as&iacute; como H3 acetilaci&oacute;n en toda la regi&oacute;n de lambda J y activar el cambio de gene de VJ de lambda de Ig. Proponemos que en la pre-B y compartimentos de la c&eacute;lula de B inmaduro, se establecen gradientes de actividades E12 y E47 mec&aacute;nico regular el cambio secuencial de los genes de la cadena ligera de Ig.

Diferentes roles para E12 y E47 en la especificaci&oacute;n de la c&eacute;lula de B y el cambio secuencial de loci de cadenas ligeras de inmunoglobulina.

&#x8111;&#x529F;&#x80FD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4E0D;&#x65AD;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x4F9B;&#x7ED9;&#x3002;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C; (BBB)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7531;&#x8840;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5FAA;&#x73AF;&#x8840;&#x6DB2;&#x6210;&#x5206;&#x5206;&#x79BB;&#x5F00;&#x6765;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FDD;&#x6301;&#x7CBE;&#x786E;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C;&#x6539;&#x53D8;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x548C;&#x5927;&#x8111;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x548C;&#x5DF2;&#x5173;&#x8054;&#x6216;&#x663E;&#x793A;&#x4E4B;&#x524D;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x6210;&#x5206;&#x7ACB;&#x5373;&#x6CC4;&#x6F0F;&#x5230;&#x5927;&#x8111;&#x540E;&#x673A;&#x68B0;&#x635F;&#x4F24;&#x6216;&#x56E0;&#x8111;&#x75C5;&#x6539;&#x53D8;&#x8840;&#x7BA1;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x90E8;&#x4F4D;&#x80DE;&#x5916;&#x73AF;&#x5883;&#x88AB;&#x7834;&#x574F;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;&#x8840;&#x6E90;&#x6027;&#x6210;&#x5206;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C;&#x5F00;&#x653E;&#x540E;&#x6539;&#x53D8;&#x8840;&#x7BA1;&#x795E;&#x7ECF;&#x63A5;&#x53E3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x5206;&#x662F;&#x8010;&#x4EBA;&#x5BFB;&#x5473;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x3001; &#x5B58;&#x653E;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x8FC5;&#x901F;&#x540E;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x521D;&#x59CB;&#x7622;&#x75D5;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x56E0;&#x5B50;&#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x79EF;&#x6781; TGF-&beta; &#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x7684;&#x8840;&#x86CB;&#x767D;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x610F;&#x60F3;&#x4E0D;&#x5230;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7ED3;&#x5408;&#x6F5C;&#x5728; TGF-&beta; &#x4E0E;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5BFC;&#x81F4;&#x79EF;&#x6781;&#x7684; TGF-&beta; &#x5F62;&#x6210;&#x548C; TGF-&beta;/Smad &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x6F5C;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x6E90;&#x6027; TGF-&beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x795E;&#x7ECF;&#x63A5;&#x53E3;&#x591A;&#x6548;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6240;&#x4EE5;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#x5982;&#x4F55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x751F;&#x7269;&#x6548;&#x5E94;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x53D8;&#x6027;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x603B;&#x7ED3;&#x4ECE;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x518D;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x53EF;&#x80FD;&#x652F;&#x6301;&#x65B0;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x8840;&#x7BA1;&#x635F;&#x4F24;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF1A; &#x4E3A;&#x8840;&#x7BA1;&#x6E90;&#x6027; TGF-&beta; &#x7684;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The brain function depends on a continuous supply of blood. The blood-brain barrier (BBB), which is formed by vascular cells and glia, separates components of the circulating blood from neurons and maintains the precisely regulated brain milieu required for proper neuronal function. A compromised BBB alters the transport of molecules between the blood and brain and has been associated with or shown to precede neurodegenerative disease. Blood components immediately leak into the brain after mechanical damage or as a consequence of a compromised BBB in brain disease changing the extracellular environment at sites of vascular damage. It is intriguing how blood-derived components alter the cellular and molecular constituents of the neurovascular interface after BBB opening. We recently identified an unexpected role for the blood protein fibrinogen, which is deposited in the nervous system promptly after vascular damage, as an initial scar inducer by promoting the availability of active TGF-Î². Fibrinogen-bound latent TGF-Î² interacts with astrocytes, leading to active TGF-Î² formation and activation of the TGF-Î²/Smad signaling pathway. Here, we discuss the pleiotropic effects of potentially vascular-derived TGF-Î² on cells at the neurovascular interface and we speculate how these biological effects might contribute to degeneration and regeneration processes. Summarizing the effects of the components derived from the brain vascular system on nervous system regeneration might support the development of new therapeutic approaches.

Vascular damage in the central nervous system: a multifaceted role for vascular-derived TGF-Î².

La fonction de cerveau d&eacute;pend d&#39;un apport continu de sang. La sang barri&egrave;re - enc&eacute;phalique (BHE), qui est form&eacute;e par les cellules vasculaires et de la glie, s&eacute;pare les composants de la circulation sanguine des neurones et maintient le milieu cerveau pr&eacute;cis&eacute;ment r&eacute;glement&eacute;s requis pour le bon fonctionnement neuronal. Un compromis BBB alt&egrave;re le transport de mol&eacute;cules entre le sang et le cerveau et a &eacute;t&eacute; associ&eacute; ou montr&eacute; &agrave; pr&eacute;c&eacute;der les maladies neuro-d&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives. Composants sanguins fuient imm&eacute;diatement dans le cerveau apr&egrave;s des d&eacute;g&acirc;ts m&eacute;caniques ou par suite d&#39;un compromis BBB en changeant l&#39;environnement extracellulaire aux sites de l&eacute;sions vasculaires maladie du cerveau. Il est curieux comment les composants d&eacute;riv&eacute;s du sang modifient les constituants cellulaires et mol&eacute;culaires de l&#39;interface neurovasculaire apr&egrave;s ouverture de BBB. R&eacute;cemment, nous avons identifi&eacute; un r&ocirc;le inattendu pour le fibrinog&egrave;ne sang prot&eacute;ine, qui est d&eacute;pos&eacute; dans le syst&egrave;me nerveux rapidement apr&egrave;s les blessures vasculaires, comme un inducteur de la cicatrice initiale par la promotion de la disponibilit&eacute; des actif TGF-&beta;. Fibrinog&egrave;ne li&eacute; aux latent TGF-&beta; interagit avec les astrocytes, conduisant &agrave; la formation du TGF-&beta; active et l&#39;activation de la voie de signalisation TGF-&beta;/Smad. Ici, nous discutons les effets pl&eacute;iotropiques du TGF-&beta; potentiellement vasculaire d&eacute;riv&eacute;es sur les cellules &agrave; l&#39;interface neurovasculaire et nous sp&eacute;culons comment ces effets biologiques pourraient contribuer &agrave; la d&eacute;g&eacute;n&eacute;rescence et la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration des processus. R&eacute;sumant les effets des composants d&eacute;riv&eacute;s du syst&egrave;me vasculaire du cerveau sur la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration du syst&egrave;me nerveux pourrait soutenir le d&eacute;veloppement de nouvelles approches th&eacute;rapeutiques.

Les l&eacute;sions vasculaires dans le syst&egrave;me nerveux central : un r&ocirc;le multiforme d&#39;origine vasculaire TGF-&beta;.

Die Funktion des Gehirns h&auml;ngt eine kontinuierliche Versorgung mit Blut. Die Blut - Hirn Schranke (BBB), die durch vaskul&auml;re Zellen und Glia gebildet wird, trennt die zirkulierenden Blutbestandteile von Neuronen und unterh&auml;lt das genau geregelten Gehirn-Milieu f&uuml;r neuronale Funktion erforderlich. Ein kompromittierter BBB wurde &auml;ndert den Transport von Molek&uuml;len zwischen Blut und Gehirn und zugeordnet oder gezeigt, dass Neurodegenerative Krankheit vorausgehen. Blutbestandteile Leck sofort ins Gehirn nach mechanischer Besch&auml;digung oder infolge einer kompromittierten BBB in Gehirnerkrankungen &auml;ndern die extrazellul&auml;re Umwelt an Standorten von vaskul&auml;ren Sch&auml;den. Es ist faszinierend, wie Blut abgeleitete Komponenten nach der BBB-Er&ouml;ffnung der zellul&auml;ren und molekularen Bestandteile der Neurovaskul&auml;re Schnittstelle &auml;ndern. Wir haben vor kurzem eine unerwartete Rolle f&uuml;r die Blut-Protein-Fibrinogen, die im Nervensystem umgehend nach vaskul&auml;ren Sch&auml;den, als eine anf&auml;ngliche Narbe-Induktor durch F&ouml;rderung der Verf&uuml;gbarkeit von aktiven TGF-&beta; hinterlegt ist identifiziert. Fibrinogen gebundene latentes TGF-&beta; interagiert mit Astrozyten, zu aktiven TGF-&beta;-Bildung und Aktivierung von der TGF-&beta;/Smad-Signalweges f&uuml;hrt. Hier diskutieren wir die pleiotropen Wirkung potenziell vaskul&auml;re abgeleitete TGF-&beta; auf Zellen an der Schnittstelle Neurovaskul&auml;re und wir spekulieren, wie diese biologische Effekte zur Degeneration und Regeneration Prozesse beitragen k&ouml;nnten. Zusammenfassung der Auswirkungen der Komponenten abgeleitet aus der Gehirn-Kreislauf-System auf das Nervensystem Regenerierung unterst&uuml;tzen m&ouml;glicherweise die Entwicklung neuer therapeutischer Ans&auml;tze.

Vaskul&auml;re Sch&auml;den im zentralen Nervensystem: eine vielschichtige Rolle f&uuml;r vaskul&auml;re abgeleitete TGF-&beta;.

La funzione del cervello dipende da un continuo rifornimento di sangue. La barriera emato - encefalica (BBB), che &egrave; formata da cellule vascolari e glia, separa le componenti del sangue circolante da neuroni e mantiene il milieu precisamente regolamentati cervello necessaria per il corretto funzionamento neuronale. Un compromesso BBB altera il trasporto di molecole tra il sangue e il cervello ed &egrave; stato associato o mostrato a precedere la malattia neurodegenerativa. Componenti del sangue fuoriuscire immediatamente nel cervello dopo danni meccanici o come conseguenza di un compromesso BBB nella malattia del cervello modificando l&#39;ambiente extracellulare nei siti di danno vascolare. &Egrave; intrigante come componenti derivati da sangue alterano i costituenti cellulari e molecolari dell&#39;interfaccia neurovascolare dopo l&#39;apertura di BBB. Abbiamo recentemente identificato un ruolo inatteso per il fibrinogeno proteina di sangue, che &egrave; depositato nel sistema nervoso prontamente dopo danno vascolare, come un induttore di cicatrice iniziale promuovendo la disponibilit&agrave; di attivi TGF-&beta;. Fibrinogeno-bound latente TGF-&beta; interagisce con gli astrociti, portando all&#39;attivo formazione TGF-&beta; e l&#39;attivazione della via di segnalazione di TGF-&beta;/Smad. Qui, noi discutere gli effetti pleiotropici potenzialmente vascolare derivata TGF-&beta; su cellule all&#39;interfaccia neurovascolare e si ipotizzano come questi effetti biologici potrebbero contribuire alla degenerazione e rigenerazione dei processi. Riassumendo gli effetti dei componenti derivati dal sistema vascolare cerebrale sulla rigenerazione del sistema nervoso potrebbe sostenere lo sviluppo di nuovi approcci terapeutici.

Danni vascolari del sistema nervoso centrale: un ruolo poliedrico per vascolare derivata TGF-&beta;.

&#x8133;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x4F9B;&#x7D66;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x8133;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x95A2;&#x9580; (BBB) &#x306F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x5FAA;&#x74B0;&#x8840;&#x6DB2;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x533A;&#x5207;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8133;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F; BBB &#x5206;&#x5B50;&#x8840;&#x6DB2;&#x3068;&#x8133;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3068;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x524D;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x6210;&#x5206;&#x306F;&#x3001;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F; BBB &#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x8133;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306B;&#x8133;&#x3092;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x7531;&#x6765;&#x6210;&#x5206;&#x795E;&#x7D4C;&#x8840;&#x7BA1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x6210;&#x5206; BBB &#x958B;&#x5C01;&#x5F8C;&#x5909;&#x66F4;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x3092;&#x305D;&#x305D;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x304C;&#x5806;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x3001;&#x901F;&#x3084;&#x304B;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; TGF-&beta; &#x306E;&#x7A7A;&#x5BA4;&#x72B6;&#x6CC1;&#x3092;&#x63A8;&#x9032;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x521D;&#x671F;&#x50B7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x6F5C;&#x4F0F; TGF-&beta; &#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E; TGF-&beta; &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068; TGF-&beta;/Smad &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x795E;&#x7D4C;&#x8840;&#x7BA1;&#x754C;&#x9762;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7531;&#x6765; TGF-&beta; &#x306E;&#x591A;&#x9762;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5F71;&#x97FF;&#x5909;&#x6027;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x63A8;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8133;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x307E;&#x3068;&#x3081;&#x305F;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;: &#x8840;&#x7BA1;&#x7531;&#x6765; TGF-&beta; &#x306E;&#x591A;&#x9762;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xB1CC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC740; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD608;&#xC561; &#xACF5;&#xAE09;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD608;&#xC561;-&#xB1CC; &#xC7A5;&#xBCBD; (BBB) &#xD608;&#xAD00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xBA85;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xB418;&#xB294; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC21C;&#xD658; &#xD608;&#xC561;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xB1CC; &#xC8FC;&#xC704;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; BBB &#xD608;&#xC561;&#xACFC; &#xB1CC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xC55E;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC190;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xB610;&#xB294; &#xB1CC; &#xC9C8;&#xD658; &#xD608;&#xAD00; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD658;&#xACBD; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; BBB&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xD608;&#xC561; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC989;&#xC2DC; &#xB1CC;&#xC5D0; &#xB204;&#xC124;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD608;&#xC561; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; neurovascular &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC774; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xC131;&#xBD84; BBB &#xC5EC;&#xB294; &#xD6C4; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC785;&#xAE08; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD608;&#xAD00; &#xC190;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xD65C;&#xC131; TGF-&beta;&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xCD08;&#xAE30; &#xD749;&#xD130; &#xC720;&#xB3C4;&#xB85C; &#xD608;&#xC561; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560; &#xD655;&#xC778;. &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xC7A0;&#xC7AC; TGF-&beta; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; TGF-&beta; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; TGF-&beta;/Smad &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xC774;&#xB2E4;, &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; neurovascular &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xD608;&#xAD00; TGF-&beta;&#xC758; &#xB2E4; &#xBA74; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xBCC0;&#xC131; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xCD94;&#xCE21;. &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xB1CC; &#xD608;&#xAD00; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC694;&#xC57D; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xD608;&#xAD00; &#xC190;&#xC0C1;: &#xD608;&#xAD00; &#xD30C;&#xC0DD; TGF-&beta;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;.

La funci&oacute;n del cerebro depende de un suministro continuo de sangre. La barrera blood - brain (BBB), que est&aacute; formada por c&eacute;lulas vasculares y glia, separa los componentes de la sangre circulante de las neuronas y mantiene el medio cerebro precisamente regulado necesario para el funcionamiento neuronal. Un comprometido BBB altera el transporte de mol&eacute;culas entre la sangre y el cerebro y ha sido asociada o demostrado que preceden la enfermedad neurodegenerativa. Componentes de la sangre inmediatamente cuele el cerebro despu&eacute;s de da&ntilde;o mec&aacute;nico o como consecuencia de un comprometido BBB en enfermedad cerebro cambiando el ambiente extracelular en los sitios de da&ntilde;o vascular. Es intrigante c&oacute;mo componentes derivados de sangre alteran los componentes celulares y moleculares de la interfaz de neurovascular despu&eacute;s de la apertura de BBB. Se identificaron recientemente un papel inesperado para el fibrin&oacute;geno prote&iacute;na de sangre, que se deposita en el sistema nervioso inmediatamente despu&eacute;s del da&ntilde;o vascular, como un inductor de la cicatriz inicial al promover la disponibilidad de activo TGF-&beta;. Fibrin&oacute;geno-limite latente TGF-&beta; interact&uacute;a con astrocitos, llevando a la activa formaci&oacute;n de TGF-&beta; y la activaci&oacute;n de la v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n de TGF-&beta;/Smad. Aqu&iacute; discutimos los efectos pleiotr&oacute;picos de potencialmente vascular derivado de TGF-&beta; en las c&eacute;lulas en la interfase neurovascular y especulamos c&oacute;mo estos efectos biol&oacute;gicos podr&iacute;an contribuir a la degeneraci&oacute;n y regeneraci&oacute;n de procesos. Resumir los efectos de los componentes derivados del sistema vascular del cerebro en la regeneraci&oacute;n del sistema nervioso puede apoyar el desarrollo de nuevos enfoques terap&eacute;uticos.

Da&ntilde;o vascular en el sistema nervioso central: un rol multifac&eacute;tico para vascular derivado del TGF-&beta;.

&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x4EE5;&#x53CA;&#x9057;&#x4F20;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; E2A &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5728;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EA7;&#x522B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x8C03;&#x5236;&#x7684; DNA &#x7ED1;&#x5B9A; Id &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x534F;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x5236;&#x5668; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x548C;&#x7535;&#x5B50;&#x4EA4;&#x6613;&#x6761;&#x4F8B; &#x300B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6807;&#x8BB0; E47 &#x7ED3;&#x5408;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x4EE5;&#x663E;&#x793A; E47 &#x5373;&#x4EA4;&#x4E92; Id &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x4E50;&#x56E2;&#x3001; Id1&#x3001; Id2&#x3001; Id3&#xFF0C;Id4 &#x4EB2;&#x548C;&#x7EAF;&#x7684;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x8131;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178; N-&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; 5 (PRMT5)&#xFF0C;CoREST&#xFF0C;corepressor (LSD1) 1 14-3-3 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x4F34;&#x4FA3;&#x5C06;&#x4E0E;&#x4EB2;&#x548C;&#x51C0;&#x5316; E47 &#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x8C31;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x7684; E47 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; AKT &#x57FA;&#x677F;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; AKT &#x57FA;&#x677F;&#x7F51;&#x7AD9;&#x672C;&#x8EAB;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x5E72;&#x6270; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x6574;&#x4E2A;&#x4E50;&#x56E2;&#x7684; Id &#x86CB;&#x767D; E47 &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3001; &#x786E;&#x5B9A; E47&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x548C;&#x63ED;&#x793A;&#x8C31;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x91CF; E47&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; AKT &#x57FA;&#x677F;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;

E47 &#x87BA;&#x65CB;-&#x73AF;-&#x87BA;&#x65CB;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x548C; phosphoproteomic &#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Numerous in vitro as well as genetic studies have demonstrated that the activities of the E2A proteins are regulated at multiple levels, including modulation of DNA binding by the Id proteins, association with the transcriptional modulators p300 and ETO, and posttranslational modifications. Here, we use affinity purification of tagged E47 combined with mass spectrometry in order to show that E47 interacts with the entire ensemble of Id proteins, namely, Id1, Id2, Id3, and Id4. Furthermore, we find that the lysine-specific histone demethylase 1 (LSD1), the protein arginine N-methyltransferase 5 (PRMT5), the corepressor CoREST, and the chaperones of the 14-3-3 family associate with affinity-purified E47. We also identify a spectrum of amino acid residues in E47 that are phosphorylated, including an AKT substrate site. We did, however, find that mutation of the identified AKT substrate site by itself did not perturb B cell development. In sum, these studies show that the entire ensemble of Id proteins has the ability to interact with E47, identify factors that associate with E47, and reveal a spectrum of phosphorylated residues in E47, including an AKT substrate site.

Biochemical and phosphoproteomic analysis of the helix-loop-helix protein E47.

De nombreuses &eacute;tudes in vitro ainsi que g&eacute;n&eacute;tiques ont d&eacute;montr&eacute; que l&#39;activit&eacute; des prot&eacute;ines E2A est r&eacute;gul&eacute;e &agrave; plusieurs niveaux, y compris la modulation de l&#39;attache d&#39;ADN par les prot&eacute;ines Id, liaison avec les modulateurs transcriptionnels p300 et ETO modifications post-traductionnelles. Ici, nous utilisons la purification d&#39;affinit&eacute; de tagged E47 combin&eacute;e &agrave; la spectrom&eacute;trie de masse afin de montrer que E47 interagit avec l&#39;ensemble complet des prot&eacute;ines Id, nomm&eacute;ment, Id1, Id2, Id3 et Id4. En outre, nous constatons que le propres lysine histone d&eacute;m&eacute;thylase 1 (LSD1), l&#39;arginine de prot&eacute;ine N-m&eacute;thyltransf&eacute;rase 5 (PRMT5), le co-r&eacute;presseur CoREST, et les accompagnateurs de la famille 14-3-3 associent &agrave; E47 purifi&eacute;s par affinit&eacute;. Nous identifions &eacute;galement un &eacute;ventail de r&eacute;sidus d&#39;acides amin&eacute;s dans E47 qui sont phosphoryl&eacute;es, y compris un site de substrat AKT. On l&#39;a fait, cependant, trouve que mutation du site substrat AKT identifi&eacute; par lui-m&ecirc;me perturbe pas le d&eacute;veloppement des cellules B. En somme, ces &eacute;tudes montrent que l&#39;ensemble complet des prot&eacute;ines Id a la capacit&eacute; d&#39;interagir avec E47, identifier les facteurs qui associent &agrave; E47 et r&eacute;v&eacute;ler un spectre de r&eacute;sidus phosphoryl&eacute;s &agrave; E47, y compris un site de substrat AKT.

Analyse biochimique et phosphoproteomic de la prot&eacute;ine de l&#39;h&eacute;lice-boucle-h&eacute;lice E47.

Zahlreiche in-vitro-als auch genetische Studien haben bewiesen, dass die Aktivit&auml;ten der E2A-Proteine auf mehreren Ebenen, einschlie&szlig;lich Modulation der DNA-Bindung durch die Id-Proteine, zusammen mit den transkriptionelle Modulatoren p300 und ETO und posttranslationale Modifikationen reguliert werden. Hier verwenden wir Affinit&auml;tsreinigung der gekennzeichneten E47 kombiniert mit Massenspektrometrie um nachzuweisen, dass das gesamte Ensemble Id Proteine, n&auml;mlich E47 interagiert, Id1, Id2, Id3 und Id4. Dar&uuml;ber hinaus finden wir, dass die Lysin-spezifische Histon-Demethylase 1 (LSD1), die Protein-Arginin-N-Methyltransferase 5 (PRMT5), der Corepressor CoREST, und ordnen Sie die Chaperone der 14-3-3-Familie E47 Affinit&auml;t gereinigt. Wir legen auch ein Spektrum an Aminos&auml;urereste um in E47, die phosphoryliert werden, einschlie&szlig;lich einer AKT-Substrat-Site. Wir habe, jedoch feststellen, dass die Mutation der identifizierten AKT Substrat Website selbst B-Zell-Entwicklung nicht verl&auml;ngern. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen zeigen diese Studien, dass das gesamte Ensemble von Id-Proteinen die F&auml;higkeit hat, interagieren mit E47, Faktoren, die E47 zuordnen zu identifizieren und ein Spektrum von phosphorylierten R&uuml;ckst&auml;nde in E47, einschlie&szlig;lich einer AKT-Substrat-Site zu offenbaren.

Biochemische und Phosphoproteomic Analyse des Proteins Helix-Schleife-Helix E47.

Numerosi studi in vitro come pure genetici hanno dimostrato che l&#39;attivit&agrave; delle proteine E2A sono regolati a pi&ugrave; livelli, tra cui modulazione di legame del DNA da proteine Id, associazione con la p300 di transcriptional modulatori ed ETO e modifiche di posttranslational. Qui, usiamo la purificazione di affinit&agrave; di tagged E47 abbinata a spettrometria di massa al fine di dimostrare che la E47 interagisce con l&#39;intero insieme delle proteine Id, vale a dire, Id1, Id2, Id3 e Id4. Inoltre, troviamo che l&#39;istone specifici di lisina demetilasi 1 (LSD1), l&#39;arginina della proteina N-metiltransferasi (PRMT5), 5 corepressor CoREST, e gli accompagnatori della famiglia 14-3-3 associano E47 purificato per affinit&agrave;. Identifichiamo anche uno spettro di residui dell&#39;amminoacido in E47 che sono fosforilati, tra cui un sito di substrato AKT. Abbiamo, tuttavia, trovato che mutazione del sito identificato AKT substrato di per s&eacute; non ha fatto perturbare lo sviluppo delle cellule B. In somma, questi studi dimostrano che l&#39;intero insieme delle proteine Id ha la capacit&agrave; di interagire con E47, identificare i fattori che si associano con E47 e rivelare uno spettro dei residui fosforilati in E47, tra cui un sito di substrato AKT.

Analisi biochimica e phosphoproteomic della proteina helix-loop-helix E47.

&#x6570;&#x591A;&#x304F;&#x306E; in vitro &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x7814;&#x7A76; E2A &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x5354;&#x4F1A;&#x306B; p300 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3068;&#x6C5F;&#x85E4;&#x3068;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE; Id &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x30BF;&#x30B0; E47 E47 &#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061; Id &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3092;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3001;Id1&#x3001;Id2&#x3001;Id3 &#x3068; Id4 &#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; &#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; 1 (LSD1) &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; N-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; 5 (PRMT5) &#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC; CoREST&#x3001;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3068;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x7CBE;&#x88FD; E47 &#x3068; 14-3-3 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4ED8;&#x304D;&#x6DFB;&#x3044;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;AKT &#x57FA;&#x677F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA; E47 &#x3067;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x81EA;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F; AKT &#x57FA;&#x677F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E; B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3092;&#x304B;&#x304D;&#x4E71;&#x3059;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5408;&#x8A08;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; Id &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB; E47 &#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3001;E47 &#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;AKT &#x57FA;&#x677F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA; E47 &#x3067;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;. &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30FB; &#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; &#x30FB; &#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; E47 &#x306E;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x3002;

&#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5F0;&#xAD6C; E2A &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; Id &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; transcriptional &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30; p300 &#xBC0F; ETO, posttranslational &#xC218;&#xC815;&#xC640; &#xD611;&#xD68C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD0DC;&#xADF8; E47 E47 &#xC989; &#xC804;&#xCCB4; &#xC559;&#xC0C1;&#xBE14; Id &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;, Id1, Id2, Id3, &#xBC0F; id4&#xC640; &#xACB0;&#xD569;&#xC758; &#xCE5C; &#xD654;&#xB825; &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; lysine &#xD2B9;&#xC815; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; demethylase 1 (LSD1) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; N-methyltransferase 5 (PRMT5) corepressor CoREST, 14-3-3 &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC815;&#xD654; E47. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; AKT &#xAE30;&#xD310; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; phosphorylated e47&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC790;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; AKT &#xAE30;&#xD310; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; B &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xAD50;&#xB780; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xCC3E; &#xC558; &#xC5B4; &#xC694;, &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xC694;&#xCEE8;&#xB300;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD45C;&#xC2DC; Id &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC559;&#xC0C1;&#xBE14; E47 &#xC791;&#xC6A9;&#xD560; E47, &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; AKT &#xAE30;&#xD310; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB4F1;&#xC5D0;&#xC11C; E47, phosphorylated &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;.

E47 &#xB098;&#xC120; &#xB8E8;&#xD504; &#xB098;&#xC120; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xBC0F; phosphoproteomic &#xBD84;&#xC11D;.

Numerosos estudios in vitro, as&iacute; como gen&eacute;ticos han demostrado que las actividades de las prote&iacute;nas E2A est&aacute;n reguladas en m&uacute;ltiples niveles, incluyendo la modulaci&oacute;n de DNA obligatorio por las prote&iacute;nas de la Id, asociaci&oacute;n con los moduladores transcripcional p300 y ETO y modificaciones postraduccionales. Aqu&iacute;, utilizamos la purificaci&oacute;n de la afinidad de etiquetado E47 combinada con espectrometr&iacute;a de masas con el fin de mostrar que E47 interacciona con todo el conjunto de prote&iacute;nas de la Id, es decir, Id1, Id2, Id3 y Id4. Adem&aacute;s, encontramos que la Histona lisina espec&iacute;fica demetilasa 1 (LSD1), la arginina N-metiltransferasa 5 (PRMT5), el correpresor CoREST, de la prote&iacute;na y los acompa&ntilde;antes de la familia de 14-3-3 asocian con E47 purificados por afinidad. Tambi&eacute;n identificamos un espectro de residuos del amino&aacute;cido en E47 que son fosforiladas, incluyendo un sitio del substrato AKT. Sin embargo, encontramos que mutaci&oacute;n del recinto identificado del sustrato AKT por s&iacute; mismo no perturban desarrollo de c&eacute;lulas B. En Resumen, estos estudios muestran que todo el conjunto de prote&iacute;nas de Id tiene la capacidad de interactuar con E47, identificar los factores que se asocian con E47 y revelan un espectro de residuos fosforilados en E47, incluyendo un sitio del substrato AKT.

Kristina Beck

Centre of Chronic Immunodeficiency (CCI),
University Medical Centre Freiburg,
Centre of Chronic Immunodeficiency (CCI), University Medical Centre Freiburg

University of Freiburg

Isolation and Culture of Mouse Cortical Astrocytes

Kristina Beck

Centre of Chronic Immunodeficiency (CCI),University Medical Centre Freiburg,Centre of Chronic Immunodeficiency (CCI), University Medical Centre Freiburg

University of Freiburg

Isolation and Culture of Mouse Cortical Astrocytes

Centre of Chronic Immunodeficiency (CCI),
University Medical Centre Freiburg,
Centre of Chronic Immunodeficiency (CCI), University Medical Centre Freiburg