Per iniziare, prendi un calibro elettronico a corsoio, posiziona la sua ganascia esterna nel punto medio del bordo esterno dell'orecchio ed estendila nel condotto uditivo. Misurare e registrare lo spessore a due terzi e mezzo punti lungo la linea. Quindi, inclina la testa del topo da un lato, orientando l'orecchio verso l'alto.
Applicare 50 microlitri di acido oleico in modo uniforme su entrambi i lati ventrale e dorsale dell'orecchio, una volta al giorno, per 25 giorni. Utilizzando una siringa da un millilitro dotata di ago da 34 o 36 gauge, iniettare 50 microlitri di sospensione di cutibacterium acnes per via intradermica nella superficie ventrale dell'orecchio. Il giorno 25, misura e registra lo spessore delle orecchie.
Dopo aver tagliato le orecchie del ratto soppresso, praticare dei fori di dimensioni fisse nelle orecchie usando un trapano ad anello da otto millimetri. Dopo aver preparato e colorato le sezioni dell'orecchio, osservarle al microscopio ottico. Registrare i cambiamenti patologici per la valutazione di follow-up da parte di un patologo e assegnare punteggi a questi cambiamenti in base alla tabella mostrata qui.
Le orecchie nei gruppi acido oleico e acido oleico con cutibacterium acnes mostravano ispessimento, indurimento, eritema, squame e comedoni con sanguinamento occasionale dovuto a graffi. L'analisi istopatologica ha rivelato paracheratosi, ipercheratosi e ipertrofia nei gruppi acido oleico e acido oleico con cutibacterium acnes. Il punteggio patologico ha indicato un aumento della gravità in questi gruppi rispetto al gruppo di controllo.
L'immunoistochimica ha mostrato una maggiore espressione di TNF alfa nel derma del cutibacterium acnes e dell'acido oleico con i gruppi cutibacterium acnes.
