Lo studio è stato sostenuto finanziariamente dalla Fondazione Lundbeck, La Karen Elise Jensen Fondazione, il Fondo Ricerca Sanitaria della Regione Centrale Danimarca e l&#39;Istituto di Clinica Medica di Aarhus University Hospital. Noi riconosciamo con gratitudine l&#39;aiuto sapiente di Donald F. Smith, Anders Steen Soerensen, Henrik Sorensen, Asbjoern Ettrup-Christensen, e il personale a Paaskehoejgaard.

1. Intubazione <ol><li> Attrezzatura necessaria per l&#39;intubazione endotracheale: mezzi di ventilazione assistita, brache per l&#39;apertura della bocca, di aspirazione a bassa pressione con la punta smussata, laringoscopio veterinario con lama dritta tra i 17 ei 25 cm di lunghezza, stiletto, siringa con l&#39;aria, stetoscopio e nastro adesivo. Per adulti Göttingen maialino una dimensione del tubo endotracheale 5 a 7 mm è opportuno 10. In questo video un tubo di 5,5 mm è stato utilizzato 10. </li><li> La cavia è posto sulla sua schiena e adeguatamente supportato al fine di garantire che il passaggio della laringe viene tenuto diritto. </li><li> La lingua è un po &#39;tirato fuori e la mascella tenuta aperta da un assistente, senza overextending la testa. Rotazione delle vie aeree o estensione eccessiva della testa può occludere vie aeree, rendendo l&#39;apertura della laringe più difficili da identificare e complicare il posizionamento del tubo tracheale. </li><li> Il laringoscopio viene passato nella cavità faringea e utilizzato per abbassare la lingua, rendendo visibile l&#39;epiglottide. La punta di aspirazione viene utilizzato per spostare l&#39;epiglottide dal palato molle. La punta del laringoscopio viene poi utilizzato per premere il epiglottide verso l&#39;alto verso la base della lingua, rivelando l&#39;apertura della laringe. </li><li> Le cartilagini aritenoidi e delle corde vocali entrano in vista e il tubo endotracheale è avanzato delicatamente con una leggera rotazione, nella trachea durante l&#39;espirazione. </li><li> Il bracciale tubo è gonfiato in base alle specifiche del manufatto avendo cura di evitare l&#39;inflazione in eccesso, che può causare gonfiore ed edema delle vie aeree. I maiali hanno un bronco di ventilare il lobo destro del cranio polmonari. E &#39;quindi importante mettere il tubo al di sopra della biforcazione tracheale. Ciò è facilitato utilizzando il formato corretto tubo e soprattutto serrando le estremità prossimale del tubo, a livello del muso con del nastro adesivo. </li><li> Quando la cavia è correttamente intubato, un libero passaggio di aria deve essere sentito attraverso il tubo, e l&#39;auscultazione del torace dovrebbe rivelare suoni respirazione sia nel lato destro e sinistro del torace. </li><li> Al momento di collegare il ventilatore con il sistema di monitoraggio per la cavia, fisiologico espiratorio valori di anidride carbonica devono essere misurabili e la curva di anidride carbonica che segue il modello respirazione deciso dal 6,10 impostazioni del ventilatore può essere osservato. </li><li> L&#39;anidride carbonica ei valori ossimetria può inizialmente essere influenzati dalla premedicazione e induzione dell&#39;anestesia. Tuttavia questi valori dovrebbe rapidamente tornare alla normalità con una corretta ventilazione 6,10. Qualsiasi segno di cianosi nonostante la ventilazione artificiale assistita indicano distribuzione impropria del tubo. L&#39;errore più comune è il posizionamento accidentale del tubo nell&#39;esofago. </li></ol> 2. Cateterismo vescicale transuretrale <ol><li> Questa procedura è solo per i suini di sesso femminile. Per maialino adulto una dimensione di catetere di Foley francese 8 o 10 è appropriato. A causa della curvatura e le dimensioni dell&#39;apertura uretrale esterno, un catetere con mandrino è preferibile. Un speculum nasale può essere utilizzata in maialino piccolo, mentre uno speculum con più lame possono essere utili per gli animali di grandi dimensioni. Attrezzatura necessaria comprende anche forcipe un ottuso-punta, una siringa con soluzione fisiologica, lubrificante e un sacchetto chiuso urine sistema di drenaggio. </li><li> Per visualizzare meglio l&#39;orifizio uretrale esterno durante cateterizzazione cavia è posto sulla sua schiena con un sostegno sotto la regione lombare, mentre un assistente tira le zampe posteriori cranialmente. </li><li> Lo speculum lubrificato viene inserito e aperto per visualizzare la parete vaginale. La femmina di apertura uretrale esterno si trova nel pavimento della vagina a circa un terzo alla metà della distanza alla cervice (Fig. 1A). Tuttavia, poiché l&#39;animale è posto sulla parte posteriore, la posizione di apertura uretrale apparirà invertita. </li><li> Il catetere è controllato con la punta smussata pinza, quindi la punta del catetere è in continuità con le pinze. Inserire con cautela il catetere in apertura uretrale (Fig. 1B). L&#39;uretra è facilmente traumatizzato una forza eccessiva, viene utilizzato durante la cateterizzazione. Tuttavia, la resistenza leggera può inizialmente essere sentito fino a quando il catetere ha superato lo sfintere urinario esterno. Se il problema persiste, ciò può indicare che l&#39;animale non è abbastanza profondamente sedato. La soluzione è quella di aspettare un po &#39;e lasciare che l&#39;anestesia faccia il suo effetto. </li><li> Come il catetere raggiunge la vescica, rimuovere il mandrino, e nelle urine si vedrà fluire. </li><li> Gonfiare il palloncino con soluzione salina secondo le specifiche di fabbricazione e tirare delicatamente il catetere fino a che la cattura palloncino sul collo della vescica. </li><li> Collegare il sistema chiuso sacca di drenaggio delle urine. </li><li> Nastro il catetere per la coda per evitare lo spostamento accidentale del catetere durante la manipolazione degli animali. </li></ol> 3. Arteria femorale e vena catheterization <ol><li> Attrezzatura necessaria comprende: bisturi, forbici a punta smussata chirurgica, pinze dei tessuti, piccole smussato punta pinze chirurgiche, piccolo autoritenuta retrattore tessuto, porta aghi, swap chirurgico, sutura con ago, soluzione salina eparinata come un filo liquido per mantenere la pervietà del catetere , due 18-gauge IV cannula, due 4-francese guaine punta brite con introduttore e filo guida Seldinger. </li><li> La profondità dell&#39;anestesia devono essere valutati dal test del riflesso interdigitali dolore prima di avviare il procedimento. </li><li> L&#39;arteria femorale e la vena si avvicinano con la cavia posto sulla sua schiena e la gamba posteriore retratto lateralmente. Identificare nella piega cutanea tra il muscolo gracile e sartorio dove la pulsazione della parte superficiale della arteria safena mediale scompare. </li><li> Fai una incisione longitudinale superficiale della pelle del cranio a questo punto, evitando così inavvertitamente danneggiare i vasi safena mediale. </li><li> Utilizzare una punta smussata forbici per sezionare il tessuto sottocutaneo sottostante. </li><li> La divisione fascia del muscolo sartorio e gracile è diviso cranica al sito penetrazione dei vasi mediale safena, prima con una piccola punta smussata pinza chirurgica e poi digitalmente. </li><li> I due gruppi muscolari sono separate da un piccolo autoritenuta divaricatore tessuto facendo attenzione a non danneggiare il nervo femorale e vasi. </li><li> L&#39;arteria è isolato per una lunghezza di circa 1 a 2 cm con una dissezione smussa. </li><li> Ruotare l&#39;ago smussato venflon in modo che il lume è rivolto verso l&#39;alto. Piegare l&#39;ago un po &#39;in modo che seguirà la curvatura nave più facilmente. Ricordati di assicurare l&#39;ago ancora possibile muoversi avanti e indietro con poco sforzo. </li><li> L&#39;arteria viene forato, l&#39;ago retratto e il filo guida Seldinger viene inserito attraverso il tubo venflon. </li><li> Rimuovere il tubo venflon mentre dolcemente pressione sulla arteria per garantire la fissazione del filo guida. </li><li> La guaina con introduttore viene inserita sopra il filo di Seldinger e avanzato nella posizione desiderata, dopo di che l&#39;introduttore e il filo di Seldinger è stato rimosso. </li><li> La vena femorale si trova proprio sotto e medialmente all&#39;arteria. Dopo aver staccato la vena con dissezione smussa, la vena è cannulata come descritto in precedenza per l&#39;arteria. </li><li> Per verificare che sia l&#39;arteria e la vena correttamente cateterizzati, prelievo di sangue da entrambe le guaine e confrontare il colore dei campioni. Ogni volta che disegno un campione di sangue, ricordarsi di lavare successivamente il catetere con soluzione fisiologica eparinata al fine di mantenere la pervietà del catetere. </li><li> I cateteri sono garantiti e la pelle è chiuso con un paio di punti di sutura. </li><li> Un ciclo vaso può essere collocato intorno l&#39;arteria e la vena al fine di fissare i vasi prima di forare. Nonostante i suoi vantaggi, in genere evitare questo ulteriore passo, perché richiede la dissezione dei vasi in eccesso e può aumentare il rischio di danneggiare i rami laterali e profondo. </li></ol> 4. Perfusione Transcardial <ol><li> Le seguenti apparecchiature sono necessarie per la procedura: sistema di perfusione (Fig. 2), fluidi perfusione rilevanti, bisturi, forbici a punta smussata chirurgici, forbici osso, e due grandi auto-holding pinze di cui almeno uno ha una punta ricurva. Un auto mantenendo divaricatore sternale non è assolutamente necessaria, ma semplifica notevolmente la procedura. </li><li> Perfusione Transcardial deve essere eseguita in un ambiente ben ventilato con un alto sistema di aspirazione dei fumi di potenza ed impianti che consentano la raccolta dei liquidi perfusato e sangue per il successivo smaltimento. </li><li> Dopo l&#39;iniezione per via endovenosa una dose letale di pentobarbital, prova il riflesso interdigitali dolore prima di continuare. </li><li> Il miglior accesso al cuore e aorta viene fornita tramite una sternotomia mediana. Fare una profonda incisione cutanea longitudinale, che si estende dal manubrio al processo xifoideo dello sterno. Ottenere l&#39;accesso alla cavità toracica facendo una piccola incisione nel diaframma appena sotto il processo xifoideo. </li><li> Inserire le forbici osso nella cavità toracica e lo sterno bisecare. Bisogna fare attenzione quando si esegue questa procedura, perché il cuore può essere aderente a qualche luogo all&#39;interno dello sterno. Quindi, accertarsi che la lama della cesoia osso riposa in ogni momento all&#39;interno della cavità toracica contro l&#39;interno dello sterno. </li><li> Dopo lo sterno è stato diviso, messo in autoritenuta divaricatore sternale e aprire la cavità toracica. </li><li> Se ancora intatto, fare una piccola incisione nel pericardio all&#39;apice del cuore e poi digitalmente aprire il pericardio. </li><li> Identificare il ventricolo sinistro, l&#39;atrio destro e l&#39;aorta con la vena cava superiore (Fig. 1C) </li><li> Fai un piccolo taglio superficiale vicino all&#39;apice del cuore e accedere al ventricolo sinistro tramite perforazione del miocardio con una punta smussata strumento. </li><li> Inserire il perfusione cannula all&#39;interno del ventricolo sinistro e spostare la punta della cannula cranialmente nell&#39;aorta. </li><li> Quando la cannula si sente tra le dita nell&#39;aorta, fissare la cannula in posizione con le pinzette ricurve auto-azienda. </li><li> Fare un&#39;incisione nel padiglione auricolare destro e iniziare a iniettare il fissativo attraverso la cannula di perfusione. Il flusso di perfusato nell&#39;aorta può essere sentito, e il sangue si riverserà attraverso il padiglione auricolare destro incise come il flusso perfusato nei vasi cavia continua. Notate come la perfusione sistemica con paraformaldeide induce iperestensione degli arti e spasmi della muscolatura superficiale a causa di aldeide reticolazione di nervi e muscoli. Quando si utilizza un sistema di perfusione alimentato ad aria compressa al posto di gravità, assicurarsi di rimuovere la cannula, o bloccare il tubo trasparente di silicone, prima che la bombola è vuota, per evitare ingresso di aria nel sistema vascolare. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2652/2652fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. R: La femmina Göttingen cavia apertura uretrale esterno. B: L&#39;apertura uretrale dopo l&#39;inserimento del catetere C:. Vista ventrale del cuore cavia dopo sternotomia mediana. <img src="/files/ftp_upload/2652/2652fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. R: Il sistema di perfusione costituito da tubi di aspirazione con valvola di pressione regolabile e una leva usata per controllare di ingresso di aria compressa nel recipiente contenente il perfusato. Tubi in silicone trasparente collega il contenitore di un ottuso-cannula costituito da un tubo di 4 millimetri in acciaio B e C:. Comprimendo la leva di ingresso, la pressione sale nel contenitore e la perfusato è azionato attraverso la cannula. D: Quando il chiaro tubo in silicone e cannula sono pieni di perfusato, il flusso è fermato con un morsetto e il sistema è pronto all&#39;uso.

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Tutte le procedure sono state approvate dalla Animal Ispettorato danese Sperimentale, Ministero della Giustizia danese e sono state condotte secondo i &quot;Principi di cura degli animali da laboratorio&quot; (NIH pubblicazione n ° 86-23, riveduta 1985).

Questa presentazione fornisce istruzioni passo-passo le istruzioni visive su come eseguire quattro procedure di uso frequente nella ricerca cavia 12,13. Le tecniche descritte può essere usato con poco o nessun adattamento nei suini Landrace e altri animali di ricerca di grandi dimensioni come i cani e le pecore 14. Tecnica asettica deve essere impiegato per evitare infezioni, quando si eseguono le procedure descritte negli studi di sopravvivenza. Induzione dell&#39;anestesia è importante per il benessere degli animali e motivi scientifici, e dovrebbe fornire assenza di riflessi corneale e buon rilassamento muscolare, prima di intubazione endotracheale è tentato. Tuttavia, poiché gli anestetici utilizzati per l&#39;induzione non sono date in dosi fisse, ma somministrato l&#39;effetto desiderato si osserva, è importante monitorare da vicino l&#39;animale a causa del rischio di apnea, specialmente se si usa propofol 6,10. Per l&#39;intubazione tracheale, l&#39;uso di spray o xylocaina miorilassante può facilitare l&#39;introduzione del tubo, ma l&#39;uso di bloccanti neuromuscolari deve essere fatto solo da personale ben addestrato in tali procedure in modo da conformarsi ai requisiti etici. Si deve prestare attenzione a non traumatizzare il passaggio della laringe durante l&#39;intubazione, per evitare il gonfiore e l&#39;edema tracheale. Edema delle vie aeree possono essere trattati con FANS o simili farmaci anti-infiammatori 10. I maiali possono essere intubati da varie posizioni, ma avendo l&#39;animale sulla schiena tende ad essere più facile per coloro che esercitano regolarmente la intubazione umano, in quanto presenta delle vie aeree in modo simile 6. L&#39;errore più comune durante l&#39;intubazione è involontario il posizionamento del tubo nell&#39;esofago, che è situata proprio sotto il passaggio della laringe quando l&#39;animale viene posto sulla sua schiena. Nota, il tubo non dovrebbe mai essere avanzata senza prima che identifica chiaramente le cartilagini aritenoidi e delle corde vocali. Cateterizzazione transuretrale della vescica urinaria attraverso l&#39;uretra è fatto facilmente in suini di sesso femminile, mentre questa procedura è estremamente difficile, forse impossibile, nei maschi 6. Va notato che da quando l&#39;orifizio uretrale femminile è anteriore alla vagina, la maggiore apertura vaginale può essere erroneamente cateterizzati. L&#39;utilizzo di lubrificante sterile e disinfettante è consigliabile per gli studi di sopravvivenza. Inoltre, lubrificante con effetto anestetico locale potrebbe facilitare la procedura di cateterizzazione. Quando si esegue cateterismo dell&#39;arteria femorale e vena, la scelta dei cateteri nave e come sono protetti differiscono tra non-sopravvivenza e studi di sopravvivenza, soprattutto quando i cateteri vengono impiantati per un lungo periodo di tempo 6. Per esempio cateteri per l&#39;impianto cronica dovrebbe essere altamente biocompatibile, sono perle di ritenzione o polsini per il fissaggio e non traumatizzare la parete del vaso nel tempo, inducendo così trombosi o erosione 6. Nel video presente, si usa un sistema chiuso alimentato da aria compressa per perfusione transcardial. Un&#39;altra opzione è quella di utilizzare un sistema guidato dalla forza di gravità. Il vantaggio di sistemi di gravità rispetto ai sistemi che utilizzano l&#39;aria compressa è che sono semplici, efficienti, e non presentino rischi di aria pressurizzata che entra nel sistema vascolare. Tuttavia, la pressione idrostatica esercitata dai sistemi di gravità cambia continuamente durante la perfusione, e questo può influire sui risultati istologici 15. A seconda del tipo di studi istopatologici si vuole eseguire, può essere vantaggioso per l&#39;animale perfusione con soluzione salina eparinata per primo. Questo è importantance particolare durante l&#39;esecuzione di colorazione di immunofluorescenza al fine di evitare i problemi causati da autofluorescenza eritrociti. Inoltre, se l&#39;organo di interesse è il cervello, l&#39;aorta discendente potrebbe essere bloccato per salvare fissativo. Tuttavia, nei suini, questo passaggio comporta ulteriori dissezione e prolungare la procedura.

<table border="1"><tbody><tr><th> Procedura </th><th> Attrezzatura </th><th> Azienda </th><th> Catalogo-numero </th></tr><tr><td> Intubazione </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Respiratore </td><td> Datex-Ohmeda S / S Avance, GE Healthcare </td><td> 1009-9002-000 </td></tr><tr><td></td><td> Aspirazione con punta smussata </td><td> Unomedical </td><td> 34091181 </td></tr><tr><td></td><td> Laringoscopio </td><td> Mugnaio </td><td> 85-0045 (set laringoscopio) </td></tr><tr><td></td><td> Tubo endotracheale 5,5 mm ID </td><td> Smiths Medical International Ltd. </td><td> 100/199/055 </td></tr><tr><td></td><td> Stiletto </td><td> Hudson RCI </td><td> 5-151001 </td></tr><tr><td></td><td> Siringa da 5 ml </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Stetoscopio </td><td> Martin </td><td> 17-262-00 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cateterismo vescicale </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> AquaFlate glicerina silicone catetere di Foley 8-francese con mandrino </td><td> Rüsch </td><td> 178003 </td></tr><tr><td></td><td> Speculum nasale </td><td> Martin </td><td> 36-859-50 </td></tr><tr><td></td><td> Speculum rettale </td><td> Martin </td><td> 30-613-15 </td></tr><tr><td></td><td> Blunt punta forcipe </td><td> Martin </td><td> 13-374-16 </td></tr><tr><td></td><td> Catetere gel lubrificante </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Cathejell Lidocaina </td><td> Montavit </td><td> CJL08501 </td></tr><tr><td></td><td> Instillagel Pettine. </td><td> Farco Pharma </td><td> 08-40-200 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> A4 urina sacca di drenaggio </td><td> Unomedical </td><td> 38 155 1S </td></tr><tr><td></td><td> Nastro adesivo </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cateterismo dell&#39;arteria femorale e vena </</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Bisturi </td><td> Martin </td><td> 10-295-11 </td></tr><tr><td></td><td> Blunt punta forbici chirurgiche </td><td> Martin </td><td> 11-881-18 </td></tr><tr><td></td><td> Tessuto forcipe </td><td> Martin </td><td> 12-100-14 </td></tr><tr><td></td><td> Piccola punta smussata pinze chirurgiche </td><td> Martin </td><td> 13-375-13 </td></tr><tr><td></td><td> Piccolo autoritenuta tessuto retrattore </td><td> Martin </td><td> 15-753-13 </td></tr><tr><td></td><td> Aghi </td><td> Martin </td><td> 20-634-14 </td></tr><tr><td></td><td> Swaps chirurgico </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Sutura con ago </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Salino </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Eparina </td><td> LEO </td><td> 585679 </td></tr><tr><td></td><td> 18-gauge venflon </td><td> BD Venflon Pro </td><td> 393206 </td></tr><tr><td></td><td> 4-francese punta guaine brite con introduttore e filo guida Seldinger </td><td> Cordis </td><td> 154-2629-1/0017 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Perfusione Transcardial </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Perfusione sistema pressurizzato </td><td> Fatta in casa dalle parti disponibili nella maggior parte dei negozi di ferramenta professionale </td><td></td></tr><tr><td></td><td> Sistema di estrazione fumi </td><td> Gram A / S </td><td> 01750000 e 0303700 </td></tr><tr><td></td><td> Perfusant 5L </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Blunt punta forbici chirurgiche </td><td> Martin </td><td> 11-881-18 </td></tr><tr><td></td><td> Osso cesoie </td><td> FST </td><td> 16150-24 </td></tr><tr><td></td><td> Grande curva punta di auto-holding forcipe </td><td> Martin </td><td> 13-421-18 </td></tr><tr><td></td><td> Auto mantenendo divaricatore sternale </td><td> Rudolf Medical </td><td> 7520-10 </td></tr><tr><td></td><td> Pentobarbital</td><td> TheRoyal veterinaria e agraria dell&#39;Università (KVL) </td><td> 200 mg / ml </td></tr><tr><td></td><td> 22-gauge venflon </td><td> BD Venflon Pro </td><td> 393202 </td></tr></tbody></table>

basic surgical techniques in the g&ouml;ttingen minipig: intubation, bladder catheterization, femoral vessel catheterization, and transcardial perfusion

L&#39;emergere di cavia Göttingen nella ricerca di argomenti come le neuroscienze, tossicologia, il diabete, l&#39;obesità e chirurgia sperimentale riflette la stretta somiglianza di questi animali di anatomia e fisiologia umana 1-6. La dimensione della cavia Göttingen consente l&#39;utilizzo di chirurgia modalità di imaging avanzate attrezzature e simili a quelle usate nell&#39;uomo 6-8. Lo scopo di questo video didattico è quello di aumentare la consapevolezza sul valore del maialino nella ricerca biomedica, dimostrando come eseguire l&#39;intubazione tracheale, cateterismo vescicale transuretrale, l&#39;arteria femorale e cateterismo venoso, così come perfusione transcardial. Intubazione endotracheale deve essere eseguito ogni volta che una cavia subisce anestesia generale, perché mantiene pervietà delle vie aeree, permette di ventilazione assistita e protegge le vie aeree da aspirati. Cateterismo vescicale transuretrale in grado di fornire utili informazioni sullo stato di idratazione e la funzione renale e cardiovascolare durante le lunghe procedure chirurgiche. Inoltre, il cateterismo urinario può prevenire la contaminazione delle delicate attrezzature medico-tecniche e l&#39;estensione della vescica dolorosa che può danneggiare inutilmente l&#39;animale e influenza l&#39;esperimento a causa di aumento del tono vagale e parametri fisiologici alterati. Cateterismo arterioso e venoso è utile per ottenere i campioni di sangue ripetute e monitoraggio vari parametri fisiologici. Cateterizzazione di vasi femorali è preferibile cateterizzazione dei vasi del collo per facilità di accesso, quando si eseguono esperimenti frame-based neurochirurgia stereotassica e di imaging cerebrale. Quando si esegue il cateterismo nave negli studi di sopravvivenza, rigorosa tecnica asettica deve essere impiegato per evitare infezioni 6. Perfusione Transcardial è il metodo di fissazione più efficace, e produce risultati preminente nella preparazione organi cavia per istologia e istochimica 2,9. Per ulteriori informazioni su anestesia, la chirurgia e le tecniche sperimentali nei suini, in generale, ci riferiamo a Swindle 2007. Informazioni supplementari sulla premedicazione e induzione di anestesia, la ventilazione assistita, analgesia, cure pre e post-operatorio di maialino Gottinga sono disponibili via internet all&#39;indirizzo <a href="http://www.minipigs.com">http://www.minipigs.com</a> 10. Per informazioni dettagliate sulla anatomia suina ci riferiamo al Nickel et al. Vol. 01-05 novembre.

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Basic Surgical Techniques in the G&amp;#246;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

L&#39;uso di suini domestici e in miniatura nella scienza è aumentata significativamente negli ultimi anni. Dimostrando come eseguire l&#39;intubazione, cateterismo vescicale transuretrale, l&#39;arteria femorale e cateterismo venoso, così come perfusione transcardial, puntiamo a incrementare ulteriormente il valore di maialino Göttingen nella ricerca biomedica.

Tecniche chirurgiche di base Nella cavia Gottinga: intubazione, cateterismo vescicale, cateterizzazione nave femorale, e Perfusione Transcardial

The emergence of the G&ouml;ttingen minipig in research of topics such as neuroscience, toxicology, diabetes, obesity, and experimental surgery reflects ...

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Research

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Medicine

Basic Surgical Techniques in the G&ouml;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

69.0K Views.  Aarhus University Hospital. L'uso di suini domestici e in miniatura nella scienza è aumentata significativamente negli ultimi anni. Dimostrando come eseguire l'intubazione, cateterismo vescicale transuretrale, l'arteria femorale e cateterismo venoso, così come perfusione transcardial, puntiamo a incrementare ulteriormente il valore di maialino Göttingen nella ricerca biomedica.

Video: Basic Surgical Techniques in the G&#246;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically implanted catheters permit a researcher to effectively and humanely administer substances, perform repeated blood sampling and assists in conscious direct measurements of blood pressure and heart rate. Once the catheter is implanted long-term sampling is possible. Patency and catheter life depends on multiple factors including the lock solution used, flushing regimen and catheter material. This video will demonstrate the methodology of femoral artery and venous catheterization of the rat. In addition the video will demonstrate the use of the femoral venous and arterial catheters for blood sampling, drug administration and use of the arterial catheter in taking measurements of blood pressure and heart rate in a conscious freely-moving rat. A tether and harness attached to a swivel system will allow the animal to be housed and have samples taken by the researcher with minimal disruption to the animal. To maintain patency of the catheter, careful daily maintenance of the catheter is required using lock solution (100 U/ml heparinized saline), machine-ground blunt tip syringe needles and the use of syringe filters to minimize potential contamination. With careful aseptic surgical techniques, proper catheter materials and careful catheter maintenance techniques, it is possible to sustain patent catheters and healthy animals for long periods of time (several weeks).

Chronic catheterization of blood vessels in the rat is often required for administration of substances, obtain blood sample over a period of time or for direct conscious blood pressure measurements. Femoral arterial catheterization of the rat and corresponding measurements of blood pressure in the conscious animal will be demonstrated.

Femorale cateterismo arterioso e venoso per il campionamento del sangue, Drug Administration e pressione sanguigna consapevole e misure di frequenza cardiaca

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Ricerca

Medicina

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the arteries (&beta;2). When systemically administered, it increases cardiac demand. Thus, dobutamine unmasks abnormal rhythm or ischemic areas potentially at risk of infarction. 
Monitoring of heart function during a cardiac stress test can be performed by either ecocardiography or cardiac catheterization. The latter is an invasive but more accurate and informative technique that the former.
Cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization accomplished as described here allows, in a single experiment, the measurement of the following hemodynamic parameters: heart rate (HR), systolic pressure, diastolic pressure, end-diastolic pressure, maximal positive pressure development (dP/dtmax) and maximal negative pressure development (dP/dtmin), at baseline conditions and under increasing doses of dobutamine.
As expected, in normal mice we observed a dobutamine dose-related increase in HR, dP/dtmax and dP/dtmin. Moreover, at the highest dose tested (12 ng/g/min) the cardiac decompensation of high fat diet-induced obese mice was unmasked.

We describe the protocol to perform a cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in normal mice. Also we show its application to unmask subclinical cardiac disease in high fat diet-induced obese mice.

Stress Test cardiaca indotta da dobutamina e monitorato da cateterizzazione cardiaca nei topi

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

Cateterismo dell&#39;arteria carotide e giugulare Vena di eseguire misure emodinamiche, Infusi e campionamento del sangue in un modello di ratto cosciente

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these strategies is to examine their effects on heart function. There are several techniques to measure in vivo cardiac mechanics (e.g., echocardiography, pressure/volume relations, etc.). Compared to echocardiography, real-time left ventricular (LV) pressure/volume analysis via catheterization is more precise and insightful in assessing LV function. Additionally, LV pressure/volume analysis provides the ability to instantaneously record changes during manipulations of contractility (e.g., &#946;-adrenergic stimulation) and pathological insults (e.g., ischemia/reperfusion injury). In addition to the maximum (+dP/dt) and minimum (-dP/dt) rate of pressure change in the LV, an accurate assessment of LV function via several load-independent indexes (e.g., end systolic pressure volume relationship and preload recruitable stroke work) can be attained. Heart rate has a significant effect on LV contractility such that an increase in the heart rate is the primary mechanism to increase cardiac output (i.e., Bowditch effect). Thus, when comparing hemodynamics between experimental groups, it is necessary to have similar heart rates. Furthermore, a hallmark of many cardiomyopathy models is a decrease in contractile reserve (i.e., decreased Bowditch effect). Consequently, vital information can be obtained by determining the effects of increasing heart rate on contractility. Our and others data has demonstrated that the neuronal nitric oxide synthase (NOS1) knockout mouse has decreased contractility. Here we describe the procedure of measuring LV pressure/volume with increasing heart rates using the NOS1 knockout mouse model.

This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

Cateterizzazione cardiaca nei topi per misurare il rapporto pressione del volume: Indagare l&#39;effetto Bowditch

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous perfusion of organs provides the opportunity to improve organ quality and allows ex situ viability assessment of donor livers prior to transplantation. This video article provides a step by step protocol for ex situ normothermic machine perfusion (37 &#176;C) of human donor livers using a device that provides a pressure and temperature controlled pulsatile perfusion of the hepatic artery and continuous perfusion of the portal vein. The perfusion fluid is oxygenated by two hollow fiber membrane oxygenators and the temperature can be regulated between 10 &#176;C and 37 &#176;C. During perfusion, the metabolic activity of the liver as well as the degree of injury can be assessed by biochemical analysis of samples taken from the perfusion fluid. Machine perfusion is a very promising tool to increase the number of livers that are suitable for transplantation.

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Here we present a protocol describing oxygenated ex situ machine perfusion of donor liver grafts. This article contains a step by step protocol to procure and prepare the liver graft for machine perfusion, prepare the perfusion fluid, prime the perfusion machine and perform oxygenated normothermic machine perfusion of the liver graft.

Ex Situ normotermica macchina di perfusione di Vivi donatori

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal (central) efferent lymph. Importantly, the collection of central lymph from the intestine enables researchers to study both the mechanisms and lipid constitutes associated with lipid metabolism, intestinal inflammation and cancer metastasis, as well as cells involved in immune function and immunosurveillance. A ventral mid-line surgical approach permits excellent surgical exposure to the cranial abdomen and relatively easy access to the intestinal lymph trunk vessel that lies near the pancreas and the right ventral segment of the portal vein underneath the visceral aspect of the right liver lobe. The vessel is meticulously dissected and released from the surrounding fascia and then dilated with sutures allowing for insertion and subsequent securing of the catheter into the vessel. The catheter is exteriorized and approximately 1 L/24 hr of lymph is collected over a 7 day period. While this technique enables the collection of large quantities of central lymph over an extended period of time, the success depends on careful surgical dissection, tissue handling and close attention to proper surgical technique. This is particularly important with surgeries in young animals as the lymph vessels can easily tear, potentially leading to surgical and experimental failure. The video demonstrates an excellent surgical technique for the collection of intestinal lymph.

We present a surgical procedure to catheterize the intestinal lymph trunk in neonatal pigs to collect large quantities of lipid metabolism components from efferent lymph.

A lungo termine cateterizzazione della intestinale linfa Tronco e Raccolta della linfa in neonatali Pigs

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

Chirurgia Shunt, Destra cuore cateterizzazione, e Vascolare Morfometria in un modello di ratto per Flow-indotta ipertensione arteriosa polmonare

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Harvest of Endothelial Cells from the Balloon Tips of Swan-Ganz Catheters after Right Heart Catheterization

A variety of pathologies lead to pulmonary hypertension (PH), which is defined as a mean pulmonary artery pressure exceeding 25 mmHg at rest. To further diagnose and manage PH, patients undergo repeated right heart catheterizations (RHC) wherein a Swan-Ganz catheter is advanced into a branch of the pulmonary artery and a balloon is inflated to wedge the catheter tip. This article illustrates a protocol whereby pulmonary artery endothelial cells (PAECs) may be harvested from the balloon tips of Swan-Ganz catheters after RHC, and purified with an anti- CD146 affinity column technique to purify putative PAECs. These cells might be used to provide an in situ snapshot of the biological state of the pulmonary vasculature endothelium to complement hemodynamic measurements obtained during RHC. Harvested and purified PAECs may be used for either cell culture or for subsequent analytical assays such as flow cytometery.

This protocol describes the removal and purification of pulmonary artery endothelial cells (PAECs) that adhere to the balloon tips of Swan-Ganz catheters while they are wedged in the pulmonary artery during right heart catheterization and remain adherent to the deflated balloon following removal from the patient's body.

Raccolta delle cellule endoteliali dalle punte del palloncino del catetere di Swan-Ganz dopo cateterizzazione del cuore destro

A variety of pathologies lead to pulmonary hypertension (PH), which is defined as a mean pulmonary artery pressure exceeding 25 mmHg at rest. To further ...

Brachial Artery Catheterization in Swine

The video describes in detail the catheterization of the distal brachial artery in swine. This technique enables researchers to measure arterial blood pressure continuously and collect arterial blood samples to assess arterial blood gas measurements. Arterial blood pressures and arterial blood gases are important physiological parameters to monitor during experimental procedures. In swine, four common methods of arterial catheterization have been described, including catheterization of the carotid, femoral, auricular, and medial saphenous arteries. Each of these techniques have advantages, such as ease of access for the auricular artery, and disadvantages that include deep tissue dissection for carotid artery catheterization. The described alternative method of arterial catheterization in swine, the catheterization of the distal aspect of the brachial artery, is a rapid procedure that requires relatively minimal tissue dissection and provides information that is in line with data collected from other arterial catheterization sites. The procedure uses a medial approach along an oblique plane of the lower brachium, positioned between the olecranon and the flexor aspect of the elbow joint, and this approach allows researchers the major advantage of unimpeded freedom for procedures that involve the caudoventral, caudodorsal back, or hind limbs of the pig. Due to the location of the upper forelimb of the catheterized vessel and potential challenges of effective homeostasis following catheter removal from the artery, this technique may be limited to non-recovery procedures.

The video describes in detail the catheterization of the distal brachial artery in swine. This procedure accurately measures arterial blood pressure and is a simple and fast method to collect samples for arterial blood gas measurements.

Cateterizzazione dell'arteria brachiale in maiali

The video describes in detail the catheterization of the distal brachial artery in swine. This technique enables researchers to measure arterial blood ...

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ventral neck for direct confirmation of cannula placement in the trachea. The relative difficulty or the tissue trauma induced to the subject by such procedures can be an impediment to an investigator&#8217;s ability to perform longitudinal studies. This article illustrates a technique in which physical manipulation of the mouse following the use of a depilatory to remove hair from the ventral neck permits transcutaneous visualization of the trachea for orotracheal intubation regardless of degree of skin pigmentation. This method is innocuous to the subject and easily achieved with a limited understanding of murine anatomy. This refined approach facilitates repeated intubation, which may be necessary for monitoring progression of disease or instillation of treatments. Using this method may result in a reduction of the number of animals and technical skill required to measure lung function in mouse models of respiratory disease.

The goal of this article is to describe a refined method of intubation of the laboratory mouse. The method is noninvasive and, therefore, ideal for studies that require serial monitoring of respiratory function and/or instillation of treatments into the lung.

Intubazione orotrachea ripetuta nei topi

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...