Quindi questa tecnica chirurgica di sutura, un pezzo di collagene ingegnerizzato tessuto rivoluzionerà il modo in cui utilizziamo grafici ingegnerizzati per sostituire gli autografi tendinei che vengono attualmente utilizzati per la ricostruzione dei tendini. Il vantaggio principale di questa tecnica è che utilizza una tecnica di sutura ottimizzata chirurgicamente per ospitare un neuro tendine del tessuto in vivo. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo dell'ingegneria tissutale sull'uso di grafici di collagene per la ricostruzione dei tendini.
Il vantaggio principale di questa tecnica è che utilizza una tecnica di inserimento del grafico ottimizzata chirurgicamente per ospitare un grafico tendineo ingegnerizzato in tessuto in vivo. Le implicazioni di questa tecnica si estendono verso la terapia di una lacuna tendinea. Perché è pronto all'uso e prontamente disponibile per i chirurghi.
Tuttavia, questo metodo può fornire approfondimenti sulla riparazione chirurgica dei tendini. Può anche essere applicato ad altre procedure di lavorazione. La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale in quanto l'applicazione in vivo della sutura può essere difficile da padroneggiare senza l'uso di un gran numero di animali.
Inizia da Alec Walton, quattro millilitri di collagene di coda di ratto di tipo uno, soluzione di collagene monomerico. Quindi aggiungere 500 microlitri di 10 volte il mezzo essenziale minimo alla soluzione di collagene e titolare contro idrossido di sodio molare cinque e uno per neutralizzare la soluzione. Quindi aggiungere 500 microlitri del Modified Eagle Medium di Dulbecco alla soluzione e trasferire cinque millilitri della miscela in uno stampo metallico rettangolare costruito su misura.
quindi posizionare lo stampo a 37 gradi Celsius e 5% CO2 per 15 minuti per facilitare l'assemblaggio della matrice. Dopo la polimerizzazione, trasferire l'idro gel di collagene dallo stampo in un gruppo di compressione in plastica standard tra due fogli di rete di nylon da 50 micrometri. Applicare un carico statico di 120 grammi all'assemblaggio per cinque minuti per rimuovere il fluido interstiziale dall'idro gel, utilizzando quattro strati di carta da filtro oF per assorbire il fluido scaricato.
Dopo aver preparato altri tre idrogel nello stesso modo, arrotolare tutti e quattro i gel compressi insieme e tagliare il rotolo in segmenti di 15 millimetri. Prima di iniziare la procedura, tagliare i capelli su entrambi gli arti posteriori di un coniglio maschio di 16-25 settimane e utilizzare una lama chirurgica numero 20 per praticare un'incisione di nove centimetri in un arto intorno all'area fibulare tubulare inferiore, per esporre il tendine posteriore tibiale. Quindi esporre un tendine sezionale di 17 millimetri e bagnare il tessuto con PBS per mantenere il tessuto idratato.
Quindi, rimuovere un segmento di 15 millimetri dal tendine nel punto medio e sostituire il tessuto asportato con l'innesto di collagene del tessuto ingegnerizzato. Usando tre suture a nucleo zero, interblocca l'innesto prossimalmente dalle estremità del tendine nativo. Passando le suture su tutta la lunghezza dell'innesto per interbloccare l'innesto distalmente dall'estremità tagliata.
Fissare entrambe le estremità del tessuto ingegnerizzato al tendine nativo con sei suture continue a zero intorno alla periferia dell'innesto. Quindi confermare manualmente che la tensione sulle suture è appropriata e che non vi è flacidità in nessuna di queste suture. Come dimostrato, lo spazio tendineo asportato viene riempito con un innesto tendineo di tessuto ingegnerizzato lungo 15 millimetri e fissato con tre suture a interblocco zero a 17 millimetri per fungere da barriere di carico e con sei suture zero al tessuto nativo.
La resistenza media alla rottura della riparazione era di circa 51 newton, significativamente superiore a quella, della riparazione Kessler di controllo di circa 12 Newton. Dimostrazione dell'influenza della lunghezza della sutura del nucleo e dell'incastro distale nel prevenire il guasto della riparazione a forze di magnitudo più elevate. Negli esperimenti di resistenza alla sutura, ha dimostrato una forza di rottura media di circa 25 Newton, significativamente superiore alla forza di rottura media di controllo di circa 14 Newton.
Ci sono due cose chiave da ricordare. Numero uno, assicurati di neutralizzare una soluzione di collagene a pH appropriato. E in secondo luogo, ci dovrebbe essere abbastanza tensione di sutura e non c'è flacidità all'interno della sutura.
Quindi, dopo lo sviluppo della tecnica di sutura, ha portato nuove prospettive nel modo in cui i ricercatori nel campo dell'ingegneria tissutale dei tendini, possono avvicinarsi alla riparazione dei tendini, alla sostituzione dei tendini e alla rigenerazione dei tendini, negli esseri umani in futuro. Ricordarsi di formulare in soluzione di collagene neutralizzato, ad un pH ideale. E per garantire manualmente che la tensione di sutura sia appropriata, in modo che non ci sia flacidità all'interno della sutura.
Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha spianato la strada ai ricercatori nel campo dell'ingegneria tissutale e della rigenerazione tendente per esplorare la riparazione del gap tendineo negli esseri umani.