Ringraziamo Molly saldi per la diluizione e pesticidi assistenza formulazione. Ringraziamo anche Troy Anderson per la guida analisi probit e Zachary Adelman per l&#39;assistenza con disegno sperimentale. Questa ricerca è stata in parte sostenuta da un premio entomologica Foundation e dai fondi borse di studio Virginia Pest Management.

NOTA: Questo protocollo include due saggi insetticidi per il trattamento a parte le uova di cimici e primi stadi. Entrambi i protocolli sono stati condotti utilizzando gli stessi insetticidi, tuttavia, i protocolli dovevano essere adattati per garantire l&#39;esposizione insetticida e di manipolare agevolmente i campioni. 1. Uovo immersione Insetticida Assay <ol><li> Tirare accoppiati, ben nutriti adulti cimici femminili da una colonia e posizionare le femmine (5-10) in una capsula di Petri con carta da filtro. Avere almeno dieci replicati per garantire che ci siano abbastanza uova per il dosaggio insetticidi. Verificare se le femmine hanno deposto le uova ogni giorno. <ol><li> Una volta che depongono le uova, prendere le femmine fuori della scatola di Petri (6 centimetri × 5 cm) e metterli in nuove piastre di Petri con una nuova carta da filtro quotidiano e registrare la data sulle vecchie e nuove piastre di Petri. </li><li> Lasciare le uova a 4 anni a 5 giorni prima di iniziare il test. La suscettibilità agli insetticidi modifiche durante lo sviluppo embrionale, so è importante per il controllo per l&#39;età delle uova. Tenere tutte le fasi della vita a 12:12 L: D fotoperiodo, il 60% di umidità relativa, e 27 ° C. </li></ol></li><li> Una volta che le uova sono invecchiati in modo appropriato, togliere le uova di cimici delicatamente dalla carta da filtro con pinze a punta morbida. raschiare delicatamente la parte inferiore dell&#39;uovo attaccato alla carta da filtro con le pinze e poi afferrare con delicatezza senza applicare molta pressione sull&#39;uovo di limitare lanciando uova di bug letto. </li><li> Mettere le uova di cimici rimossi nei loro rispettivi gruppi all&#39;interno di piatti di plastica Petri. Limitare l&#39;elettricità statica lanciando uova cimici strofinando il fondo di ogni piatto Petri sulla parte esterna con un foglio di ammorbidente. gruppi Trattare di uova di cimici (5-10 uova per gruppo) tutti in una volta. Prendere in considerazione un gruppo di replica e utilizzare almeno cinque (o più) replica per questo test. </li><li> Preparare diluizioni seriali di insetticidi per ottenere una gamma di 5 diverse concentrazioni (0,21-21 microlitri / ml per imidacloprid (0,1%) / β-ciflutrin (0,5%) e un controllosoluzione con il solvente (acqua di rubinetto) solo. Rendere 20 mL di ciascuna concentrazione di avere un volume sufficiente per il dosaggio immersione. </li><li> provette Cut centrifuga (50 mL) alla linea 35 mL medialmente con un utensile rotante con un accessorio disco di taglio e quindi tagliare un foro nel tappo della provetta (diametro = 2.54 cm) usando lo stesso utensile rotante con alluminio ossido di rettifica accessorio di pietra. Lasciare 5 cm sul bordo della calotta durante il taglio, in modo che il tappo si avvitare saldamente nel tubo (Figura 1). </li><li> Tagliare a maglia fine in quadrati grande abbastanza da contenere nel tappo (~ 5 centimetri 2). Avvitare la maglia stretta, eliminando eventuali urti, nelle provette da centrifuga che utilizzano il tappo provetta. </li><li> Posizionare un gruppo di uova di bug letto (una replica) utilizzando un pennello sulla maglia all&#39;interno della provetta. Immergere il gruppo di cimici all&#39;interno della provetta taglio in una concentrazione di insetticida per 5 secondi. </li><li> Rimuovere la provetta da centrifuga di thsoluzione insetticida e. Essiccare la rete con le uova all&#39;interno ponendo la provetta direttamente su un tessuto di laboratorio. </li><li> Rimuovere il gruppo di uova fuori della provetta con un piccolo, fine-setole del pennello e metterli in un ambiente pulito capsula di Petri con una carta da filtro pulito. </li><li> uovo mortalità Record (mancata schiusa) per 14 giorni al fine di garantire tutte le uova hanno avuto il tempo sufficiente per covare. </li><li> Corretta per la mortalità nel trattamento di controllo usando la formula di Abbott (test di mortalità% - controllo% di mortalità / 100 - la mortalità di controllo x 100). </li><li> Inserire la mortalità registrato con le corrispondenti concentrazioni nel software di analisi 15 per calcolare LC 50 valori. </li></ol> 2. Prima Instar Insetticida Assay <ol><li> Separare un gruppo di cimici ben nutriti (5 maschi adulti e 5 femmine adulte), preferibilmente alimentato 1 giorno prima, e metterli in una capsula di Petri (6 centimetri × 5 cm) con carta da filtro previsto mating e la deposizione delle uova. Lasciare le cimici adulti per accoppiarsi e deporre le uova per circa 7-9 giorni. Per l&#39;alimentazione, utilizzare un sistema di alimentazione artificiale che circola acqua calda in tubi di vetro di sangue 16 circostanti. Per questo studio, usare sangue di coniglio defibronated. </li><li> Rimuovere le adulti dalle piastre di Petri (6 cm x 5 cm) e permetta che le uova si schiudono in primi stadi all&#39;interno delle piastre di Petri. Ci vogliono circa 7-9 giorni per le uova di cimici alla schiusa a temperatura ambiente. </li><li> Raccogliere i digiuni primi stadi della stessa età con un pennello. Età può essere determinata rimuovendo i primi stadi quotidianamente e registrando il giorno sono nati. Metterli in nuove, pulite piastre di Petri fino al test insetticidi. Primi ninfe instar non sono molto resistenti essiccante, quindi il saggio insetticida dovrebbe essere completata al più presto possibile. </li><li> Per il saggio, preparare diluizioni seriali di imidacloprid / β-ciflutrin per ottenere una gamma di 5 diverse concentrazioni e una solu controllozione con solo solvente. prodotti formulati etichettati per il controllo di cimici dei letti negli Stati Uniti sono stati utilizzati per questi studi, quindi il solvente era acqua (secondo l&#39;etichetta). </li><li> Pipetta 150 microlitri aliquote di ogni concentrazione insetticida ed acqua per il gruppo di controllo sulle singole carte da filtro (# 1, 4,2 centimetri di diametro). Distribuire l&#39;insetticida sull&#39;intera carta da filtro con il pipettatore applicando goccioline lungo l&#39;intero bordo e il centro della carta da filtro. </li><li> Mettere le carte da filtro trattate individualmente sulla parte superiore dei pannelli di truciolato individuali (7 cm 2). </li><li> gruppi uscita del primo stadi (da 5 a 10 per gruppo) sul singole carte da filtro mentre ancora bagnato con insetticida e coprire i primi stadi con un fondo rovesciata di una capsula di Petri. </li><li> Collocare un peso sopra della scatola di Petri per evitare i primi cimici instar fuoriuscita superficie trattata. </li><li> Record di mortalità dei primi cimici instar dopo 24 ore di esposizione a tuttile concentrazioni di insetticida. </li><li> Corretta per la mortalità nel trattamento di controllo usando la formula di Abbott (test di mortalità% - controllo% di mortalità / 100 - la mortalità di controllo x 100). </li><li> Inserire la mortalità e le concentrazioni registrate nel software di analisi 15 per calcolare LC 50 valori. </li></ol>

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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplification+of+adult+mosquito+bioassays+through+use+of+time-mortality+determinations+in+glass+bottles.">Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles.</a> J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).</li><li>Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+and+larval+nutrition+on+phenotypic+expression+of+insecticide-resistance+in+Anopheles+mosquitoes.">Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes.</a> PLoS One. 8 (3), (2013).</li><li>Outram, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+the+resistance+of+insect+eggs+to+sulphuryl+fluoride-II:+the+distribution+of+sulphuryl-35+S+fluoride+in+insect+eggs+after+fumigation.">Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation.</a> J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).</li></ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that ...

Le cimici dei letti sono un parassita urbano significativo che può causare la perdita di sangue, irritazioni della pelle, insonnia, depressione e ansia nei loro ospiti umani 1, 2, 3, 4, 5, 6. I costi di smaltimento e controllare le cimici dei letti sono alti e spesso richiedono più visite a casa da una società di controllo dei parassiti 7. visite multiple sono di solito necessari a causa del comportamento criptico di cimici e le difficoltà connesse con la loro uccisione. In particolare, le uova di cimici sono difficili da controllare a causa della loro piccola dimensione e la protezione dell&#39;embrione dal guscio. Attualmente, una pratica comune per molte aziende di controllo dei parassiti in tutti gli Stati Uniti è quello di trattare una casa per le cimici dei letti utilizzando un insetticida chimico. È risaputoche le uova sono difficili da controllare, così molte aziende hanno implementato un lasso di tempo di due settimane per ri-trattamenti 8. Questo permette di uova di cimici abbastanza tempo per covare, in modo che il primo stadio emergerà e presumibilmente più facile per uccidere con insetticidi. Tuttavia, vi è una carenza di studi che valutano l&#39;efficacia degli insetticidi liquido contro le uova di bug letto e primi stadi. uova di insetti sono stati documentati per essere il più difficile fase della vita da controllare in insetti infestanti urbani, diverso da cimici dei letti, oltre a molti parassiti agricoli. La maggior parte di queste difficoltà sono state attribuite al guscio d&#39;uovo, mentre pochi studi hanno riportato resistenza agli insetticidi. Resistenza allo stadio di uovo è stato documentato in Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha dominica 12, <em&gt; Cimex lectularius 13, e più coleotteri di prodotti conservati (cioè Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus e Rhyzopertha dominica). 14 Lo sviluppo della resistenza nella fase di uovo e stadi immaturi, così come le complicazioni associate con la penetrazione insetticida attraverso il guscio d&#39;uovo, richiede la necessità di test biologici insetticida efficacia contro queste fasi della vita. Questo protocollo prevede una procedura passo-passo per determinare l&#39;efficacia di insetticidi nell&#39;uovo e primo stadio fase di cimici comuni, Cimex lectularius. Entrambi questi protocolli sono saggi concentrazione-risposta per consentire la quantificazione di LC 50 valori. saggi di concentrazione-risposta sono comunemente usati per studi tossicologici, ma questo protocollo è stato adattato per il trattamento facilmente gruppi di uova di bug letto e primi stadi. Questi saggi possono essere adattatiper le uova diverse specie di insetti &#39;e le fasi della vita immaturi.

<table><tbody><tr><td>Petri dishes</td><td>Fisher Scientific Inc.</td><td>08-757-105</td><td>Plastic</td></tr><tr><td>Filter paper</td><td>Whatman</td><td>1001-042</td><td></td></tr><tr><td>Featherweight forceps</td><td>Fisher Scientific Inc.</td><td>4750</td><td></td></tr><tr><td>Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin)</td><td>Bayer CropScience</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin)</td><td>FMC Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge tube</td><td></td><td>06-443-18</td><td>50 mL; flat-top threaded</td></tr><tr><td>Fine mesh</td><td></td><td>7250C</td><td></td></tr><tr><td>KimWipe</td><td></td><td>06-666A</td><td>11 cm x 21 cm</td></tr><tr><td>Small paint brush</td><td></td><td></td><td>Any small paint brush</td></tr><tr><td>Hardboard panels</td><td></td><td></td><td>Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store</td></tr><tr><td>Metal weights</td><td></td><td></td><td>Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface</td></tr></tbody></table>

a method for evaluating insecticide efficacy against bed bug, cimex lectularius, eggs and first instars

valutazioni di tossicità standard di insetticidi contro insetti nocivi sono condotte principalmente di insetti adulti. Le valutazioni sono basate su una dose-risposta o curva concentrazione-risposta, se la mortalità aumenta all&#39;aumentare della dose o concentrazione di un insetticida è aumentato. Concentrazione standard letale (LC 50) e dose letale (LD 50) prove che si traducono nel 50% di mortalità di una popolazione di prova può essere difficile per valutare la tossicità degli insetticidi contro i non-adulti fasi di vita degli insetti, come le uova e instar presto o fasi nymphal . Tuttavia, queste informazioni sono essenziali per la comprensione di efficacia insetticida in tutte le fasi della vita di cimici, che colpisce gli sforzi di controllo e di trattamento. Questo protocollo utilizza un saggio biologico immersione standard modificato per le uova di cimici e un test di insetticida di contatto per il trattamento di nymphal primi stadi. Questi test producono una curva di concentrazione-risposta per quantificare ulteriormente LC 50 valori per le valutazioni insetticida.

Le uova sono stati immersi in 5 diverse concentrazioni di imidacloprid / β-ciflutrin (ul / mL). I primi stadi sono stati collocati su superfici trattate di cinque diverse concentrazioni di imidacloprid / β-ciflutrin (Figura 2). Abbiamo usato tre diverse popolazioni di C. lectularius: Harlan, Richmond, ed Epic Centro (Tabella 1). Il ceppo Harlan è suscettibile di insett...

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A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars

valutazioni Insetticida sono spesso presi di mira contro gli insetti adulti, piuttosto che stadi immaturi. Qui, vi presentiamo un protocollo per la valutazione insetticidi contro le uova di bug letto con un confronto con il primo stadio bug letto ninfale. Questi protocolli possono essere regolati per altri insetti per valutare l&#39;efficacia insetticida in fasi della vita non adulti.

Un metodo per la valutazione Insetticida efficacia contro Bed Bug,<em&gt; Cimex lectularius</em&gt;, Uova e First stadi

Standard toxicity evaluations of insecticides against insect pests are primarily conducted on adult insects. Evaluations are based on a dose-response or ...

a-method-for-evaluating-insecticide-efficacy-against-bed-bug-cimex

Research

JoVE Journal

Environment

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars

11.2K Views.  University of Florida.  valutazioni Insetticida sono spesso presi di mira contro gli insetti adulti, piuttosto che stadi immaturi. Qui, vi presentiamo un protocollo per la valutazione insetticidi contro le uova di bug letto con un confronto con il primo stadio bug letto ninfale. Questi protocolli possono essere regolati per altri insetti per valutare l'efficacia insetticida in fasi della vita non adulti. 

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Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and rates of mortality in populations, which has a variety of applications in ecology, including agricultural ecosystems. Horizontal, or cohort-based, life tables provide for the most direct and accurate method of quantifying vital population rates because they follow a group of individuals in a population from birth to death. Here, protocols are presented for conducting and analyzing cohort-based life tables in the field that takes advantage of the sessile nature of the immature life stages of a global insect pest, Bemisia tabaci. Individual insects are located on the underside of cotton leaves and are marked by drawing a small circle around the insect with a non-toxic pen. This insect can then be observed repeatedly over time with the aid of hand lenses to measure development from one stage to the next and to identify stage-specific causes of death associated with natural and introduced mortality forces. Analyses explain how to correctly measure multiple mortality forces that act contemporaneously within each stage and how to use such data to provide meaningful population dynamic metrics. The method does not directly account for adult survival and reproduction, which limits inference to dynamics of immature stages. An example is presented that focused on measuring the impact of bottom-up (plant quality) and top-down (natural enemies) effects on the mortality dynamics of B. tabaci in the cotton system.

Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

Life tables allow quantification of the sources and rates of mortality in insect populations and contribute to understanding, predicting and manipulating population dynamics in agroecosystems. Methods for conducting and analyzing cohort-based life tables in the field for an insect with sessile immature life stages are presented.

Metodologia per lo sviluppo di tavole di sopravvivenza per insetti Sessile nel campo utilizzando la Whitefly, Bemisia tabaci, in cotone come un modello di sistema

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and ...

Ricerca

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Functional Characterization of Carboxylesterases in Insecticide Resistant House Flies, Musca Domestica

Carboxylesterase-mediated metabolism is thought to play a major role in insecticide resistance in various insects. Several carboxylesterase genes were found up-regulated in the resistant house fly strain, whereas their roles in conferring insecticide resistance remained to be explored. Here, we designed a protocol for the functional characterization of carboxylesterases. Three example experiments are presented: (1) expression and isolation of carboxylesterase proteins through a baculovirus-mediated insect Spodoptera frugiperda (Sf9) cell expression system; (2) a cell-based MTT (3-[4, 5-dimethykthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) cytotoxicity assay to measure the tolerance of insect cells to different permethrin treatments; and (3) in vitro metabolic studies to explore the metabolic capabilities of carboxylesterases toward permethrin. The carboxylesterase gene Md&#945;E7 was cloned from a resistant house fly strain ALHF and used to construct a recombinant baculovirus for Sf9 cells infection. The cell viabilities against different permethrin treatments were measured with the MTT assay. The enhanced cell tolerance of the experimental group (Md&#945;E7-recombinant baculovirus infected cells) compared with those of the control groups (CAT-recombinant baculovirus infected cells and GFP-recombinant baculovirus infected cells) to permethrin treatments suggested the capabilities of Md&#945;E7 in metabolizing insecticides, thereby protecting cells from chemical damages. Besides that, carboxylesterase proteins were expressed in insect Sf9 cells and isolated to conduct an in vitro metabolic study. Our results indicated a significant in vitro metabolic efficiency of Md&#945;E7 toward permethrin, directly indicating the involvement of carboxylesterases in metabolizing insecticides and thus conferring insecticide resistance in house flies.

Functional Characterization of Carboxylesterases in Insecticide Resistant House Flies, Musca Domestica

Here, we present a protocol to produce house fly carboxylesterase proteins in vitro with a baculovirus mediated insect cell expression system and later functionally characterize their roles in metabolizing permethrin, thereby, conferring pyrethroid resistance by conducting cell-based MTT assay and in vitro metabolic studies.

Caratterizzazione funzionale di Carboxylesterases in casa resistente all'insetticida mosche, Musca Domestica

Carboxylesterase-mediated metabolism is thought to play a major role in insecticide resistance in various insects. Several carboxylesterase genes were ...

Biochimica

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these insecticides against adult insects or their impact on reproductive output. However, currently available methods assess adult mortality only, limiting the selection of novel insecticides with a different mode of action. In this work, different experimental methods were examined to identify the diverse effects on the CBB under laboratory conditions. For this, green coffee fruits (GFs) were collected and disinfected by immersion in sodium hypochlorite solution followed by UV light irradiation. In parallel, CBB adults from a colony were disinfected by immersion in sodium hypochlorite solution. To assess fruit protection (preinfestation), the fruits were placed in plastic boxes, and the insecticides were applied. Then, the CBB adults were released at a rate of two CBBs per GF. The GFs were left under controlled conditions to evaluate CBB infestation and survival after 1, 7, 15, and 21 days. To evaluate insecticide efficacy after CBB infestation (postinfestation), CBB adults were released to the GFs in a 2:1 ratio for 3 h at 21 &#176;C. Infested fruits showing CBB adults with their abdomens partially exposed were selected and placed in 96-well racks, and the CBBs boring into the fruits were treated directly. After 20 days, the fruits were dissected, and the CBB biological stages inside each fruit were recorded. The GFs served as substrates that mimic natural conditions to evaluate toxic, chemical, and biological insecticides against the CBB.

Methodology to Test Control Agents and Insecticides Against the Coffee Berry Borer Hypothenemus hampei

A method using green coffee fruits (GFs) was developed to test the toxicity of insecticides against the coffee berry borer (CBB). Insecticides or toxic substances were applied to disinfected GFs before or after CBB infestation. Insect mortality, repellency, and reproductive capacity, in addition to other parameters, were evaluated.

Metodologia per testare agenti di controllo e insetticidi contro la bacca di caffè Borer Hypothenemus hampei

Prior to recommending insecticides to treat the coffee berry borer (CBB) Hypothenemus hampei, it is valuable to know the mortality and repellency of these ...

Bioassays for Monitoring Insecticide Resistance

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products are labeled for an individual pest within a particular crop system, chemical control options are limited. Therefore, the same product(s) are used repeatedly and continual selection pressure is placed on the target pest. There are both financial and environmental costs associated with the development of resistant populations. The cost of pesticide resistance has been estimated at approximately $ 1.5 billion annually in the United States. This paper will describe protocols, currently used to monitor arthropod (specifically insects) populations for the development of resistance. The adult vial test is used to measure the toxicity to contact insecticides and a modification of this test is used for plant-systemic insecticides. In these bioassays, insects are exposed to technical grade insecticide and responses (mortality) recorded at a specific post-exposure interval. The mortality data are subjected to Log Dose probit analysis to generate estimates of a lethal concentration that provides mortality to 50% (LC50) of the target populations and a series of confidence limits (CL's) as estimates of data variability. When these data are collected for a range of insecticide-susceptible populations, the LC50 can be used as baseline data for future monitoring purposes. After populations have been exposed to products, the results can be compared to a previously determined LC50 using the same methodology.

This manuscript demonstrates and discusses techniques used to survey pesticide susceptibility and detect resistance to contact and systemic pesticides in arthropod pests.

Saggi biologici per la resistenza di monitoraggio Insetticida

Pest resistance to pesticides is an increasing problem because pesticides are an integral part of high-yielding production agriculture. When few products ...

Biologia

Using Single Sensillum Recording to Detect Olfactory Neuron Responses of Bed Bugs to Semiochemicals

The insect olfactory system plays an important role in detecting semiochemicals in the environment. In particular, the antennal sensilla which house single or multiple neurons inside, are considered to make the major contribution in responding to the chemical stimuli. By directly recording action potential in the olfactory sensillum after exposure to stimuli, single sensillum recording (SSR) technique provides a powerful approach for investigating the neural responses of insects to chemical stimuli. For the bed bug, which is a notorious human parasite, multiple types of olfactory sensillum have been characterized. In this study, we demonstrated neural responses of bed bug olfactory sensilla to two chemical stimuli and the dose-dependent responses to one of them using the SSR method. This approach enables researchers to conduct early screening for individual chemical stimuli on the bed bug olfactory sensilla, which would provide valuable information for the development of new bed bug attractants or repellents and benefits the bed bug control efforts.

Bed bugs rely on olfactory receptor neurons housed in their antennal olfactory sensilla to detect semiochemicals in the environment. Utilizing single sensillum recording, we demonstrate a method to evaluate bed bug response to semiochemicals and explore the coding process involved.

Utilizzando Sensillum singolo controllo per rilevare olfattiva Neuron Risposte di cimici a semiochimici

The insect olfactory system plays an important role in detecting semiochemicals in the environment. In particular, the antennal sensilla which house ...

Neuroscienze

Protocols for Testing the Toxicity of Novel Insecticidal Chemistries to Mosquitoes

New classes of insecticides with novel modes of action are needed to control insecticide resistant populations of mosquitoes that transmit diseases such as Zika, dengue and malaria. Assays for rapid, high-throughput analyses of unformulated novel chemistries against mosquito larvae and adults are presented. We describe protocols for single point-dose and dose response assays to evaluate the toxicity of small molecule chemistries to the Aedes aegypti vector of Zika, dengue and yellow fever,&#160;the malaria vector, Anopheles gambiae and the northern house mosquito, Culex quinquefasciatus, on contact and via ingestion. As an example, we evaluated the toxicity of amitriptyline, a small molecule antagonist of G protein-coupled receptors, via larval, adult topical and adult blood-feeding assay. The protocols provide a starting point to investigate insecticide potential. Results are discussed in the context of additional experiments to explore product applications and mechanisms for delivery.

Protocols are described for assessing the toxicity of chemistries to immature and adult mosquitoes for development as new classes of larvicides, adulticides and endectocides. The protocols enable high-throughput testing of multiple chemistries at single-point dose and subsequent evaluation via dose response assay to determine toxicity on contact or via ingestion.

Protocolli per testare la tossicità di romanzo chimiche insetticide per le zanzare

New classes of insecticides with novel modes of action are needed to control insecticide resistant populations of mosquitoes that transmit diseases such ...

Topical Application Bioassay to Quantify Insecticide Toxicity for Mosquitoes and Fruit Flies

The continued use of insecticides for public health and agriculture has led to widespread insecticide resistance and hampering of control methods. Insecticide resistance surveillance of mosquito populations is typically done through Centers for Disease Control and Prevention (CDC) bottle bioassays or World Health Organization (WHO) tube tests. However, these methods can result in a high degree of variability in mortality data due to variable insecticide contact with&#160;the insect, the relatively small numbers of organisms tested, extensive variation in mass between populations, and constantly changing environmental conditions, leading to variable outcomes. This paper presents the topical application bioassay, adapted as a high-throughput phenotypic bioassay for both mosquitoes and fruit flies, to test large numbers of insects along&#160;a range of insecticide concentrations.
This assay 1) ensures consistent treatment and insecticide contact with every organism, 2) produces highly specific dose-response curves that account for differences in average mass between strains and sexes (which is particularly important for field-collected organisms), and 3) allows for the calculation of statistically rigorous median lethal doses (LD50), which are necessary for resistance ratio comparisons-an alternative surveillance approach from diagnostic dose mortality, which is also used for larvicide resistance surveillance. This assay will be a complementary tool for accurately phenotyping mosquito populations and, as illustrated using fruit flies, is easily adaptable for use with other insects. We argue that this assay will help fill the gap between genotypic and phenotypic insecticide resistance in multiple insect species.

We describe the methodology and importance of the topical application bioassay to measure insecticide susceptibility in mosquitoes and fruit flies. The presented assay is high-throughput, utilizes insect mass-thus allowing for calculating a mass-relativized lethal dose instead of concentration-and likely has lower variability than other similar methods.

Biotest di applicazione topica per quantificare la tossicità degli insetticidi per zanzare e moscerini della frutta

The continued use of insecticides for public health and agriculture has led to widespread insecticide resistance and hampering of control methods. ...

Valutazione degli effetti fitochimici su Helicoverpa armigera attraverso il saggio di alimentazione

Developing a Feeding Assay System for Evaluating the Insecticidal Effect of Phytochemicals on Helicoverpa armigera

Helicoverpa armigera, a lepidopteran insect, is a polyphagous pest with a worldwide distribution. This herbivorous insect is a threat to plants and agricultural productivity. In response, plants produce several phytochemicals that negatively impact the insect's growth and survival. This protocol demonstrates an obligate feeding assay method to evaluate the effect of a phytochemical (quercetin) on insect growth, development, and survival. Under controlled conditions, the neonates were maintained until the second instar on a pre-defined artificial diet. These second-instar larvae were allowed to feed on a control and quercetin-containing artificial diet for 10 days. The insects' body weight, developmental stage, frass weight, and mortality were recorded on alternate days. The change in body weight, the difference in feeding pattern, and developmental phenotypes were evaluated throughout the assay time. The described obligatory feeding assay simulates a natural mode of ingestion and can be scaled up to a large number of insects. It permits one to analyze phytochemicals' effect on the growth dynamics, developmental transition, and overall fitness of H. armigera. Furthermore, this setup can also be utilized to evaluate alterations in nutritional parameters and digestive physiology processes. This article provides a detailed methodology for feeding assay systems, which may have applications in toxicological studies, insecticidal molecule screening, and understanding chemical effects in plant-insect interactions.

Autore in primo piano: Sviluppo e sfide dei saggi di alimentazione per la gestione dei parassiti degli insetti 

This protocol describes the obligate feeding assay to evaluate the potentially toxic effect of a phytochemical on the lepidopteran insect larvae. This is a highly scalable insect bioassay, easy to optimize the sublethal and lethal dose, deterrent activity, and physiological effect. This could be used for screening eco-friendly insecticides.

Sviluppo di un sistema di dosaggio per l'alimentazione per la valutazione dell'effetto insetticida di sostanze fitochimiche su Helicoverpa armigera

Helicoverpa armigera, a lepidopteran insect, is a polyphagous pest with a worldwide distribution. This herbivorous insect is a threat to plants and ...

Un metodo per la valutazione Insetticida efficacia contro Bed Bug,

Riepilogo

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Caratterizzazione funzionale di Carboxylesterases in casa resistente all'insetticida mosche, Musca Domestica

Metodologia per testare agenti di controllo e insetticidi contro la bacca di caffè Borer Hypothenemus hampei

Saggi biologici per la resistenza di monitoraggio Insetticida

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Biotest di applicazione topica per quantificare la tossicità degli insetticidi per zanzare e moscerini della frutta

Sviluppo di un sistema di dosaggio per l'alimentazione per la valutazione dell'effetto insetticida di sostanze fitochimiche su Helicoverpa armigera

Sviluppo di un sistema di dosaggio per l'alimentazione per la valutazione dell'effetto insetticida di sostanze fitochimiche su Helicoverpa armigera

Sviluppo di un sistema di dosaggio per l'alimentazione per la valutazione dell'effetto insetticida di sostanze fitochimiche su Helicoverpa armigera