Per iniziare, prendi dal 70 all'80% di cellule Hep-3B confluenti. Rimuovere 250 microlitri di terreno da ciascuno dei pozzetti e aggiungere 50 microlitri di mezzo con il trattamento o il veicolo appropriato. Aggiungere 50 microlitri di terreno a ciascun pozzetto contenente il reagente colorante e incubare le cellule con il colorante.
Dopo aver rimosso il mezzo e lavato le celle con PBS preriscaldato, fissare le celle con 200 microlitri di soluzione di fissaggio per 15 minuti a temperatura ambiente. Successivamente, decantare la soluzione fissativa e lavare brevemente con 200 microlitri di PBS. Infine, aggiungere 200 microlitri di PBS.
Mantenere le celle coperte e protette dalla luce a quattro gradi Celsius e l'immagine entro 24 ore.
