Coltura in vitro di cellule staminali pluripotenti (iPSC) indotte dall'uomo su array di microelettrodi ad alta densità (HD-MEA)

Per iniziare, prendi il chip HD-MEA. Pulisci il chip con l'anello di vetro con un fazzoletto inumidito con etanolo al 96%. Mettere ogni dispositivo in una capsula di Petri sterile sotto il cofano e riempire il serbatoio MEA con etanolo al 70%.

Dopo aver aspirato l'etanolo, lavare il serbatoio tre volte con acqua sterile, filtrata e bidistillata. Aggiungere un millilitro di terreno di precondizionamento e incubare per una notte. Il giorno successivo, rimuovere i mezzi di precondizionamento dai dispositivi.

Rivestire l'area attiva di ciascun dispositivo con un millilitro di PDLO. Il giorno seguente, aspirare il PDLO dai dispositivi. Lavare i dispositivi tre volte con acqua bidistillata e lasciarli asciugare sotto una cappa.

Riempi una capsula di Petri di 35 x 10 millimetri con acqua sterile, filtrata e bidistillata e posizionala accanto al chip. Utilizzando il terreno preriscaldato, pipettare la sospensione cellulare sulla superficie dell'area attiva del chip. Incubare i trucioli a 37 gradi Celsius in un ambiente con il 5% di anidride carbonica.

Dopo 45 minuti, aggiungere delicatamente due millilitri di terreno riscaldato a temperatura ambiente nel serbatoio HD-MEA. Incubare le patatine a 37 gradi Celsius con il 5% di anidride carbonica.