Studi incentrati su modelli di malattie cardiovascolari, obiettivi terapeutici cardiovascolari o agenti farmaceutici richiedono la valutazione della pressione arteriosa sistemica e dei cambiamenti del ritmo cardiaco. La cannula dell'arteria femorale è un metodo economico per registrare forme d'onda a pressione intraarteriale che possono essere eseguite con apparecchiature standard in una struttura animale. A dimostrare la procedura sarà Hsin-Ting Lin, un tecnico del mio laboratorio.
Prima di iniziare l'esperimento, posizionare il ratto anestetizzato in posizione supina su una tavola chirurgica e confermare la mancanza di risposta al pizzico. Fissare le gambe con elastici per immobilizzare il corpo e impostare la pressione sanguigna e gli strumenti elettrocardiogramma per la registrazione, tra cui un'unità di ingresso analogica per acquisire i segnali, un trasduttore di pressione con un hub compatibile, tre cavi elettrocardiogrammi bipolari con punta ad ago e un computer con software adatto. Prima dell'inizio della registrazione della pressione sanguigna, rimuovere il polsino a pressione da uno sphygmomanometro standard e collegare il fermagli a tre rapporti sul tubo di gonfiaggio al trasduttore di pressione del sistema di acquisizione dati.
Avvitare la valvola di rilascio dell'aria in senso orario, tenendo d'occhio il misuratore durante il pompaggio della lampadina di gonfiaggio. Quando il misuratore mostra 100 millimetri di mercurio, aprire il fermacock a tre per collegarsi al trasduttore di pressione. Il fattore di conversione per il calcolo della pressione sanguigna verrà determinato automaticamente.
Per rilasciare la pressione, avvitare la valvola di rilascio dell'aria in senso antiorario fino a quando la pressione dello sphygmomanometer non è tornata a zero. Ripetere la calibrazione con 200 millimetri di pressione del mercurio, quindi staccare il trasduttore di pressione dallo sfgmomanometro al mercurio. Collegare il trasduttore di pressione al punto di arresto a tre strade del catetere PE e controllare le giunzioni di connessione del fermagore a tre strade.
Per l'identificazione del punto di riferimento della superficie, individuare la piega inguinale alla giunzione tra l'addome e la coscia e sollevare l'intero strato di pelle al centro della piega. Utilizzare le forbici per tagliare la pelle sollevata con un orientamento approssimativamente parallelo alla coscia ipsilaterale. Il nervo femorale e i vasi si trovano sotto il tessuto sottocutaneo esposto.
Utilizzando forcelle a punta fine, sezionare il tessuto strato per strato, fermando la dissezione a livello dei vasi femorali. Cancellare con cura il tessuto molle lungo il nervo femorale e i vasi per ottenere una buona vista del nervo simile a una fibra. La vena è viola scuro e l'arteria è pulsatile.
Quando la dissezione tissutale raggiunge i vasi femorali, cambiare e andare a cambiare le forcelle per prevenire i vasi danneggiati. Quindi utilizzare le forcep con punte angolate per estendere la lunghezza esposta dell'arteria e della vena femorale. Per cannucolare l'arteria femorale, utilizzare le pinze per separare la vena femorale dall'arteria e applicare un morsetto bulldog all'arteria femorale il più cranicamente possibile.
Fai una cravatta sciolta delle due corde di seta, una appena sotto il morsetto bulldog e l'altra al terminale caudale dell'arteria femorale esposta. Utilizzare microscissori per fare un piccolo foro sul lato ventrale dell'arteria femorale e inserire la punta di un catetere in polietilene o PE attraverso il piccolo foro. Avanzare il catetere cranialmente.
Uno scarico posteriore di sangue nel catetere dopo aver rimosso il morsetto indica che la punta del catetere ha raggiunto il lume dell'arteria femorale. Stringere la seta superiore per fissare la posizione del catetere e stringere la seta inferiore per evitare sanguinamento dal lato caudale dell'arteria femorale. Per confermare il successo della cannula, utilizzare una siringa da un millilitro per iniettare da 0,1 a 0,2 millilitri di salina eparinizzata nell'arteria femorale.
Quindi controlla di trasudare intorno al sito di cannula e copri il sito con un batuffolo di cotone bagnato. Per eseguire una registrazione della pressione sanguigna, collegare il catetere PE e il fermagante a tre via al fermago del trasduttore di pressione e assicurarsi che non ci siano bolle d'aria nel sistema di cannulazione. Quindi controlla gli incroci di collegamento del fermafiai a tre strade.
Quando l'apparecchiatura è pronta, avviare il sistema di acquisizione dati con una frequenza di campionamento di 1000 hertz. Verranno visualizzate onde di pressione arteriosa. Lasciare che l'intero set-up si stabilizzi per almeno tre o cinque minuti, controllando periodicamente il sito di cannulazione per confermare che non c'è sanguinamento.
Per eseguire un elettrocardiogramma di superficie, controllare prima i tre cavi dell'ECG bipolare per assicurarsi che gli elettrodi di platino positivi, negativi e di riferimento siano intatti e inserire i cavi per via sottocutanea alla parte anteriore sinistra, anteriore destra e gamba posteriore destra. Quindi collegare i mozzi degli elettrodi a un amplificatore ECG personalizzato con una frequenza di campionamento di 1000 hertz e una frequenza di filtro da tre a 500 hertz. Le registrazioni simultanee della pressione sanguigna e dell'ECG in sei ratti normotensivi e ipertesi di 47 settimane hanno rivelato una pressione sanguigna sistolica e media significativamente più elevata negli animali spontaneamente ipertesi rispetto ai ratti normali.
I parametri di onda P, intervalli PR, larghezza QRS e intervallo QT misurati dalle registrazioni ECG non hanno dimostrato alcuna differenza tra i due gruppi. È possibile eseguire la calibrazione del sistema di pressione e impostare il trasduttore di pressione e il sistema di acquisizione dati prima di anestetizzare gli animali. I dati acquisiti sulla forma d'onda a pressione arteriosa grezza e sull'elettrocardiogramma possono essere analizzati sul software.
La radiotelemetria è considerata una tecnica gold standard per il monitoraggio della BP e della frequenza cardiaca, ma la tecnica è costosa. La cannula intraarteriale con ECG simultaneo è un'alternativa economica. L'anestesia per inalazione di isoflurane è facile da eseguire, ma può essere pericolosa se si verifica una perdita sostanziale.
Pertanto, controllare sempre l'attrezzatura e i tubi prima dell'uso.
