Questo lavoro è supportato dalla American Heart Association 14FTF20370058 (DMA) e NIH T32 HL007101-35 (DMA).

1. Preparati conduttanza catetere e calibrazione della pressione <ol><li> Collegare il catetere conduttanza al modulo del catetere emodinamica. Elettronico calibrare le misure di pressione e di volume registrando pressione preimpostata e il volume impostato sul modulo catetere. Registrare un tracciato pari a 0 mm Hg e 25 mm Hg (Figura 1A) e assegnare le tensioni su entrambi i tracciati di pressione (Figura 1B e 1C). Allo stesso modo, registrare un tracciato volume di 5 RVU e 25 RVU (Figura 1D) e assegnare le tensioni su entrambi i tracciati volume (1E e 1F). </li><li> Confermare la taratura di pressione elettronico con una taratura pressione manuale, utilizzando una colonna di mercurio sfigmomanometro. Montare il porto bracciale sfigmomanometro con un rubinetto a 3 vie. Riempire un sistema di valvola emostatica 3 vie, spesso utilizzato per angioplastica coronarica, con acqua RT utilizzando la porta laterale. <ol><li> Posizionare la punta di un catetere conduttanza nella valvola emostatica pieno di liquido e fissare delicatamente ingegnoHout attorcigliamento del catetere. Collegare la valvola emostatica alla sfigmomanometro e gonfiare a 200 mmHg e bloccare rubinetto a 3 vie. Verificare se la pressione misurata corrisponde alla pressione gonfiato sul sfigmomanometro. </li></ol></li><li> Luogo catetere salina riscaldata a 37 ° C che è al livello della pressione campo operatorio e misura. Regolare il controllo della pressione fino a quando le pressioni registrate è pari a zero. </li></ol> 2. Anestesia / intubazione <ol><li> Somministrare ketamina / xilazina (80-100 / 10 mg kg -1) come un&#39;iniezione intraperitoneale. Nota: agenti anestetici alternativi possono essere utilizzati. Una lunga lista di anestetici sono forniti in recensioni precedenti di questa tecnica 11,12. Anestesia corretta può essere confermata da dolce pizzico coda. </li><li> Una volta anestetizzato, radersi il collo e il petto con tosatrici e posto su un tappetino riscaldato. Mantenere la temperatura rettale mouse 36,5-37,5 ° C. Basse temperature del corposi tradurrà in tassi di cuore depressi. Applicare pomata per gli occhi per evitare secchezza </li><li> Eseguire un&#39;incisione mediana del collo e sezionare i muscoli tracheali via per esporre la trachea. Inserire un tubo endotracheale attraverso la bocca, mentre si visualizza la trachea al fine di garantire l&#39;intubazione, e connettersi al respiratore. </li><li> Mantenere mouse sul ventilatore durante la procedura. Impostazioni Impostare ventilatore in base al peso animale come descritto in precedenza 11. Volume corrente (ml) = 6.2 x (peso animale in chilogrammi) 1.01 e la frequenza respiratoria = 53.5 x (peso animale in chilogrammi) -0.26. </li></ol> 3. Posizionamento di conduttanza catetere nella camera LV <ol><li> Approccio carotidea <ol><li> Per garantire la sterilità, due serie di strumenti chirurgici sterili sono uno Used- per incisione cutanea iniziale e quella di operare nel toracotomia. Gli strumenti devono essere decontaminati con uno sterilizzatore a secco tra gli animali nel corso di una singola sessione chirurgica unnd autoclave alla fine di ogni giornata chirurgica. </li><li> Dopo che la pelle è stata decontaminata con tre cicli di una macchia della pelle clorexidina + alcool (soluzione alcolica / 70% clorexidina 0,5%), fare un&#39;incisione sopra la carotide destra da mandibola a sterno. Sezionare il tessuto circostante per esporre la carotide destra, e tagliare il nervo vago che corre adiacente alla carotide. </li><li> Posizionare un sterile sutura 6-0 seta intorno all&#39;estremità distale (lontano dal petto) della carotide, cravatta e sicuro. Inserire due suture aggiuntivi sotto prossimale carotide (più vicino al petto) alla prima sutura liberamente legare la sutura centrale. Tirare delicatamente la sutura prossimale e sicuro fissando alla pelle. Assicurarsi che la carotide è stato bloccato sia prossimale e distale prima di procedere. </li><li> Fai una piccola incisione nella carotide R., prossimale alla prima sutura, e si estendono longitudinalmente verso il petto. </li><li> Inserire la punta del catetere conduttanza,precedentemente imbevuto in soluzione salina calda per 30 minuti, nel recipiente attraverso l&#39;incisione e fissare il catetere con la sutura centrale. </li><li> Avanzare delicatamente il catetere nel ventricolo sinistro attraverso la carotide, mentre si guarda il loop pressione-volume tracciamento per garantire il corretto posizionamento. Nota: il posizionamento ottimale del catetere dovrebbe produrre loop pressione-volume che appaiono rettangolare (vedi figura 2). Se si incontra resistenza al passaggio del catetere, delicatamente tirare indietro e avanzare di nuovo con una leggera pressione. Rotazione delicato del catetere può aiutare con il posizionamento nel ventricolo sinistro. Forzare il catetere conduttanza può portare a gravi complicanze cardiovascolari o danni al catetere. </li><li> Registra basale pressione-volume loop ~ 10 minuti dopo il posizionamento del catetere e di raggiungere uno stato stabile (figura 2). </li></ol></li><li> Approccio apicale <ol><li> In un mouse anestetizzato e ventilato, fare un fr un&#39;incisioneom il processo xifoideo e tagliare attraverso la parete toracica laterale fino a quando il diaframma è visibile. </li><li> Tagliare se il diaframma e visualizzare l&#39;apice del cuore. </li><li> Inserire il catetere nella conduttanza all&#39;apice del ventricolo sinistro attraverso una ferita ago stab (usando un ago G 25-30), fino l&#39;elettrodo prossimale è appena dentro il ventricolo. </li><li> Record basale pressione-volume loop ~ 10 minuti dopo il posizionamento del catetere e raggiungere uno stato stazionario. </li></ol></li></ol> 4. Variazione Postcarico Utilizzando Transient aortica Occlusione <ol><li> Per eseguire transitoria occlusione aortica, fare una piccola incisione orizzontale nella parte superiore del torace e sezionare il tessuto circostante per esporre l&#39;aorta trasversale. </li><li> Posizionare una legatura 6-0 di seta sotto l&#39;aorta trasversale. Dopo loop pressione-volume sono tornati ai valori basali, stringere entrambe le estremità della sutura con un morsetto ago, delicatamente e sollevare lentamente la sutura sopra 1-2 sec, e rilasciare lentamente la tensione. </li&gt; <li> Ripetere questa procedura, fino a tre registrazioni ottimali separati sono realizzati dallo stesso animale. Nota: registrazioni ottimale dovrebbe avere almeno 5 cicli di loop di volume e pressione un aumento costante pressione sistolica terminali durante l&#39;applicazione della tensione sulla sutura (Figura 3A e 3C). </li></ol> 5. Variazione precarico Utilizzando Transient Vena cava inferiore Occlusion (IVC) <ol><li> Per eseguire transitoria occlusione della vena cava inferiore, fare una incisione orizzontale sotto il processo xifoideo, sotto il diaframma per esporre il IVC. </li><li> Posizionare una legatura 6-0 di seta sotto il IVC. Dopo loop pressione-volume sono tornati ai valori basali, stringere entrambe le estremità della sutura con un morsetto ago; delicatamente e lentamente aumentare la sutura sopra 1-2 sec, e rilasciare lentamente la tensione. IVC occlusione può essere effettuata anche mediante l&#39;applicazione di pressione leggera con un batuffolo di cotone punta. </li><li> Ripetere questa procedura, fino a tre registrazioni ottimali separati sono made dallo stesso animale. Nota: registrazioni ottimale dovrebbe avere almeno 5 cicli di loop di volume e pressione un calo costante pressioni telediastolico ventricolare sinistra durante l&#39;applicazione della tensione sulla sutura (Figura 4A e 4B). </li></ol> 6. Saline Calibrazione <ol><li> Al termine dello studio, un (V p) valore di conduttanza parallela può essere ottenere iniettando un bolo di 10 ml di soluzione salina ipertonica (15%) nel animale attraverso la vena giugulare (Figura 5A e 5B). Nota: Questo bolo causerà un apparente aumento di volume senza variazione della pressione. Questa apparente variazione di volume è il risultato di un cambiamento nella pozza di sangue conduttanza piuttosto che a causa di un effettivo aumento di volume. Un calo transitorio dP / dt max può osservare, come soluzione salina ipertonica ha un effetto inotropo negativo 13. Il V p calcolata può essere inserito in un software di analisi del ciclo di volume di pressione lungocon i parametri di calibrazione cuvetta e convertire da RVUs in microlitri. </li></ol> 7. Cuvette di calibrazione <ol><li> Per eseguire una calibrazione cuvetta, posizionare una vaschetta con pozzetti di diametro noto forniti dal produttore su una piastra elettrica o di un bagno d&#39;acqua riscaldata a 37 ° C. Riempire i primi 4-5 fori con caldo sangue eparinato fresco da topi sottoposti a valutazioni emodinamiche. Nota: Una calibrazione cuvetta permette una valutazione precisa del ventricolo sinistro pozza di sangue con il sangue del mouse e permette la conversione dei dati di volume da RVUs a microlitri. </li><li> Inserire il catetere conduttanza nel primo pozzo, fino a quando tutti gli elettrodi sono sommersi. Spostare delicatamente il catetere nel pozzo, che genererà diversi RVU. </li><li> Registrare i cambiamenti di conduttanza del canale volume in RVU. Selezionare la massima RVU per la calibrazione. Nota: Il volume dei pozzetti può essere calcolata da 1) usando l&#39;equazione per il volume di un cilindro, in cui il raggio è quella del pozzo cuvetta e la lunghezza è basata sulla lunghezza tra i due elettrodi di rilevamento interne o 2) controllando nelle istruzioni del produttore. L&#39;uscita conduttanza può essere correlata con i volumi noti per sviluppare una equazione di taratura che converte il dato da RVUs in microlitri 11. </li></ol> 8. Eutanasia <ol><li> A conclusione del protocollo, i topi vengono sacrificati mediante dislocazione cervicale mentre sotto anestesia. </li><li> Al fine di assicurare la morte, i topi che sono stati sottoposti dislocazione cervicale devono essere sottoposti a un metodo secondario di eutanasia. Usiamo dissanguamento in anestesia, con la raccolta di tessuto cardiaco per la sperimentazione, o toracotomia bilaterale sotto anestesia. </li></ol> 9. Analisi dei dati utilizzando pressione, volume e Loop software di analisi <ol><li> Calcola V p da Saline di calibrazione <ol><li> Selezionare pressione e volumi Loops ottenuto durante l&#39;espulsione di salina ipertonica (Figura 5A e 5B) </li><li> Esporta loop al software di analisi del volume di pressione. Scegliere l&#39;opzione per la calibrazione Saline (Figura 5C) </li><li> Registrare il valore V p calcolato (Figura 5D). Nota: Il valore di p V è calcolata individuando l&#39;intersezione del volume 1) Fine-diastolico vs. volume telesistolico dalla taratura salina e 2) linea del volume volume = telesistolico End-diastolica. L&#39;intersezione di queste linee fornisce V p, che viene calcolato dal software di analisi ciclo pressione volume. </li></ol></li><li> Inserisci conduttanza a volume (RVU) relazione nelle opzioni del canale del volume (Figura 1F) </li><li> Misurare Baseline pressione Volume relazione ciclo <ol><li> Selezionare 8-10 cicli cardiaci di canali di pressione e di volume una volta che lo stato stazionario è stato raggiunto (Figura 2A) e l&#39;esportazione in analisi morbidoware. Identificare 5-6 cicli di fine espirazione (Figura 2b) </li><li> Utilizzare il valore p V per correggere la conduttanza parallelo. Scegliere l&#39;opzione &quot;stato stazionario&quot; e generare una tabella riassuntiva emodinamica (Figura 2C) </li></ol></li><li> Misura di pressione Volume ciclo Relation durante aortica Costrizione <ol><li> Selezionare 8-10 cicli cardiaci di canali di pressione e di volume che corrispondono a costrizione aortica prima dell&#39;aumento delle pressioni telediastolico (Figura 3A) e esportazione software di analisi. Identificare 5-6 cicli di fine espirazione (Figura 3C) </li><li> Selezionare analisi &quot;contrattilità&quot; (Figura 3B), che calcola il volume di pressione Relation telesistolico (ESPVR) </li></ol></li><li> Misura di pressione Volume ciclo Relation durante IVC Costrizione <ol><li> Selezionare 8-10 cicli cardiaci di canali di pressione e di volume che corrispondono a IVC costrizione (Figure 4A) e l&#39;esportazione di software di analisi. Identificare 5-6 cicli di fine espirazione (Figura 4B) </li><li> Selezionare analisi &quot;contrattilità&quot; (Figura 3B), che calcolerà precarico recruitable corsa di lavoro (PRSW) (Figura 4C), massimo dP / dt vs EDV (Figura 4D), così come la ESPVR e relazione del volume pressione telediastolica (Figura 4E) </li></ol></li></ol>

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	<li>Clark, J. E., Marber, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advancements+in+pressure-volume+catheter+technology+-+stress+remodelling+after+infarction.">Advancements in pressure-volume catheter technology - stress remodelling after infarction.</a> Exp Physiol. 98 (3), 614-621 (2013).</li><li>Sunagawa, K., Maughan, W. L., Burkhoff, D., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+interaction+with+arterial+load+studied+in+isolated+canine+ventricle.">Left ventricular interaction with arterial load studied in isolated canine ventricle.</a> Am J Physiol. 245 (Pt 1), H773-H780 (1983).</li><li>Suga, H., Sagawa, K., Demer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determinants+of+instantaneous+pressure+in+canine+left+ventricle.+Time+and+volume+specification.">Determinants of instantaneous pressure in canine left ventricle. Time and volume specification.</a> Circ Res. 46 (2), 256-263 (1980).</li><li>Suga, H., Sagawa, K., Shoukas, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Load+independence+of+the+instantaneous+pressure-volume+ratio+of+the+canine+left+ventricle+and+effects+of+epinephrine+and+heart+rate+on+the+ratio.">Load independence of the instantaneous pressure-volume ratio of the canine left ventricle and effects of epinephrine and heart rate on the ratio.</a> Circ Res. 32 (3), 314-322 (1973).</li><li>Kass, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+left+ventricular+mechanics+from+acute+VDD+pacing+in+patients+with+dilated+cardiomyopathy+and+ventricular+conduction+delay.">Improved left ventricular mechanics from acute VDD pacing in patients with dilated cardiomyopathy and ventricular conduction delay.</a> Circulation. 99 (12), 1567-1573 (1999).</li><li>Kass, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diastolic+Compliance+of+Hypertrophied+Ventricle+Is+Not+Acutely+Altered+by+Pharmacological+Agents+Influencing+Active+Processes.">Diastolic Compliance of Hypertrophied Ventricle Is Not Acutely Altered by Pharmacological Agents Influencing Active Processes.</a> Annals of Internal Medicine. 119 (6), 466-473 (1993).</li><li>Georgakopoulos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+murine+left+ventricular+pressure-volume+relations+by+miniaturized+conductance+micromanometry.">In vivo murine left ventricular pressure-volume relations by miniaturized conductance micromanometry.</a> Am J Physiol. 274 (4 pt 2), H1416-H1422 (1998).</li><li>Cingolani, O. H., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-volume+relation+analysis+of+mouse+ventricular+function.">Pressure-volume relation analysis of mouse ventricular function.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 301 (6), H2198-H2206 (2011).</li><li>Baan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+Measurement+of+Left-Ventricular+Volume+in+Animals+and+Humans+by+Conductance+Catheter.">Continuous Measurement of Left-Ventricular Volume in Animals and Humans by Conductance Catheter.</a> Circulation. 70 (5), 812-823 (1984).</li><li>Pearce, J. A., Porterfield, J. E., Larson, E. R., Valvano, J. W., Feldman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accuracy+considerations+in+catheter+based+estimation+of+left+ventricular+volume.">Accuracy considerations in catheter based estimation of left ventricular volume.</a> Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2010, 3556-3558 (2010).</li><li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats.">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (1038).</li><li>Hanusch, C., Hoeger, S., Beck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+of+small+rodents+during+magnetic+resonance+imaging.">Anaesthesia of small rodents during magnetic resonance imaging.</a> Methods. 43 (1), 68-78 (2007).</li><li>Georgakopoulos, D., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+parallel+conductance+by+dual-frequency+conductance+catheter+in+mice.">Estimation of parallel conductance by dual-frequency conductance catheter in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 279 (1), H443-H450 (2000).</li><li>Esposito, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+myocardial+contractility+and+enhanced+exercise+function+in+transgenic+mice+overexpressing+either+adenylyl+cyclase+5+or+8.">Increased myocardial contractility and enhanced exercise function in transgenic mice overexpressing either adenylyl cyclase 5 or 8.</a> Basic Res Cardiol. 103 (1), 22-30 (2008).</li><li>Kohout, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Augmentation+of+cardiac+contractility+mediated+by+the+human+beta(3)-adrenergic+receptor+overexpressed+in+the+hearts+of+transgenic+mice.">Augmentation of cardiac contractility mediated by the human beta(3)-adrenergic receptor overexpressed in the hearts of transgenic mice.</a> Circulation. 104 (20), 2485-2491 (2001).</li><li>Kim, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta-Arrestin-biased+AT1R+stimulation+promotes+cell+survival+during+acute+cardiac+injury.">beta-Arrestin-biased AT1R stimulation promotes cell survival during acute cardiac injury.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 303 (8), H1001-H1010 (2012).</li><li>Suga, H., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mathematical+Interrelationship+between+Instantaneous+Ventricular+Pressure-Volume+Ratio+and+Myocardial+Force-Velocity+Relation.">Mathematical Interrelationship between Instantaneous Ventricular Pressure-Volume Ratio and Myocardial Force-Velocity Relation.</a> Annals of Biomedical Engineering. 1 (2), 160-181 (1972).</li><li>Suga, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+energetics.">Ventricular energetics.</a> Physiol Rev. 70 (2), 247-277 (1990).</li><li>Kass, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+contractile+state+on+curvilinearity+of+in+situ+end-systolic+pressure-volume+relations.">Influence of contractile state on curvilinearity of in situ end-systolic pressure-volume relations.</a> Circulation. 79 (1), 167-178 (1989).</li><li>Little, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+left+ventricular+dP/dtmax-end-diastolic+volume+relation+in+closed-chest+dogs.">The left ventricular dP/dtmax-end-diastolic volume relation in closed-chest dogs.</a> Circ Res. 56 (6), 808-815 (1985).</li><li>Glower, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linearity+of+the+Frank-Starling+relationship+in+the+intact+heart:+the+concept+of+preload+recruitable+stroke+work.">Linearity of the Frank-Starling relationship in the intact heart: the concept of preload recruitable stroke work.</a> Circulation. 71 (5), 994-1009 (1985).</li><li>Sharir, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+systolic+assessment+in+patients+with+dilated+cardiomyopathy+by+preload-adjusted+maximal+power.+Validation+and+noninvasive+application.">Ventricular systolic assessment in patients with dilated cardiomyopathy by preload-adjusted maximal power. Validation and noninvasive application.</a> Circulation. 89 (5), 2045-2053 (1994).</li><li>Baan, J., Van der Velde, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+to+type+of+loading+intervention+in+dogs.">Sensitivity of left ventricular end-systolic pressure-volume relation to type of loading intervention in dogs.</a> Circ Res. 62 (6), 1247-1258 (1988).</li><li>Wei, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volume+catheter+parallel+conductance+varies+between+end-systole+and+end-diastole.">Volume catheter parallel conductance varies between end-systole and end-diastole.</a> IEEE Trans Biomed Eng. 54 (8), 1480-1489 (2007).</li><li>Porterfield, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+correction+for+parallel+conductance,+GP,+and+gain+factor,+alpha,+in+invasive+murine+left+ventricular+volume+measurements.">Dynamic correction for parallel conductance, GP, and gain factor, alpha, in invasive murine left ventricular volume measurements.</a> J Appl Physiol (1985). 107 (6), 1693-1703 (2009).</li></ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Si descrive un metodo per l&#39;analisi del ciclo perfoming pressione-volume utilizzando un catetere conduttanza nei topi, per ricavare analisi complete sia di contrattilità cardiaca e relax. Suga, Sagawa e colleghi utilizzati pressione-volume loop per definire le misure di contrattilità cardiaca, in particolare la pendenza della ESPVR, o l&#39;elastanza telesistolico (es E), e E max. Elastance, definito dal rapporto di pressione a volume (P / V), varia in base alla durata della sistole. Durante ...

Analisi del ciclo del volume pressione cardiaca fornisce informazioni dettagliate della funzione cardiaca e sono il gold standard per la valutazione funzionale 1. Mentre le tecniche di imaging come l&#39;ecocardiografia o risonanza magnetica cardiaca forniscono misure funzionali, queste misure sono fortemente dipendenti dalle condizioni di carico. Misure indipendenti dal carico di contrattilità cardiaca e relax richiedono misure dinamiche della pressione ventricolare e rapporto di volume entro una gamma di precarico e postcarico. Questa comprensione della relazione pressione-volume nasce dal lavoro pionieristico di Sagawa e colleghi 2,3. Hanno dimostrato in ex vivo cuori canini perfusi che le misure contrattilità derivati ​​ciclo pressione-volume erano indipendenti di condizioni di carico 4. In vivo applicazione di queste analisi è diventato possibile con lo sviluppo di cateteri conduttanza nel 1980. Questo progresso tecnico ha permesso Kass e colleghi per eseguire pressione-volume l&#39;analisi di circuiti negli esseri umani 5,6. La miniaturizzazione dei cateteri di conduttanza e miglioramenti nelle tecniche chirurgiche alla fine degli anni 1990 7 ha fatto l&#39;analisi di roditore funzione cardiaca fattibile, consentendo studi genetici e farmacologici da eseguire. Questo progresso ha da portare alla diffusione di analisi del ciclo pressione-volume e ha generato una grande quantità di comprensione mammiferi fisiologia cardiaca. Un concetto fondamentale l&#39;uso di cateteri conduttanza e l&#39;interpretazione dei dati ottenuti è il rapporto tra volume e conduttanza. Conduttanza è inversamente proporzionale alla tensione, che viene misurata utilizzando un catetere con elettrodi posti prossimalmente, solitamente poste sotto la valvola aortica, e distalmente, all&#39;apice LV 8. Le variazioni di tensione o conduttanza sono misurate dai cambiamenti nel flusso di corrente da prossimale a distale dell&#39;elettrodo. Anche se la pozza di sangue contribuisconos significativamente alla conduttanza, il contributo della parete ventricolare, definito conduttanza parallelo (V p), alla conduttanza misurata deve essere sottratto per ottenere misurazioni di volume LV assolute. I metodi per eseguire questa correzione, chiamato calibrazione salina, sono discussi nel protocollo di seguito. La relazione matematica tra conduttanza e volume, descritto da Baan e colleghi, è che il volume = 1 / α; (ρ L 2) (GG p), dove α = campo uniforme fattore di correzione, ρ = resistività del sangue, L = distanza tra gli elettrodi, G = conduttanza e G p = conduttanza non sangue 9. Da segnalare, il campo fattore di correzione uniforme nei topi avvicina 1.0 a causa di piccoli volumi camera 10. Accoppiato con trasduttori di pressione, catetere conduttanza fornisce dati relativi alla pressione simultanea e di volume in tempo reale. PRESSU cardiacari-analisi del volume presenta particolari vantaggi rispetto ad altre misure della funzione cardiaca, in quanto consentono di misurazione della funzione ventricolare indipendente dalle condizioni di carico e di frequenza cardiaca. Specifici indici cardiaci indipendenti dal carico di contrattilità includono: telesistolico relazione del volume di pressione (ESPVR), d P / d t max -end-diastolico relazione del volume, elastanza massimo (E max) e del precarico lavoro ictus recruitable (PRSW). Una misura indipendente dal carico di funzione diastolica è il volume di pressione rapporto fine diastole (EDPVR) 11. Il protocollo che segue descrive il comportamento di analisi del ciclo di volume pressione cardiaca, utilizzando sia un carotidea ed un approccio apicale. Mentre la metodologia per eseguire questi studi sono stati descritti in dettaglio in precedenza 8,11, rivedremo passaggi chiave per ottenere misurazioni della pressione volumi precisi, tra cui la correzione sia saline e la calibrazione provetta, e di fornire una dimostrazione visiva di thesprocedure e. La ricerca con animali effettuati per questo studio è stata gestita secondo protocolli approvati e ai regolamenti sul benessere degli animali di cura e l&#39;uso degli animali Comitato Istituzionale del Duke University Medical Center.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>AnaSed (xylazine)&#160;</td>
			<td>Lloyd Laboratories</td>
			<td>NADA no. 139-236</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketaset (ketamine)</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>440842</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VIP3000</td>
			<td>Matrx Medical Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Anesthesia machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>Model 683</td>
			<td>Surgical Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing kit</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-1049</td>
			<td>Surgical Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket&#160;</td>
			<td>Kaz Inc.</td>
			<td>5628</td>
			<td>Surgical Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Carl Zeiss Optical Inc.</td>
			<td>Stemi 2000</td>
			<td>Surgical Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Illuminator</td>
			<td>Cole&#8211;Parmer</td>
			<td>41720</td>
			<td>Surgical Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont no. 55 Dumostar Forceps&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>11295-51</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps, curved&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>11052-10</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moria MC31 forceps&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>11370-31</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo scissors&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>14512-15</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris scissors&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>14041-10</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey needle holder&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>12501-13</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen&#8211;Hegar needle holder&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>12002-12</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools Inc</td>
			<td>15610-08</td>
			<td>Surgical Instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>disposable underpads</td>
			<td>Kendall/Tyco Healthcare</td>
			<td>1038</td>
			<td>Surgical Supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze sponges, sterile&#160;</td>
			<td>Dukal</td>
			<td>62208</td>
			<td>Surgical Supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-tipped applicators, sterile&#160;</td>
			<td>Solon</td>
			<td>368</td>
			<td>Surgical Supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical suture,&#160; silk, 6-0&#160;</td>
			<td>DemeTECH</td>
			<td>FT-639-1</td>
			<td>Surgical Supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 cc Insulin syringes&#160;</td>
			<td>Becton Dickenson</td>
			<td>329412</td>
			<td>Surgical Supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Access-9&#8482; Hemostasis Valve</td>
			<td>Merit Medical&#160;</td>
			<td>MAP111</td>
			<td>Hemodynamic equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sphygmomanometer</td>
			<td>Baumanometer</td>
			<td>320</td>
			<td>Hemodynamic equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millar PV system MPVS-300/400 or MPVS Ultra (includes calibration cuvette)</td>
			<td>ADInstruments Inc</td>
			<td></td>
			<td>Hemodynamic equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.4F conductance catheter&#160;</td>
			<td>ADInstruments Inc</td>
			<td>SPR-839</td>
			<td>Hemodynamic equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/30 with Chart Pro</td>
			<td>ADInstruments Inc.</td>
			<td>ML866/P</td>
			<td>Hemodynamic software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>animal clipper</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>8787-450A</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intradermic tubing PE-10 (Becton Dickinson, cat. no. )</td>
			<td>Becton Dickenson</td>
			<td>427401</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intradermic tubing PE-50 (Becton Dickinson, cat. no.)</td>
			<td>Becton Dickenson</td>
			<td>427411</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle assortment (18, 25 and 30 gauge; Thomas Scientific)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% (wt/vol) sodium chloride injection, USP , cat. no. )</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC no. 0409-4888-50</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alconox (Alconox Inc.) for catheter cleaning</td>
			<td>ADInstruments Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cardiac pressure-volume loop analysis using conductance catheters in mice

Cardiac pressure-volume loop analysis is the &#8220;gold-standard&#8221; in the assessment of load-dependent and load-independent measures of ventricular systolic and diastolic function. Measures of ventricular contractility and compliance are obtained through examination of cardiac response to changes in afterload and preload. These techniques were originally developed nearly three decades ago to measure cardiac function in large mammals and humans. The application of these analyses to small mammals, such as mice, has been accomplished through the optimization of microsurgical techniques and creation of conductance catheters. Conductance catheters allow for estimation of the blood pool by exploiting the relationship between electrical conductance and volume. When properly performed, these techniques allow for testing of cardiac function in genetic mutant mouse models or in drug treatment studies. The accuracy and precision of these studies are dependent on careful attention to the calibration of instruments, systematic conduct of hemodynamic measurements and data analyses. We will review the methods of conducting pressure-volume loop experiments using a conductance catheter in mice.

Analisi di circuiti di pressione-volume può essere utilizzato per misurare la funzione cardiaca in topi geneticamente modificati 14,15 o topi sottoposti a studi di droga 16. Cicli di volume pressione rappresentativi sono forniti dal lavoro precedentemente pubblicato 16 indagare l&#39;effetto della beta-arrestina polarizzato AT1R ligando, TRV120023. Per verificare se TRV120023 colpisce la funzione cardiaca in vivo, l&#39;analisi del ciclo di pressione-volume è stato eseguito su...

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Cardiac Pressure-Volume Loop Analysis Using Conductance Catheters in Mice

Cardiac pressure-volume loop analysis is the most comprehensive way to measure cardiac function in the intact heart. We describe a technique to perform and analyze cardiac pressure volume loops, using conductance catheters.

Cardiac pressione Volume Analysis Loop Utilizzando conduttanza Cateteri nei topi

Cardiac pressure-volume loop analysis is the &#8220;gold-standard&#8221; in the assessment of load-dependent and load-independent measures of ventricular ...

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Biology

19.3K Views.  Duke University Medical Center. Cardiac pressure-volume loop analysis is the most comprehensive way to measure cardiac function in the intact heart. We describe a technique to perform and analyze cardiac pressure volume loops, using conductance catheters. 