Noi riconosciamo con gratitudine il supporto di una borsa di studio pilota del Fondo Stanford Research Pediatrica e K08DK087895-01 dal NIDDK.

1. Topo iniezione parete della vescica Scelta del ceppo di topi, l&#39;età e il sesso è dettata da esigenze sperimentali. Noi usiamo topi tra 8 e 12 settimane di età, dal momento che questo è una finestra di maturità immunologica prima senescenza. Come regola generale, i topi dovrebbero arrivare almeno una settimana prima di manipolazione sperimentale al fine di evitare fattori di confondimento indotta da stress. <ol><li> Pulire la superficie del tavolo operatorio con acqua e sapone. </li><li> Pulire la superficie del tavolo operatorio con Swipes Cide o salviette antisettico. </li><li> Autoclave pulizia degli strumenti chirurgici prima di utilizzare in chirurgia. </li><li> Inoltre, sterilizzare strumenti chirurgici con sterilizzatore a caldo tallone immediatamente prima dell&#39;uso, così come tra gli animali durante l&#39;intervento. </li><li> Pulire 100 microlitri siringhe Hamilton e 29 o 30 gauge (1 / 2 pollice di lunghezza), aghi da aspirazione ripetute e iniezione con alcool assoluto prima del primo utilizzo e, alla fine della procedura chirurgica definitiva. </li><li> Lavaggio e risciacquo siringhe Hamilton con sterilizzati PBS tra ogni animale. </li><li> Anestetizzare topi mettendoli in una camera di induzione isoflurano, con il set isoflurano tra 2-5%. </li><li> Una volta che l&#39;anestesia generale si ottiene, rimuovere il mouse dalla camera e posto in posizione supina con un batuffolo di caldo sotto per aiutare a mantenere la normale temperatura corporea. </li><li> Ottenere l&#39;anestesia manutenzione mettendo muso dell&#39;animale in un ugello che contiene vaporizzare isoflurano (titolato dal 1-3% se necessario per mantenere l&#39;anestesia del caso). </li><li> Rasatura della pelle addominale con Clippers. </li><li> Utilizzare un monouso, telino sterile chirurgico per coprire l&#39;ano per evitare la contaminazione fecale durante l&#39;intervento. </li><li> Utilizzare un secondo usa e getta, telino sterile chirurgico per coprire il campo operatorio (basso addome). </li><li> Prep all&#39;addome con tre pezzi di garza imbevuta di Betadine. Ripetere questa operazione tre volte. </li><li> Utilizzando un microscopio da dissezione di ingrandimento, fare abbassare un&#39;incisione addominale mediana con le forbici. </li><li> Esporre la vescica. </li><li> Se la vescica è piena, parzialmente da decomprimere delicata pressione verso il basso la cupola. </li><li> Iniettare la soluzione del campione (fino a 50 mL), con un calibro 29 o 30 aghi e siringhe, nella parete della cupola vescicale (iniezione intramurale) con la smussatura dell&#39;ago verso l&#39;alto. </li><li> Spingere lo stantuffo della siringa per iniettare la soluzione di esempio nella parete della vescica. A ben localizzato bleb è un&#39;indicazione di iniezione di successo delle cellule nella parete della vescica. </li><li> Rimuovere la siringa, chiudere l&#39;incisione con clip ferita e permettono di recuperare il mouse su un blocco del riscaldamento. </li></ol> 2. Rappresentante dei risultati: A ben localizzato bleb che non fluido perdite e resta stabile in dimensioni è un&#39;indicazione di iniezione di successo delle cellule nella parete della vescica (Figura 1). L&#39;analisi istologica può essere eseguito per confermare la presenza delle cellule iniettate nella parete della vescica. <img src="/files/ftp_upload/2523/2523fig1.jpg" alt="Figura 1"/> Figura 1. Esempio di iniezione di successo parete vescicale utilizzando inchiostro di china per l&#39;illustrazione. <img src="/files/ftp_upload/2523/2523fig2.jpg" alt="Figura 2"/> Figura 2. Schematica delle procedure sperimentali.

<ol>
	<li>Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Characterization+of+Metastatic+Variants+from+Human+Transitional+Cell+Carcinoma+Passaged+by+Orthotopic+Implantation+in+Athymic+Nude+Mice.">Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice.</a> The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).</li><li>Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. L., Zhou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soy+Phytochemicals+Prevent+Orthotopic+Growth+and+Metastasis+of+Bladder+Cancer+in+Mice+by+Alterations+of+Cancer+Cell+Proliferation+and+Apoptosis+and+Tumor+Angiogenesis.">Soy Phytochemicals Prevent Orthotopic Growth and Metastasis of Bladder Cancer in Mice by Alterations of Cancer Cell Proliferation and Apoptosis and Tumor Angiogenesis.</a> Cancer Res. 66, 1851-1858 (2006).</li><li>Yanagiuchi, A., Miyake, H., Nomi, M., Takenaka, A., Fujisawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+the+Microenvironment+by+Growth+Factors+Regulates+the+In+Vivo+Growth+of+Skeletal+Myoblasts.">Modulation of the Microenvironment by Growth Factors Regulates the In Vivo Growth of Skeletal Myoblasts.</a> BJU International. 103, 1569-1573 (2009).</li><li>Miyake, H., Hara, I., Yamanaka, K., Gohji, K., Arakawa, S., Kamidono, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Bcl-2+Enhances+Metastatic+Potential+of+Human+Bladder+Cancer+Cells.">Overexpression of Bcl-2 Enhances Metastatic Potential of Human Bladder Cancer Cells.</a> British Journal of Cancer. 79, 1651-1656 (1999).</li><li>Chancellor, M. B., Yokoyama, T., Tirney, S., Mattes, C. E., Ozawa, H., Yoshimura, N., Groat, W. C. d. e., Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+Results+of+Myoblast+Injection+into+the+Urethra+and+Bladder+Wall:+a+Possible+method+for+the+Treatment+of+Stress+Urinary+Incontinence+and+Impaired+Detrusor+Contractility.">Preliminary Results of Myoblast Injection into the Urethra and Bladder Wall: a Possible method for the Treatment of Stress Urinary Incontinence and Impaired Detrusor Contractility.</a> Neurourol Urodyn. 19, 279-287 (2000).</li><li>Dinney, C. P., Tanguay, S., Bucana, C. D., Eve, B. Y., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravesical+Liposomal+Muramyl+Tripeptide+Phosphatidylethanolamine+Treatment+of+Human+Bladder+Carcinoma+Growing+in+Nude+Mice.">Intravesical Liposomal Muramyl Tripeptide Phosphatidylethanolamine Treatment of Human Bladder Carcinoma Growing in Nude Mice.</a> J Interferon Cytokine Res. 15, 585-592 (1995).</li><li>Mohamedali, K. A., Kedary, D., Sweeney, P., Kamaty, A., Davisy, D. W., Evey, B. Y., Huangy, S., Thorpez, P. E., Dinney, C. P., Rosenblum, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Vascular-targeting+Fusion+toxin+VEGF121/rGel+Inhibits+the+Growth+of+Orthotopic+Human+Bladder+Carcinoma+Tumors.">The Vascular-targeting Fusion toxin VEGF121/rGel Inhibits the Growth of Orthotopic Human Bladder Carcinoma Tumors.</a> Neoplasia. 7, 912-920 (2005).</li><li>Slaton, J. W., Perrotte, P., Inoue, K., Dinney, C. P., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-&#945;-mediated+Down-Regulation+of+Angiogenesis-related+Genes+and+Therapy+of+Bladder+Cancer+Are+Dependent+on+Optimization+of+Biological+Dose+and+Schedule.">Interferon-&#945;-mediated Down-Regulation of Angiogenesis-related Genes and Therapy of Bladder Cancer Are Dependent on Optimization of Biological Dose and Schedule.</a> Clinical Cancer Research. 5, 2726-2734 (1999).</li><li>Yokoyama, T., Huard, J., Pruchnic, R., Yoshimura, N., Qu, Z., Cao, B., De Groat, W. C., Kumon, H., Chancellor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle-Derived+Cell+Transplantation+and+Differentiation+into+Lower+Urinary+Tract+Smooth+Muscle.">Muscle-Derived Cell Transplantation and Differentiation into Lower Urinary Tract Smooth Muscle.</a> Urology. 57, 826-831 (2001).</li><li>Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Orthotopic+Models+for+Bladder+Cancer+Research.">Mouse Orthotopic Models for Bladder Cancer Research.</a> BJU International. 104, 1286-1291 (1988).</li><li>Russell, P. J., Jelbart, M., Wills, E., Singh, S., Wass, J., Witherspoon, J., Raghavan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+characterization+of+a+new+human+bladder+cancer+cell+line+showing+features+of+squamous+and+glandular+differentiation.">Establishment and characterization of a new human bladder cancer cell line showing features of squamous and glandular differentiation.</a> Int. J. Cancer. 41, 74-74 (1988).</li><li>Ahlering, T. E., Dubeau, L., Jones, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+in+vivo+model+to+study+invasion+and+metastasis+of+human+bladder+carcinoma.">A new in vivo model to study invasion and metastasis of human bladder carcinoma.</a> Cancer Res. 41, 6660-6660 (1987).</li><li>Heaney, J. A., Omellas, E. P., Daly, J. J., Lin, J. C., Rout, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+growth+of+human+bladder+cancer+cell+lines.">In vivo growth of human bladder cancer cell lines.</a> Invest. Urol. 15, 380-380 (1978).</li><li>Hadaschik, B., Black, P., Sea, J., Metwalli, A., Fazli, L., Dinney, C., Gleave, M., So, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+validated+mouse+model+for+orthotopic+bladder+cancer+using+transurethral+tumor+inoculation+and+bioluminescence+imaging.">A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumor inoculation and bioluminescence imaging.</a> BJU International. 100, 1377-1384 (2007).</li></ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Vescica iniezione del mouse parete permette l&#39;impianto di cellule specifiche in determinati settori della parete vescicale. Questa tecnica ha applicazioni gamma di modelli murini di cancro alla vescica, muscolo liscio, e biologia delle cellule staminali. Per definizione, la vescica di iniezione del mouse parete facilita l&#39;introduzione di cancro della vescica o di cellule staminali in una posizione ortotopico in modo che la loro crescita e differenziazione possono essere studiati in un contesto fisiologicamente r...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reagente </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td> Isoflurano (Aerrane) </td><td> Baxter </td><td> NDC 10019-773-60 </td></tr><tr><td> 29 o 30 gauge aghi </td><td> Hamilton </td><td> 7803-06 e 7803-07 </td></tr><tr><td> 100 microlitri siringa </td><td> Hamilton </td><td> 7656-01 </td></tr></tbody></table>

mouse bladder wall injection

Vescica iniezione del mouse muro è una tecnica utile per lo studio dei fenomeni ortotopicamente vescica, tra cui cellule staminali, muscolo liscio, e la biologia del cancro. Prima di iniziare le iniezioni, l&#39;area chirurgica devono essere pulite con acqua e sapone e soluzione antisettica. Strumenti chirurgici devono essere sterilizzati prima dell&#39;uso e tra ogni animale. Ogni mouse è posta sotto anestesia per via inalatoria isoflurano (2-5% per l&#39;induzione, 1-3% per la manutenzione) e la sua vescica esposti facendo una incisione addominale mediana con le forbici. Se la vescica è piena, è parzialmente decompresso dalla spremitura delicata tra due dita. La sospensione di cellule di interesse è intramurale iniettato nella parete della cupola della vescica con un 29 o 30 gauge e 1 cc o più piccoli siringa. La ferita viene poi chiusa con clip ferita e il topo ha permesso di recuperare su un blocco del riscaldamento. Parete vescicale iniezione è una tecnica microchirurgica delicato che può essere masterizzato con la pratica.

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Mouse Bladder Wall Injection

Vescica iniezione del mouse muro è un approccio utile per lo studio delle cellule staminali ortotopicamente della vescica e della biologia del cancro. Questo metodo microchirurgico delicato può essere padroneggiato con tecnica attenta e pratica.

Topo iniezione parete della vescica

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

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23.8K Views.  Stanford University School of Medicine. Vescica iniezione del mouse muro è un approccio utile per lo studio delle cellule staminali ortotopicamente della vescica e della biologia del cancro. Questo metodo microchirurgico delicato può essere padroneggiato con tecnica attenta e pratica.