Per iniziare, prendere il tubo per biopsia cutanea con mezzo fibroblasto. Rimuovere il mezzo e lavare la biopsia del pugno cutaneo tre volte con cinque millilitri di PBS sterile e preriscaldato. Utilizzando una pinza sterile, trasferire la biopsia del punch cutaneo su una piastra di coltura cellulare di 10 centimetri e tagliarla in larghezza in tre o quattro pezzi con un bisturi sterile, lasciando l'epidermide e il derma.
Trasferire ogni pezzo in un piatto di coltura cellulare sterile, 35 millimetri, e premerlo delicatamente nel piatto di coltura. Lasciare asciugare per cinque a 10 minuti fino a quando il liquido evapora e la biopsia è attaccata alla plastica della coltura cellulare. Utilizzando una pipetta da 1.000 microlitri, aggiungere un millilitro di fibroblasti a goccia intorno alla biopsia a un volume finale di tre millilitri.
Incubare il campione per sette giorni a 37 gradi Celsius e 5% di anidride carbonica senza nutrire o spostare il piatto. Alla fine dell'incubazione, cambiare il terreno in terreno di fibroblasti fresco e preriscaldato. Infine, utilizzare un microscopio a contrasto di fase per monitorare i fibroblasti simili a fusi intorno alla biopsia cutanea e congelare le cellule selezionate dopo averle cresciute.
